INFORME DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA GENERAL 3.

MECANISMOS DE
ACCIÓN DE LAS ENZIMAS.

ELIZA N. PARRA. E.1, LAURA M. OROZCO G. 1

1 Programa de Química, Facultad de Ciencias Básicas, Universidad de la Amazonia,

Avenida Circunvalar - Barrio Porvenir, Florencia, Caquetá, Colombia.

laura_og@live.com.

RESUMEN

La actividad vital no es más que el desarrollo de una serie de reacciones químicas

entre un conjunto de moléculas. Donde un catalizador o enzima solo cataliza una
reacción, por tanto existen tantas enzimas como reacciones, en la práctica de
laboratorio se trabajó con una serie de materiales biológicos como son la gelatina sin
sabor, saliva y extracto de piña, y como reactivos el lugol, benedict y solución de
almidón, en el primer procedimiento de enzimas sobre proteínas tomamos tres tubos de
ensayos, el primero contenía 2ml de almidón, el segundo 2ml de galantina sin sabor y
2ml de saliva, y el tercero 2ml de gelatina sin sabor y 2ml de extracto de piña, tres
minutos después se picó suavemente con agitador, este procedimiento se repitió en
intervalos de 1min hasta que se observó el cambio, que al picar estos materiales no se
disolvían muy bien. En el segundo procedimiento enzimática sobre almidones, se
trabajó con cuatro tubos de ensayo, donde al tuvo 4 se le agregó 2ml de solución d
almidón y 4 gotas de lugol, los tubos 5ª, 5b, se le agregaron 2ml de solución de almidón
y 2ml de saliva, al tuvo 6 se le agrego 2ml de solución de almidón y 2ml e extracto de
piña, por consiguiente cada tuvo fue mezclado, los tubos 5ª, 6 fueron calentaos al baño
maría a 37°cpor diez minutos, al tuvo 5b se le adiciono 8 gotas de benedict, y también
fue puesto a baño maría por 10 minutos a 60°c, los resultados de estos procedimientos
se verá evidenciados en los resultados ya que el segundo procedimiento algunos no
nos dio positiva la reacción del tuvo 5b y esto se llevó a discusión de resultados.

ABSTRACT
Vital activity is nothing more than the development of a series of chemical reactions
among a set of molecules. Where a catalyst or enzyme only catalyzes a reaction,
therefore there are as many enzymes as reactions, in laboratory practice we worked
with a series of biological materials such as unflavored gelatin, saliva and pineapple
extract, and as reagents the lugol, benedict and starch solution, in the first enzyme
process on proteins we took three test tubes, the first contained 2ml of starch, the
second 2ml of unflavored galantine and 2ml of saliva, and the third 2ml of unflavored
gelatin and 2ml of pineapple extract, three minutes later it was gently pecked with
shaker, this procedure was repeated in 1min intervals until the change was observed,
that when chopping these materials did not dissolve very well. In the second enzymatic
procedure on starches, we worked with four test tubes, where at 4 was added 2ml of
starch solution and 4 drops of lugol, tubes 5, 5b, 2ml of starch solution and 2ml were
added of saliva, to the 6 had added 2ml of starch solution and 2ml of pineapple extract,
therefore each had was mixed, tubes 5, 6 were heated in a water bath at 37 ° c for ten
minutes, had 5b was added 8 drops of benedict, and was also put in a water bath for 10
minutes at 60 ° c, the results of these procedures will be evidenced in the results since
the second procedure did not give us positive reaction of 5b and this was led to
discussion of results.

INTRODUCCIÓN

Las enzimas son catalizadores de una efectividad notable al igual que son
responsables de miles de reacciones químicas coordinadas en procesos biológicos
de los sistemas vivientes. Una enzima actúa acelerando la velocidad de una reacción
disminuyendo la energía de reactivación requerida para tenga lugar la reacción, las
enzimas no se destruyen en una reacción y, por tanto, permanecen inalterado, siendo
utilizable. Un rasgo notable de un enzima como catalizador es su especificación de
sustrato, la cual determina su función biológica. Una de las características biológicas
critica de las reacciones enzimáticas es que sus especificidades de sustrato y catalítica
aseguran la síntesis de solo productos biomoleculares, algunos enzimas se conocen
como proteínas simples, debido a que solo requieren su estructura proteica para la
actividad catalítica. Otros enzimas son proteínas conjugadas ya que requieren un
componente no proteico, llamado cofactor, para la actividad. Por tanto en la práctica de
laboratorio se verificara la acción de los enzimas sobre un almidón y sobre una proteína
el resultado de esta práctica se verá evidenciado en los resultados obtenidos.

MATERIALES Y MÉTODOS

RESULTADOS

PRUEBA 1 DE ACTIVIDAD ENZIMÁTICA SOBRE PROTEÍNAS.

En esta prueba se utilizó el tubo de ensayo rotulado como tubo 1 como muestra base
que contenía gelatina sin sabor coagulada, previamente preparada en presencia de
agua. Así pues en comparación en el tubo 2 que contenía gelatina más saliva y agua,
se observó al adicionar la gelatina, agitar y someterla a baño maria, que debido a las
enzimas presentes en esta la gelatina se presentaba más diluida y con menos
densidad, similar a lo ocurrido en el tubo 3 que en lugar de saliva contenía extracto de
piña que además de ya tener enzimas la acidez de esta lograba una mejor dilución en
la mezcla, que se apreciaba al agitar con la varilla de vidrio.

PRUEBA 2 DE ACTIVIDAD ENZIMÁTICA SOBRE ALMIDONES.

Este procedimiento se efectuó en 2 etapas, teniendo como muestra base al tubo de

ensayo rotulado como tubo 4, que contenía una solución de almidón al 10% junto a
lugol.

Respecto al tubo 4, las muestras de los tubos 5a y 6 presentan diferencias entre ellos
puesto que el seis presentaba una forma y color similares al 4, sin embargo el 5a
mostraba una coloración violeta oscura con una sutil aparición de precipitado como se
evidencia en la fig #.

Para el tubo 5b, los resultados no fueron los esperados puesto que se pretendía
obtener una muestra con coloración amarilla como se mostró en algunos grupos
vecinos, sin embargo nuestra muestra de solución de almidón al 10%, solución de
saliva y lugol, presentaba una coloración azúl celeste en la que se apreciaban dos
fases, sin embargo esta coloración es el color propio del Benedicto que fue adicionado
por lo que se presume, no reaccionó.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

En la practica de laboratorio de mecanismos de acción de las enzimas se pudo

determinar el uso de las enzimas como sustancias catalizadoras en reacciones
biológicas, normalmente son una proteína grande, que no afecta el equilibrio, ni
ocasiona cambios químicos no favorables en el resultado (McMurry J., 2010) y cada
reacción, así sea catalizada, continúa solamente hasta que sea alcanzado el equilibro
(Mertz E. t., 1971), situación que se observó en la prueba sobre almidones en las
figuras ## en donde el tubo 5a continua la reacción pues presenta enzimas en la
mezcla; no se afirma que la muestra del tubo 6 no tenga presencia de enzimas sin
embargo se infiere que no son efectivas en su solución, ya que a diferencia de muchos
catalizadores, las enzimas por lo general son específicas en su acción (McMurry J.,
2010), por ende también se deduce no sirven en todos las mezclas; en este caso se
hace evidente, gracias a que se mantiene el tinte azúl oscuro de la muestra base del
tubo 4.

En la práctica se trabajó con ptialina o amilasa salival, colágeno y bromelina que

combina también tres enzimas, bromelina, extrasa y ananasa; en general, las enzimas,
son hidrosolubles y pertenecen a la clase de proteínas globurales simples o
conjugadas, que se pueden desnaturalizar con el calor y otras sustancias química
(Armstrong F., 1982), en la práctica se usó el calor para obtener una mejor reacción sin
embargo no se mostró en todos los casos, esta desnaturalización es una reacción
exagorica(1) que se ejecuta a una temperatura critica, puesto que solamente se
necesita un poco incremento de la temperatura para que de produzca rápidamente de
forma casi instantánea (Mertz. E.T., 1971), caso similar al presentado en el tubo 5a que
al momento de retirarlo del calor y adicionar el lugol, se notó no tardó en mezclarse
con el lugol, en comparación con el 6 que se necesitó de agitación para lograr mezclar
y según se menciona en el Libro de bioquímica de Mertz para este caso la entropía(2)
aumenta a una velocidad mucho mayor que la entalpía(3), dando una ∆F negativa
grande (Mertz. E.T., 1971), pero aunque es similar no fue precisamente el tipo de
reacción presentada, y se esperaba que si fuese así en la prueba del tubo 5b con
benedict, que resultó sin aparente reacción alguna en el trabajo realizado, no obstante
en las muestras de otros grupos de laboratorio resulto favorable la reacción lo que
conlleva a afirmar que un mal manejo de la prueba conllevo a los malos resultados en
esta prueba; se dizcute una posible falla al adicionar cada una de las sustancias, mala
obtención de la saliva, que la saliva utilizada no fue la más óptima o incluso el tiempo
que se espero para poner la prueba al baño maria.

En general, del mismo modo que los catalizadores inorgánicos, una enzima acelera la
velocidad de reacción de manera que reduce la energía de activación que se requiere
para que pueda darse la reacción y como existen diversas enzimas que desdoblan la
proteínas, es decir, proteínas que desdoblan proteínas, se hace necesario emplearse
nombres específicos para cada una (Armstrong F.; Bennett T., 1982). Anterior a esto se
mencionaron las utilizadas en esta ocasión, y poniendo esto en contexto se asegura
que fue positiva la reacción en las pruebas enzimáticas en proteínas ya que aunque no
diluyeron un su totalidad a la gelatina coagulada, se notó menor viscosidad en los
fluidos en en un principio se notaban turbios, viscosos, disminuyendo así la densidad
de estos.

(2) Se denota S, la entropía, o medida del desorden molecular al azar.

(3) Se denota H, la entalpía, o cambio en la energía interna de un sistema.

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFÍA

MERTZ E. T.: Bioquímica. Purdue University. Sistemas mecanizados de Linotipo, S.A.

México D.F. 1971.

McMURRY J.:Química Orgánica. Cornell University. Cengage Learning Editores, S.A.

México D.F. 2010. 7a Edición.

ARMSTRONG F.B.; BENNETT T. B.: Bioquímica. North California state University.; The
academy Natural Sciences of Philadelphia. Editorial Reveté, S.A. Barcelona, España.
1982.

Aspectos generales sobre las enzimas. www.ehu.sus/biomoléculas/enzimas/enz1.htm