Las mariposas ninfálidas se diversifican siguiendo casi

fallecimiento en el Cretáceo / Terciario límite

Niklas Wahlberg 1,2, *, Julien Leneveu 1 , Ullasa Kodandaramaiah 2 ,
Carlos Pen˜ a 2 , So¨ren Nylin 2 , André VL Freitas 3
y Andrew VZ Brower 4
1 Laboratorio de Genética, Departamento de Biología, Universidad de Turku, 20014 Turku, Finlandia.
2 Departamento de Zoología, Universidad de Estocolmo, 10691 Estocolmo, Suecia.
3 Departamento de Biología Animal y Museu de Zoologia, Instituto de Biología, Universidade Estadual
de Campinas, CP 6109, Campinas, SP 13083-970, Brasil
4 Departamento de Biología, Middle Tennessee State University, Murfreesboro, TN 37132, EE. UU.

La familia de las mariposas Nymphalidae contiene algunos de los modelos de insectos no drosófilos más importantes.
sistemas para estudios evolutivos y ecológicos, sin embargo, la historia evolutiva del grupo se ha mantenido. envuelto en
misterio. Hemos inferido una hipótesis filogenética robusta basada en secuencias de 10 genes y 235 caracteres
morfológicos para ejemplares de 400 de los 540 géneros de ninfálidos válidos que representan enviando todos los linajes
principales de la familia. Al fechar los eventos de ramificación, inferimos que Nymphalidae se originó en el Cretáceo en
90Ma, pero que los antepasados de 10-12 linajes sobrevivieron catástrofe del Cretácico final en las regiones neotropicales
y orientales. Los patrones de diversificación sugieren extinción de linajes en el límite Cretáceo / Terciario (65 Ma) y
posterior especiación elevada tasas en el terciario.

Palabras llave: lepidópteros; Nymphalidae; extinción masiva; tiempos de divergencia; diversificación

1. INTRODUCCIÓN
Las mariposas de la familia Nymphalidae se encuentran entre las más insectos carismáticos en muchos hábitats, y su
belleza y la diversidad inspira una pasión de por vida por el mundo natural entre científicos y entusiastas por igual.  Como
adultos, la ninfa los párpados pueden ser visualmente llamativos, y sus comportamientos son susceptible de observación
fácil. Estos atributos han llevado los científicos utilizarán muchas especies de ninfálidos como sistemas modelo en
estudios evolutivos y ecológicos ( Boggs et al. 2003 ).

Las especies de Nymphalidae se encuentran entre los primeros taxones que nos ayudó a comenzar a entender las
complejas relaciones entre insectos y sus plantas hospederas (Ehrlich y Raven 1964), los efectos de la fragmentación del
hábitat en la población Dinámica de las especies en peligro de extinción ( Hanski 1999 ), los mecanismos genéticos detrás
del desarrollo vías de características morfológicas ( Beldade y Brakefield 2002), y las interacciones coevolutivas entre
organismos en anillos de mímica y coloración aposemática ( Brower 1996; Mallet y col. 1998) Sin embargo, tal
importancia los estudios recientes han sido impedidos por la falta de conocimiento de la escala de tiempo involucrada en
los procesos evolutivos que conducen a los patrones que vemos hoy (Vane-Wright 2004 ; Wahlberg 2006), ya sea la
evolución de la vagilidad o la evolución de resistencia de defensa de la planta huésped.

La edad de las mariposas (incluyendo Nymphalidae) tien sido objeto de un debate de larga dataForbes 1947; Escudos y
Dvorak 1979; Scott y Wright 1990; de Jong 2007 ), con el consenso de que las cinco familias de Papilionoidea se originó
y diversificó en el Terciario (Vane-Wright 2004 ). Esto se basa principalmente en el ocurrencia de los pocos fósiles de
mariposas conocidos de Oligo- depósitos de cene y eoceno ( Scott y Wright 1990; Emmel et al. 1992) Sin embargo, varios
estudios recientes sobre subgrupos dentro de las mariposas, extrapolando las tasas de divergencia de ADN a partir de la
edad mínima estimada calibraciones de los fósiles, sugieren que las mariposas pueden ser mayores, con la mayoría de las
familias originarias antes del límite KT ( Wahlberg 2006 ; Nazari y col. 2007; Wheat y col. 2007; Pen˜a & Wahlberg
2008) Las implicaciones de tal edad para la historia evolutiva de Nymphalidae no ha sido investigado todavía.

El período de tiempo durante el cual un grupo de especies tiene evolucionado tiene una fuerte influencia en su histórico
implícito biogeografía Las distribuciones de las mariposas existentes tienen atribuido a la vicariancia después de la ruptura
de Gondwana ( Miller y Miller 1997; Braby et al. 2005) y para dispersar eventos en tiempos más recientes
(Kodandaramaiah y Wahlberg 2007, 2009) Obviamente, el período de tiempo durante el cual un grupo de especies tiene
diversificado dictará qué procesos geológicos tienen posiblemente afectado su evolución, por ejemplo, si un grupo es
mucho más joven que la división de los continentes en que se encuentra hoy, es probable que la dispersión transoceánica
ser favorecido sobre la vicariancia como explicación de la corriente distribuciones (de Queiroz 2005 ).

Aquí proporcionamos una hipótesis filogenética robusta para la familia de las mariposas Nymphalidae basada en el más
común muestreo prensivo de géneros hasta la fecha (400 de 540 4296 N. Wahlberg y col. Historia evolutiva de
Nymphalidae
géneros válidos) y el mayor conjunto de datos actualmente disponible (hasta 10 genes secuenciados y hasta 235
morfológicos caracteres codificados para cada ejemplar). Basado en estos datos también inferimos tiempos de
divergencia, biogeografía histórica y el ritmo de diversificación en esta familia de aproximadamente 6000 especies.

2. MATERIAL Y MÉTODOS
Las muestras de mariposas fueron recolectadas por los autores y contribuyeron Utilizado por colegas de todo el mundo (ver
electrónica material suplementario, tabla S1 para la lista de taxones). En En la mayoría de los casos, el ADN genómico se extrajo
de dos patas de muestras secas; para algunos ejemplares se preservaron las patas en 95 por ciento de etanol en el campo antes de
la extracción. ADN se extrajo usando el kit de extracción Qiagen DNEasy ing un protocolo de insectos ligeramente
modificado. Cadena de polimerasa Se han publicado protocolos de reacción y secuenciación previos vivamente ( Wahlberg y
Zimmermann 2000; Wahlberg y col. 2003 , 2005b ; Wahlberg y trigo 2008), con la mayoríade nuevas secuencias que se generan
de acuerdo con Wahlberg y Trigo (2008) . Los caracteres morfológicos fueron codificados según Freitas y Brown (2004) para
aquellos géneros que tenía suficiente material disponible (suplementario electrónico material, tabla S1). Compilamos una matriz
de datos de 10 regiones de genes y 235 caracteres morfológicos, que proporcionan representación taxonómica tation de todas las
subfamilias, tribus y subtribus de Nymphalidae, así como el 75 por ciento de todos los actualmente aceptados géneros De los
géneros faltantes, casi todos se consideran estrechamente relacionado con los géneros muestreados, y por lo tanto su exclusión es
no se espera que afecte sustancialmente las relaciones inferidas. Todos los taxones (400 géneros más 29 grupos externos) fueron
secuenciados para 3127 pares de bases de las regiones de genes COI, EF-1a y wing-menos, las regiones genéticas estándar
empleadas para molecular sistemática de los lepidópteros ( Sperling 2003 ). Adicionalmente, siete nuevas regiones genéticas
(Wahlberg y Wheat 2008 ) fueron secuenciado para múltiples ejemplos que representan el filoge-diversidad netica de la familia:
86 taxa fueron secuenciados para 596 pb de ArgKin, 131 para 850 pb de CAD, 174 para 691 pb de GAPDH, 104 para 710 pb de
IDH, 168 para 733 pb de MDH, 107 para 411 pb de RpS2 y 199 para 615 pb de RpS5.  Además, 238 taxones (incluidos los
grupos externos) fueron codificado para hasta 235 caracteres morfológicos (Freitas y Marrón 2004) Se tomaron datos
moleculares para grupos externos. de Wahlberg et al. (2005a), con el gen de las siete novelas regiones secuenciadas para al
menos un representante de cada familia del grupo externo.

Los datos morfológicos y moleculares combinados fueron analizado utilizando la máxima parsimonia en el programa TNT
( Goloboff et al. 2008 ). Los datos fueron tratados con igual los pesos y los caracteres morfológicos se codificaron según lo
ordenado o sin ordenar de acuerdo con Freitas y Brown (2004). Molécula Todos los datos fueron tratados como
desordenados. Utilizamos la nueva búsqueda Algoritmos tecnológicos en TNT, utilizando el nivel 10 de búsqueda intensidad,
sosteniendo hasta 10000 árboles en cada ciclo, usando valores predeterminados para fusiones de árboles, deriva y búsquedas
sectoriales, y 50 ciclos de trinquete. Los árboles obtenidos se sometieron a rama- intercambiando para obtener árboles adicionales
igualmente parsimoniosos.

La estabilidad de los nodos de los árboles más parsimoniosos fue evaluado utilizando 1000 pseudoreplicates de arranque.
Además, los datos moleculares fueron sometidos a maxi- análisis de probabilidad de mamá usando la versión en línea de
RA X ML ( Stamatakis et al. 2008 ). Los datos fueron modelados con el modelo predeterminado GTR + G, y analizado de forma
parcial fraccionado, dividido en gen mitocondrial y nuclear regiones, y particionadas por regiones genéticas individuales.  Para el
datos no particionados, se realizaron 10 análisis separados, cada uno incluida una búsqueda de la topología de máxima
verosimilitud, como así como 100 pseudoreplicates de arranque. El bootstrapped los árboles se combinaron en un solo archivo
para calcular bootstrap valores para todos los nodos.

Los tiempos de divergencias y topología se estimaron simultáneamente usando el programa BEAST v. 1.4.8 (Drummond y
Rambaut 2007) Se realizaron dos tipos de análisis: uno que incluía secuencias de grupos externos y una que incluía solo
secuencias de ninfálidos. Ambos análisis fueron repetidos dos veces (cada ejecución tomó dos o tres meses de tiempo de CPU en
una computadora de escritorio de doble núcleo de 64 bits). Ambos análisis tuvieron los mismos puntos de calibración Los datos
se dividieron en el gen mitocondrial. región (COI) y los genes nucleares combinados (ArgKin, CAD, EF1a, GAPDH, IDH,
MDH, RpS2, RpS5 y wing- menos), debido a la alta proporción de nucleótidos AT en el gen mitocondrial en comparación con el
aproximadamente igual relaciones base de los genes nucleares. El árbol anterior se estableció en el proceso de Yule, los modelos
independientes para los dos pares ambas opciones se configuraron en el modelo GTR + G, mientras que todas las demás los prior
se dejaron a los valores predeterminados. Se permitieron las longitudes de las ramas. variar bajo un modelo de reloj relajado con
un registro no correlacionado distribución normal. Los análisis se realizaron por 40 millones generaciones con cada 4.000
generación de muestra. Utilizando el programa T RACER (parte del paquete BEAST) que consultamos afirmó que las dos carreras
habían convergido a una estacionaria distribución después de 5000 muestras (quemado), que dejaron 5000 muestras en cada
ejecución que describen la distribución posterior.

Los tiempos máximos de divergencia fueron restringidos por edades de familias de plantas para seis clados de mariposas cuya
las larvas son oligotróficas en esas familias. El maximo la edad del clado Danainae estaba limitada a ser 83Ma basado en la edad
estimada de Gentianales ( Bremer et al. 2004) Este clado vegetal no es utilizado por ningún otro ninfálido. mariposas, pero es
comúnmente utilizado por las danaines y se infiere que es la familia de plantas anfitrionas ancestrales del grupo (  Janz et al.
2006 ). La edad máxima de la heliconiina + el clado de nymphaline se limitó a ser 110 Ma basado en la edad estimada de Rosales
( Anderson et al. 2005 ), que es un clado vegetal muy comúnmente usado en estos dos clados y se infiere que es la familia de
plantas anfitrionas ancestrales ( Janz et al. 2006 ; Nylin y Wahlberg 2008 ). La edad máxima de Biblidinae se limitó a ser 65 Ma
según la estimación edad de apareamiento de la división entre Ricinus y Dalechampia ( Davis y col. 2005), que representa el
clado de Euphorbia- ceae en que especies de Biblidinae son altamente especializadas (DeVries 1987) La edad máxima de la
ninfalina clado incluyendo Kallimini, Junoniini, Victorinini y Melitaeini se vio limitado a ser 74Ma según la edad estimación
para la familia Acanthaceae (Bremer y col. 2004 ) que es una familia de plantas que no se usa fuera de este clado ( Nylin y
Wahlberg 2008 ). La edad máxima de Melitaeini, excluye ing Euphydryas, se limitó a ser 40Ma basado en la edad estimada de
Asteraceae (Kim y col. 2005), cual es una familia de plantas muy raramente utilizada fuera de este clado (Nylin y Wahlberg
2008 ). Finalmente, la edad máxima de Satyrinae se limitó a ser 65 Ma según la estimación edad de apareamiento de Poaceae
(Prasad y col. 2005 ), que es un familia de plantas muy raramente utilizada fuera de este clado ( Pen˜a & Wahlberg 2008)

Las restricciones de edad mínima se basaron en siete fósiles, cuatro de los cuales son de la formación Florissant del Eoceno /
Límite del oligoceno ( Emmel et al. 1992 ), dos son de Ámbar dominicano del Mioceno ( Pen˜alver y Grimaldi 2006) y uno es de
depósitos de oligoceno en el sureste Francia ( Nel et al. 1993 ). La edad mínima de la división. entre Libythea y Libytheana se vio
obligado a ser 34Ma basado en dos fósiles, Libytheana vagabunda y L. florissanti, ambos de la formación Florissant en Colorado
y recientemente se descubrió que era hermana de Libytheana existente en un cladis- análisis de tic Kawahara 2009) La edad
mínima de la división entre Vanessa y su grupo hermano se vio obligado a ser 34 Ma basado en el fósil Vanessa amerindica
( Emmel et al.
1992), que se ha colocado en el género existente ( Miller &Brown 1989 ). Este fósil también se utilizó como punto de
calibración.
por Wahlberg (2006). La edad mínima de la división entre Hipanartia y su grupo hermano se vieron obligados a ser 34 Ma asado
en el fósil Prodryas persephone ( Emmel et al. 1992), que está claramente relacionado con la hipanartia basada en la morfología
características de las alas (K. Willmott 2006, personal personal catión). Este fósil también fue utilizado como punto de
calibración por Wahlberg (2006) . La edad mínima de la división entre Dynamine y su grupo hermano se vieron obligados a tener
20 Ma basado en el fósil de ámbar dominicano de Dynamine alexae, que claramente pertenece a este género existente ( Pen˜alver
& Grimaldi 2006) La edad mínima de la división entre Smyrna y su grupo hermano se vieron obligados a ser 20Ma basado en la
larva fósil de ámbar dominicano de Smyrna (Hammond y Poinar 1998 ). La edad mínima de la división entre Lethe y su grupo
hermano se vio obligado a ser 25 Ma basada en el fósil Lethe corbieri encontrado en el Oligoceno depósitos del sureste de
FranciaNel y col. 1993) Este fósil tiene sido utilizado como punto de calibración en el estudio de Pen˜a & Wahlberg (2008).

El análisis BEAST resultó en un árbol ultramétrico con 400 taxones terminales para el grupo interno y 399 nodos internos.
Analizar el ritmo de la especiación durante la evolución.historia de Nymphalidae, la edad más probable y 95 por los intervalos de
credibilidad de ciento para cada nodo se transfirieron a Un programa de hoja de cálculo. El número acumulado de linajes a través
del tiempo se trazó utilizando una escala logarítmica: un con tasa de especiación constante en el linaje junto con un menor la tasa
constante de extinción debería producir aproximadamente número exponencialmente creciente de linajes hasta el final etapas de
diversificación ( Harvey et al. 1994 ), que no son de preocupación aquí debido al muestreo de linaje incompleto dentro de los
géneros. De acuerdo con Harvey et al. (1994) , una misa la extinción conduce a una severa caída en los linajes a través de gráfico
de tiempo (LTT), y esto se observaría como una desaceleración en la tasa de especiación de linajes existentes anteriormente en el
LTT trama.

Optimización de dispersión-vicariancia de áreas ancestrales implementado en DIVA v. 1.2 (Ronquist 1997) estaba acostumbrado
a inferir la historia biogeográfica del grupo. El distrilas nociones de géneros se dividieron en seis áreas correspondientes a los
reinos zoogeográficos: neotropicales, neárticos, Paleártico, oriental, australasiano y afrotropical. Nodos los géneros subtending
con las mismas distribuciones se colapsaron y tratado como un solo terminal.  Dondequiera que se publique la hipótesis los
estudios estaban disponibles sobre el origen de un clado, por ejemplo Junonia (Kodandaramaiah y Wahlberg 2007 ),
Coenonympha (Kodandaramaiah y Wahlberg 2009) y Phyciodina (Wahlberg y Freitas 2007): El área de origen inferida de se
utilizó el clado en lugar de la distribución actual de su especies existentes DIVA asigna un costo de uno para dispersiones y
extinciones, mientras que la vicariancia y la especiación dentro del área Los eventos no reciben ningún costo.  La optimización
ancestral con el Se elige el costo más pequeño como el escenario preferido. Los la optimización se ejecutó en la topología
BEAST sin restricciones en el número máximo de ancestros inferidos zonas

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Todos los métodos de análisis recuperaron topol generalmente similar ogies (figura 1 ; los nodos con asteriscos fueron
muy estables en todos análisis). Los árboles estaban enraizados con Hesperiidae, el Supuesto taxón hermano de las cinco
familias de Papilionoidea (Wahlberg y col. 2005a) Encontramos la monofilia y relaciones entre 12 subfamilias ninfálidas
para ser
fuertemente apoyado en todos los análisis (figura 1 ; electrónico material suplementario, higos S1 – S3). Contrariamente a
lo anterior estudios basados en datos moleculares (Brower 2000 ; Wahlberg et al. 2005a; Wahlberg y trigo 2008), la
posición de Danainae ahora es estable y está bien apoyada como hermana a todos los Nymphalidae excepto Libytheinae,
un resultado congruente con un estudio morfológico previo (Freitas y Brown 2004 ). La subfamilia Libytheinae parece ser
la taxón hermano del resto de Nymphalidae, una hipótesis sugerido hace 50 añosEhrlich 1958 ; Kristensen 1976 ), pero
nunca corroborado por el trabajo molecular por lo tanto lejos (Brower 2000 ; Wahlberg y col. 2005a ; Wahlberg y Trigo
2008) La subfamilia Pseudergolinae es muy claramente una hermana de linaje independiente de la otra ninfa subfamilias
de línea ( figura 1) y no el grupo hermano de Cyrestinae, como se encontró en un estudio anterior (Wahlberg y col. 2003 ).

El análisis de los tiempos de divergencia sugiere que Nymphalidae comenzó a diversificarse a finales del Cretácico 90
Ma, con el linaje libiteína que se ramifica desde ancestro común del resto de Nymphalidae (  figura 2). No mucho después
de eso, los linajes danaine y satyrine divergieron en aproximadamente 89 y 85 Ma, respectivamente, y finalmente los
linajes de heliconiina y ninfalina divergieron de entre sí a unos 78 Ma. Dada la credibilidad inferida intervalos de los
tiempos de divergencia, parece que todos los cladogénesis que conduce a los linajes actualmente reconocidos como las
subfamilias ocurrieron a finales del Cretácico o temprano Terciario ( figura 2 ), lo que sugiere que Nymphalidae era ya
morfológica y ecológicamente diversificada antes del final del período cretáceo. El estimado origen de la familia coincide
con el auge global de las angiospermas a aproximadamente 100Ma, que es probable que han sido particularmente
favorables para una radiación de un grupo de alimentación de angiospermas como Nymphalidae. Se cree que el evento KT
que condujo a la extinción La acción de los dinosaurios no aviarios también tuvo un gran impacto en insectos fitófagos
(como mariposas; Labandeira et al. 2002 ). Nuestra inferida desaceleración de la diversificaciónla tasa anterior al límite de
KT ( figura 2 ) puede explicarse por un mayor número de extinciones de linaje ( Harvey et al. 1994) ocurriendo a 65
Ma. En el linaje acumulado curva de la figura 2 , la región roja corresponde a el período en que se originaron todas las
subfamilias existentes (94-64 Ma). La región amarilla corresponde al tiempo intervalo cuando los linajes de la subfamilia
se diversificaron, dando levantarse a las tribus; observe que ninguno de los eventos de divergencia conducir a las tribus es
más antiguo que un evento de divergencia

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Todos los métodos de análisis recuperaron topol generalmente similar ogies (figura 1 ; los nodos con asteriscos fueron
muy estables en todos análisis). Los árboles estaban enraizados con Hesperiidae, el Supuesto taxón hermano de las cinco
familias de Papilionoidea (Wahlberg y col. 2005a) Encontramos la monofilia y relaciones entre 12 subfamilias ninfálidas
para ser fuertemente apoyado en todos los análisis (figura 1 ; electrónico material suplementario, higos S1 –
3). Contrariamente a lo anterior estudios basados en datos moleculares (Brower 2000 ; Wahlberg et al. 2005a; Wahlberg y
trigo 2008), la posición de Danainae ahora es estable y está bien apoyada como hermana a todos los Nymphalidae excepto
Libytheinae, un resultado congruente con un estudio morfológico previo (Freitas y Brown 2004 ). La subfamilia
Libytheinae parece ser la taxón hermano del resto de Nymphalidae, una hipótesis sugerido hace 50 añosEhrlich
1958 ; Kristensen 1976 ), pero nunca corroborado por el trabajo molecular por lo tanto lejos (Brower 2000 ; Wahlberg y
col. 2005a ; Wahlberg y Trigo 2008) La subfamilia Pseudergolinae es muy claramente una hermana de linaje
independiente de la otra ninfa subfamilias de línea ( figura 1) y no el grupo hermano de Cyrestinae, como se encontró en
un estudio anterior (Wahlberg y col. 2003 ).

El análisis de los tiempos de divergencia sugiere que Nymphalidae comenzó a diversificarse a finales del Cretácico
90 Ma, con el linaje libiteína que se ramifica desde ancestro común del resto de Nymphalidae ( figura 2) No mucho
después de eso, los linajes danaine y satyrine divergieron en aproximadamente 89 y 85 Ma, respectivamente, y finalmente
los linajes de heliconiina y ninfalina divergieron de entre sí a unos 78 Ma. Dada la credibilidad inferida intervalos de los
tiempos de divergencia, parece que todos los cladogénesis que conduce a los linajes actualmente reconocidos como las
subfamilias ocurrieron a finales del Cretácico o temprano Terciario ( figura 2 ), lo que sugiere que Nymphalidae era ya
morfológica y ecológicamente diversificada antes del final del período cretáceo. El estimado origen de la familia coincide
con el auge global de las angiospermas a aproximadamente 100Ma, que es probable que han sido particularmente
favorables para una radiación de un grupo de alimentación de angiospermas como Nymphalidae.

Se cree que el evento KT que condujo a la extinción La acción de los dinosaurios no aviarios también tuvo un gran
impacto en insectos fitófagos (como mariposas; Labandeira et al. 2002 ). Nuestra inferida desaceleración de la
diversificación la tasa anterior al límite de KT ( figura 2 ) puede explicarse por un mayor número de extinciones de linaje
( Harvey et al. 1994) ocurriendo a 65 Ma. En el linaje acumulado curva de la figura 2 , la región roja corresponde a el
período en que se originaron todas las subfamilias existentes (94-64 Ma). La región amarilla corresponde al tiempo
intervalo cuando los linajes de la subfamilia se diversificaron, dando levantarse a las tribus; observe que ninguno de los
eventos de divergencia conducir a las tribus es más antiguo que un evento de divergencia conduciendo a una
subfamilia. La zona negra de la curva comprende
considera el período posterior al comienzo de la diversificación en géneros modernos Como el muestreo no es exhaustivo
en este período de tiempo (una especie muestreada por género), la curva subestima el número acumulado de linajes.

La forma de la curva encontrada en el gráfico LTT para Nymphalidae ( figura 2 ) es muy similar al encontrado en Las
simulaciones de un evento de extinción masiva en Harvey et al. (1994) . El rápido aumento en la tasa de diversificación en
se espera el comienzo en este tipo de análisis; la los linajes que sobrevivieron hasta nuestros días son los en promedio, eso
tuvo un comienzo rápido (Nee y col. 1994 ). Este 'empuje del pasado' es seguido por un período de estabilidad (90–64 Ma)
con una baja tasa neta de diversificación.

Esta tasa cambia dramáticamente a 64 Ma y el tiempo de mitades de duplicación de linaje (10 en lugar de 20 millones)
derecha después del límite de KT. Este cambio dramático en la red La tasa de diversificación puede reflejar un cambio en
la tasa de especiación o extinción. Como se argumentó anteriormente, un importante evento de extinción en Nympha-
Lidae que tuvo lugar a unos 64 Ma, como el KT evento, explicaría la forma de la curva. Extrapolando la tasa promedio de
diversificación neta después de la crisis (gris línea sobre la parte amarilla de la curva en la figura 2 ) a la aparición origen
del período que precede al límite KT (azul línea punteada en la figura 2), encontramos que el 60 por ciento de todos los
los linajes se han extinguido bajo esta hipótesis, sugiriendo que el evento KT pudo haber tenido un gran impacto en las
mariposas ninfálidas. Harvey y col. (1994) sugirió que solo un gran evento de extinción masiva deje tal señal en el
diagrama LTT. Es posible que los linajes ancestrales de las subfamilias existentes de Nymphlos alidos sobrevivieron en
pequeñas poblaciones geográficamente áreas restringidas y se convirtieron en promedio más genéticamente diversificado
el uno del otro que antes del evento Apoyo adicional para la extinción de las mariposas ninfálidas alrededor del momento
del evento KT proviene de la historia biogeografía cal de la familia. Una dispersión-vicariancia

Figura 2. Árbol ultramétrico bayesiano que muestra las relaciones filogenéticas de subfamilias (colores clade como en la figura
1 ) y tribus
de Nymphalidae, con edades dadas en millones de años atrás (Ma). Las estrellas rojas y amarillas muestran los nodos de los
eventos de divergencia.
que han llevado a las subfamilias y las tribus, respectivamente. Las elipses grises indican la hora del primer evento de divergencia
dentro de
subfamilias / tribus (basado en material electrónico complementario, fig. S4). La curva debajo del árbol muestra el número
acumulado.
de linajes a través del tiempo (el análisis incluye el conjunto de datos completo, hasta el nivel de género). Las partes coloreadas
de las curvas se refieren a
Las divergencias inferidas conducen a las principales subdivisiones taxonómicas existentes. Las subfamilias (en rojo) todas se
originaron antes o
inmediatamente después del evento Cretáceo-Terciario (KT), mientras que todos los linajes que conducen a las tribus (en
amarillo) diversificaron varios
millones de años después del límite de KT. La tasa promedio de diversificación neta desde el Paleoceno hasta el Eoceno medio
(línea gris) tiene
trazado en la parte superior del linaje a través del diagrama de tiempo (en amarillo). La tasa promedio fue extrapolada como la
tasa potencial de
diversificación en el Cretácico tardío (línea azul) donde se observa que la tasa de diversificación observada es el doble de lenta
(probablemente
debido a extinciones), lo que lleva a una estimación de hasta el 60 por ciento de pérdida de diversidad a 65 Ma. La última parte
de la curva (en negro)
representa el período de tiempo en el que los géneros se han diversificado para producir especies existentes (47 Ma hasta el
presente). Debido a no exhaustivo
muestreo a nivel de especie, esta parte de la curva subestima la tasa neta de diversificación.

La hipótesis biogeográfica óptima en DIVA indica un ancestro tropical extendido en la base de Nymphalidae.  La hermana
clade de Libytheinae puede tener surgido en la región oriental o neotropical o ambos. Como se mencionó anteriormente,
estas dos regiones fueron inferido para ser las áreas ancestrales de la base de la árbol hasta los nodos que definen
subfamilias, así como muchas de las tribus (material complementario electrónico, higo.  S5). Durante el lapso de tiempo
57–34 Ma (el Eoceno / Límite del oligoceno), la región Afrotropical era colo-Nized independientemente al menos tres
veces desde el Región oriental: una vez por el ancestro común de Limenitidinae alrededor de 57 Ma, una o dos veces por
el común antepasado de las tribus Vagrantini + Argynnini en Heliconiinae (entre 40 y 50 Ma) y una vez por lo común
ancestro de Charaxini + Pallini en Charaxinae (también entre 40 y 50 Ma). Además, parece que el La región afrotropical
fue colonizada del Neotropical región entre 40 y 30 Ma por los ancestros comunes de Biblidini y Catonephelini (ambas
Biblidinae). Los La región paleártica parece haber sido colonizada antes el límite Eoceno / Oligoceno por el antepasado de
NymPhalini alrededor de 48 Ma y por el antepasado de Apaturinae alrededor de 40 Ma, ambos de la región
oriental. También el La región neártica parece haber sido colonizada por el Región oriental por el antepasado de
Melitaeini alrededor 40Ma. Las distribuciones existentes de géneros tienen en gran medida formado después del límite
Eoceno / Oligoceno (alrededor
34Ma), que se conoce como un período de enfriamiento y secado en la Tierra, cuando grandes extensiones de bosques
húmedos fueron reemplazados por pastizales secos (Willis y McElwain 2002), principalmente debido a la separación del
remanente Gondwana en Sudamérica, Australia y Antártida, permitiendo que las corrientes oceánicas frías enfríen el sur
región polar. Grupos de especies asociadas con tierra abierta Paisajes y pastizales parecen haberse diversificado en este
período, como Satyrini ( Pen˜a y Wahlberg 2008) y Melitaeini ( Leneveu et al. 2009)

Examinando la escala temporal y espacial de macroevolos procesos lucrativos en insectos fitófagos solo tienen
recientemente se hizo posible con una muestra completa hipótesis filogenéticas y estimaciones robustas de patrones y
tiempos de divergencia (McKenna y col. 2009) Tenemos sido capaz de inferir aspectos novedosos de la profunda
evolución historia de un grupo rico en especies de insectos fitófagos, sugiriendo que los eventos que causan la extinción
masiva de tebratos y otros organismos con un fósil bien conservado el registro alrededor del límite de KT también afectó a
los taxones con un escaso registro fósil. Estas extinciones fueron supuestamente causado por un impacto masivo de
bólidos, que podría tener enfriado la Tierra sustancialmente durante un largo período de hora.  Esto claramente habría
afectado efímero, ecto-insectos térmicos que dependen del calor del sol para actividades diarias como alimentación y
reproducción, y aquí mostramos por primera vez que la evidencia filogenética apoya esta hipótesis.  Las extinciones
podrían haber sido agravado aún más como resultado de extinciones generalizadas de plantas hospedadoras de
angiospermas en el mismo período, interrumpiendo obligar interacciones mariposa-planta (Wilf y col. 2006)

La hipótesis filogenética robusta e integral, y estimaciones históricas, biogeográficas y de tiempo de divergencia para este
grupo de modelos, proporcionará un marco muy esperado trabajar para estudios comparativos y abrir nuevas vías de
investigación que puede capitalizar el amplio conocimiento sobre la ecología y la historia natural de Nymphalidae