PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

Facultad de Ciencias – Carrera de Biología

Laboratorio de Genética

Guía de laboratorio No 3
Eliminación de parentales, elaboración de medios de cultivo y selección de vírgenes

OBJETIVOS

 Descartar parentales para evitar cruzamientos entre generaciones

 Preparar medios de cultivo.
 Separar vírgenes para la realización de cruzamientos

MATERIALES Y REACTIVOS

30 Frascos de vidrio Harina de trigo 48g

2 Ollas de aluminio Agar-agar 6g
1 Balanza de un brazo Azúcar 39 g
8 cajas de Petri Agua 600 ml
Mechero o plancha de calentamiento Solución de ácidos 6 ml
2 cucharas de madera Levadura 19.2 g
1 Gasa estéril (rollo)
1 Algodón (bloque)
Tijeras *
Pipeta de 10 ml
Pipeteador
Kit para Drosophila
*Suministrados por el estudiante
METODOLOGÍA

Parte 1: Eliminación de parentales

Cada grupo procederá a descartar los parentales de cada frasco ya sea liberándolos o durmiéndolos y
disponiéndolos en el cementerio.

Parte 2: Preparación de medios de cultivo.

Formarán dos grupos con un integrante de cada grupo de laboratorio. Cada grupo elaborará los medios para
15 frascos. Los demás integrantes de cada grupo se encargarán de hacer los tapones (30)
Depositen 300 ml de agua en la olla (considere un poco más ya que parte que se liberará por ebullición)
Caliente a temperatura media
Añada poco a poco y mezclando cada uno de los ingredientes empezando por la harina. Asegúrese de que no
se formen grumos.
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Una vez la mezcla hierva, añada la solución de ácidos y deje hervir una vez más.

Sirva en los frascos de compota

Espere aproximadamente 15 minutos y tápelos.
Para hacer uso de ellos debe esperar hasta que se endurezcan (para mayor seguridad, al día siguiente)

Parte 3. Separación de vírgenes

Cada uno de los grupos recibirá cuatro frascos con medio de cultivo. Uno de ellos será para almacenar
machos y el otro para las hembras. (Lo mismo para el cruzamiento recíproco).

La idea de esta separación es que a medida que los individuos van naciendo, se vayan separando por sexos
en cada uno de los frascos. La frecuencia de separación no debe superar las cuatro horas ya que al alcanzar
los imagos la madurez sexual, inician las cópulas y se necesitan individuos vírgenes para el cruzamiento de la
próxima semana. No estar atentos se reflejará en los resultados de dicho cruzamiento, por lo que es muy
importante ser estrictos con el sexaje y los horarios de separación.

Parte 4. Elaboración de tapones

Corte la gasa en cuadros de 20cm x 20 cm.
Coloque un cuadrado sobre otro obteniendo la forma de una estrella
Haga una mota de algodón teniendo en cuenta la boca del frasco y enróllela con la gasa como si empacara un
dulce
Asegúrela con doble nudo. Tape el frasco con el medio cuando éste último este solidificado.

PRE – LABORATORIO
Consulte cuál es la función de la solución de ácidos en los medios de cultivo.
¿Qué otros medios existen para el cultivo de Drosophila?
BIBLIOGRAFIA
Griffiths, A. et al. 2002. Genética: Introducción al análisis genético. Ed Interamericana Mc Graw.