20302E.

htm Page 1 of 2

01/2013:20302

2.3.2. IDENTIFICATION OF FATTY OILS BY THIN-LAYER

CHROMATOGRAPHY

METHOD A
Thin-layer chromatography (2.2.27).
Test solution. Unless otherwise prescribed, dissolve about 20 mg (1 drop) of the fatty oil in 3 mL of methylene 
chloride R.
Reference solution. Dissolve about 20 mg (1 drop) of maize oil R in 3 mL of methylene chloride R.
Plate: a suitable octadecylsilyl silica gel for high performance thin-layer chromatography as the coating 
substance.
Mobile phase:
– mobile phase A: ether R;
– mobile phase B: methylene chloride R, glacial acetic acid R, acetone R (20:40:50 V/V/V).
Application: 1 µL.
Development: twice over a path of 0.5 cm with mobile phase A, then twice over a path of 8 cm with mobile 
phase B.
Drying: in air.
Detection: spray with a 100 g/L solution of phosphomolybdic acid R in ethanol (96 per cent) R. Heat the plate at 
120 °C for about 3 min and examine in daylight.
The chromatogram obtained typically shows spots comparable to those in Figure 2.3.2.-1.

1. arachis oil 4. rapeseed oil 7. linseed oil 10. almond oil 13. evening 

primrose oil

2. sesame oil 5. soya-bean oil 8. olive oil 11. wheat-germ oil

http://online6.edqm.eu/ep905/NetisUtils/srvrutil_getdoc.aspx/1L34sC3SsEJTSCZ0pC395... 11/08/2019
20302E.htm Page 2 of 2

14. safflower oil 
(type I)

3. maize oil 6. rapeseed oil (erucic  9. sunflower oil 12. borage oil 15. safflower oil 

acid-free) (type II)

Figure 2.3.2.-1. – Chromatograms for the identification of fatty oils (method A)

METHOD B

Thin-layer chromatography (2.2.27).
Test solution. Unless otherwise prescribed, dissolve about 20 mg (1 drop) of the fatty oil in 3 mL of methylene 
chloride R.
Reference solution. Dissolve about 20 mg (1 drop) of maize oil R in 3 mL of methylene chloride R.
Plate: a suitable octadecylsilyl silica gel for high performance thin-layer chromatography as the coating 
substance.
Mobile phase: methylene chloride R, glacial acetic acid R, acetone R (20:40:50 V/V/V).
Application: 1 µL as bands of 8 mm. A suitable automated apparatus may be used.
Development: over a path of 7 cm.
Drying: in air.
Detection: treat with a 100 g/L solution of phosphomolybdic acid R in ethanol (96 per cent) R. Heat the plate at 
120 °C for 3 min and examine in daylight.
The chromatogram obtained typically shows zones comparable to those in Figure 2.3.2.-2.

1. arachis oil 5. soya-bean oil 9. sunflower oil 13. evening primrose oil

2. sesame oil 6. rapeseed oil (erucic  10. almond oil 14. safflower oil (type I)

acid-free)

3. maize oil 7. linseed oil 11. wheat-germ oil 15. safflower oil (type II)

4. rapeseed oil 8. olive oil 12. borage oil 16. hydrogenated arachis oil

Figure 2.3.2.-2. – Chromatograms for the identification of fatty oils (method B)

http://online6.edqm.eu/ep905/NetisUtils/srvrutil_getdoc.aspx/1L34sC3SsEJTSCZ0pC395... 11/08/2019