Fotosíntesis

Laboratorio No.5

María De Los Ángeles Muñoz Garcés

20162010006

Camilo Andrés Galindo Triana

20162010008

Grupo 421

William Ariza cortés

Universidad Distrital Francisco Jose de Caldas

Facultad de medio ambiente y recursos naturales

Ingeniería forestal

Biología General

Bogotá D.C

20 de Octubre de 2016
1. INTRODUCCIÓN

La vida en la tierra depende fundamentalmente de la energía solar, la cual es

atrapada mediante el proceso fotosintético, que es responsable de la producción
de toda la materia orgánica que conocemos. A diferencia de los animales, que
necesitan digerir los alimentos ya elaborados, las plantas son capaces de
producir sus propios alimentos a través de la fotosíntesis. Para realizar la
fotosíntesis las plantas disponen de un pigmento llamado clorofila que es el
encargado de absorber la luz adecuada para realizar este proceso.[CITATION
Rub01 \l 3082 ]

La fotosíntesis es un proceso que transforma la energía de la luz del sol en

energía química. Comienza por la absorción de la energía lumínica y su
transformación en ATP y NADPH en las membranas internas de los cloroplastos
(tilacoides y granas). El CO₂ se absorbe a través de los estomas y su
transformación o reducción a triosa fosfato ocurre en el estroma de los
cloroplastos, con la participación de un gran número de enzimas. Por tanto
existen varios factores por los cuales la fotosíntesis puede ser afectada como la
concentración de CO₂ en el medio, la intensidad de la luz y el grado de apertura
de los estomas.[CITATION Rod06 \l 3082 ]

En la práctica a realizar, usaremos la cromatografía como proceso para la

extracción de pigmentos fotosintéticos por medio de papel filtro y hojas de
espinaca este método nos permitirá identificar las clases de pigmentos
encontrados en esta fácilmente. Además realizaremos montajes húmedos con
plantas como diente de león, cartucho y saúco, tomando epidermis de sus hojas
para observar los estomas de sus células.

2. OBJETIVOS

2.1 Objetivo General

Reconocer algunos de los elementos cruciales en el proceso de fotosíntesis de
las plantas

2.2 Objetivo especifico

 Identificar y obtener los pigmentos fotosintéticos que se encuentran en
las hojas de espinaca (Spinacia olerace)
 Reconocer los diferentes tipos de estomas presentes en las células
vegetales
 Determinar la importancia de los pigmentos fotosintéticos dentro del
proceso de la fotosíntesis
3. MARCO TEÓRICO

La fotosíntesis como un proceso físico-químico por el cual las plantas, las algas
y las bacterias fotosintéticas utilizan la energía de la luz solar para sintetizar
compuestos orgánicos. En plantas, algas y en algunos tipos de bacterias
fotosintéticas el proceso conlleva la liberación de oxígeno molecular y la
utilización de dióxido de carbono atmosférico para la síntesis de compuestos
orgánicos. A este proceso se le denomina fotosíntesis oxigénica. Sin embargo,
algunos tipos de bacterias utilizan la energía de la luz para formar compuestos
orgánicos pero no producen oxígeno. En este caso se habla de fotosíntesis
anoxigénica. [ CITATION Pér09 \l 3082 ]
La unidad estructural de la fotosíntesis es el cloroplasto. Los organismos
fotosintéticos procariotas y eucariotas poseen sacos aplanados o vesículas
llamadas tilacoides, que contienen los pigmentos fotosintéticos; pero solamente
los cloroplastos de los eucariotas están rodeados por una doble membrana. Los
tilacoides se disponen como una pila de panquecas, que recibe el nombre de
grana. El interior del cloroplasto entre las granas es el estroma proteico, donde
se encuentran las enzimas que catalizan la fijación del CO 2 . Las mitocondrias
constituyen un sistema con dos membranas como los cloroplastos, pero los
cloroplastos tienen tres compartimentos: el estroma, el espacio tilacoidal y el
espacio entre las membranas. El cloroplasto en su interior tiene un ADN circular
y ribosomas.[ CITATION Rod06 \l 3082 ]

Los pigmentos fotosintéticos son los únicos que tienen la capacidad de absorber

la energía de la luz solar y hacerla disponible para el aparato fotosintético. En las
plantas terrestres hay dos clases de pigmentos fotosintéticos: las clorofilas y los
carotenoides.[ CITATION Oña10 \l 3082 ]
El color verde tan uniformemente presente en los vegetales es debido a la
presencia de dos pigmentos estrechamente emparentados llamados clorofila
a y clorofila b. Se encuentran prácticamente en todas las plantas con semilla,
helechos, musgos y algas. Pueden formarse en las raíces, tallos, hojas y frutos a
condición de que estos órganos estén situados por encima del suelo y queden
expuestos a la luz. También aunque aparentemente falten en algunas hojas de
color rojo o amarillo, cuando se extraen las otras sustancias colorantes de estas,
puede comprobarse incluso allí la presencia de las clorofilas, que estaban
enmascaradas por los demás pigmentos. Estos pigmentos se encuentran en el
interior de las células vegetales específicamente en una organelo
llamada cloroplasto. Los cloroplastos son simplemente plástidos que contienen
pigmentos clorofílicos. Los compuestos clorofílicos están ligados químicamente
con las estructuras internas del cloroplasto (membrana tilacoides) y se hallan
retenidos en estado coloidal.[ CITATION Oña10 \l 3082 ]
La fotosíntesis es un proceso que ocurre en dos fases. La primera fase es un
proceso que depende de la luz (reacciones luminosas), requiere la energía
directa de la luz que genera los transportadores que son utilizados en la
segunda fase. La fase independiente de la luz (reacciones de oscuridad), se
realiza cuando los productos de las reacciones de luz son utilizados para formar
enlaces covalentes carbono-carbono (C-C), de los carbohidratos. Las reacciones
oscuras pueden realizarse en la oscuridad, con la condición de que la fuente de
energía (ATP) y el poder reductor (NADPH) formados en la luz se encuentren
presentes.[ CITATION Ber08 \l 3082 ]

Durante la fotosíntesis se presentan dos fases

Fase luminosa: La fase luminosa puede presentarse en dos modalidades, con

transporte acíclico de electrones o con transporte cíclico de electrones. En la
acíclica se necesitan los dos fotosistemas el I y el II. En la cíclica solo el
fotosistema I[CITATION Rub01 \l 3082 ]

Imagen 1. Transporte acíclico, recuperado de:

http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/Fisiologia_celular/contenidos9.htm

La fase luminosa acíclica se inicia con la llegada de fotones al fotosistema II.

Excita a su pigmento diana P680 que pierde tantos electrones como fotones
absorbe. Tras esta excitación existe un paso continuo entre moléculas capaces
de ganar y perder esos electrones. Pero para reponer los electrones que perdió
el pigmento P680 se produce la hidrólisis de agua (fotolisis del agua),
desprendiendo oxígeno. Este proceso se realiza en la cara interna de la
membrana de los tilacoides.[CITATION Rub01 \l 3082 ]
Por último, los electrones son introducidos en el interior del tilacoide por el
citocromo b-f y crean una diferencia de potencial electroquímico (hipótesis
quimiosmótica de Mitchell) a ambos lados de la membrana. Esto hace salir
protones a través de las ATP sintetasas con la consiguiente síntesis de ATP que
se acumula en el estroma (fosforilación del ADP). Por otro lado los fotones
también inciden en el PSI; la clorofila P700 pierde dos electrones que son
captados por aceptores sucesivos. Los electrones que la clorofila pierde son
repuestos por la Plastocianina que lo recibe del citocromo b-f. Al final los
electrones pasan a la enzima NADPreductasa y se forma NADPH
(fotorreducción del NADP).[CITATION Rub01 \l 3082 ]
Imagen 2. Transporte cíclico, recuperado de:
http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/Fisiologia_celular/contenidos9.htm

En la fase luminosa cíclica sólo interviene el PSI, creándose un flujo o ciclo de

electrones que, en cada vuelta, da lugar a síntesis de ATP. No hay fotolisis del
agua y tampoco se genera NADPH, ni se desprende oxígeno. Su finalidad es
generar más ATP imprescindible para realizar la fase oscura posterior.[CITATION
Rub01 \l 3082 ]
Durante esta fase se produce el fenómeno de la fotolisis del agua el cual
Consiste en la ruptura de los enlaces químicos del agua por causa de energía
radiante. A su vez se denomina fotolisis a la disociación de moléculas orgánicas
complejas por efecto de la luz, y se define como la interacción de una o más
fotones con una molécula objetivo. [ CITATION Cur08 \l 3082 ]

Fase oscura: El proceso fundamental que ocurre en la fase oscura es la fijación

reductora del C a partir del CO₂, formándose primero glúcidos sencillos de los
que derivan el resto de compuestos orgánicos. Este proceso ocurre en la
mayoría de las plantas a través de una secuencia cíclica de reacciones conocida
como ciclo de Calvin. El ciclo se inicia a partir de una enzima de elevado peso
molecular, la ribulosa -1,5- difosfato carboxilasa que cataliza la incorporación al
ciclo de co₂ atmosférico.[ CITATION Gon11 \l 3082 ]
 Imagen 3. Ciclo de Calvin, recuperado de:
http://educativa.catedu.es/44700165/aula/archivos/repositorio/3250/3380/html/32_fases_oscura_de
_la_fotosntesis.html

4. MATERIALES

Extracción de pigmentos:

• 3 Hojas grandes de Espinaca. • Colador de malla fina (Colador de

Cocina)
• Mortero y pistilo
• Carbonato de calcio
• 1 Hoja de papel filtro

• 200 ml Etanol 2.

Caracterización de estomas:

• Hojas de tres especies vegetales diferentes

•Microscopio
 5. METODOLOGIA

5.1 Extracción de pigmentos

Se lavaron las hojas de espinaca y se les retiraron los nervios, luego se
colocaron en un mortero y se les agrego etanol y carbonato de calcio. Con
ayuda del pistilo se trituro la mezcla hasta que el disolvente adquirió un color
verde intenso. Después se filtró la mezcla con ayuda de un colador y el
resultado se colocó en una placa de Petri. Se colocó la mitad del papel filtro de
manera vertical sobre la placa de Petri. Luego de un tiempo se observó el color
del papel y las tonalidades presentes.

5.2 Observación de células de la epidermis de tres plantas

Se retiró la epidermis del haz de la hoja de la planta con un área aproximada

mínima de 0,7 cm². Luego se realizó un montaje húmedo con cada uno de las
tres diferentes hojas. Según lo observado se caracterizó los estomas de las
tres especies de acuerdo con el Manual de arquitectura foliar de (Hickey 1999),
páginas 52-56 documento anexo, y se determinó cuantos estomas se
observaban por mm²

CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es el color de los pigmentos observados en el papel filtro?

Rta// Al realizar la extracción de pigmentos fotosintéticos obtuvimos en la parte
inferior del papel filtro un verde claro siguiente a este un verde oscuro y en la
parte superior un color amarillo claro el cual se distorsiona a blanco

2. ¿Cuáles son los pigmentos observados en el papel filtro?

Rta// según los colores observados identificamos los pigmentos de la siguiente
manera:
Color verde oscuro: clorofila B
Color verde claro: clorofila A
Color amarillo: Xantofilas

3. ¿Que es absorción? y ¿cómo relaciona dicha definición con la práctica?

Rta// la absorción es un proceso por el cual átomos, iones o moléculas so
atrapados o retenidos en la superficie de un material en contraposición a la
absorción, que es un fenómeno de volumen. Es decir es un proceso en el cual
un contaminante soluble es eliminado del agua por contacto con una superficie
sólida. El proceso inverso a la absorción se conoce como deserción.
Este fenómeno lo relacionamos con el papel filtro usado en la extracción de
pigmentos de la hoja de espinaca ya que gracias a las propiedades físicas de
este papel y a la solubilidad y absorción que posee los pigmentos fotosintéticos
se logra observar los pigmentos específicamente en el papel, a este método
de separación de pigmentos se le llama cromatografía la cual ocurre
principalmente usando un soporte inerte como lo es el papel filtro.
4. Describa las diferencias con respecto a crecimiento, color de las hojas, etc.
Cuando se varían las longitudes de onda que actúan sobre las plantas.

Rta// Las plantas foto sintetizan entre los 400 a 700 nm; este intervalo se
conoce como radiación fotosintéticamente activa (RFA). La clorofila, el
pigmento verde de las hojas que es responsable de absorber la energía de
RFA, tiene dos puntos críticos de absorción: la luz azul y roja. Las hojas
absorben poco verde y lo reflejan de vuelta; este es el motivo por el que vemos
el color verde de las hojas.

En general, los diferentes colores tienen diferentes efectos sobre las plantas:

*Luz ultravioleta: La luz ultravioleta provoca daños en el ADN, reduce la

velocidad de la fotosíntesis, disminuye el florecimiento y la polinización, y
afecta el desarrollo de las semillas. Ultravioleta A (una subcategoría de la luz
ultravioleta) puede provocar la elongación de la planta.

*Luz azul: Corresponde a uno de los puntos críticos de absorción; por lo tanto,
el proceso fotosintético es más eficiente cuando hay luz azul. La luz azul es
responsable del crecimiento vegetativo y de las hojas, y es importante para las
semillas y las plantas jóvenes porque ayuda a reducir el estiramiento de la
planta.

*Luz roja: Este es el otro punto crítico de absorción de la luz para las hojas. El
fitocromo (un foto receptor) dentro de las hojas es más sensible a la luz roja y
responde a esta. La luz roja es importante en la regulación del florecimiento y la
producción de frutos. Además, ayuda a aumentar el diámetro del tallo y
estimula la ramificación.

*Luz roja lejana: Esta luz puede provocar la elongación de la planta y

desencadena el florecimiento en las plantas de días largos.

6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

6.1 Extracción de pigmentos:

Se colocaron unos trozos de espinaca (sin sus nerviaciones más gruesas) en

un mortero y se le agrego etanol y carbonato de calcio. Luego se macero la
mezcla (Imagen 4) hasta que el líquido adquirió un color verde intenso.
Posteriormente se procedió a filtrar la mezcla para así dejar el líquido
resultante de la filtración en una caja de Petri. Al obtener esto se colocó en la
caja un papel filtro de manera vertical
Imagen 4. Mezcla macerada

Luego de dejar la caja Petri con el papel filtro en reposo durante un tiempo se
procedió a observar el papel y se obtuvo el siguiente resultado:

Imagen 5. Pigmentos presentes en la espinaca Imagen 6. Pigmentos presentes en la espinaca

Se pudo determinar que los colores resultantes en el papel filtro correspondían a los
distintos pigmentos fotosintéticos presentes en las hojas de espinaca. A su vez
basándonos en lo anteriormente consultado en el marco teórico se pudo determinar
que cada color identificaba un tipo de pigmento fotosintético es decir el color verde
claro que se encuentra en la parte inferior del papel filtro (imagen 6) corresponde a la
clorofila A, la cual desempeña la función principal en la fotosíntesis es decir
transformar la energía dada por la clorofila B en energía química. La clorofila A
absorbe las longitudes de ondas violeta, azul, anaranjado, rojo y pocas radiaciones de
las longitudes de onda intermedias (verde-amarillo-anaranjado), es por esto que se
presenta en un color verde claro ya que el color de un pigmento es el resultado de la
longitud de onda reflejada
El color verde oscuro que se encuentra en el medio (Imagen 6) corresponde a la
clorofila B, la cual se encarga de absorber la luz de una longitud de onda diferente y
transferirle la energía a la clorofila A. por último en parte superior se encuentra el color
amarillo (imagen 6) que corresponde a la xantofila la cual tiene la función de absorber
la energía no absorbida por la clorofila. La xantofila absorbe la luz al máximo en
longitudes de onda entre 460 y 550 nm y, por lo tanto, son de color amarillo ya que
reflejan las longitudes de onda en esta parte del espectro. 
También se pudo determinar que los pigmentos que se encontraban en la parte
superior del papel eran los más livianos es decir la xantofila luego la sigue la clorofila B
y por último la clorofila A siendo esta la menos liviana de todos los pigmentos
fotosintéticos presentes en las hojas de espinaca.
 6.2 Observación de células de la epidermis de tres plantas

 Cartucho (Zanthedeschia aethiopica): Se retiró la epidermis del haz de

la hoja de cartucho y se realizó un montaje húmedo.
Al observar a través del microscopio se obtuvo lo que se muestra a
continuación:

OBSERVACIÓN EN 10X OBSERVACIÓN EN 40X

foto obtenida por Diana Ramirez

Se pudo determinar que en la célula de la epidermis de la hoja de cartucho había

presencia del estoma paracítico es decir con 2 células anexas, dispuestas
paralelamente con respecto a las oclusivas. Los estomas se presentan en las plantas
gracias a la venación paralelinervia, la cual da pie para que existan los espacios
intercostales donde se hallan las bandas con los estomas. Se sabe que los estomas
son paraciticos, cuando cada célula oclusiva está limitada por una célula
acompañante. Estas células tienen su eje mayor paralelo al de las células oclusivas y
no cubren los polos de estas. Las células oclusivas presentan la forma de una mesa
de gimnasia con los extremos ensanchados y la parte central estrecha.

 Sauco (Sambucus nigra) y diente de león (Taraxacum officinale): se

retiró la epidermis del haz de la hoja de sauco y de diente de león y se
realizó un montaje húmedo para cada una de las dos epidermis. Al
observar a través del microscopio se obtuvo los siguientes resultados
 diente de leon (40x)

foto obtenida por Diego Angulo

SAUCO
OBSERVACIÓN EN 4X OBSERVACIÓN EN 40X

Foto obtenida por Diego Angulo

Se pudo identificar que en ambas especies se presentaban estomas

anomocitico en sus células. Estas no presentan células anexas o
acompañantes, es decir, las células que rodean al estoma no presentan
diferencias con las otras células epidérmicas, siempre se presentan de
4 a 5 células rodeándolo. Estos son cruciales para la fisiología de las
plantas ya que los estomas realizan la función de intercambio de
oxígeno y dióxido de carbono con el medio y además se encarga de
expulsar agua fuera de la plantas, es decir, también tiene función
excretora. Se encuentran en el interior de las hojas de la planta y
regularmente se abren de día debido a las ondas de luz.
 7. CONCLUSIONES

 Los pigmentos fotosintéticos y en especial la clorofila juegan un papel

relevante en el proceso de la fotosíntesis ya que son capaces de captar
energía solar y almacenarla como energía química en los enlaces de
moléculas como ATP, que en última instancia sirve para dirigir la
síntesis de moléculas orgánicas; fuente de energía de todos los
heterótrofos

 Los estomas son cruciales en la fisiología de las plantas ya que se

encargan de la respiración y secreción celular permitiendo así el buen
desarrollo de la fotosíntesis

 El reconocimiento de estomas en diferentes especies vegetales es vital

ya que nos permite entender y apreciar más la diversidad a nivel celular
de cada especie utilizada en la practica

8. BIBLIOGRAFIA

Berg, J., & Tymoczko, J. (2008). Bioquímica sexta edición. Barcelona: Reverté.

Curtis, H., & Schnek, A. (2008). Curtis Biología. Madrid: Editorial Medica Panamericana.

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http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/fotosintesis/

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http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/fase-oscura-de-la-fotosintesis

Oñate, L. (2010). Biologia I. CENGAGE learning.

Pérez, E., & Carril , U. (2009). Fotosíntesis: aspectos básicos. Reduca (Biología), 2(3).

Rodés , R., & Collazo, M. (2006). Medición de la actividad fotosintética. En R. Rodés, & M.
Collazo , Manual de prácticas de fotosíntesis. Mexico: Las prensas de ciencias.