Relación de Problemas 2019/20

PROBLEMAS DE DISRUPCIÓN CELULAR

P-02-01: Para la ruptura de células de levadura Candida utilis en un homogeneizador continuo de tipo válvula, se sabe que las constantes son K’= 5,91x10-4
-a
MPa y a=1,77 para el intervalo de presión de funcionamiento comprendido entre 50 MPa<P<125 MPa. Se desea que la extensión de la disrupción sea ≥0,9.
Representa cómo el número de pasos varía con la presión de funcionamiento en dicho rango de presiones. ¿En qué rango de presión se debería operar?
Solución: 70-105 MPa.

P-02-02: Una suspensión celular que contiene la bacteria Gram negativa Alcaligenes eutrophus, se hace pasar por un homogeneizador APV Gaulin 15M8BA
con el propósito de estudiar la recuperación de poli-β-hidroxibutirato (PHB), que puede ser un potencial plástico. Cuando se opera a una presión constante de
-4 -2,2
15,2 MPa la constante del homogeneizador vale 5,05x10 MPa .
a) Determine el número de pasos necesarios para lograr una extensión de la disrupción del 63%.
b) Si la presión de operación se duplica, ¿en cuántos pasos se obtendrá el mismo rendimiento?
Solución: a) N=4,94≈5; b) N=1,07≈1

P-02-03: En una disrupción celular utilizando un homogeneizador es posible conseguir una extensión del 80% bajo dos condiciones diferentes:
Condición P (MPa) N
1ª 90 1
2ª 50 3
a) Estime los parámetros cinéticos del homogeneizador.
b) Compare la energía por unidad de masa de alimentación necesaria para cada condición.
Solución: a) K ′ = 3,56 ⋅ 10 −4 MPa− a a = 1,87 ; b) 66,67%

P-02-04: En un homogeneizador a escala piloto se han obtenido los siguientes datos experimentales de la disrupción celular de levaduras del pan en un solo
paso, sobre la influencia de la presión de operación en la constante cinética de primer orden:
2
P (kg/cm ) K
200 0,020
270 0,045
330 0,070
500 0,290
3
La potencia requerida por paso en el homogeneizador, varía linealmente con la presión de operación con una constante de proporcionalidad de 7,63x10-
2
kW·cm /kg.
a) Encuentre una expresión del porcentaje de proteína liberada por kW de potencia.
Solución: a) % R = 100 − 100exp ( −5,41 ⋅ 10 −3 Potencia2,9 ) 

P-02-05: En la disrupción celular por cargas con dos tipos de agitadores utilizados en un molino de bolas se han obtenidos los siguientes datos
experimentales:
Agitador concéntrico Agitador excéntrico
t, minutos
-ln(1-R)
3 0,0852 0,1382
5 0,2072 0,3454
10 0,3684 0,5181
15 0,5181 0,7489
20 0,6908 0,9786
25 0,8404 1,2089
30 1,0062 1,4967
a) Estímese la constante cinética para cada tipo de agitador
b) Calcúlese el tiempo necesario para el cual se obtiene el 80% de extensión en la disrupción con cada tipo de agitador
-1 -1
Solución: a) kconc.=0,0331 min y kexc.=0,0476 min ; b) tconc.=48,7 min y kexc.=33,8 min

PROBLEMAS DE FILTRACIÓN
P-02-06: Un embudo Büchner de 8 cm de diámetro está disponible para probar la filtración de una suspensión de un cultivo celular, que tiene una viscosidad
de 3 cP. Los datos de la tabla se obtuvieron con una presión de vacío de 600 mmHg aplicados al embudo Büchner. Las células en el filtro al final de la filtración se
secaron y se determinó un peso de 14 g.
a) Determine la resistencia específica de la torta y la resistencia del medio filtrante
2
b) Estime el tiempo que se tarda en filtrar 10000 L de este caldo de células en un filtro con una superficie de 10 m y la presión de vacío de 500 mmHg.

t, s 26 96 197 342 537 692 989

V, mL 100 200 300 400 500 600 690
10 8 -1
Solución: a) α=1,27·10 cm/g y Rm=1,14·10 cm ; b) t=16,20 h

1
Relación de Problemas 2019/20

P-02-07: En la filtración de una suspensión de levaduras a presión constante se obtuvieron los siguientes datos
t, min 4 20 48 76 120
V, L 115 365 680 850 1130
2 3
El área del filtro utilizado fue de 0,28 m . La suspensión contiene 1,92 kg/m de masa seca y una viscosidad de 0,0029 kg/m·s. La resistencia específica de la torta
10
formada es de 4·10 m/kg.
a) Calcule la caída de presión en el filtro
b) Determine la resistencia del medio filtrante
c) Cuantifique el área de filtración necesaria para procesar 4000 L de suspensión en 20 minutos, trabajando a la misma presión
5 2 10 -1 2
Solución: a) ΔP=3,38·10 N/m ; b) Rm=5,32·10 m ; c) A=3 m

P-02-08: En la filtración a nivel de laboratorio de un caldo para la recuperación de gentamicina, la suspensión presentó una viscosidad de 1,2 cP y un
2
contenido de sólidos de 5 g/L. El área de filtración empleada fue de 100 cm y el gradiente de presión de 1,8 mH2O. Los datos de filtración obtenidos son:
t, s 12 20 30 40
V, L 0,60 0,78 0,95 1,10
2
Estime el tiempo de filtrado para procesar 5000 L de este caldo en un filtro de 1,5 m de área, si el proceso se realiza con un gradiente de presión igual al
empleado en el laboratorio.
Solución: t=10,2 h

PROBLEMAS DE CENTRIFUGACIÓN
P-02-09: Se desea saber si una centrífuga tubular podrá tratar una cierta alimentación. A tal efecto, se hace una prueba con una centrífuga de tubos
basculantes de laboratorio, que tiene las siguientes características:
R1 + R2
Radio medio= = 10 Distancia de sedimentación=R2 − R1 = 12 cm
2
2
El tiempo de clarificación en el laboratorio es de 4 min, y la frecuencia de rotación es de 1200 rpm. La centrífuga tubular tiene un valor Σ=1200 m . Calcule el
caudal que podrá tratar la centrífuga tubular.
3
Solución: 15,5 m /h

P-02-10: En las etapas iniciales del proceso de la insulina humana, hay que hacer una operación de clarificación para recuperar los cuerpos de inclusión y el
precipitado de proinsulina. (TrpE-Meth-proinsulina). La planta tiene varias centrífugas de discos (de descarga por tobera). Se desea conocer cuál es la más
adecuada. Los datos de una máquina son 200 discos, semiángulo del cono 50°, radio exterior 0,25 m y radio interno 0,08 m, distancia entre discos 1 mm y
3
máxima frecuencia de rotación 5000 rpm. En cuanto a las características de la alimentación: densidad del medio líquido 1025 kg/m , densidad de los sólidos
3
1090 kg/m , viscosidad 31 mPa·s, concentración del producto disuelto 1 g/L, diámetro celular 2 μm, concentración de células 2,5% en peso, alimentación de
25000 kg a tratar en 5 horas. Calcule la capacidad de la centrífuga para la suspensión que se quiere separar. Cuántas máquinas como la especificada trabajando
en paralelo se necesitan para procesar la alimentación en 5 horas.
3
Solución: 2,4 m /h, dos centrífugas

P-02-11: Se quiere separar operando en continuo un precipitado con tamaño de partícula de 10 μm. El caudal de la suspensión es de 5,5 m3/h y contiene un
3 3
5% de precipitado. Los datos son: densidad de partícula 2300 kg/m , densidad del fluido 1050 kg/m , viscosidad del líquido 4 mPa·s. En principio, se recomienda
una centrífuga de cesta continua, pero hay que ver si es adecuada según Tabla.
-5
Solución: Sí, velocidad de sedimentación 1,7·10 m/s

P-02-12: Se quiere utilizar una centrífuga de cesta tubular para concentrar una suspensión de Escherichia coli antes de pasar a su disrupción. La cesta tiene las
dimensiones siguientes: 12,7 cm de radio medio y 73 cm de longitud. La frecuencia de rotación es de 16000 rpm y la capacidad es de 200 L/h.
a) Calcule la velocidad de sedimentación del E. coli
b) Tras el proceso de disrupción, el tamaño de las células se reduce a la mitad y la viscosidad aumenta cuatro veces. Calcule la reducción de capacidad de la
máquina.
-9
Solución: a) 2,62·10 m/s; b) 1/16

PROBLEMAS DE EXTRACIÓN LÍQUIDO-LÍQUIDO

P-03-01: Una corriente de caldo de fermentación, F=450 L/h (pH=3,5) contiene 260 mg/L de actinomicina D. Se quiere extraer con S=37 L/h de acetato de
butilo puro y se quiere recuperar el 99% del antibiótico. Calcule las etapas de equilibrio que serán necesarias y la concentración de antibiótico que habrá en la
salida del extracto. El coeficiente de reparto es KD=57.
Solución: 2,83 etapas; 3130,5 mg/L

P-03-02: Utilizando el mismo número de etapas ideales (esto no es crítico), pero ahora el extracto siguiente como nueva alimentación a pH=6 (37 L/h de
concentración, 3130,5 mg/L). La extracción ahora es con agua tamponada a pH=6, como nuevo solvente de extracción, donde ahora KD=9,01. Calcule el caudal
de agua para extraer un 95% de la actinomicina D.
Solución: 9,92 mg/L

2
Relación de Problemas 2019/20

P-03-03: Por el fondo de una columna de relleno, de 61 cm de altura y 100 mm de diámetro interior se bombea una alimentación de 6,5 L/h de una
3 3
disolución acuosa de sitosterol (densidad 1000 kg/m ). El disolvente es cloruro de metilo (densidad 1330 kg/m ), que se dosifica por la parte alta de la torre y
pasa a través del relleno, con un caudal de 3 L/h, a contracorriente descendente. Se sabe que el coeficiente de distribución es KD=7,14 bastante favorable. En
cambio, sólo se recupera el 53% del esteroide y, por tanto, se tendrá que alargar la columna con más tramos. Se quiere recuperar el 90% del sitosterol utilizando
los mismos caudales de disolvente y alimentación. Calcule Kxa para los caudales de trabajo empleados. En cuánto se tendrá que alargar la columna para llegar al
90% de recuperación.
3
Solución: 909kg/m ·h; hasta 2,18 m

P-03-04: El funcionamiento de una columna de extracción de platos recíprocos (Columna Karr) a escala piloto se ha optimizado para la extracción de un
antibiótico del caldo de fermentación completo usando acetato de amilo como disolvente.
Datos de extracción en el laboratorio. Columna Karr de DN25,4 mm (1”), altura efectiva de 1,83 m. Caudal de alimentación: disolvente acetato de amilo de 105
3 3
cm /min y caldo de fermentación de 70 cm /min. La frecuencia de la columna de laboratorio era de 280 impulsos/min. La recuperación es del 93%. El coeficiente
de reparto vale KD=7,5. La alimentación es muy diluida en antibiótico.
Datos de extracción en la columna industrial. ¿Qué tamaño de la columna y la velocidad del agitador se requieren para dar una relación de antibiótico en el
refinado de antibióticos en la alimentación de 0,03 y para manejar caldo de fermentación a un ritmo de 150.000 L cada 12 h? (Nota: 150.000 L es un volumen
típico de un fermentador para una planta de antibióticos).
Solución: 11,1 m; 160 impulsos/min

PROBLEMAS DE ADSORCIÓN
P-03-05: Se quiere recuperar el 98% de un metabolito contenido en 3 L de un caldo de fermentación por contacto con carbón activo con agitación. La
concentración inicial del bioproducto es de 46 mg/L. a) Calcule la masa de carbón que se ha de utilizar. b) Calcule el tanto por ciento de producto adsorbido por
kg de carbón virgen utilizado. La isoterma del producto sobre carbón es
q (mg/g ) = 35,1C 0,41 con C en mg/L
Solución: a)3,99 g; b)3,39%

P-03-06: A baja concentración, el equilibrio de absorción de la novobiocina sobre el polímero de intercambio iónico Dowex 21K tiene forma lineal, q = 125C ,
-1
con q y C en mg/mL, con la constante de equilibrio adimensional (Kρp=125). Para esta columna, el valor del coeficiente de transferencia de masa vale Kpa=82 h .
Estime el punto de ruptura admisible (en el que se supone que C/C0=0,05) a la salida de la columna. Esta tiene una longitud L=20 cm y opera a una velocidad
superficial del fluido de 40 cm/h. La fracción de huecos del lecho es del 50%.
Solución: 46,23 h

P-03-07: Se ha aislado una proteína (una posible vacuna) por absorción desde un tampón por contacto con una resina de intercambio iónico en un lecho fijo.
La resina consiste en esferas de 0,011 cm de diámetro, con una fracción de huecos ε=0,37. El lecho tiene 100 cm de longitud y 83 cm de diámetro, y se alimenta
-6
a una velocidad superficial de 0,053 cm/s. En estas condiciones, la proteína se absorbe con un coeficiente de transferencia de masa Kp=86·10 cm/s y una
constante de equilibrio adimensional de KρB=27. Después de cargar todo el lecho, se planifica la desorción usando un tampón más ácido como eluyente, a fin de
liberar la proteína. La constante de equilibrio de adsorción en el nuevo tampón vale KρB=0,22, mientras que los otros parámetros permanecen constantes.
Siguiendo el modelo paramétrico, calcular:
a) Durante cuánto tiempo tendremos que eludir la columna hasta tener una concentración a la salida de un 10% del valor máximo.
b) Y qué carga de proteína quedará retenida por la adsorbente en este momento.
Solución: a) 40,34 min; b) 7%

P-03-08: En la siguiente tabla, se dan datos de ruptura, C vs. t, de una columna de adsorción de pruebas de laboratorio (5 cm de diámetro y 15 cm de
longitud).
t, h 20,5 26,7 32,0 36,0
C, U/L 0,01 0,20 0,39 0,53
3
El caudal de líquido era de 400 cm /h y la concentración de la alimentación del bioproducto era de C0=0,75 U/L (U, unidades de actividad biológica). Se quiere
hacer una columna más larga, de 30 cm, extrapolando los datos de la columna pequeña por el método LUB. Además, se quiere saber cuál será el tiempo de
ruptura tB de la columna larga.
Solución: 52,98 h

PROBLEMAS DE PRECIPITACIÓN
P-03-09: Se han obtenido datos de precipitación de una proteína con sulfato amónico. La concentración inicial de proteína era de 15 g/L. A concentraciones
de sulfato amónico de 0,5 y 1,0 M, la concentración de proteína residual en la solución en equilibrio era de 13,5 y 5,0 g/L, respectivamente. A partir de esta
información, estime los parámetros de la ecuación de Cohn y calcular la concentración de sulfato amónico para precipitar un 90%.
Solución: K=2 y β=3,6; 1,597 mol/L

P-03-10: Se quiere precipitar α2-macroglobulina disuelta en un volumen de 100L. Suponiendo que el tanque tiene fondo plano y que la altura del líquido en
reposo sobre el fondo es igual al diámetro interior del tanque, 1,08 m: a) calcule el tiempo de micro mezcla utilizando un agitador de turbina de paletas planas
verticales (Rushton, Np=5) cuyo diámetro es un tercio del diámetro del tanque y b) para una turbina axial (Np=1) de igual diámetro, empleando la correlación de

3
Relación de Problemas 2019/20

Ekato. La frecuencia de rotación, N, del agitador será tal que la velocidad periférica de la pala sea 5,08 m/s. La viscosidad absoluta es de 5 cP (mPa·s) y la
3
densidad de la disolución es de 1000 kg/m .
Solución: a) a) 5,45 s; b) 9,31 s

P-03-11: Se quiere precipitar una proteína (catalasa) de una mezcla de enzimas que contiene colesterol oxidasa, que es el producto que se desea. La catalasa
3
tiene un peso molecular de 250.000 y una densidad de precipitado de 1.300 kg/m ; el diámetro de la proteína en la disolución es de 10,4 nm y el coeficiente de
-11 2
difusión es de 4,1x10 m /s. El método de precipitación se basa en introducir un cambio brusco de pH en un recipiente de 100 L, que dispone de un agitador de
3
750 W. La concentración inicial es de 200 g/m y el coeficiente de eficacia de colisión α se puede tomar como 0,05. Haga una estimación de:
a) el tiempo a partir del cual comienza la etapa de floculación de segundo orden
b) la concentración de partículas en este instante
el tiempo necesario para obtener partículas de 0,1 mm, aptas para ser centrifugadas
-8 3
Solución: a) 7 s; b) 2,17·10 mol/m ; c) 0,92 h

P-03-12: Se quiere pasar un proceso de precipitación a un volumen de V2=1000 L, extrapolando los datos de un tanque de V1=100 L para la precipitación de
una proteína. El tanque pequeño usa un agitador tipo Rushton, que gira a una frecuencia de N1= 270 rpm. a) aplique el criterio P/V constante. Calcule, en este
caso, la velocidad del tanque grande y cuánto valdrá la relación de gradientes máximos de cizalladura en los dos recipientes. b) Si se aplica como criterio de
cambio de escala, la constancia de esfuerzos de cizalladura máximos, qué relación P/V habrá en los dos recipientes.
Solución: a) 162 rpm y 0,775; b) 2,14

PROBLEMAS DE MEMBRANAS
P-04-01: Se está purificando por ultrafiltración un antibiótico de peso molecular moderado. La concentración molar de soluto es de 0,10 kmol/m3 y T=298 K.
La presión aplicada a la solución es de 5 bar. En estas condiciones, el soluto está completamente retenido (R=1). Considerando que el soluto se comporta como
una molécula no iónica y que el disolvente es agua puro. Cuál es la presión efectiva del proceso.
Solución: 2,52 bar

P-04-02: Una disolución de una enzima se concentra por ultrafiltración. El flujo a través de la membrana en función de la concentración de enzima en cada
momento es el siguiente:
3
C, mol/m 1,0 1,5 3,0 5,0 8,0
6
J·10 , m/s 114 11,5 7,7 4,9 2,3
Suponiendo el modelo de gelificación, cerca de la membrana. Calcule: a) El coeficiente de transferencia de masa. b) La concentración CG de esta enzima. c) El
2
valor máximo del flujo expresado en L/m ·h, y observe si está dentro de los valores normales. d) La concentración óptima que hace máxima la producción y
3
compárese con la que según Coulson y Richardson (2002) es de 4,7 mol/m .
-6 3 2 3
Solución: a) 5,588·10 m/s; b) 11,99 mol/m ; c) 50,4 L/m ·h; d) 4,2 mol/m

P-04-03: Se quiere recuperar las células libres de E. Coli recombinantes, que tienen un tamaño de 1 μm, usando una membrana de 100 cm2. Durante la
filtración tangencial, la capa estacionaria sobre la membrana se estima que tiene un grosor de 10 μm y una fracción de huecos de 0,4. Para determinar el flujo
de la operación: a) Se hace una prueba con agua pura para calcular la resistencia de la membrana, midiendo JH2O con una caída de presión de 0,5 bar, y el flujo
-4
obtenido es de 10 m/s. b) Calcúlese la resistencia de la torta (que se añadirá a la membrana) y determínese el flujo de microfiltración que se obtendría al filtrar
2
100 cm , usando la suspensión de células. NOTA: Para el agua pura, la viscosidad es de 1 mPa·s y la del filtrado es de 2 mPa·s. En todos los casos la caída de
presión es 0,5 bar. La densidad de los microorganismos se puede suponer igual a la del agua.
11 -1 10 -1 2
Solución: a) 5·10 m ; b) 1,4·10 m y 175 L/m ·h

P-04-04: Un volumen de cerveza de 10 m3 contiene una concentración de enzima de 0,6 kg/m3 se quiere concentrar por ultrafiltración con un coeficiente f=5,
3 3
hasta una C=3 kg/m . Para la proteína de interés, la concentración de gelificación vale 25 kg/m . El proceso se lleva a término en un módulo de UF enrollado en
-5
espiral, para el cual se estima kc=0,4·10 m/s. La proteína tiene un rechazo del 100%. No hay ensuciamiento.
3
a) Utilizando una operación en discontinuo con recirculación, calcúlese la superficie de membrana necesaria, alimentación 10 m en una hora.
3
b) Si se lleva el proceso en continuo en una unidad que trabaje en estado estacionario, con el mismo caudal 10 m /h, qué área de UF es necesaria.
2 2
Solución: a) 187,5 m ; b) 280 m

P-04-05: Una planta de ultrafiltración ha de tratar 50 m3 cada día de una disolución de proteína que opera durante 20 h/día con un caudal de 2,5 m3/h. El
3 3
residuo que se ha de tratar contiene 0,5 kg/m de proteína, que se han de concentrar hasta 20 kg/m y permitir reciclar a la corriente principal del proceso.
Estudios preliminares en planta piloto indican que el flujo sobre la membrana viene dado (en m/h) por el modelo de gelificación con la siguiente ecuación:
30
J = 0,02ln
C
3
en la que C (en kg/m ) es la concentración de trabajo del módulo. Para evitar el ensuciamiento de la membrana, el flujo no puede exceder de los 0,04 m/h. a)
Estúdiese la posibilidad de utilizar una sola unidad de UF con alimentación y purga continuas. b) Estudiar la posibilidad de reducir los requerimientos de área
usando dos etapas también con alimentación y purga. NOTA: Considérese el flujo bien mezclado en los módulos. Los módulos de UF son de tipo espiral y están
2
disponibles con un área de 30 m /módulo.
2 2 2
Solución: a) 300,6 m ; b) 58,6 m y 26,5 m

4
Relación de Problemas 2019/20

P-04-06: Una instalación de ultrafiltración que tiene una membrana que a la presión de trabajo produce un flujo de 36 L/m2·h se ha de utilizar para lavar
3 3 2
(NH4)2SO4, que está a C0=2 kg/m . El tanque de alimentación es de 0,1 m y la superficie de membrana, de 1 m . Éste contiene proteínas que se quiere retener
durante el proceso. Se lava con agua de proceso de manera que se mantenga el volumen del tanque a nivel constante adicionado agua, hasta que la
3
concentración de sal sea de C=0,2 kg/m .
a) Calcúlese el tiempo necesario para lavar el 90% de la sal por diafiltración
b) Calcúlese el porcentaje de pérdida de proteína por ultrafiltración durante este tiempo
NOTA: La sal pasa libremente por la membrana, pero la proteína tiene una retención del 98%
Solución: a) 6,4 h; b) 4,5%