TA 918 Microbiologia e Fermentações - Turma C

Profa. Dirce Y. Kabuki

PEDs: Joyce e Allan

Esta atividade pode ser realizada em grupo (organizado no 1º dia de aula) ou individualmente. Esta
atividade vai substituir a nota do relatório e deve ser entregue no dia 16/04/2020.

Aula prática 3 - Identificação bioquímica de bactérias

Introdução
Após o isolamento em cultura, o micro-organismo pode ser identificados no laboratório. A identificação
de bactérias pode ser realizada de diversas maneiras:
• Através da observação das características morfológicas: como dimensão, forma, arranjo e
estrutura das células;
• Culturais: referindo-se à aparência macroscópica em diferentes meios de cultura;
• Fisiológicas: em relação à capacidade dos micro-organismos sintetizar enzimas intra ou
extracelulares, de assimilar diferentes substratos ou gerar produtos metabólicos específicos e
(testes bioquímicos);
• Genéticas: por meio da identificação de regiões especificas do genoma da célula, por ex.
detecção 16S rDNA.
O metabolismo celular compreende as transformações dos nutrientes por reações químicas organizadas
que são catalisadas por enzimas. As enzimas são a expressão do potencial genético da célula. A avaliação
da presença de um conjunto definido de enzimas auxilia na identificação dos micro-organismos. Enzimas
microbianas podem ser intra ou extracelulares. Enzimas extracelulares ou ligadas à parede exercem sua
atividade catalítica fora da célula. Algumas transformam substratos de elevado peso molecular em
compostos menores, para serem transportados através da membrana e metabolizados no interior da
célula. Já as enzimas intracelulares são responsáveis pela síntese das estruturas celulares e pela produção
de energia. O metabolismo gera produtos que são excretados pela bactéria no meio de cultura, sendo que
a presença ou ausência desses produtos também pode ser utilizada na sua identificação.
Numa rotina de identificação, os resultados de vários testes são comparados aos de espécies descritas no
“Manual de Bergey”.
Sendo assim, o reconhecimento e identificação adequados desses micro-organismos são de extrema
relevância, pois enquanto algumas espécies são prejudiciais para a indústria e saúde, outras apresentam
extensiva aplicação nos processos biotecnológicos.

Esta aula pratica tem como objetivo apresentar alguns testes bioquímicos utilizados na identificação de
bactérias. Assista os vídeos abaixo, leia o material complementar e os slides e responda as questões.

1) O Bacillus subtilis é um bacilo Gram positivo formador de esporos com grande capacidade de
produção de enzimas. As figuras abaixo apresentadas representam os resultados do teste de
catalase (A) e teste da hidrólise do amido (B, indicado pela seta). Interprete os resultados e explique
o princípio de cada testes.

A B
 2) Escherichia coli é uma bactéria pertencente à família Enterobacteriaceae, na forma de bastonetes
Gram negativo, e se presente na água, indica contaminação de origem fecal. Assim, descreva as
reações bioquímicas dos testes de indol, vermelho de metila, Voges Proskauer, citrato, e as
características no ágar TSI para E. coli. Explique também o princípio bioquímico de cada teste.

Links de vídeos referentes a aula prática 3:

https://www.youtube.com/watch?v=PGBf7Xehcns – teste da catalase

https://www.youtube.com/watch?v=zFhMbXSgve8 – teste de hidrolise do amido

https://www.youtube.com/watch?v=YWuTwBuqQrA – IMViC (teste de Indol, teste de Vermelho de

metila, teste de Voges Proskauer, e teste de Citrato)

https://www.youtube.com/watch?v=nQxJnI9c1X4 – teste em ágar triplice acúçar e ferro (TSI)