EXTRACCION ARTESANAL DE ADN

Cristian Santiago Torres Villavicencio, Juan Camilo Villamil Murcia

Estudiantes de Zootecnia, IV semestre, Universidad de Cundinamarca seccional Ubaté.
Presentado el 02 de 03 de 2020

Resumen
La extracción artesanal de DNA de células vegetales es una práctica de laboratorio con el
objetivo de identificar las etapas básicas de los protocolos de extracción de ADN, se toma
una muestra de fresa y con un cuchillo se parte en trozos, posteriormente troceando
manualmente con un mortero se utiliza agua destilada para facilitar la ruptura del tejido
vegetal, una vez triturada la muestra se pasa por un colador, posteriormente se toman 10 ml
de muestra para la identificación de ADN, se procede a depositar la muestra en un Erlenmeyer
y se añade 20 ml de tampón de lisis, bicarbonato de sodio, cloruro de sodio, detergente
lavavajillas, ablanda carnes, agua destilada, esta solución tiene como propósito provocar una
ruptura de membranas externas y liberar el ADN allí contenido. Posteriormente ambas
soluciones se deposita en un tubo de rosca, durante el tampón de lisis está haciendo que el
ADN se libere del núcleo como de los cloroplastos y las mitocondrias. Finalmente se filtra la
solución, del filtrado anterior se toman 5ml y se depositan en un tubo de rosca y se le adiciona
10 ml de alcohol se observa la interfase de la muestra y el alcohol se identifica una banda
blanquecina que corresponde al ADN y de este mismo tubo se extrae solamente el alcohol a
otro tubo y se deposita junto a la hebra de ADN posteriormente se centrifugar y se tiene como
resultado la estructura molecular del material vegetal
Introducción

Los ácidos nucleicos son polímeros de nucleótidos unidos por enlaces fosfodiéster. Por su
composición química, se han clasificado en dos tipos: ácido desoxirribonucleico (DNA) y
ácido ribonucleico (RNA). Los nucleótidos que forman al DNA están constituido por el
azúcar 2′-desoxirribosa unido mediante enlace éster a ácido fosfórico y mediante enlace N-
glucosídico a una de las cuatro bases nitrogenadas (adenina, guanina, timina o citosina).

Los nucleótidos del DNA forman una hélice constituida por dos hebras antiparalelas que se
mantienen unidas mediante puentes de hidrógeno. Para empaquetarse, el DNA se une a
nucleoproteínas, denominadas histonas; y cuando se quieren separar estos componentes, se
aplica tratamiento con ácidos o con concentraciones altas de sales.

Los nucleótidos del RNA se encuentran formados por el azúcar ribosa, unida mediante enlace
glucosídico a una de cuatro bases nitrogenadas (adenina, guanina, uracilo o citocina),
formando moléculas de una sola cadena.

La función del DNA es la de almacenar y transferir la información genética que conforma a

un organismo y a su descendencia. El genoma de un individuo comprende la totalidad de la
información genética contenida en el DNA. El DNA junto con los tres tipos de RNA (rRNA,
tRNA y mRNA) participa en la biosíntesis ordenada de los componentes de la célula,
codificando la expresión espacio temporal de las proteínas y respondiendo a los estímulos
del medio ambiente.

El genoma se encuentra organizado en forma diferente en las células procarióticas y

eucarióticas; en estas últimas presenta un mayor grado de complejidad. El genoma de las
células procarióticas está integrado dentro de una sola molécula de DNA circular, dispuesta
de modo compacto en una zona nuclear denominada nucleoide. El tamaño del genoma
bacteriano se puede ejemplificar con el de Escherichia coli; tiene 1 360 nm y se encuentra
constituido por 4 700 kilopares de bases (kpb).

El genoma de las células eucarióticas se encuentra organizado en cromosomas, que son

estructuras de DNA relacionadas con proteínas básicas, a las que se les denomina histonas,
y proteínas no histonas; las histonas tienen carga positiva a pH fisiológico y neutralizan las
cargas negativas del fosfato de los nucleótidos, lo que confiere estabilidad y permite que el
DNA que mide casi 2 metros de longitud se empaquete en un núcleo de 10 µm de diámetro.
El genoma humano está constituido por 46 cromosomas y contiene 5 × 106 kpb en su
totalidad.

De acuerdo con el tipo de célula en estudio, para aislar los ácidos nucleicos es necesario
romper la membrana y la pared celular mediante métodos físicos, químicos o enzimáticos,
para liberar las moléculas de DNA al medio extracelular. A partir de esto, la purificación de
los ácidos nucleicos se realiza mediante la extracción de las proteínas y los lípidos con
solventes orgánicos, y su recuperación, en un paso posterior, al precipitarlos con alcohol
(isopropanol o etanol).

La linealidad de la molécula de ADN y la consecuente disposición de los genes en

cromosomas hacen posible que genes vecinos se hereden juntos. Este hecho, junto con las
herramientas experimentales y de análisis, han permitido generar "mapas", en los cuales
cualquier fragmento de ADN (marcador molecular) puede ser utilizado como una vía
indirecta para seguir el patrón de herencia de una característica. Los marcadores moleculares
establecen relaciones de vecindad con genes de interés, determinando su localización dentro
del genoma del organismo estudiado

Los genes que posee un individuo en su genoma definen su genotipo. La expresión del
genotipo es afectada en gran medida por el medio ambiente, determinando así la apariencia
o rendimiento de un individuo (fenotipo). La genética estudia cómo el genotipo y el fenotipo
son transmitidos de padres a hijos y junto con la biología molecular han desarrollado técnicas
de análisis de poblaciones y de individuos que permiten ubicar, caracterizar y explicar la
heredabilidad de genes u otros fragmentos de ADN (Lewin 1995).
Resultados y Análisis
Foto1 Estructura de ADN de
muestra vegetal de fresa
Torres Santiago, Villamil juan
.2020
Foto2 Estructura de ADN de
muestra vegetal de fresa
.Torres Santiago, Villamil
juan .2020
Después que son eliminados los lípidos y las proteínas, los
grupos fosfato del ADN están cargados negativamente y
son polares. El ADN se disuelve en soluciones acuosas,
pero es insoluble en alcohol.
La adición de etanol y altas concentraciones de iones
sodio que se unen a los grupos fosfato, reduce las fuerzas
repulsivas entre las cadenas y permite que el ADN se
pliegue sobre si mismo haciéndolo insoluble. De esta
forma precipita y forma una malla filamentosa
blanquecina que contienen proteínas y otros materiales.
El alcohol disminuye la constante dieléctrica de la
solución acuosa. El etanol frio provoca que el ADN se
separe del agua y precipite. Cuando el ADN se separa de
la solución acuosa, tiende agruparse, lo que hace que sea
visible. Las largas cadenas del ADN se enrollaran
alrededor de la varilla al revolver la interfase entre las dos
capas.
Conclusiones

1. El producto final no es ADN puro, ya que se encuentran diminutos fragmentos de

ARN e incluso algunas proteínas.
2. El ADN es una molécula muy larga y tiende a agruparse, esto permite extraerla y
visualizarla con facilidad
3. La extracción de ADN requiere de un proceso secuencial, en el cual se trata de
aislar a esta molécula de los demás componentes de la célula
4. Todo el proceso realizado provoca el desenrrollamiento del ADN que tiene
apariencia de material fibroso

Referencias

JIMENEZ,L.FELIPE, MERCHANT,HORACIO( 2003 )biología celular y molecular

recuperado de https://oncouasd.files.wordpress.com/2015/06/biologia-celular-y-molecular.pdf

LOPEZ, NOVOA, J.M. DIEZ, J.(1993)INTRODUCCION A LA BIOLOGIA MOLECULAR VOL 13

RECUPERADO DE file:///D:/Desktop/quimica/X0211699593048082.pdf