PRÁCTICA No.

1: PREPARACIÓN DE SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

Objetivo

Que el alumno aprenda a utilizar la ecuación de Herderson- Hasselbalch y por medio de esta
prepare una solución amortiguadora.

Fundamento: Las soluciones amortiguadoras son soluciones que conservan su pH con tenacidad a
pesar de que se les añadan cantidades importantes de ácidos o álcalis. Están formadas por una
mezcla de ácidos débiles y su base conjugada. Al hacer la mezcla entre un ácido débil y su sal en
las proporciones adecuadas, (estas proporciones se calculan con la ecuación de Henderson-
Hasselbach) logramos obtener una solución que será resistente a los cambios bruscos de pH.
Cuando el pH de la solución se aproxima al valor del pK del Ácido este comienza a disociarse. Los
protones liberados en el proceso reemplazan a muchos de los titulados por la base. Así una
solución que contiene un ácido débil resiste cambios en el pH mejor que un volumen igual de agua
debido a que el efecto amortiguador depende de los cambios en la disociación de un ácido débil,
un amortiguador es más eficaz dentro de los límites del pH, donde estos cambios son más grandes,
esto es, cerca del pK del ácido.

Procedimiento

Preparación de solución amortiguadora.

1.- Al recibir su problema, estudie las condiciones que se piden y busque un buffer cuyo pKa sea
adecuado y aplicando la ecuación de Henderson-Hasselbach, calcule las cantidades de ácido y base
conjugada que debe usar para preparar 100ml de disolución.

2.- Pese las cantidades que calculó o mida los volúmenes adecuados y disuelva. Afore
aproximadamente a 75mL. Laboratorio de Bioquímica 9

3.-Transfiera esta disolución a un vaso de precipitados de 150 mL y verifique el pH en un

potenciómetro previamente calibrado y ajustar la temperatura a las condiciones de trabajo. Si el
pH no es exactamente el pedido, ajústelo agregando el componente (ácido o base), que sea
necesario para subir o bajar el pH hasta el valor requerido. Para valores de pH mayores a 6 usar la
sal di básica de fosfatos.

4.- Afore a 100 mL con agua destilada y verifique nuevamente el pH. Determinación de la
capacidad Buffer. La capacidad buffer es la cantidad de base fuerte requerida para alterar el pH de
la disolución reguladora, en una unidad de pH: C. B.

Siendo dpH el incremento de pH resultante de la adición de un volumen de base.

5.- Ponga su disolución en un vaso, introduzca los electrodos del potenciómetro y disponga una
bureta con disolución de NaOH 1 N medido exactamente en la bureta (1mL). Anote el pH
resultante. Repita las adiciones de base, en los volúmenes iguales (1 mL) y anote los valores de pH
correspondientes, hasta obtener por lo menos cinco lecturas.
Disposición de desechos

Las soluciones amortiguadas pueden ser vertidas en la tarja; los sobrantes de NaOH deben
recuperarse en frascos ámbar con tapa para ser reutilizados.

HOJA DE RESULTADOS

a) Preparación de soluciones amortiguadoras:

1. Problema # 1: pH requerido: 4.00 concentración molar: 0.1M volumen final: 100 ml.

2. Cálculos efectuados.

pK acido acético= 4.75

[A]
pH=Pk +log ⁡( )
[ HA ]
[ A]
4−4.75=log ⁡( )
[ HA ]
[A]
0.14=log ⁡( )
[ HA ]
=0.17

A
([[ ]])
HA
=0.17 /1

0.17+1= 1.17=100%

Porcentaje

1.17 100% 1.17 100%

0.17 x = 14.52% 1 x=85.47%

Molaridad

0.1 M 100% 0.1M 100%

Xa=0.014M 14.52% xHa=0.085M 85.47%

Gr.

82 PM 1M 60PM 1M

x=1.19064 0.01452M x=5.1 0.085

1.19064/ 10= 0.1190 gr. Acetate de sodio 0.085/10= 0.51 gr

M 0.51
V= = =0.48 ml . acidoacetico
D 1.05

Acido: CH3COOH =60gr/mol

Base: CH3COO Na =82gr/mol

3. Cantidades por pesar o medir de A- y HA

Se requiere medir 0.11906 gr de la base y 0.48 ml de ácido acético y ponerlos en 100ml de agua en
un matraz aforado

4. ¿Cuál es el pH de la solución inicial y cuál el valor final de pH?

La solución inicial de agua pura tiene un pH de 6.7 y con la solución final se obtuvo un pH de 2.3, el
cual se corrigió con una solución básica de hidróxido de sodio al 40% siendo la solución final de pH
de 4.00

5. ¿Por qué para valores de pH cercanos a 5 se usan acetatos y para valores cercanos a 7

Fosfatos?

Debido a si Pk (constante de disociación) siendo la de los fosfatos una constante de 6.8 mientras
que la de los acetatos es menor siendo este alrededor de 4-5

Laboratorio no. 104 de Bioquímica

Discusión

Para la preparación de la solución amortiguadora, se hicieron los cálculos necesarios para medir la
base y el ácido añadidos a la solución, a pesar de que no se mostró cambio aparente si se pudo
obtener un pH más bajo que el que se obtuvo antes de agregar los compuestos, a pesar de que se
logró obtener un pH bajo, este no fue el requerido por lo que para llegar al pH necesario se le
agrego una solución de NaOH al 40%, hasta que se consiguiera el pH deseado
Conclusiones

Las soluciones amortiguadoras son de gran importancia para los análisis químicos de cualquier
tipoi, pues estos pueden ser indicadores de problemas en el cuerpo, problemas ambientales dados
por contaminación, o incluso la presencia de microorganismos pues algunos pueden cambiar el pH
de los lugares en los que se encuentran.

Bibliografía

Bioquímica. (2 de 10 de 2007). uco.es. Obtenido de uco.es: https://www.uco.es/dptos/bioquimica-

biol-mol/pdfs/06%20pH%20AMORTIGUADORES.pdf

Bioquímica dogsleep. (25 de 5 de 2009). Bioquímica dogsleep. Obtenido de bioquímica dogsleep:

http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/Chp02.pdf