Infecciones Sistémicas

Hemocultivo
Nomenclatura:
 Bacteriemia: presencia de microorganismos en
el torrente sanguíneo
a) Transitoria: Se presenta repentinamente y
desaparece (1 día)
b) Intermitente: Aparecen y desaparecen
repetidamente ej: S. typhi
c) Continua: Presencia sostenida
 Septicemia: consecuencia más grave de la
bacteriemia, procesos tóxicos en la sangre y
falla funcional de múltiples órganos.
 Endotoxinas: componentes de pared celular de
G- (LPS), pueden ser liberadas o por
destrucción de la bacteria.

 Producen: fiebre, activan complemento, y

algunos factores de coagulación.

 Los G+ pueden producir exotoxinas.

Causas de Septicemia
1. Susceptibilidad en pacientes con CATETERES
2. Pacientes con procedimientos odontológicos
con abscesos.
3. Transfusiones de sangre contaminada
4. Infecciones diseminadas: tracto genitourinario,
respiratorio, abscesos, heridas quirúrgicas.
Hemocultivo
Selección del sitio de punción.
a) Se debe seleccionar un sitio diferente de punción en
cada toma de muestra.
b) Evitar sangrar de vía intravenosa o catéter arterial a
menos que halla una sospecha de sepsis por catéter.
Hemocultivo
 Toma de muestra: Pico febril
 Guantes
 Limpiar el área de punción con Isodine (povidona iodada)
 Dejar secar. No tocar el área antes de sangrar.
 Quitar el exceso de iodo con alcohol al 70%
 Desinfectar la tapa de la botella con alcohol o yodo.
 Insertar la aguja en la vena y obtener sangre.
 Inocular el medio de cultivo
 Mezclar suavemente
 Después de sangrar limpiar el área con alcohol para
remover el exceso de yodo
Volumen de la muestra
La cantidad de sangre es crítica porque la
concentración de las bacterias en la sangre
usualmente es baja, especialmente si el paciente está
bajo tratamiento antimicrobiano.
En infantes y niños la concentración de
microorganismos durante la bacteremia es más alta
que en adultos, por consiguiente, se requiere menos
cantidad sangre para el cultivo.

Volumen recomendado
a. Niños: 1 a 5 ml de sangre por venipunción
(dilución 1:10 respecto al medio)
b. Adultos: 10 a 30 ml de sangre por venipunción
 Se recomiendan 2 a 3 hemocultivos (24 horas)
con muestras tomadas en diferentes zonas de
venopunción.

 Aumenta posibilidades

 Descarta contaminación
Numero y tiempo de muestra
En sepsis aguda, meningitis, osteomielitis, artritis,
neumonía aguda sin tratamiento o pielonefritis.:
2 muestras de sangre de dos sitios diferentes antes
del tratamiento.
En sospecha de endocarditis y bacteremia continua
de baja magnitud:
a) Aguda: 3 muestras de 3 sitios diferentes durante
las primeras 1 a 2 horas de evaluación y antes del
tratamiento.
b) Subaguda: 3 muestras en el día 1 (15 minutos o
más de diferencia). Si todos los cultivos están
negativos en el día 2, obtener 3 muestras más.
c) Pacientes con endocarditis con tratamiento
antimicrobiano: 2 muestras separadas en cada día
por 3 días sucesivos.
Composición del medio
 Calso soya tripticasa
 PSS: polietanol sulfonato de sodio,
anticoagulante que inhibe fagocitosis, inactiva
complemento y algunos antibióticos
parcialmente.
 Nutrientes
 Medio sólido: agar BHI
Sistema manuales para
aislamiento

 Medios líquidos:
 Infusión cerebro-corazón (ICC), Brucella, Columbia,
peptona suplementada, tripticasa-soya.

 Medios bifásicos:
 Medio de Ruiz-Castañeda: fase líquida, caldo
tripticasa-soya; fase sólida, agar tripticasa-soya.
 Septi-Chek (Roche Diagnostics) con paletas
recubiertas de agar.
 Agar inclinado Becton Dickinson Vacutainer
Sistemas manuales
 Incubar a 35°C por 7 días.
 Agitar la botella en forma continua durante las primeras 24 horas.
 Inspeccionar las botellas visualmente por lo menos una vez al día.
 Hacer tinción de Gram y subcultivos de las botellas a las 6, 18
horas y a las 48 horas y un último reporte a los 6 días, para
confirmar un cultivo negativo.
 Ante evidencia de desarrollo, mezclar suavemente,
aspirar 0.25 ml con jeringa estéril

 o a través de la unidad ventilatoria. El propósito de

ventilar las botellas es proporcionar una atmósfera que
permita que se recupere los aeróbicos estrictos como
Pseudomonas sp. y levaduras

 Frotis de gram,
 Resiembra en agar chocolate, agar sangre, agar
MacConkey
 Staphylococcus y Enterobacterias en casos de
septicemias severas desarrollan en las primeras
4-6 hrs de incubación.
 H. influenzae, N. gonorrhoeae, N. meningitidis, y
Pseudomonas sp, pueden no producir turbidez
por lo que deben hacerse resiembras “ciegas” a
las 24 hrs, posteriormente a los 3, 5 y 7 días.

 Se incuban en ambiente de CO2 a 37°C 24 a 48

hrs.
Reportes preliminares: Tincion de Gram
 Ej: Se observaron bacilos gram negativos, se
procederá a su aislamiento, identificación y
sensibilidad a los antimicrobianos.
Casos especiales
 Brucelosis: Se incuba durante 4 semanas con
resiembras “ciegas” cada 7 días.

Fúngicas: Se recomiendan 2 medios difásicos:

Uno a temperatura ambiente, y el otro a 37°C

 Formas atípicas bacterianas: perdieron pared

celular, se aíslan en medios hipertónicos (10%
de sacarosa adicional)
Procedimientos inadecuados:
1. Uso de soluciones inadecuadas para la
asepsia de la piel (ej. soluciones de
cuaternarios de amonio: cloruro de
benzalconio).
2. Proporciones inadecuadas de sangre en
relación a la cantidad del medio.
3. Omisión de la revisión programada en las
primeras 24 hrs y de las resiembras "ciegas".
4. Apertura de los frascos para la inoculación.
Hemocultivos en sistemas
automatizados

 SISTEMA PARA HEMOCULTIVO BACTEC 9050

Mediante un lector de fluorescencia realiza el monitoreo de la
muestra cada 10 minutos obteniendo resultados seguros en
menor tiempo
Hemocultivos en sistemas automatizados

 SISTEMA PARA HEMOCULTIVO BACTEC 9050

Mediante un lector de fluorescencia realiza el monitoreo de la
muestra cada 10 minutos obteniendo resultados seguros en
menor tiempo
Fundamento:
 Los microorganismos
producen CO2,
Reacciona con
colorante fluorescente
 Un sensor mide el
nivel de
fluorescencia.