El origen inusual de la reacción en

cadena de la polimerasa
Kary B. Mullis;scientific american abril 1990

El origen inusual de la reacción en cadena de la polimerasa es un relato realizado

por el bioquímico estadunidense Kary B. Mullis en donde describe las ideas que le
surgieron para realizar millones de copias de genes.

Donde menciona los diferentes procesos en los cuales los biólogos moleculares
utilizaban para el análisis de los genes, dentro de estas técnicas los científicos
buscaban recortar la cadena de ADN, para si solo obtener el gen de interés. Para
ellos se utilizaron endonucleasas y sondas de oligonucleótidos marcados
radioactivamente para determinar si una muestra de ADN contiene una secuencia
de nucleótidos o un gen específico. En esos años Mullis fue contratado por el
laboratorio Cetus con ello llego la industrialización de sondas de oligonucleótidos
marcados. No conforme con la información que otorgaban estos Mullis empezó a
realizar experimentos con la utilización de dideoxinucleótidos tal técnica se
llamaba método se Sanger para poder revelar la secuencia del segmento de ADN,
para todo estos surgieron preguntas de la información que se podía tener del
ADN. Años anteriores un bioquímico estadunidense llamado Arthur Kornberg
había descubierto la ADN polimerasa la cual tenía funciones de reparación y
replicación. Teniendo la información anterior a Mullis aun le surgían dudas de la
secuenciación del ADN, ya que el problema era que los oligonucleótidos a veces
se hibridan con el ADN secuencias distintas a las previstas; estos
emparejamientos inevitables hicieron que los resultados fueran ambiguos. Pero en
un viaje de noche en su coche a Mullis se le ocurrió una propuesta de
experimentación de la secuenciación del ADN, corregiría los emparejamientos no
deseados, en la cual calentó la muestra para separar las cadenas de ADN para
luego los hibridaría con oligonucleótidos posteriormente agregaría los cuatro tipos
de dideoxinucleótidos para al final agregar la ADN polimerasa la cual extendería
los olgonucleotidos , para luego ser identificados por electroforesis en los
residuales de ddNTP etiquetados radioactivamente, al final de este experimento se
preguntó por qué no tendría más pares de bases al momento de eliminar los
ddNTPs y agregar dos primers uno que fuera uno en cada cadena, y así con
ayuda de la polimerasa tener mas copias del gen de interés. No podía creer lo que
estaba pensando y empezó a investigar si alguien más ya lo había propuesto, pero
para su sorpresa no había rastro de dicha información, para los cual los meses
posteriores se dedicó a pulir más la técnica hasta que la logro estandarizar y llego
a la conclusión que su modelo podría lograr que a partir de una molécula de ADN
se pueden obtener dos y de dos cuatro y así exponencialmente. Posteriormente
Mullis busco la patente de laboratorio Cetus el cual estuvo conforme con los
resultados. Finalmente estos resultados fueron presentados en congresos en
modo de poster. Donde distinguidos investigadores estaban interesados con dicho
experimento.

La PCR, técnica inventada por Kary B. Mullis en 1983, emplea un par de

oligonucleótidos para delimitar una región de interés y una polimerasa para
extenderlos, utilizando ambas hebras del gen en cuestión como plantilla. Al repetir
este ciclo decenas de veces, se duplica cada vez el fragmento de ADN en
cuestión. Así se logra copiar millones de veces la secuencia de interés, aunque se
encuentre entre millones de otras secuencias de ADN. A 20 años de su invención,
la PCR se cataloga como la estrella de las herramientas de la biología molecular.
En la actualidad son innumerables las aplicaciones de su utilización en múltiples
campos de las ciencias biológica y de la salud.