ESTERILIZACION

Leydi D. Carreño Barreto (1093792314), Ángela N. Castellanos

Cote (1005062660), Karime L. Parra Cifuentes (116555750)
Curso Microbiología Veterinaria, Grupo A, Departamento de
Ciencias Agrarias, Universidad de Pamplona

RESUMEN
En el laboratorio de microbiología se realizaron los pasos y se conocieron los requisitos
mínimos para poder esterilizar y operar adecuadamente los implementos de trabajo,
en la práctica se conocieron los métodos de eliminación total de las bacterias que
contaminan las herramientas de laboratorio durante su uso como lo son las cajas de
Petri; asas; probetas etc.
Se emplearon dos métodos de esterilización:
La esterilización por calor seco produce la destrucción de los microorganismos por
oxidación de los componentes celulares. Este es un proceso menos eficiente que la
esterilización por calor húmedo porque los microorganismos mueren con mayor
rapidez cuando se encuentran en presencia de agua.
El calor húmedo destruye los microorganismos por coagulación de sus proteínas
celulares; también presenta ventajas como que no es corrosivo para metales y necesita
menor tiempo de esterilización.

ABSTRAC
In the microbiology laboratory were performed the steps and met the minimum
requirements to operate properly sterilized and work tools, in practice the methods
met a total elimination of bacteria that contaminate the laboratory tools for use as are
Petri dishes, handles, cylinders etc.
Two methods of sterilization were used:
• Dry heat sterilization destroys microorganisms by oxidation of cellular components.
This is a less efficient process than humid heat sterilization because microorganisms
Palabras clave: Esterilizacion, seco, humedo, temperatura, presion.
die more quickly in the presence of water.
• Moist heat destroys microorganisms by coagulating their cellular proteins; It also
 1. OBJETIVOS
• Aplicar métodos utilizados para la
esterilización de medios de cultivo, materiales
y accesorios empleados en el Laboratorio de
Microbiología.
• Enumerar los diferentes métodos que existen
para realizar procedimientos de esterilización
usados en microbiología.
• Preparar el material a Esterilizar y hacer uso
de la autoclave para ser utilizados en prácticas
futuras.
2. INTRODUCCION
La esterilización comprende todos
procedimientos físicos, mecánicos y químicos, que
se emplean para destruir, inactivar o retener
gérmenes en general y patógenos en particular.
El control de microorganismos mediante procesos
de esterilización, tiene importancia en el
laboratorio, dado que la escogencia del método a
utilizar y del material a procesar definen la eficacia
del proceso de eliminación microbiana y por ende
garantizan la no contaminación de muestras o
cultivos hechos fundamentales en la validez de un
resultado en el laboratorio.
La esterilización es la eliminación de todos los
microorganismos presentes en un objeto o
sustancia. Para llevar el proceso de esterilización
existen métodos como los agentes físicos (calor
seco, calor húmedo y radiaciones) y agentes
químicos (cloro, compuestos clorados, aldehídos,
óxido de etileno, compuestos fenólicos, ácidos y
álcalis), generalmente el agente más empleado es el
calor, ya sea húmedo o seco; la efectividad del calor
depende del tiempo de exposición y de la
temperatura.
La desinfección supone la destrucción de los
microorganismos vegetativos que pueden causar
enfermedades o en el contexto de las industrias de
alimentos, los que pueden producir alteraciones; la
desinfección también puede hacerse por métodos
físicos y químicos.
los
3. PROCEDIMIENTO
4. RESULTADOS
Material de esterilización en el Horno de aire
caliente:
- El material se desinfecto por medio del
(calor seco) en el horno a una temperatura
de 120°C, durante 5 horas estando
completamente limpio.
La
utilización de este método y su eficacia fue apta 5. ANALISIS DE RESULTADOS
para esterilizar los materiales debido a dos factores:
el tiempo de exposición y la temperatura.
Todos los microorganismos son susceptibles, en
distinto grado, a la acción del calor. El calor
provoca desnaturalización de proteínas, fusión y
desorganización de las membranas y/o procesos
oxidantes irreversibles en los microorganismos y
este requiere de mayor tiempo de esterilización.
Material de esterilización en el Autoclave:

- El material se desinfecto por medio

de la autoclave a una temperatura de 121°C
por 15 libras de presión durante 30 minutos.
(El material se encontraba sucio)
La utilización de este método permitió la
destrucción de microrganismos formadores de
esporas, su proceso es mucho más rápido, no
deja residuos tóxicos.
 6. CONCLUSIONES CUESTIONARIO
- La esterilización debe ser un método seguro, que 1. ¿Qué es esterilización?
permita el rápido procesamiento del material,
R: Se denomina esterilización al proceso por el cual
garantizando su esterilidad en el momento de su
se obtiene un producto libre de microrganismos
entrega.
viables. El proceso de esterilización debe ser
- En la práctica se estudió el envolver correctamente diseñado, validado y llevado a cabo para asegurar
el material de vidrio teniendo en cuenta las pautas que es capaz de eliminar la carga microbiana del
requeridas para obtener una adecuada cubierta y el producto a un microrganismo más resistente.
tiempo requerido para realizar una esterilización.
- El objetivo a realizar se cumplió ya que los 2. Dibuje una autoclave con sus partes y
resultados obtenidos fueron los mejores, el cual era describa su función
dejar los materiales libres de cualquier agente R: Una autoclave de laboratorio es un dispositivo
patógeno no deseado para el cultivo de que sirve para esterilizar material de laboratorio,
microorganismos. utilizando vapor de agua a alta presión y
temperatura, evitando con las altas presiones que el
agua llegue a ebullir a pesar de su alta temperatura.
7. ANEXOS El fundamento de la autoclave es que coagula las
proteínas de los microorganismos debido a la
presión y temperatura, aunque recientemente se ha - Tapón de sobrepresión: Es una tapa que permite
llegado a saber de algunas formas a celulares, tal la liberación de la presión cuando es excesiva. La
como los priones, que pueden soportar las autoclave tiene un canal de drenaje por donde se
temperaturas de autoclave. libera vapor.
- Manómetro de vapor: Es el indicador de la
PARTES DE UN AUTOCLAVE:
- Válvula de seguridad: Están diseñadas para presión dentro de la cámara. El vapor ingresa a la
aliviar la presión cuando un fluido supera un límite cámara de la autoclave causando la elevación de la
preestablecido (presión de tarado). Su misión es temperatura y la presión interna.
evitar la explosión del sistema protegido o el fallo
de un equipo o tubería por un exceso de presión.
Existen también las válvulas que alivian la presión
de un fluido cuando la temperatura (y, por lo tanto,
la presión) supera un límite establecido por el
fabricante
- Manómetro: Instrumento para medir la presión de
los fluidos, principalmente de los gases, Es la que
permite retirar la parte superior del equipo.
- Válvulas de control, apertura y cierre de purga:
Son las piezas que permiten el control de la presión
dentro de la autoclave.
- Tubo de purga: Es el conducto por donde se
libera el vapor generado por la autoclave cuando
está en funcionamiento.
- Contenedor de aluminio: Es el chasis o el soporte
de la autoclave.
- Asadera: Son las asas laterales que permiten
agarrar y levantar la autoclave para su traslado o
movimiento.
- Tuerca de tapa superior: Es un dispositivo que
forma parte del mecanismo de aseguramiento que
tiene el instrumento.
- Soporte de contenedor: Se trata de una base,
cuyo material es de aluminio, con la que está
elaborada el contenedor.
- Grasa sintética: Es el lubricante que permite
engrasar la empaquetadura de la puerta del equipo
esterilizador.
- Tornillo asegurador: Es otro de las tuercas que
forman parte del mecanismo de aseguramiento.
- Fijador del tornillo asegurador: Es un
mecanismo que sujeta fijamente y así se evita el
movimiento del tornillo asegurador.
 3. ¿Qué medidas podría tomar usted para - Los elementos deben estar limpios.
verificar la efectividad de la esterilización - Inmersión completa de los mismos en agua,
por auto clavado? alcanzando la temperatura adecuada, o usar
R: Tener en cuenta que no permite esterilizar Autoclave de vapor.
soluciones formen emulsiones con el agua, además - Los elementos deben ser secados posteriormente.
de que es corrosivo en instrumentos metálicos, que
la temperatura sea la adecuada, al igual que la RADIACIÓN UV: Estas radiaciones poseen un
presión y el tiempo, para su correcto funcionamiento bajo poder de penetración, se emplea para disminuir
la carga microbiana de superficies. No se considera
se debe saber muy bien las instrucciones de uso.
un método esterilizante.
Mecanismo de acción: máximo de absorción de los
4. ¿Qué es liofilización? ácidos nucleicos es a 265 nm. La luz UV provoca
R: Es un proceso de deshidratación usad dímeros de pirimidina en el DNA y si no se reparan,
generalmente para conservar un alimento la célula muere.
perecedero o hacer el material más conveniente para
LIMPIEZA: Reduce la contaminación y evita que
el transporte. La liofilización funciona congelando
se depositen sustancias pirógenas en los distintos
el material y luego reduciendo la presión materiales. Este proceso puede ser:
circundante para permitir que el agua congelada en  Manual: Esta expulsa mecánicamente una
el material se sublime directamente desde la fase alta proporción de microorganismos
solida a la fase gaseosa, sin pasar por el estado presentes en el material.
líquido.
- El lavado y fregado con agua a temperatura
5. ¿Qué es sonicacion? adecuada y detergente permite que no se disemine el
R: La sonicacion es el acto de aplicación de la polvo que puede trasladarse a superficies críticas.
energía del sonido (generalmente ultrasonidos) para - No se debe usar el agua a más de 45°C, porque
coagula la albúmina y se hace más difícil la
agitar las partículas de una muestra, con diversos
limpieza.
fines científicos o industriales.
- No usamos escobas, plumeros ni franelas ya que
Su mecanismo es una corriente eléctrica que crean un riesgo de infección por diseminación.
transmite su energía a un sistema mecánico que la - El personal debe proteger su salud utilizando
convierte en vibración de alta intensidad que genera guantes resistentes, protección ocular y delantal
ondas de ultrasonido. Los ultrasonidos generan a su impermeable y barbijo.
vez, vibraciones en el material objetivo. Si contiene
líquidos, se generan millones de burbujas  Mecánica: Existen maquinas lavadoras
microscópicas, las cuales sufren rapidísimos especialmente diseñadas para el lavado de
procesos de expansión y colapso que pueden material. El proceso se realiza a través de
transmitir su energía a otros materiales. Este se una cinta transportadora, que incluye el
llama cavitación y puede ser incrementado lavado con agua fría, lavado con agua
añadiendo al medio pequeñísimas esferas de vidrio. caliente, enjuague y secado. Estas máquinas
forman chorros de agua y vapor que trabajan
6. ¿Qué otros procesos físicos permiten por fricción y generan turbulencias.
disminuir la carga microbiana?
R: CALOR: La desinfección por calor recibe el Ultrasónica: Se utiliza energía en forma de onda
nombre de Pasteurización. Este proceso, por ultrasónica 20 KHz. transductor metálico por 5
calentamiento de líquidos se emplea generalmente a minutos u onda ultrasónica de 35 KHz. transductor
temperaturas por debajo del punto de ebullición. de cristal por 3 minutos. Esta limpieza no remueve
Destruye microorganismos patógenos (infecciosos); material incrustado, pero es suplementaria de la
no incluye esporas. La temperatura alcanzada es de
manual. Esta onda no produce muerte microbiana.
65°C durante 15 minutos. Las condiciones para
No se utiliza en materiales de goma, PVC, metal y
obtener óptimos resultados son:
plástico al mismo tiempo. - Radiaciones ionizantes y no ionizantes

FOTOGRAFIAS

Imagen1: Materiales a preparar para el proceso de

esterilización.
Fotografía tomada por la estudiante Leydi Carreño
B.

Imagen 2: Materiales preparados para esterilizar y

llevarlos posteriormente al horno.
Fotografía tomada por el estudiante Karime Parra
Cifuentes.

Imagen 3: Materiales preparados para esterilizar y

llevarlos posteriormente a la autoclave.
Fotografía tomada por el estudiante Natalia
Castellanos Cote.

7. ¿Qué otros tipos de rayos a diferentes

longitudes de onda emplean para
esterilización?
R:
- Radiación de las ondas electromagnéticas
- Espectro electromagnético
- Rayos x, rayos gamma y rayos cósmicos
- Rayos ultravioleta

8.
BIBLIOGRAFIA
1. VWR PART OF AVANTOR.
Indicadores de cintas de esterilización.
Disponible en
https://es.vwr.com/store/product/571101/in
dicadores-de-cintas-de-esterilizacion
2. VWR PART OF AVANTOR. Indicadores
de cintas de esterilización. Disponible en
https://es.vwr.com/store/product/571101/in
dicadores-de-cintas-de-esterilizacion
3. Rossman García ,Emmanuel Muñoz , ET
AL (2009) REPORTE DE LA PRACTICA
NO. 4 "ESTERILIZACION POR CALOR
HUMEDO" ( I ).Disponible en : http://los-
divinos.overblog.es/article-32790565.html
4. Universidad del desarrollo. (2017, enero).
Equipamiento y operaciones de laboratorio.
Control biológico de autoclaves.
Disponible en
“https://medicina.udd.cl/files/2017/03/SOP
-12-12.V02-Control-Biol%C3%B3gico-
deAutoclaves.pdf”
5. Tecnología de los plásticos. (2011, junio
6). Blog dedicado a los materiales
plásticos, características, usos, fabricación,
procesos de
6. transformación y reciclado.
Politetrafluoruro de etileno. Disponible en
“https://tecnologiadelosplasticos.blogspot.c
om/2011/06/politetrafluoruro-
deetileno.html”
7. Prácticas de Microbiología. PRÁCTICA 3
– UTILIZACIÓN DE LA AUTOCLAVE.
14 diciembre, 2016. Disponible en;
https://fiestadelosmicroorganismos.wordpr
ess.com/2016/12/14/practica-3-
utilizacionde-la-autoclave/
8. Conservación de cepas microbianas por el
método de liofilización para el control
microbiológico en Laboratorios Liorad.
Autores. Nancy Burguet Lago, Nelson
Sierra Prado, Lázaro C. Brito Godoy
Año:2012 (Volumen 43). Número:3.
REVISTA CENIC CIENCIAS
BIOLOGICAS. Disponible en:
https://revista.cnic.edu.cu/revistaCB/articul
os/conservaci%c3%b3n-de-
cepasmicrobianas-por-el-m%c3%a9todo-
de-liofilizaci%c3%b3n-para-el-control8.
9. Laboratorio Químico .Mufla. Disponible
en:
https://www.tplaboratorioquimico.com/lab
oratorio-quimico/materiales-e-
instrumentosde-un-laboratorio-
quimico/horno-mufla.html
10. Desnaturalización de Proteínas: Factores
que la Provocan y Consecuencias.
desnaturalización de las proteínas. Por
Mariana Gelambi. Disponible en:
https://www.lifeder.com/desnaturalizacion-
proteinas/
11. hisopos-operarla-urgencia-infeccion-
craneo_0__Q14MWt_n.html
12. google imagenes . (30 de septiembre de
2019). Obtenido de
http://www.sakiramedical.com/producto/ba
jalenguas/
13. patesdel.com. (1 de octubre de 2019).
Obtenido de
https://www.partesdel.com/autoclave.html

14. Baamonde, J. M. (01 de julio de 2013).

Bioterios. Obtenido de
https://www.bioterios.com/post.php?
s=2013-07-01-mtodos-de-limpieza-
desinfeccin-yesterilizacin

15. Equipos y laboratorio de colombia . (s.f.).

Obtenido de
https://www.equiposylaboratorio.com/sitio/
contenidos_mo.php?it=1498