DEMTERMINACIÓN DE ACETAMINOFÉN EN UN FÁRMACO POR

ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ULTRAVIOLETA

Jhoan Alejandro Rivera - 1760263

jhoan.rivera@correounivalle.edu.co
Wendy Rojas Arce - 1667929
wendy.rojas@correounivalle.edu.co
Camila Santibañez Soto - 1760351
santibanez.maria@correounivalle.edu.co

Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento de Química, Universidad del

Valle, Sede Yumbo, Colombia.

Fecha de entrega: 26/febrero/2020

Entregado a: Harold Díaz Segura

Resumen
Se determinó el contenido de acetaminofén en una muestra pulverizada partiendo
de dos tabletas utilizando la técnica de espectrofotometría de absorción
molecular en el rango ultravioleta a una longitud de onda de 243 ± 0,3 nm con un
espectrofotómetro marca SHIMADZU, modelo UV-1700 de doble haz; mediante
los métodos de patrón externo y adicción de estándar, se midieron las
absorbancias respectivamente con las cuales se construyeron las curvas de
calibración correspondientes y se obtuvo finalmente una concentración de
496,623 ± 0,0477 mg acetaminofén/tableta con un error de 0,6754% por patrón
externo y una concentración de 468,162 ± 1,22 mg acetaminofén/tableta con un
error de 6,3676 % para la adicción de estándar.

Palabras clave: Patrón externo, adición de estándar, acetaminofén, doble haz,

ultravioleta.

Datos, cálculos y resultados sX σ a 2 σ b 2 σc 2

Patrón externo
Solución patrón (madre)
X
=
√( a )( )( )
+
b
+
c
[Ec. 1]
Concentración de la solución madre
Se pesaron 0,0203 g de patrón,
20,3 mgacetam
seguido se disolvieron en 5,0 mL ± =203± 0,0063 ppm
0,015 mL de metanol y se llevaron a 0,1 L
un balón de 100,0 ± 0,25 mL
completando hasta el aforo con agua Preparación de los estándares a
desionizada. partir de la solución madre.

Se utilizó la ecuación siguiente para Se prepararon soluciones de

determinar s[acetaminofén]. concentraciones de 4,00, 8,00, 12,00
y 24,00 ppm.

1
Para conocer los volúmenes de Peso registrado en teoría por tableta
solución madre que se deben tomar = 500 mg.
en cada matraz se realizó el
respectivo despeje a la siguiente Se pulverizaron dos tabletas de
ecuación. acetaminofén a las cuales se les
tomo el peso para poder medir el
V 1 C 1=V 2 C2 [Ec. 2] equivalente a 20 mg.

Tabla 3. Peso de las tabletas.

50,0 mL ±0,06 sln x 4 ppmC 8 H 9 NO~
2 Tableta Peso (mg)
−¿ 1mL ¿ ± 0,1
203 ±0,006 ppmC 8 H 9 NO2
1 556,1
El error aleatorio se determinó con la 2 557,1
siguiente ecuación: Promedio 556,6

sc sX 2 σa 2 σ b 2 σ∞ 2
C
=
√( X )( )( ) ( )
+
a
+
b
…+
∞
∗[ ppm]
[Ec. 3]
0,02 g x
0,5566C 8 H 9 NO 2 g
0,500C 8 H 9 NO 2 g
=0,0223 g

Tabla 4. Pesos tomados para la

Tabla 1. Volúmenes de las
preparación de las muestras y su
alícuotas tomadas para la
respectiva absorbancia
preparación de las 5 soluciones a
Muestra Peso (g) Abs
diferentes concentraciones y sus
± 0,0001 ± 0,002
respectivas desviaciones.
1 0,0228 0,780
Volumen (mL) Concentración
(ppm) 2 0,0225 0,785
1,00 ± 0,007 4,00 ± 0,025
Tomando los datos de la curva de
2,00 ± 0,01 8,00 ± 0,041
calibración se procede a construir la
3,00 ± 0,01 12,00 ± 0,043
gráfica respectiva.
4,00 ± 0,015 16,00 ± 0,063
6,00 ± 0,01x2 24,00 ± 0,117

Tabla 2. Curva de calibración.

Concentración Absorbancia
ppm ± 0,002
4,00 ± 0,025 0,258
8,00 ± 0,041 0,520
12,00 ± 0,043 0,768
16,00 ± 0,063 1,043
24,00 ± 0,117 1,540

Gráfica 1. Curva de calibración,

Preparación de las muestras patrón externo.

2
Al observar la gráfica y con sus Ha=Existe
respectivas correlaciones se correlación
determina que todos los puntos están Criterio Tcrit < Tcalc
ajustados a la linealización de la Se rechaza H0,
curva de calibración, por ende, no se Conclusión si hay
realiza la prueba Q. correlación
Ecuaciones para la elaboración de las También se realizan estos
tablas de datos estadísticos. parámetros para la pendiente(b) y a
la ordenada en el origen (intercepto
S xx =∑ (xi − x́)2 a). Aplicando:
i=1
[Ec. 4] S xy
b=
S xx
S yy =∑ ( yi − ý)2
i=1 [Ec. 10]
ree [Ec.
5]
S xy =∑ ( x i−x́)( y i− ý) Intervalo de confianza (IC) para b
i=1
[Ec. 6] ICb  b  tsb [Ec. 11]
S xy
r=
√ S xx∗S yy
[Ec. 7]
SR
S yy −b2 S xx sb 

[Ec.8]
S R=
√ n−2
12]
S xx
[Ec.

r n2 |b|
t t cal=
1 r 2 Sb
[Ec.9]
[Ec. 13]
Tabla 5. Coeficiente de correlación
Sxx 236,80 Tabla 6. Datos de la pendiente
Syy 0,9765
b 0,0642
Sxy 15,2048
Sb 0,0006
r 0,9999
tcal 107
r2 0,9998
tcrit (n-2) 3,1800
Sr 0,0085
ICb 0,0008
ICr 0,0121
Límite superior 0,0650
Límite superior 1,0120
Límite inferior 0,0634
Límite inferior 0,9878
H0=No existe
tcal 116,2278
correlación
tcrit (n-2) 3,1800 Supuesto
Ha=Existe
Supuesto H0=No existe
correlación
correlación

3
 Criterio Tcrit < Tcalc significativamente
Se rechaza H0, diferente de cero
Conclusión si hay Tcri>Tcal se acepta
correlación Conclusión Ha

Tabla 8. Residuos para la

Para el intercepto: determinación del rango lineal.

a  y  bx [Ec. 14] ^y (corregida) Residuos

0,2680 0,0028
0,5176 -0,0024
0,7744 0,0064
1,0313 -0,0117
1,5449 0,0049
Intervalo de confianza (IC) para a Sumatoria 0,000

IC=a ± t cri Sa
[Ec. 15]

1 x2
sa  S R 
n S xx
[Ec.
16]

Gráfica 2. Curva del rango lineal de

Evaluación del parámetro con la t los residuos, patrón externo.
calculada

|a| Con los resultados de los datos

tcalc = [Ec. 17] estadísticos se halla la concentración,
Sa
su respectiva desviación e intervalo
de confianza, teniendo en cuenta la
Tabla 7. Datos del intercepto señal de cada muestra.

a 0,0039 y ± S R= ( b ± S b )∗x o +(a ± S a)

Sa 0,0080
IC 0,0114 [Ec. 18]
Límite superior 0,0153 y−a
x o=
Límite inferior -0,0075 b
Tcal 0,4875
S R 1 1 y o −ý 2 1
tcrit (n-2) 3,1800
H0=El intercepto no
es significativamente
Sx =
g
o
√
b m n
+ +
b ( S xx )
[Ec.
diferente de cero 19]
Supuesto Ha= El intercepto es

4
 IC=x o ±t cri S x [Ec. 20] 22,8 mg+ 22,5 mg
o
x́= =22,65 mg
2

Promedio de las concentraciones:

Tabla 9. Datos de la muestra,
patrón externo. mg mg
12,0867 +12,1646
Muestra 1 L L
x́=
Señal 0,780 2
Xo 12,0867
Sxo 0,0007 ¿ 12,1256 ± 0,0007 mg/L
IC ±0,00223
La concentración de acetaminofén
Muestra 2
por pasta en las muestras
Señal 0,785
promediadas se presenta mediante la
Xo 12,1646
siguiente conversión.
Sxo 0,0007
IC ± 0,0023
12,1256 m g 100,0 mLsln
x x
1000 mL sln 22,65 mg

Límite de detección (LD)

50,0 mL 556,6 mg acetaminofén
x
( a+ 3 x S a ) −a 3,0 mL 1 pasta
LD= [Ec. 21]
b
mg acetaminofén
¿ 496,623 ± 0,0477
( 0,0039+3 x 0,0080 )−0,0039 pasta
LD=
0,0642
Se utilizó la [Ec. 3] para determinar la
LD=0,3972 propagación del error del resultado de
[ ] en mg acetaminofén/pasta.
Límite de cuantificación (LC)
Cálculo de porcentaje de error.
( a+10 x Sa ) −a |496,623−500|
LC=
b %Error= ∗100
|500|
[Ec. 22]
¿ 0,6754 % error

( 0,0039+ 10 x 0,0080 )−0,0039 Adición estándar

LC=
0,0642
Se tomaron 0,5 mL ± 0,004 de la
muestra 2 y se llevaron a 5 balones
LC=1,2504 de 25 mL ± 0,04, seguido, partiendo
de la solución madre se adicionaron
Promedio muestras: alícuotas a diferentes volúmenes con

5
excepción de uno, finalmente se
enrasaron todos los matraces con Tabla 11. Determinación del rango
agua desionizada. lineal, adicción estándar.

Para determinar la concentración final ^y (corregida) Residuos

de cada solución preparada se 0,0142 0,0052
procede a hacer el respectivo despeje 0,2690 0,0030
de la [Ec. 2]. 0,5238 -0,0033
1,0333 -0,0168
203 ±0,0063 ppm x 0,5 ± 0,004 1,5428 0,0118
[ ]=
25,0 mL 0,04 Sumatoria 0,000

¿ 4,06 ± 0,033 ppm acetaminofén

El mismo tratamiento que se le aplicó

al método de patrón externo para los
errores aleatorios de las
concentraciones preparadas a partir
de la muestra se utilizó en adición de
estándar empleando la [Ec. 3]. Gráfica 4. Curva del rango lineal de
los residuos, adición estándar.
Tabla 10. Alícuotas tomadas de Para el método de adición estándar
solución madre para la preparación se realizan los mismos parámetros
de las soluciones, concentraciones estadísticos, también a diferentes
y su respectiva absorbancia. concentraciones, pero teniendo en
S/n Patrón [ ] ppm Abs cuenta que en estas diluciones la
(mL) y su ± concentración del patrón va
desviación 0,002 aumentando, pero con la misma
0,0 0,0 0,009 cantidad de muestra (0,5 mL, muestra
0,5 ± 0,004 4,06 ± 0,033 0,266 2), excepto el primer dato, que tiene
1,0 ± 0,007 8,12 ± 0,058 0,527 solo muestra; en matraces de 25,0
2,0 ± 0,01 16,24 ± 0,085 1,050 mL.
3,0 ± 0,01 24,36 ± 0,090 1,531

Tabla 12. Parámetros estadísticos

para el coeficiente de correlación.
Adición estándar.

Gráfica 3. Curva de calibración,

adición estándar.

6
 Sxx 382,4195
Syy 1,5061
Sxy 23,9954
Tabla 13. Parámetros estadísticos r 0,9998
para la pendiente, método por r2 0,9997
adición estándar Sr 0,0125
ICr 0,0177
Límite superior 1,0176
Límite inferior 0,9821
tcal 98,4787
tcrit (n-2) 3,1800
H0=No existe
correlación
Supuesto
Ha=Existe
correlación
Criterio Tcrit < Tcalc
Se rechaza H0,
Conclusión si hay
correlación
Limite de
detencion
[LOD] 0,4176
Limite de
cuantificacion 1,3920
b 0,0627 Tabla 14. Datos del intercepto,
Sb 0,0006 método por adición estándar.
tcal 45,3600
tcrit (n-2) 3,1800
ICb 0,0009
Límite superior 0,0267 Para hallar la concentración de la
Límite inferior 0,0018 muestra por este método se debe
H0=No existe extrapolar, ya que la señal de esta
correlación será 0.
a
Supuesto 0,0142
Sa
ICa
Ha=Existe
0,0087
correlación
0,0124
xE=
−a
b| | [Ec. 23]
Criterio
Límite Tcrit < Tcalc
0,0267
superior Se rechaza H0, si
Conclusión S R 1 ý 2 1
hay0,0018
correlación
Límite inferior
tcal
tcrit (n-2)
1.33568
3,1800
Sx =
E
√ + .
b n b 2 S xx

H0=El intercepto [Ec. 24]

no es
significativamente IC=x E ± t cri S x E
[Ec. 25]
diferente de cero
Supuesto Ha= El intercepto
es
significativamente 7
diferente de cero
Conclusión Tcri>Tcal se
acepta Ha
Tabla 15. Datos de la muestra,
adición estándar |b1−b2|
Muestra 2 t calc=
1 1
Xo
Sxo
0,2271
0,1410
SR
√ +
S xx1 S xx 2

IC ±0,3919 [Ec. 26]

Concentración de acetaminofén por f 1 S 2R 1 + f 2 S 2R 2

pasta en la muestra 2. S R=
√ f 1+ f 2

0,2271 m g 100,0 mLsln [Ec. 27]

x
1000 mL sln 22,5 mg
F=¿ ¿
50,0 mL 25,0 mL [Ec. 28]
x x
3,0 mL 0,5 mL
Tabla 16. Prueba FXPrueba F
556,6 mg acetaminofén Fcal 1,6290
x Fcrit 9,605
1 pasta
Las desviaciones no
Ho difieren
mg acetaminofén Ha Las desviaciones difieren
¿ 468,162 ±1,22
pasta Decisión Fcrit >Fcal Se acepta Ho

Propagación del error calculada con

la [Ec. 1].
Cálculo de porcentaje de error.

|468,162−500| Tabla 17. Prueba tXPrueba t

%Error= ∗100
|500| Scombinada 0,1069
Tcal 0,1131
¿ 6,3676 % error Tcrit 2,3100
Los métodos no producen
Ho resultados diferentes
Se realiza una prueba de entre las Los métodos si producen
pendientes de ambos métodos con el Ha resultados diferentes
fin de establecer si existe o no Decisión Tcri>Tcal Se acepta Ho
efectos de matriz. Se calcula la
prueba F para validar que las
desviaciones son o no
significativamente diferentes.

8

Gráfica 5. Comparación de curva
de calibración de ambos métodos.
ANÁLISIS
El acetaminofén es un fármaco con
propiedades analgésicas
antipiréticas que se
principalmente para aliviar el dolor y
tratar la fiebre, se desconoce el
mecanismo exacto de acción del
acetaminofén, se cree que aumenta
el umbral del dolor, inhibiendo las
ciclooxigenasas en el sistema
nervioso central (SNC), enzimas que
participan en la síntesis
prostaglandinas aumentando el flujo
sanguíneo y la sudación
disminuyendo la temperatura
corporal.[1]
En el laboratorio se realizó la
determinación espectrofotométrica
por absorción molecular ultravioleta
del acetaminofén presente en un
fármaco por medio de dos curvas de
calibración, por patrón externo y
adición estándar, fue necesario
preparar 5 soluciones patrón a
distintas concentraciones tabla 1
para patrón externo, después se
preparó la muestra macerando dos
tabletas del fármaco (peso registrado
teórico por tableta 500 mg); así
mismo se tomaron cinco balones a
las cuales se agrega la misma
cantidad de muestra adicionando
cantidades de patrones distintas a
cada uno exceptuando el primero
tabla 9 y les midieron las
absorbancias tabla 2 y tabla 9. La
medición de las absorbancias fue
llevada a cabo mediante el uso de un
espectrofotómetro shimadzu modelo
Uv-1700, a una longitud de onda en
la región ultra violeta media
comprendida entre 200nm y 300nm
y
con una absorbancia máxima por
usa
parte del acetaminofén a 243nm.
La espectroscopia ultravioleta-visible 
(UV/VIS) se basa en utilización
de radiación electromagnética de las
regiones visibles, ultravioleta media
(UV) del espectro electromagnético,
es decir, una longitud de onda entre
de 10nm y 380nm para el rango del
ultravioleta y de 380 y 780nm para el
ultravioleta visible. La radiación
absorbida por las moléculas desde
esta región del espectro
provoca transiciones electrónicas que
pueden ser cuantificadas.
El principio físico de
la espectroscopia ultravioleta-
visible es la absorción de radiación
ultravioleta-visible por una molécula,
la radiación absorbida por los
electrones de valencia, estos son
promovidos desde un estado
electrónico basal a un estado
electrónico excitado de mayor
9
energía, estás transiciones pueden Figura 1. espectrofotómetro
ser del tipo (σ -> σ*; π -> σ*; n-> σ*; n- Shimadzu modelo UV-1700.
>π*). Al absorber radiación
electromagnética de una frecuencia El equipo posee una lampara de
especifica. Las diferencias entre deuterio (D2), su funcionamiento es
energías varían entre los diversos por incandescencia, la lámpara de
orbitales de las diferentes moléculas. deuterio emplea un filamento de
wolframio y un ánodo situados en los
Cuando un haz de radiación UV-Vis extremos opuestos de una estructura
atraviesa una disolución conteniendo de níquel diseñada para producir el
un analito absorbente, la intensidad mejor espectro de salida posible. El
incidente del haz (I0) es atenuada filamento de wolframio forma junto
hasta (I). La transmitancia es la con el ánodo el sistema de
fracción entre la intensidad incidente generación de arco eléctrico. El arco
del haz (no atenuado) y el atenuado voltaico generado excita las
moléculas de deuterio que conforman
I
T= el gas contenido en la cápsula de la
I0
lámpara a un nivel de energía
A=−log (T ) superior. Cuando retornan al estado
inicial, el deuterio emite luz
ultravioleta durante dicha transición.
Este proceso se repite continuamente
Este método se utiliza para identificar
mientras la lámpara esté en
algunos grupos funcionales de
funcionamiento, por lo que emite una
moléculas, y además, para
radiación ultravioleta continua.
determinar el contenido y fuerza de
una sustancia. Se utiliza de manera D2 + Ee D2* D´ + Dn + hv
general en la determinación
cuantitativa de los componentes de D2* hace referencia al deuterio en su
soluciones. forma molecular excitada y D´ y Dn
son las especies atómicas. [2] [3]

Figura 2. Lampara de deuterio.

10
El monocromador que usa este
instrumento es uno de haz simple del
tipo Czerney-Turner con una red de
reflexión, la luz emitida por la fuente
llega a la rendija de entrada del
monocromador llegando a un espejo
cóncavo colimado que redirige la luz
de forma paralela hacia la red de
reflexión encargándose así, de
difractar el haz de luz en las
longitudes de onda que la componen,
Por último, esta luz llega a un espejo
cóncavo enfocando las longitudes de
onda en la ranura de salida para que
así se obtenga un haz de luz
monocromática deseada. [3]
Figura 3. Monocromador del tipo
Czerney-Turner.
La característica de este equipo es
que funciona doble haz lo que
permite que, ante cualquier variación
en la intensidad de la fuente, la
eficiencia de
la red, la reflectividad de los espejos,
la fotosensibilidad del detector, afecta
simultáneamente a los dos haces. En
consecuencia, la relación de energía
de los dos haces permanece siempre
constante.
La luz monocromática proveniente del
monocromador redirecciona el haz de
luz dividiéndolo en dos con un
corrector del porcentaje de
transmitancia o chopper, el cual
posee unos sectores, uno oscuro que
bloquea el paso de la radiación, uno
incoloro que pasa hacia la celda de
referencia y por último un sector
plateado pasando a la celda de la
muestra, los haces vuelven y se
recombinan y son guiados por un
espejo al detector.
Figura 4. diagrama de cuadros de un
espectrofotómetro de doble haz.
El detector es un tubo
fotomultiplicador funcionando por
efecto fotoeléctrico. Cada fotón del
haz de luz que llega al fotocátodo
provoca la emisión de electrones que
se aceleran a una superficie foto
sensible o dinodo, que es 90V más
positivo que el fotocátodo provocando
la liberación de más electrones que
son acelerados al siguiente dinodo
que es -90V más positivo que el
dinodo anterior, el proceso se repite
sucesivamente liberando cada vez
más electrones para que al final la
cantidad de electrones liberados sea
de más de 106 electrones por cada
fotón que incidió reuniéndose en el
11
ánodo para que finalmente la señal
se transforme en un voltaje y se mida.
[4]
Figura 5. esquema de un tubo
fotomultiplicador
Partiendo de la concentración de la
solución madre que fue de 203 ppm ±
0,0063, se obtiene la concentración
de los patrones tabla 1. para realizar
la curva de calibración por patrón
externo gráfica 1. En la cual se
denotan todos los datos ajustados a
la linealización de la curva de
calibración, por ende, se procede a
realizar los datos estadísticos por
medio de mínimos cuadrados para
patrón externo, registrando un
coeficiente de correlación entre x y y
(r) de 0,9999 tabla 5, a la cual se le
aplica una prueba t, donde se obtiene
un valor de 116,2278 para la tcal y
3,18 para tcrit, rechazando así la H0,
es decir que si hay correlación,
definiendo que cuanto más próximo
este el coeficiente de correlación (r)
de 1, mayor serán los valores de tcal,
más acusada será la relación lineal,
esto también se confirma con la suma
de los residuos hallados tabla 8 ya
que la suma de estos da un valor de
0, confirmado el buen ajuste de los
datos en x y y. De esta curva de
calibración gráfica 1. Se obtiene una
pendiente de 0,0642 ± 0,0006 y un
orden de origen o intercepto de
0,0039 ±0,0080 Para hallar la
concentración por este método donde
se emplea la regresión no ponderada,
se interpola dando una concentración
de (Xo) 12,1256 ppm ± 0,0007. La
interpolación que está sujeta a menor
incertidumbre y a un menor riesgo de
producir resultados insignificantes
que la extrapolación la cual utilizamos
para el método de adición estándar,
donde tampoco se realiza prueba Q
ya que los datos se observan
ajustados a la linealidad gráfica 3,
esto se resalta en la tabla 12. Donde
se presenta un coeficiente de
correlación de 0,9998 a la cual se le
aplico prueba t, estimando que, si hay
una correlación y también los
residuos que registran una sumatoria
de 0 tabla 11 concluyendo el buen
ajuste de los datos en x y y. Para este
método se realiza la regresión no
ponderada, por medio de mínimos
cuadrados, esto nos arroja una
pendiente de 0,0627 ± 0,0006 y un
intercepto de 0,0142 ± 0,0087, como
se mencionó antes para hallar la
concentración por adición estándar se
debe extrapolar, ya que no se obtiene
señal de la muestra aparte, pues en
este método a todos los patrones se
les agrega una misma cantidad de
muestra (0,5 mL), pero la cantidad de
solución estándar varia de 0,0 – 3,0
mL tabla 10, por consiguiente la
concentración de la muestra solo se
efectúa con pendiente e intercepto
[Ec. 23] Dando una concentración de
0,2271 ppm ± 0,1410.
A las concentraciones halladas por
cada método se les aplico las
conversiones necesarias, que deja
expresado la concentración en ppm a
12
mg/ tableta resultando una
concentración de 496,623 ± 0,0477
mg/tableta para patrón externo y una
de para 468,162 ± 1,22 mg/ tableta
adición estándar para así poder
compararlo con la concentración
registrada en el fármaco (mg/tableta),
donde hay un error del 0,6754% y
6,368% respectivamente.
Se calculo el límite de detención
[Ec.21] que se define habitualmente
como la cantidad o concentración
mínima de sustancia que puede ser
detectada con fiabilidad por un
método analítico determinado.
Intuitivamente, el LDD sería la
concentración mínima obtenida a
partir de la medida de una muestra
(que contiene el analito) que
seríamos capaces de discriminar de
la concentración obtenida a partir de
la medida de un blanco, es decir, de
una muestra sin analito presente [1] el
límite de detención para patrón
externo fue de 0,3972, menor que el
de adición estándar 0,4176. El límite
de cuantificación [Ec.22] Es la menor
concentración de analito que puede
determinarse con cierta precisión y
exactitud, bajo condiciones
experimentales bien definidas [5],
este para los métodos de patrón
externo y adición estándar son de
1,2504 y 1,3920 respectivamente.
A pesar de que los métodos no varían
confirmado con la prueba f donde se
retiene la Ho es decir que las
desviaciones de los métodos no
difieren. Si no existe diferencia
estadísticamente significativa entre
las desviaciones, la presencia de
errores aleatorios será la causa
predominante de la discrepancia
entre los valores medio. También se
registró la prueba t student donde se
acepta la H0, es decir que los
métodos no producen resultados
diferentes tabla 16 y 17. Se debe
tener en cuenta que de acuerdo el
porcentaje de error, los límites de
detención y cuantificación de cada
método, que en comparación de
métodos son menores los de patrón
externo que los registrados en adición
estándar, se deduce que el método
más exacto y preciso es patrón
externo, además de que con este no
se necesita gran cantidad de muestra
y se obtienen mejores resultados.
Obteniendo la gráfica 5. donde se
detona la comparación de las dos
pendientes, no se registra efecto de
matriz, es decir, no hay aumento o
disminución de la señal debido a
presencia de otros componentes.
CONCLUSIONES
 Cuando no se registra efecto
de matriz entre el método de
adición estándar y patrón
externo, el método más
preciso y exacto es patrón
externo, puesto que, al
comprar entre los límites de
detención, límites de
cuantificación y el porcentaje
de error de cada uno, se
determina que los valores de
estos son más bajos para el
método de patrón externo,
dando como resultado una
mejor precisión y exactitud.
 El trabajo en el laboratorio
cuando se va a realizar una
curva de calibración, debe ser
pulcro y con seguridad, ya que
para realizar estas curvas las
concentraciones de los
patrones con los cuales se va
a graficar deben ser de
13
 concentraciones exactas, para
que así en el momento de
aplicar la regresión los
resultados sean más próximos
al valor teórico, como se
demostró en este caso,
observando las gráficas,
registrando el coeficiente de
relación con su respectiva
prueba t y la sumatoria de
residuos, demuestran una
buena linealidad de los datos,
siendo exactos y precisos.
 Los métodos ópticos de
absorción molecular son
buenos métodos para
cuantificar un analito presente
en una muestra, y aún más
cuando el equipo posee un
sistema de doble haz, Los
sistemas de doble haz tienen
la ventaja de que cualquier
variación en la intensidad de la
fuente, la reflectividad de los
espejos, la fotosensibilidad del
detector, afecta
simultáneamente a los dos
haces. En consecuencia, la
relación de la energía de los
dos haces permanece siempre
constante, además de que
permite medir
simultáneamente la
radicación absorbida por el
blanco y/o los patrones y
muestra agilizando la toma de
mediciones.
BIBLIOGRAFÍA
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medicamentos. Paracetamol
(Acetaminofén). [EN LINEA] Revisado
el 14 de febrero de 2020.
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[2]Fuente UV De deuterio. [En línea].
Revisado el 14 de febrero de 2020.
http://www.uhv.es/sites/marte/es/fuent
e_UV.html
[3] Skoog, D., Holler, F. and Crouch,
S. (2019). Principios de análisis
instrumental (6a. ed.). 6th ed. Ciudad
de Mexico: Cengage Learning,
pp.349. y 180-181
[4] Harris, D. Análisis químico
cuantitativo. 3rd ed. [Barcelona]:
Reverté, p.473.
[5] Oscar Delgado. (2017). Todo lo
que necesitas saber sobre el límite de
detección y el límite de cuantificación;
Especialistas técnicos. [En línea].
Revisado el 18 de febrero de 2020.
https://especialistastecnicos.com/limit
e-deteccion-y-cuantificacion/
PREGUNTAS
a) ¿Existen interferencias de
matriz en el método analítico
para cuantificar acetaminofén
en tabletas, usadas en esta
práctica? Justifique con
cálculos.
R/ Para evaluar estadísticamente
si existe un efecto matriz debemos
comparar la curva de calibración
de adicción de estándar con la
curva de calibración de patrón
externo. Si las pendientes de
14
ambas curvas son “iguales”
podemos afirmar que no hay
evidencia de efecto matriz tal
como se muestra en la figura 3.
De modo contrario, si las
pendientes de ambas curvas
difieren, entonces, existe un efecto
matriz significativo. La correlación
de las pendientes se realiza por
medio de una prueba denominada
“F” que se desarrolla a través de
los cálculos en las [Ec. 26], [Ec. 27]
y [Ec. 28].
b) Con base en sus conocimientos
de la estadística básica y
aplicada al análisis, ¿qué
recomienda para lograr mejores
límites de detección del
método? Explique e indique los
cuidados que debe tener para
no afectar la confiabilidad de
los resultados.
R/ Cuando las mediciones se realizan
a concentraciones bajas, es
importante conocer la concentración
más baja del analito que puede ser
detectada por el método a un nivel
de confianza especificado.
Los límites de detección del
instrumento van de la mano con la
sensibilidad y los componentes del
mismo, para los límites de detección
del método lo pertinente seria tener
precisión, exactitud y reproducibilidad
en las medidas de los patrones para
armar la curva de calibración ya que
la ecuación para determinar el límite
de detección va ligada a la pendiente
e intercepto que arroja la gráfica.
Los siguientes puntos deberían ser
considerados en el momento de
determinar LD en un experimento que
consiste en una replica:
 Contar con un detector en
óptimas condiciones.
 Escoger la longitud de onda
máxima de absorbancia
característica de la muestra en
específico.
 La lámpara debe emitir
radiación con la máxima
potencia.
 Escoger el solvente adecuado.
 Graficar la curva de calibración
adecuada.
c) En el artículo reportado en
bibliografía (Tarinc, D. y Golcu,
A.) se presenta un método
espectrofotométrico, simple y
directo para la determinación de
algunos antibióticos del grupo
de las cefalosporinas. ¿Qué
ventajas presenta este método
comparado con otras técnicas
como la cromatografía y la
electroquímica? ¿Cómo
determina la ausencia de
interferencia por parte de los
excipientes? ¿Qué es un
excipiente? ¿Qué información
relevante se obtiene de las
figuras 4A y AB? ¿Para qué
sirve este tipo de cura?
R/ Las ventajas que presenta este
método comparado con otras
técnicas es que es preciso, exacto,
simple y económico. Otra de sus
ventajas es que no requiere
extracción, evaporación, uso de
agente complejante, lo que genera
disminución de error en
cuantificación.
15
 organolépticas, la estabilidad y la
La ausencia de interferencias se biodisponibilidad de las medicinas
determinó por adición de estándar, en
donde se agregaron cantidades En la figura 4A se compara la longitud
conocidas de los medicamentos de onda vs el tiempo en horas, y en la
puros. Un excipiente es una sustancia figura 4B se compara absorbancia vs
inerte, es decir, aquella que no puede tiempo en horas. Ambas figuras
producir ninguna acción biológica. muestran el perfil de estabilidad
Los excipientes mejoran la perteneciente a soluciones acuosas
apariencia, las propiedades de los medicamentos analizados.

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