-El microscopio es una herramienta de gran importancia para la observación e identificación de los

microorganismos. El tamaño de las bacterias impide verlas a simple vista. Puesto que la inmensa
mayoría de las bacterias son incoloras, la única forma de observarlas bien en el microscopio óptico
consiste en incrementar su contraste con respecto al medio. Esto se consigue mediante su teñido
con colorantes o mediante la disposición de una óptica especial de contraste, generalmente de
fases, en el microscopio. La disponibilidad de sistemas de contraste de fases permite observar a las
bacterias vivas y determinar algunas características tales como su movimiento.

Para observar las bacterias teñidas, hay que proceder previamente a su fijación. Inicialmente se
prepara un frotis a partir de medio líquido o dispersando en una gota de agua una porción de
células crecidas en sólido. Posteriormente se deshidrata el frotis por calentamiento suave
utilizando el reverso de la mano como control de temperatura tras pasar repetidamente el
portaobjetos sobre la llama del mechero. Tras la fijación por calor se procede a la tinción.
https://es.slideshare.net/evside13/observacin-de-los-microorganismos-en-el-microscopio

-Un frotis bacteriano es una extensión en forma de película delgada de una suspensión de
microorganismos bacterianos que se efectúa sobre una placa de vidrio transparente o
portaobjetos, para su observación bajo un microscopio óptico. La extensión en forma de película
se efectúa con el objeto de separar los microorganismos en lo posible, ya que si están agrupados la
observación no es nítida. En el estudio de cultivos bacterianos se emplean técnicas de preparación
de frotis, de fijación y de coloración para analizarlos mejor. A causa del tamaño tan pequeño de los
microorganismos, se requiere necesariamente el uso de un microscopio óptico para su
observación. https://www.lifeder.com/frotis-bacteriano/

-La tinción simple es un procedimiento de tinción rápido y sencillo en el cual se emplea un solo
colorante, por eso se denomina simple. Se utiliza principalmente para determinar la morfología y
la organización de las células presentes en una muestra. Naturalmente las células no tienen color,
por lo que es necesario hacerlas visibles de alguna manera cuando se observan en el microscopio.

Es importante destacar que los colorantes empleados en la tinción simple deben ser básicos con
carga positiva (catiónicos), para que puedan unirse espontáneamente a la pared y al citoplasma
celular. Estas estructuras celulares están cargadas negativamente. Por esto el colorante, cargado
positivamente, se ve atraído por las células y se une a estas de manera espontánea. Así, se
colorean rápidamente todas las células presentes en una muestra. La tinción simple se utiliza para
destacar el microorganismo completo para que se vean las formas y lasestructuras celulares
básicas. Por tanto, la tinción simple mejora la observación de la célula completa. Se fija el
espécimen, seañade el colorante y se deja el tiempo adecuado para que se absorba, se retira el
exceso de colorante y la preparación ya está lista para ser observada. se utilizan tintes como
safranina, azul de metileno, cristal violeta y carbolfuesina
https://es.scribd.com/doc/80998594/Tincion-Simple https://www.lifeder.com/tincion-simple/
-LAS TINCIONES DIFERENCIALES SON AQUELLAS TINCIONES QUE SE USAN PARA DIFERENCIAR DE
MANERA MAS EXPLICITA LOS MICROORGANISMOS. • ESTAS TINCIONES UTILIZAN LOS
COLORANTES DIFERENCIALES, QUE SE COMPONEN DE MÁS DE UNA SUSTANCIA TINTÓREA

La diferenciación entre las bacterias Gram positivas y Gram negativas se establece en la naturaleza
y características de la pared celular bacteriana . Las bacterias Gram positivas poseen una gruesa
capa de peptidoglicano que es capaz de retener al complejo colorante-mordiente (cristal violeta-
yodo). Durante la decoloración con alcohol acetona se provoca una deshidratación de esta gruesa
pared y se reduce la porosidad, atrapando entonces al complejo en el interior de la célula. Las
bacterias Gram negativas, poseen una delgada capa de peptidoglicano no puede impedir la salida
del complejo colorante-mordiente (cristal violeta-yodo) y es entonces fácilmente teñida por el
colorante secundario o de contraste. Los dos grupos bacterianos a los que anteriormente se
refiere difieren en el color con el que finalmente se tiñen las bacterias. Gram positivas se
observarán de azul por el cristal violeta y no perderán esta coloración durante los pasos sucesivos.
Las bacterias Gram negativas perderán la coloración inicial con los siguientes pasos y se teñirán de
rosa debido a la Safranina. La diferencia esta determinada por la composición de su envoltura
celular, las bacterias Gram. positivas poseen una malla de péptido glicano en su parte mas
externa ,mientras que las Gram. negativas recubriendo una fina capa de peptidoglicano y
presentan una membrana externa . https://es.slideshare.net/josemagarinos/tinciones-
diferenciales-aspectos-tecnicos https://es.slideshare.net/JWilson6/tinciones-68379682

-TINCIONES SELECTIVAS • SON AQUELLAS QUE PERMITEN OBSERVAR UN ORGANELO CELULAR

DETERMINADO, PORQUE EL COLORANTE SE COMBINA SELECTIVAMENTE CON EL. • SUELEN
USARSE COLORANTES DE CONTRASTE, PARA DISTINGUIR EL RESTO DE LA CELULA. Las tinciones
selectivas nos permiten observar estructuras de las células gracias a su mayor afinidad por los
colorantes utilizados . Se pueden observar estructuras como la pared celular, cápsula, flagelos,
material nuclear, e inclusiones como depósitos de materiales de reserva de poli-ß-hidroxibutirato,
glucógeno y gránulos metacromáticos . Coloración de esporas <ul><li>Algunas bacterias son
capaces de desarrollar formas de resistencia denominadas esporas como mecanismo de defensa a
agresiones ambientales. Son estructuras de pared gruesa en las que el microorganismo logra
soportar las condiciones desfavorables de calor, desecación, acidez, etc.

las endosporas son impermeables a los colorantes , por lo que cuando se hace una tinción, se
observan al microscopio como cuerpos altamente refringentes y sin teñir. Sin embargo, las
endosporas se pueden teñir aplicando calor a la preparación previamente cubierta con una
solución de colorante que en la técnica de Shaeffer y Fulton es el verde de malaquita. El lavado
con agua elimina este colorante de las células vegetativas y la aplicación de un colorante de
contraste permitirá distinguir claramente a las esporas de color verde.

Coloración de la cápsula <ul><li>Algunas bacterias presentan una capa externa a la pared

denominada cápsula. Está compuesta de azúcares y proteínas. No es una estructura vital para la
bacteria, de modo que es posible que bajo determinadas condiciones ambientales o del propio
desarrollo genere cápsula y bajo otras no lo haga. La tinción de cápsula se denomina tinción
negativa porque tiñe el fondo de la preparación y no el microorganismo. La tinta cubre toda la
preparación a excepción de las cápsulas. En el microscopio se observa el fondo negro y los
microorganismos con cápsula sin color.

• Las bacterias reciben diferentes nombres según su forma: • Cocos: bacterias en forma esférica •
Bacilos: bacterias en forma de bastón; • Espirilos y espiroquetas: bacterias en forma de espiral. •
Vibriones: bacterias en forma de coma.

Las agrupaciones bacterianas aparecen cuando las células se mantienen juntas después de la
división celular. Son características de diferentes microorganismos. • A partir de los cocos:
Diplococos, Estreptococos (un plano de división), Tétradas, Sarcinas y Estafilococos (dos o más
planos). • Diplococos: dos células • Estreptococos: cadenetas de varias células • Tétradas: dos
planos perpendiculares • Sarcinas: tres planos ortogonales (paquetes cúbicos) • Estafilococos:
muchos planos aleatorios • A partir de bacilos aparecen: • Diplobacilos • Estreptobacilos • Otras
agrupaciones son: En Empalizada, en V o L, letras chinas o rosetas.

https://es.slideshare.net/YessiPalacios8/morfologa-y-agrupacin-bacteriana