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Directora
Claudia Elizabeth Mora Huertas, PhD.
Profesora Asociada
Departamento de Farmacia
A la profesora Claudia Mora, por su apoyo, guía, consejo y esfuerzo constante que
permitieron en conjunto sacar adelante este trabajo.
A mis amigas, especialmente a Catalina Acevedo, Catalina Amaya y Aura Hernández por
su apoyo incondicional, y a Edwin Tavera por acompañarme a conquistar este proyecto
personal.
Resumen y Abstract IX
Resumen
Abstract
Contenido
Pág.
1. INTRODUCCIÓN ....................................................................................................... 1
2. JUSTIFICACIÓN ........................................................................................................ 5
4. OBJETIVOS............................................................................................................. 17
4.1 Objetivo general ................................................................................................. 17
4.2 Objetivos específicos.......................................................................................... 17
6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN................................................................................. 39
6.1 Preparación de las micropartículas a base de alginato .................................. 39
6.2 Desarrollo de matrices sólidas conteniendo micropartículas a base de alginato
y quercetina.............................................................................................................. 63
6.2.1 Caracterización farmacotécnica de las micropartículas a base de
alginato ............................................................................................................ 64
6.2.2 Caracterización farmacotécnica de los posibles excipientes para el
desarrollo de matrices sólidas conteniendo micropartículas a base de alginato. 91
6.3 Desarrollo de matrices sólidas conteniendo quercetina encapsulada en
micropartículas a base de alginato ......................................................................... 113
Lista de figuras
Pág.
Figura 3-1: Estructura química de la quercetina. ............................................................ 11
Figura 3-2: Mecanismo probable de la gelificación iónica del alginato: a. Formación de un
lecho de gel de alginato con cationes calcio, resultando en el modelo de "caja de huevos"
y b. Asociaciones laterales de las cadenas. ................................................................... 14
Figura 5-1: Ensamble para la determinación de la fluidez por el método del ángulo de
reposo. ........................................................................................................................... 32
Figura 6-1: Morfología de las micropartículas a base de alginato y ácido algínico previa al
proceso de secado. ........................................................................................................ 43
Figura 6-2: Morfología de las micropartículas a base de alginato y ácido algínico posterior
al proceso de secado a 25 °C ± 0.7 °C. .......................................................................... 44
Figura 6-3: Distribución de tamaño de partícula obtenida al evaluar diferentes referencias
de alginato y ácido algínico a concentración 1.5 % y calibre de aguja de extrusión 27G. 46
Figura 6-4: Distribución de tamaño de partícula obtenida al evaluar diferentes referencias
de alginato y ácido algínico a concentración 1.5 % y calibre de aguja de extrusión 30 G.
....................................................................................................................................... 47
Figura 6-5: Distribución de tamaño de partícula obtenida al evaluar diferentes referencias
de alginato y ácido algínico a concentración 2.5 % y calibre de aguja de extrusión 27 G.
....................................................................................................................................... 47
Figura 6-6: Distribución de tamaño de partícula obtenida al evaluar diferentes referencias
de alginato y ácido algínico a concentración 2.5 % y calibre de aguja de extrusión 30 G.
....................................................................................................................................... 48
Figura 6-7: Distribución de tamaño de partícula obtenida al evaluar la referencia de ácido
algínico Protacid® F a concentración 5.0 % y calibres de aguja de extrusión 27 G y 30G.
....................................................................................................................................... 48
Figura 6-8: Distribución de tamaño de partícula obtenida al secar las micropartículas
elaboradas con Protanal® LF a temperatura de 30 °C ± 1.0 °C. ..................................... 50
Figura 6-9: Distribución de tamaño de partícula obtenida al secar las micropartículas
elaboradas con Protanal® LF a temperatura de 40 °C ± 0.7 °C. ..................................... 51
Figura 6-10: Micropartículas a base de Protanal® LF 1.5 % secadas a 30 °C ± 1.0 °C y a
40 °C ± 0.7 °C, observadas en microscopio electrónico de barrido: a. Morfología y b.
Acercamiento a los detalles de la superficie. .................................................................. 52
Figura 6-11: Apariencia de las micropartículas a base de Protanal® LF posterior al
proceso de secado a 30 °C ± 1.0 °C y a 40 °C ± 0.7 °C. ................................................ 53
Figura 6-12: Dureza de las micropartículas a base de Protanal® LF para los intervalos de
muestreo estudiados. ..................................................................................................... 54
XIV Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Lista de tablas
Pág.
Tabla 5-1: Evaluación del efecto sobre el tamaño de partícula, de la naturaleza y la
concentración del polímero y del calibre de la aguja de extrusión. ................................. 22
Tabla 5-2: Composición de los granulados en las distintas formulaciones empleando
Starlac® y Retalac® para la incorporación de micropartículas a base de alginato
conteniendo quercetina dentro de matrices sólidas. ....................................................... 36
Tabla 5-3: Composición de la tableta a partir de granulados de Starlac®, Starlac® -
Retalac® y Retalac®, para la incorporación de micropartículas a base de alginato
conteniendo quercetina. ................................................................................................. 36
Tabla 6-1: Resultados obtenidos en el estudio sistemático del método de gelificación
iónica utilizado para la preparación de micropartículas a base de alginato de sodio. ..... 40
Tabla 6-2: Proporción monomérica, naturaleza y viscosidad de las dispersiones de las
diferentes referencias de alginato y ácido algínico evaluadas. ....................................... 41
Tabla 6-3: Tamaño de las micropartículas a base de alginato y ácido algínico en mm,
obtenidas al evaluar diferentes referencias y concentraciones de los materiales, y
diferentes calibres de aguja de extrusión........................................................................ 45
Tabla 6-4: Influencia de la temperatura y del tiempo de secado sobre el tamaño, la
dureza y el contenido de humedad de las micropartículas a base de Protanal® LF. ....... 49
Tabla 6-5: Comportamiento del pH de la solución entrecruzante y del tamaño y humedad
de las micropartículas en función de la cantidad de Protanal® LF y Manucol® LKX
adicionada. ..................................................................................................................... 56
Tabla 6-6: Resultados de la caracterización de algunas de las propiedades
farmacotécnicas de las micropartículas preparadas a partir de Protanal® LF. ................ 67
Tabla 6-7: Clasificación del grado de higroscopicidad, contenido de humedad de
equilibrio (EMC) y velocidad de sorción – desorción de agua de las micropartículas
preparadas a partir de Protanal® LF. .............................................................................. 70
Tabla 6-8: Capacidad de carga y eficiencia de encapsulación de quercetina para las
micropartículas empleadas en el ensayo de liberación del activo. .................................. 75
Tabla 6-9: Tamaño de partícula de los coprocesados Starlac®, Microcelac® y Retalac®. 94
Tabla 6-10: Resultados de la caracterización de algunas de las propiedades
farmacotécnicas de los coprocesados Starlac®, Microcelac® y Retalac®. ....................... 96
Tabla 6-11: Clasificación del grado de higroscopicidad, contenido de humedad de
equilibrio (EMC) y velocidad de sorción – desorción de agua de los coprocesados
Starlac®, Microcelac® y Retalac®. ..................................................................................100
Tabla 6-12: Evaluación del comportamiento bajo compresión de los coprocesados
Starlac®, Microcelac® y Retalac®. ..................................................................................108
XVIII Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Superíndices
Superíndice Término
® Marca registrada
Abreviaturas
Abreviatura Término
Billones
B
Ingrediente farmacéutico activo (por sus
API
siglas en inglés)
Farmacopea de los Estados Unidos (por sus
USP
siglas en inglés)
G Ácido gulurónico
M Ácido manurónico
UA Unidades de Absorbancia
CV Coeficiente de variación
XX Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
1. INTRODUCCIÓN
La vía oral es la ruta más conveniente y comúnmente empleada para la administración
de fármacos, debido a las menores restricciones en la calidad de los ambientes para su
producción, la flexibilidad en el diseño de la forma de dosificación y a su facilidad de
administración al paciente (Abdul y col., 2004). Sin embargo, las formas farmacéuticas
sólidas convencionales o de liberación inmediata no permiten mantener una
concentración terapéutica constante del fármaco en el plasma durante todo el
tratamiento, la concentración del fármaco en el estado de equilibrio presenta
fluctuaciones, y para fármacos que tienen tiempo de vida media corto se requiere la
administración frecuente de dosis para lograr el efecto terapéutico. Por tanto, es posible
afirmar que este tipo de formas farmacéuticas resultan particularmente desventajosas
(Collett y Moreton, 2007; Peñaranda, 2009).
Es así como las formas farmacéuticas de liberación modificada surgen como una
alternativa terapéutica. Entre sus ventajas se destaca la posibilidad de mantener las
concentraciones plasmáticas necesarias para lograr el efecto terapéutico por un mayor
periodo de tiempo y el control de la cantidad de activo disponible para la absorción desde
una dosis administrada hasta la siguiente, lo que resulta en un perfil más estable de
fármaco en el plasma (Abdul y col., 2010). Según la compañía de investigaciones de
mercado BCC Research, en el 2011 las ventas globales de productos farmacéuticos que
involucran nanotecnología, una estrategia para modificar la liberación de activos, fueron
de USD $50.1 B, y de acuerdo con sus proyecciones, las ventas para 2016 serán de
USD $96.9 B, con una taza crecimiento anual de 14.1 % durante dicho periodo (BCC
Research, 2012).
su producción a escala industrial, han sido objeto de investigación intensiva por parte de
la industria nacional (Vallejo y Torres, 2007; Gallo y col., 2010). Lo anterior se encuentra
soportado en el hecho de que hasta la fecha, en el mercado colombiano únicamente
existen cinco medicamentos de liberación modificada que cuentan con registro sanitario
vigente expedido por el Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos
INVIMA, y cuyo registro y autorización de fabricación pertenece a empresas
farmacéuticas nacionales (INVIMA, 2016).
En este sentido, los resultados hasta ahora obtenidos por el grupo de investigación
evidencian la factibilidad de encapsular quercetina mediante la técnica de gelificación
iónica, utilizando alginato como polímero y en donde las micropartículas obtenidas
exhiben comportamientos de liberación modificada dependientes del pH del medio
(Montenegro, 2014; Orozco, 2014; Baena, 2016). Sobre esta base, la presente tesis tiene
como objetivo investigar cómo dicho comportamiento de liberación podría verse
influenciado cuando las micropartículas conteniendo quercetina son incorporadas en
matrices sólidas tipo tableta. Esto permitirá profundizar en el estudio de diferentes
estrategias para modular la liberación del activo, fundamentalmente aquellas basadas en
la selección de los excipientes. En conjunto, la información y la experiencia recopiladas
sentarán las bases para iniciar procesos de transferencia de tecnología desde la
Universidad hacia la industria, con el fin de contribuir al avance como país, en el
Introducción 3
De acuerdo con lo anterior, la presente tesis busca contribuir a las investigaciones acerca
del desarrollo de formas farmacéuticas de liberación modificada que sean atractivas para
la industria radicada en Colombia y que a la vez, sean competitivas teniendo en cuenta
las tendencias en el ámbito internacional. Como molécula activa se ha elegido la
quercetina (3,3´,4´,5-7-pentahidroxiflavona), un flavonoide presente en frutas y vegetales,
que es catalogado como uno de los antioxidantes más potentes del grupo de los
polifenoles (Tavano y col., 2014). Se ha demostrado que la quercetina posee
propiedades como antiviral (Choi y col., 2009), antibacterial (Paolillo y col., 2011), anti-
inflamatorio (Fan y col., 2011) y anticancerígeno (Shi y col., 2014). Sobre esta última
aplicación terapéutica, la Sociedad Americana del Cáncer (ACS, por sus siglas en inglés)
resalta que estudios científicos en animales han demostrado que este activo puede
ayudar en la protección frente a algunos tipos de cáncer, particularmente en el cáncer de
colon. No obstante, aunque no se descarta esta aplicación terapéutica, aún no se cuenta
con la evidencia suficiente para extrapolar a humanos estos resultados (ACS, 2014).
6 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de micropartículas
de alginato formuladas en matrices sólidas
Reconociendo que la quercetina, como flavonoide, podría tener varios efectos para la
salud, su baja solubilidad en agua, su corto tiempo de vida media y su baja
biodisponibilidad oral dificultan su aprovechamiento como agente terapéutico (Liu y col.,
2014). Es así como, desde el punto de vista tecnológico, resulta interesante el diseño de
nuevos sistemas de liberación de fármacos que permitan su formulación. En este sentido,
estudios recientes han reportado diferentes posibilidades para promover el
aprovechamiento de esta molécula activa, dentro de las que se destacan la
microencapsulación, ya sea en partículas sólidas lipídicas (Costa Silva y col., 2013;
Scalia y col., 2013), en nanopartículas poliméricas (Kumari y col., 2010), en micelas
poliméricas (Khonkarn y col., 2011) o en liposomas (Cadena y col., 2013).
Guardando esta misma línea de diseño de productos innovadores, la presente tesis hace
parte de un proyecto del Grupo de Investigación en Desarrollo y Calidad de Productos
Farmacéuticos y Cosméticos del Departamento de Farmacia, orientado a la búsqueda de
nuevos sistemas de liberación de activos basados en la preparación de micropartículas
mediante la técnica de gelificación iónica. Trabajos previos han permitido la
implementación de esta técnica en el laboratorio (Orozco, 2014; Baena, 2016) y el
desarrollo de la formulación de micropartículas conteniendo quercetina, así como la
validación de la metodología analítica para la cuantificación de este activo en este tipo de
sistemas particulados. Así mismo, se ha evaluado la liberación de quercetina a partir de
las partículas, mostrando que ésta se ve favorecida en medios de pH básico, propios de
la primera y segunda porción del intestino delgado, donde ocurre una rápida liberación
del activo en las dos primeras horas (superior al 50 %). Posteriormente, se presenta una
liberación lenta dependiente de la concentración de quercetina encapsulada. Dicha
liberación se ve afectada negativamente a causa del envejecimiento acelerado de las
micropartículas, lo que se atribuye a su endurecimiento haciendo la red polimérica más
compacta y como consecuencia, dificultando la liberación del activo (Montenegro, 2014).
tableta y entender los aspectos relacionados con la disolución, para de esta forma
aportar información útil para futuros desarrollos de productos novedosos y atractivos para
la industria farmacéutica colombiana.
8 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de micropartículas
de alginato formuladas en matrices sólidas
3. MARCO TEÓRICO
Según la farmacopea de los Estados Unidos (USP 38, 2015) la liberación modificada es
un término descriptivo que aplica para una forma de dosificación con un patrón de
liberación del ingrediente farmacéutico activo (API, por sus siglas en inglés), que se
modificó deliberadamente respecto a lo que se observaría si se formula en una forma de
dosificación de liberación inmediata. En lo concerniente a las formas farmacéuticas
sólidas y teniendo en cuenta el esquema de liberación del activo, existen dos categorías
de formas de liberación modificada:
proporcionan una dosis simple de fármaco y a un tiempo posterior liberan otra dosis
similar, pero en el intervalo de liberación de una dosis y otra, no existe liberación de
principio activo; y de liberación retardada o diferida, aquellas que liberan el principio
activo después de transcurrido un tiempo de latencia, por lo que no se obtienen niveles
plasmáticos de fármaco hasta que la forma farmacéutica se encuentre en la zona del
tracto digestivo en donde se desea que se active el sistema.
De igual manera, la USP establece los ensayos mediante los que se evalúa la calidad de
una forma farmacéutica sólida, siendo de particular interés las pruebas que se realizan a
las tabletas y que a su vez, aplican para aquellas que presentan un comportamiento de
liberación modificada. Dentro de tales ensayos se incluyen: (i) ensayos generales como
la identificación, la valoración de activo y el análisis de impurezas y, (ii) ensayos
específicos como la evaluación de la friabilidad, la dureza, la uniformidad de contenido y
las pruebas de disolución. Estas últimas, que son de particular interés en la presente
investigación, se definen como el proceso mediante el cual las moléculas del activo se
liberan desde la fase sólida y entran en solución. La efectividad de una tableta en liberar
el fármaco que contiene para lograr su absorción sistémica está influenciada por la
velocidad de desintegración, de desagregación de los gránulos, pero aún más
importante, la velocidad de disolución del activo mismo, lo que hace que las pruebas de
disolución sean de suma importancia para garantizar el adecuado comportamiento in vivo
del producto (Sinko y Singh., 2011b).
Resultados de estudios in vivo (Boulton y col., 1998) mostraron que la quercetina exhibe
elevada unión a proteínas plasmáticas (99.4 %) y una baja solubilidad en agua (10 mg/l a
20 °C) (Srinivas y col., 2010; Gao y col., 2011; Abraham y col., 2014). De otro lado,
estudios de biodisponibilidad reportan que esta es menor a 17 % en ratas (Khaled y col.,
2003), y en humanos se encuentra entre el 15 % y el 20 % (Graefe y col., 2001). Es por
esta razón, que diversos estudios clínicos acerca del empleo de este fármaco como
agente terapéutico se han visto limitados (Graefe y col., 1999; Bhattaram y col., 2002).
(Sweetman, 2009)
los cambios de pH (Lupo y col., 2014; Lam y Gambari, 2014). Los alginatos son extraídos
principalmente de algas marrones de las especies Laminaria hyperborea, Ascophyllum
nodosum y Macrocystis pyrifera. También se han extraído de Laminaria japónica, Eclonia
máxima y Lesonia negrescens. Estos polímeros son una familia de polisacáridos lineales
no ramificados, conteniendo cantidades variables de ácido (1,4´) β-D-manurónico (bloque
M) y de ácido α-L-gulurónico (bloque G). La proporción y secuencia de los bloques, así
como su peso molecular, determinan las propiedades físicas del alginato (Rodríguez-
Llimós y col., 2003).
(Morch, 2008)
entrecruzamiento y las interacciones inter-cadena del polímero (Guan y col., 2011; Silva y
col., 2006).
5.1 Materiales
5.2 Métodos
durante aproximadamente una hora para garantizar la completa distribución del activo en
la dispersión polimérica. Luego, las partículas se prepararon según el procedimiento
descrito previamente y se caracterizaron respecto al tamaño de partícula, la capacidad
de carga, la eficiencia de encapsulación y la liberación de la quercetina encapsulada.
𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑞𝑢𝑒𝑟𝑐𝑒𝑡𝑖𝑛𝑎 𝑒𝑛 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑝𝑎𝑟𝑡í𝑐𝑢𝑙𝑎𝑠
𝐶𝑎𝑝𝑎𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑐𝑎𝑟𝑔𝑎 (%) = ( 𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑝𝑎𝑟𝑡í𝑐𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑜𝑏𝑡𝑒𝑛𝑖𝑑𝑎𝑠
)∗ 100 (5.2)
𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑞𝑢𝑒𝑟𝑐𝑒𝑡𝑖𝑛𝑎 𝑒𝑛 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑝𝑎𝑟𝑡í𝑐𝑢𝑙𝑎𝑠
𝐸𝑓𝑖𝑐𝑖𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑒𝑛𝑐𝑎𝑝𝑠𝑢𝑙𝑎𝑐𝑖ó𝑛 (%) = ( 𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑞𝑢𝑒𝑟𝑐𝑒𝑡𝑖𝑛𝑎 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙
)∗ 100 (5.3)
Tanto para los coprocesados como para las micropartículas, a partir de los datos
obtenidos se construyeron las gráficas de distribución del tamaño de partícula en
función de la frecuencia relativa. Adicionalmente, los resultados fueron
expresados como el valor span para cada material estudiado.
(𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑𝑎𝑝𝑖𝑠𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎 −𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑𝑎𝑝𝑎𝑟𝑒𝑛𝑡𝑒 )
𝐼𝑛𝑑𝑖𝑐𝑒 𝑑𝑒 𝐶𝑎𝑟𝑟 (%) = [ ] ∗ 100 (5.4)
𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑𝑎𝑝𝑖𝑠𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎
𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑎𝑝𝑖𝑠𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎
𝐼𝑛𝑑𝑖𝑐𝑒 𝑑𝑒 𝐻𝑎𝑢𝑠𝑛𝑒𝑟 = 𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑎𝑝𝑎𝑟𝑒𝑛𝑡𝑒
(5.5)
Parte Experimental 31
1
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑖𝑛𝑜𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑎𝑝𝑖𝑠𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎 = 𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑎𝑝𝑖𝑠𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎
(5.6)
1
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑖𝑛𝑜𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑎𝑝𝑎𝑟𝑒𝑛𝑡𝑒 = 𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑎𝑝𝑎𝑟𝑒𝑛𝑡𝑒
(5.7)
ℎ
𝑡𝑎𝑛𝜃 = (5.8)
(𝑑⁄2)
Figura 5-1: Ensamble para la determinación de la fluidez por el método del ángulo
de reposo.
- Velocidad de flujo: Se determinó haciendo uso del equipo FLODEX®, que consta
de un cilindro de acero con discos intercambiables de distintos diámetros de
orificio. Al ensamblar el cilindro con un disco y tapando el orificio se forma un
recipiente en el que se depositó una cantidad aproximada de 100 g del material
por medio de un embudo. Una vez cargado el material, se retiró el tapón
verificando que al repetir el experimento por tres veces consecutivas, se obtuviera
flujo libre del material. Para encontrar el orificio de disco que permite dicho flujo,
sistemáticamente se repitió el experimento variando el disco en orden creciente
de diámetro. Teniendo identificado el diámetro de disco correcto se estimó el
coeficiente de fricción del material utilizando la Ecuación 5.9. Adicionalmente, se
realizaron 12 réplicas del ensayo para determinar la cantidad de material que fluía
por el orificio por unidad de tiempo. Para tal fin, se midió el tiempo (Cronómetro
Sport Timer S-1380) en que una cantidad exacta de material (balanza analítica
PA214 OHAUS®, sensibilidad 0.1 mg) atravesó el orificio. Los resultados
obtenidos a partir de reemplazar los datos en la Ecuación 5.10, fueron
expresados como el promedio de las determinaciones efectuadas con su
coeficiente de variación.
Parte Experimental 33
𝐶𝑎𝑛𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑚𝑎𝑡𝑒𝑟𝑖𝑎𝑙
𝑉𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑓𝑙𝑢𝑗𝑜 = 𝑇𝑖𝑒𝑚𝑝𝑜
(5.10)
tipo tableta. Se prepararon tres formulaciones diferentes en las que se varió la proporción
de los coprocesados en cada una de ellas, manteniendo constante una cantidad de 20
mg de micropartículas. No se empleó Microcelac® debido a que los comportamientos
farmacotécnicos de este material y del Starlac® fueron similares.
Como punto de partida se pesaron las cantidades requeridas de cada material según lo
indicado en la Tabla 5-2 (balanza PA3102, OHAUS®, sensibilidad 0.01 g) y previa carga
del material en el mezclador planetario (Erweka PRS), se realizó la mezcla durante 30
min a velocidad baja (1 en la escala del equipo). Una vez concluida esta etapa y
manteniendo el material bajo la misma condición de mezcla, se adicionó agua a
temperatura ambiente para realizar la aglutinación, en pequeñas porciones hasta lograr
la consistencia requerida para la granulación, lo que se verificó pasando el material por la
malla de granulación (malla No. 6) y observando que se alcanzara el aspecto del gránulo
que visualmente se consideró adecuado. Posteriormente el material se sometió al
proceso de granulación (Regranulador Erweka FGS) forzando su paso a través de la
malla No. 6. Los gránulos obtenidos se secaron a temperatura de 40 °C (secador de
lecho fluidizado Glatt) durante el tiempo necesario para obtener una humedad final en el
producto entre 1 y 2 % respectivamente (balanza de humedad RADWAG® PMX50,
sensibilidad 0.001 %). El granulado seco fue regranulado (Regranulador Erweka FGS)
empleando una malla No.18 y se mezcló con las micropartículas conteniendo quercetina,
en la proporción descrita en la Tabla 5-3. Este proceso se llevó a cabo en un mezclador
cúbico durante 30 min, a velocidad baja en la escala del equipo. Posteriormente se
adicionaron los agentes lubricantes y se permitió una mezcla adicional durante 5 min a la
misma condición de trabajo del equipo. Al término de esta etapa, se alimentó la
tableteadora con el material (tableteadora rotativa multipunzón Protón®) ajustando la
fuerza de compresión de modo tal que permitiera la obtención de tabletas con una dureza
entre 30 y 50 N (durómetro KRAEMER ELEKTRONIK HC 6.2).
36 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Las tabletas fueron caracterizadas en cuanto a sus dimensiones, peso, dureza, contenido
de activo y liberación del activo. Como primera medida, sobre una muestra de 12
unidades por cada formulación estudiada, se tomaron medidas del diámetro y altura de
las tabletas utilizando un calibrador digital (Red Line Mechanics®). A continuación dichas
tabletas se pesaron (balanza analítica PA214 OHAUS®, sensibilidad 0.1 mg). Los
resultados se expresaron como el promedio de las determinaciones con su coeficiente de
variación.
Parte Experimental 37
La prueba de dureza se efectuó a partir de seis unidades, a cada una de las cuales se
aplicó un estrés mecánico hasta lograr su fractura (durómetro KRAEMER ELEKTRONIK
HC 6.2). Los resultados se expresaron como el promedio de las determinaciones con su
coeficiente de variación.
y la duración del ensayo fue aquella que permitiera determinar la máxima liberación del
activo desde la matriz sólida, sin exceder un tiempo límite de 24 h. Los resultados fueron
expresados como porcentaje de quercetina liberado en cada tiempo de muestreo con su
intervalo de confianza.
39 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Como se ha mencionado, la presente tesis explora una estrategia para modular el
comportamiento de liberación de moléculas activas a través de la incorporación en
matrices sólidas tipo tableta, de micropartículas elaboradas con alginato conteniendo
quercetina. Trabajos anteriores desarrollados en el mismo grupo de investigación
reportaron la obtención de partículas de tamaños entre 0.63 mm ± 0.07 mm (Montenegro,
2014). Sobre esta base, una primera parte de la investigación se orientó a lograr
partículas de menor tamaño que fuesen más adecuadas para la incorporación dentro de
las matrices sólidas. Una vez se cumplió este propósito, se procedió al desarrollo de
matrices sólidas tipo tableta cuya composición permitiese conocer el efecto de los
excipientes sobre la liberación del activo.
Como se presenta en las Figuras 6-1 y 6-2, en donde se observa la morfología de las
micropartículas obtenidas antes y después del proceso de secado, independiente de la
naturaleza y la concentración del material empleado, estas presentan una tenue
coloración amarillenta. La forma de las partículas parece estar relacionada con la
viscosidad de las dispersiones de polímero. Como lo reportan Caballero y col. (2014) y
Fundueanu y col. (1999), la viscosidad aumenta en relación directa con el incremento de
su concentración.
De otro lado, el Protacid® F fue el único material que se trabajó a una concentración de
5.0 % debido a que a concentraciones de 1.5 % y 2.5 % las partículas obtenidas no son
del aspecto y la consistencia esperadas. Este efecto podría atribuirse principalmente a
que la viscosidad de las dispersiones de Protacid® F a dichas concentraciones no era lo
suficientemente elevada para favorecer la formación de las micropartículas.
Estudios llevados a cabo por Sankalia y col. (2004) acerca del efecto de la concentración
del alginato de sodio y de la solución entrecruzante, y el tiempo de curado sobre el
tamaño de partículas de alginato, evidenciaron que aunque las tres variables ejercen
influencia sobre este parámetro, la concentración de alginato resultó ser el más
relevante; un aumento en la concentración del polímero incrementa la viscosidad de sus
dispersiones, lo que a su vez promueve la obtención de partículas con mayor tamaño. De
acuerdo con los resultados de la Tabla 6-3 y las Figuras 6-3 a 6-7, lo anterior es
coherente cuando se utilizan Protacid® F y Protanal® LF como polímeros. Para el caso
del alginato calidad farmacéutica y del Manucol® LKX, el tamaño de partícula no varía
considerablemente en términos de la viscosidad de las dispersiones acuosas; sobre el
Protanal® HF no puede hacerse ninguna afirmación dado que únicamente se trabaja un
nivel de concentración por las razones previamente descritas.
43 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-1: Morfología de las micropartículas a base de alginato y ácido algínico previa al proceso de secado.
44 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-2: Morfología de las micropartículas a base de alginato y ácido algínico posterior al proceso de secado a 25 °C ± 0.7 °C.
45 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Tabla 6-3: Tamaño de las micropartículas a base de alginato y ácido algínico en mm,
obtenidas al evaluar diferentes referencias y concentraciones de los materiales, y
diferentes calibres de aguja de extrusión.
Respecto al calibre de la aguja de extrusión, existe una relación inversa entre el tamaño
de partícula y el calibre de aguja cuando se emplearon alginato calidad farmacéutica y
Protanal® LF como polímeros. Por el contrario, se observa una relación directa para
Manucol® LKX. Para el Protacid® F aparentemente el calibre de aguja de extrusión no
ejerce mayor influencia en el tamaño de partícula, exceptuando el caso del Protacid® F
1.5 %. Nuevamente, sobre el Protanal® HF no puede hacerse ninguna afirmación dado
que únicamente se trabajó un nivel de concentración.
En términos generales, los diámetros de partícula más grandes se logran con el ácido
algínico referencia Protacid® F a una concentración de 5.0 % y calibre de extrusión 27 G,
y los más pequeños se obtienen a partir de la referencia de alginato Protanal® LF a
concentración 1.5 % y calibre de extrusión 27 G. El análisis de los valores de span indica
que la amplitud de la distribución del tamaño de partícula es similar.
Teniendo en cuenta los valores de span obtenidos así como el comportamiento gráfico
observado en las Figuras 6-8 y 6-9, las distribuciones de tamaño de partícula son
estrechas. Al comparar estadísticamente los resultados de la distribución del tamaño de
las partículas a las dos condiciones de secado, no se detectaron diferencias
estadísticamente significativas entre ellas (𝟀2 calculado 0.04 < 𝟀2 tabulado 0.05, 5 11.07).
Según Arshia y col. (2007), posterior al proceso de secado, las micropartículas reducen
hasta un tercio su tamaño original. Esto sugiere que a menor humedad, menor tamaño.
Teniendo en cuenta los resultados reportados en la Tabla 6-4, se observa que la
50 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
disminución del tamaño de partícula no sigue un patrón definido. Aun cuando es evidente
la diferencia entre las humedades de las partículas preparadas a base de Protanal® LF
para las dos condiciones de secado, el no detectar diferencias en el tamaño una vez se
observó que las partículas estaban aparentemente secas, sugiere que continuar con el
proceso de secado solamente afectó su contenido de humedad. Esto podría deberse a
que existe un límite en la consolidación de la estructura de la partícula durante el secado
(endurecimiento) el que una vez es alcanzado sólo ocurre la pérdida de agua. En efecto,
como se observa en la Figura 6-10, en la superficie de las partículas bajo estudio es
evidente la presencia de grietas y poros. En particular, las grietas podrían reflejar cierto
estrés en la estructura de la partícula a causa de la temperatura, la pérdida de agua y la
imposibilidad de deformación adicional de la estructura de las partículas una vez se ha
alcanzado el valor límite.
Por otra parte, se pudo observar que las micropartículas húmedas poseen una forma
esférica. Sin embargo, se encontró que posterior al proceso de secado para las dos
temperaturas evaluadas, las micropartículas presentaron una forma lenticular (Figura 6-
11). Lo anterior podría explicarse teniendo en cuenta el estudio reportado por Skja°k-
Bræk y col. (1989), donde muestra que el alginato tiene un mecanismo de gelación
ionotrópica heterogéneo. Así, en el proceso de formación de las partículas, los iones Ca2+
de la solución entrecruzante entran por difusión a la gota de polímero uniéndose de
manera irreversible a los bloques G que conforman la estructura del alginato formando el
gel. De esta manera, al interior de la gota de polímero se forman interfases sol/gel en las
que tiende a predominar el gel a medida que nuevos iones Ca 2+ se unen al alginato. No
obstante, este proceso de gelificación gradual es limitado por la dificultad de los iones
Ca2+ para acceder al alginato disponible para ser gelificado pero que se encuentra al
52 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-11: Apariencia de las micropartículas a base de Protanal® LF posterior al proceso de secado a 30 °C ± 1.0 °C y a 40 °C ±
0.7 °C.
54 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-12: Dureza de las micropartículas a base de Protanal® LF para los intervalos de
muestreo estudiados.
Resultados y Discusión 55
De otro lado, como se evidencia en la Figura 6-15, a medida que aumenta la cantidad
adicionada de alginato sobre la solución entrecruzante, la disponibilidad de iones Ca2+ en
el medio de formación de las micropartículas disminuye en forma proporcional. Este
fenómeno podría conducir paulatinamente a la obtención de geles con mayor grado de
hinchamiento, es decir, con mayor capacidad de captación de agua dentro de su
estructura. En efecto, tal hinchamiento gradual podría explicar el comportamiento
observado en las Figuras 6-16 y 6-17. Así, al tener un medio para la formación de las
partículas con elevada cantidad de iones carboxilato pero poca disponibilidad de iones
Ca2+ para lograr el entrecruzamiento, además de los puentes de hidrógeno formados con
los grupos hidroxilo propios de la estructura de los monómeros gulurónico y manurónico,
se favorecería la formación de puentes de hidrógeno entre los iones carboxilato con el
agua provocando el aumento de la captación de ésta en el interior de la estructura de la
micropartícula. Finalmente, una vez se ha consumido la totalidad de iones Ca2+, no es
posible lograr la formación de las partículas. Como resultado, se podría predecir un
tamaño de partícula también gradualmente mayor a medida que disminuye la
concentración de iones calcio y por tanto, la estructura de la partícula sería menos
consolidada. Lo anterior concuerda con lo reportado por Golmohamadi y col. (2014), en
donde se observó que el efecto de la protonación a pH ácido que conlleva a la
disminución de la densidad de carga del alginato tiene menor influencia en el grado de
hinchamiento de los geles, respecto a la disponibilidad de iones calcio en el medio de
formación de las partículas. Por tanto, una disminución en la concentración de iones Ca2+
lleva a un mayor grado de hinchamiento de las partículas.
Evaluación de la morfología
Figura 6-19: Morfología de las micropartículas preparadas a partir de Protanal® LF: a. Observación en microscopio de luz
transmitida y polarizada (4X), y b. Observación en microscopio electrónico de barrido.
Las fotografías de las micropartículas elaboradas con Protanal® LF en microscopio de luz transmitida y luz polarizada fueron tomadas con objetivo (4X).
66 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Comparando los resultados reportados en la Tabla 6-6 con la escala de fluidez reportada
por la USP (USP 38, 2015), las micropartículas a base de Protanal® LF presentan buenas
características de flujo con un índice de Carr ≤ 10 %, y un índice de Hausner entre 1.00 -
1.11. El índice de Carr y el índice de Hausner son medidas que evalúan la importancia de
las interacciones interpartícula. Así, en un material que fluye libremente como es el caso
de las micropartículas preparadas a partir de Protanal® LF, esas interacciones son menos
significativas y las densidades apisonada y aparente son más cercanas en valor, como
puede observarse en la Tabla 6-6 (USP 38, 2015; Peleg, 1977; Burguess y Hickey,
1992b).
68 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Comportamiento de flujo
Entre los métodos más comunes para caracterizar la fluidez de polvos se encuentran el
ángulo de reposo, la velocidad de flujo a través de un orificio, y los índices de Carr y de
Hausner que fueron discutidos previamente (USP 38, 2015). Los resultados se presentan
en la Tabla 6-6.
La USP describe el ángulo de reposo como una característica relacionada con la fricción
interpartícula o la resistencia al movimiento que existe entre las partículas (USP 38,
2015) y corresponde al ángulo formado entre la superficie de una pila de polvo al dejarlo
caer libremente respecto a una superficie horizontal (Burguess y Hickey, 1992c). De
acuerdo con la USP, materiales que poseen un índice de Carr ≤ 10 y ángulos de reposo
por debajo de 30°, se les considera que poseen buenas propiedades de flujo. Por tanto,
las micropartículas preparadas a partir de Protanal® LF estarían dentro de esta categoría.
Es de esperarse que por su gran tamaño presenten ángulos de reposo bajos, debido a
que tienden a exhibir fenómenos de cohesión y de adhesión en menor proporción que las
partículas pequeñas.
De otro lado, la fluidez intrínseca se define como la capacidad del polvo para caer
libremente a través de un disco con un diámetro definido. Se encontró que las
micropartículas a base de alginato fluían libremente a través del orificio de 5 mm de
diámetro. Adicionalmente se determinó el coeficiente de fricción, que es un indicativo de
la fuerza requerida para hacer que las partículas se muevan o deslicen unas con otras. El
resultado indica que las micropartículas preparadas a partir de Protanal® LF requerirán la
aplicación de una fuerza igual o superior a 223.93 Pa/s para lograr su movimiento, valor
que resulta alto si se compara con otros materiales como los excipientes que se
evaluaron en este mismo trabajo y cuyos resultados se reportan y discuten más adelante
(Tabla 6-10). Como se ha mencionado, las micropartículas elaboradas con Protanal® LF
son lenticulares, densas y grandes lo que podría explicar el resultado de coeficiente de
fricción. En este sentido, como se observa a partir de la ecuación para su estimación
Resultados y Discusión 69
Figura 6-23: Velocidad de ganancia de agua por parte de las micropartículas preparadas
a partir de Protanal® LF a distintas condiciones de humedad relativa.
A partir de los resultados presentados en la Figura 6-24, se evidencia que cuando las
micropartículas preparadas a partir de Protanal® LF entran en contacto con el agua,
presentan una elevada y rápida capacidad de sorción de este solvente, logrando una
cantidad de 1.57 ml de agua absorbida en el equilibrio, en un proceso que se caracteriza
por una primera fase en la que a una velocidad de 2.21 ml/s se incorpora
aproximadamente el 50 % de agua en la estructura de la partícula, seguido por una
segunda fase que ocurre a una menor velocidad (0.29 ml/s). Como se ha mencionado
anteriormente, esto puede ser debido a la capacidad del alginato de formar puentes de
hidrógeno con el agua, gracias a la gran cantidad de grupos carboxilo e hidroxilo que
conforman su estructura. El proceso de absorción bifásico, sugiere que podría ocurrir una
rápida hidratación del polímero ubicado en la superficie de la partícula, generando una
barrera que ralentiza la posterior captación de agua en su interior.
74 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
los patrones de liberación del activo. Por tanto, la presión de compactación deberá ser
controlada como uno de los parámetros críticos del proceso. Igualmente deben
establecerse restricciones respecto a la cantidad máxima de partículas que puede ser
incorporada dentro de la matriz.
En este sentido, como se observa en la Figura 6-25, la liberación del activo depende de
la cantidad de micropartículas presentes en el medio de disolución. A medida que
aumenta la cantidad de partículas, la velocidad de liberación de la quercetina disminuye.
Las diferencias encontradas en los porcentajes de activo liberado para los lotes
empleados, podría deberse a que la quercetina no se encuentra uniformemente
distribuida en el interior de las micropartículas a base de alginato, como se explicará más
76 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Sin embargo, sumado al hecho de que las micropartículas formen la mencionada capa de
gel, el hinchamiento de las micropartículas también trae como consecuencia su erosión y
el que no pueda asumirse el cumplimiento de condiciones “sink” perfectas en el estudio
de liberación. Esto debido al cambio progresivo en la relación entre el medio de
disolución realmente disponible y el volumen de medio de disolución inicial. A medida
que transcurre el tiempo del ensayo de liberación, el hinchamiento de las micropartículas
provoca que la cantidad de medio de disolución disminuya paulatinamente. Dada la baja
solubilidad de la quercetina en agua (10 mg/l a 20 °C), el volumen de medio de disolución
que logre penetrar la capa de gel formada, será insuficiente para que el activo se
disuelva y se libere de la matriz polimérica. En otras palabras, los procesos de difusión y
posterior liberación de la quercetina desde la matriz de alginato se estarían llevando a
cabo en un volumen limitado de medio de disolución (Kim, 2000). Tal como se presenta
en la Figura 6-25, este efecto es más marcado a medida que se emplea una cantidad
mayor de partículas de alginato en el estudio de liberación. De acuerdo con los
resultados presentados en la Figura 6-25, se eligió una cantidad de 10 mg de
micropartículas para el desarrollo de los ensayos de liberación a otras condiciones de pH.
Como se observa en la Figura 6-26 se logran perfiles de liberación reproducibles entre
los tres lotes estudiados a condiciones de pH 1.0, 6.8 y 7.4 respectivamente.
Resultados y Discusión 77
Figura 6-26: Liberación de quercetina a partir de las micropartículas para las condiciones
de pH: a. pH 1.0, b. pH 6.8 y c. pH 7.4.
80 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Cuando se emplea solución reguladora de fosfatos para evaluar la liberación del activo a
partir de micropartículas a base de alginato, el hinchamiento de las partículas está
gobernado por el proceso de intercambio de iones, en este caso entre los iones K+ y Na+
Resultados y Discusión 81
Figura 6-28: Comportamiento de las micropartículas preparadas a partir de Protanal® LF conteniendo quercetina, en solución
reguladora de pH 6.8.
83 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-29: Comportamiento de las micropartículas preparadas a partir de Protanal® LF conteniendo quercetina, en solución
reguladora de pH 7.4.
84 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Los resultados presentados en la Figura 6-30 muestran un pequeño espesor del frente
de hinchamiento de las micropartículas a base de alginato a condición de pH 1.0 (aprox.
0.05 mm a las 7 h de estudio). Como se describió anteriormente, esto es debido a la
formación de ácido algínico en el medio de disolución, cuya capacidad de hinchamiento
es bastante menor que la del alginato de sodio. De acuerdo con Sriamornsak y col.
(2007), a valores de pH por debajo de 3, la capa de gel formada alrededor de la partícula
posee una consistencia poco viscosa y adhesiva, característica de la conversión del
Resultados y Discusión 85
alginato de sodio en ácido algínico. Así mismo, los autores reportan que el grado de
erosión de la matriz no supera el 30 % de la masa del alginato de partida,
comportamiento atribuido a que el gel es más resistente y gomoso. Las características
del gel previamente descritas para las partículas investigadas en esta tesis coinciden con
lo reportado por Sriamornsak y col. (2007), imposibilitando la visualización del frente de
difusión. De igual forma, a partir de las fotografías tomadas no fue posible distinguir la
aparición del frente de erosión. En conjunto, este comportamiento condujo a que la
cantidad de quercetina liberada a pH 1.0 (aprox. 12 %) fuera la más baja respecto a las
otras condiciones de pH investigadas (Figura 6-26 a).
De otro lado, la Figura 6-31 muestra que a pH 6.8 las micropartículas a base de alginato
presentan un frente de hinchamiento de aproximadamente 1.50 mm. Como se ha
explicado previamente, las matrices preparadas con alginato poseen una elevada
capacidad para hincharse en medios de pH cercanos a la neutralidad (pH 6.8), si se
compara con el comportamiento exhibido a pH ácido (pH 1.0), iniciando este proceso en
tanto entra en contacto directo con el medio de disolución (Sriamornsak y col., 2007). De
otro lado, Liew y col. (2006) han reportado que la capa de gel formada por el alginato a
valores de pH 6.8 posee un grado de rigidez tal que la hace muy poco susceptible a
erosionarse, constituyéndose así en una barrera más eficiente para la liberación del
activo. Esto está de acuerdo con los resultados de la Figura 6-31, donde se observa que
el frente de erosión alcanzó un valor mucho menor respecto al frente de hinchamiento
(aprox. 0.08 mm y 1.50 mm, a 225 min de ejecución del ensayo respectivamente). Así
mismo, la capa de gel formada se caracteriza por ser más viscosa al tacto respecto a la
presentada a pH 1.0, lo que coincide con lo reportado por Sriamornsak y col. (2007). Sin
embargo, a esta condición de pH el control sobre la liberación del activo desde las
micropartículas elaboradas con alginato es bastante limitado lográndose la máxima
liberación de quercetina (aprox. 60 %) en la primera hora de ejecución del estudio
(Figura 6-26 b).
logran microzonas en las que se concentran iones calcio dando a la partícula una
estructura heterogénea en cuanto a la gelificación del polímero.
excipientes de la matriz. Por tal razón, como componentes del granulado de excipientes
se emplearon almidón de maíz y almidón pregelatinizado en proporciones fijas del 60 % y
10 % respectivamente. El desempeño de estos materiales en el desarrollo de formas
farmacéuticas sólidas ha sido conocido en trabajos previos como el desarrollado por
Sánchez y Zuluaga (1999), por lo que no se consideró necesaria su caracterización
farmacotécnica. El 30 % restante de la formulación del granulado de excipientes se
reservó para investigar el efecto sobre la liberación del activo de coprocesados a base de
almidón – lactosa (Starlac®), celulosa microcristalina – lactosa (Microcelac®) e
hipromelosa – lactosa (Retalac®), los que sí requirieron su caracterización
farmacotécnica debido a que son materiales que se emplean por primera vez en nuestras
investigaciones.
Evaluación de la morfología
Figura 6-35: Morfología de las partículas de los coprocesados Starlac®, Microcelac® y Retalac® observadas en microscopio de luz
transmitida y polarizada con objetivo 20X.
94 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Así, el empaquetamiento de las partículas de Starlac® deja muy pocos espacios vacíos si
se le compara con el Microcelac® y el Retalac®, permitiendo que una mayor cantidad de
material se acomode en el volumen definido. Lo anterior puede explicarse considerando
la morfología y el tamaño de las partículas. Por la forma de las partículas de Starlac®,
podría afirmarse que su rearreglo es intermedio entre uno romboédrico y uno cúbico, con
lo que los espacios interpartícula serían los más pequeños respecto a los otros dos
materiales evaluados. Adicionalmente, dada la amplitud de la distribución de tamaño de
partícula para el Starlac®, es predecible que las partículas más pequeñas (finos) se
acomoden entre los espacios interpartícula de forma eficiente, aumentando el valor de
densidad aparente (Sinko y Singh, 2011a; Staniforth, 2002). Teniendo en cuenta que la
voluminosidad aparente es el inverso del valor de la densidad aparente, podría sumarse
a lo anterior que el material más voluminoso es el Retalac®; esto se debe quizás a su
forma irregular lo que resulta en arreglos espaciales caracterizados por mayores
espacios vacíos inter particulares comparado con los demás coprocesados estudiados.
96 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Tabla 6-10: Resultados de la caracterización de algunas de las propiedades farmacotécnicas de los coprocesados Starlac®,
Microcelac® y Retalac®.
97 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Los resultados de índices de Carr y de Hausner presentados en la Tabla 6-10 para los
materiales investigados, guardan el orden Starlac® < Retalac® < Microcelac®, en tanto
que para el índice de Hausner es Starlac® < Retalac® y Microcelac®. No obstante,
comparando estos resultados con la escala de fluidez reportada por la USP (USP 38,
2015) todos los materiales evaluados presentan buenas características de flujo con
índices de Carr ≤ 10 % e índices de Hausner entre 1.00 - 1.11 respectivamente. La Tabla
6-10 muestra que el índice de Carr para el Microcelac® es mayor que para el Retalac®,
situación que podría deberse en gran medida a que el coeficiente de variación asociado
al índice de Carr para el Retalac® es bastante elevado en comparación con el del
Microcelac®, indicando mayor dispersión entre los datos de las réplicas.
98 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
De otro lado, es importante tener en cuenta que el índice de Carr es una consecuencia
indirecta de la densidad aparente, el tamaño y la forma de las partículas, el área
superficial, el contenido de humedad y la cohesividad de un material, ya que todos estos
factores influyen en su determinación (USP 38, 2015). Así, el índice de Carr y el índice de
Hausner son medidas que permiten evaluar la importancia de las interacciones
interpartícula. Dado que para los tres materiales estudiados la densidad apisonada y la
aparente son cercanas en valor, es posible afirmar que las interacciones interpartícula
(fuerzas atractivas y de fricción) no son significativas (USP 38, 2015; Peleg, 1977;
Burguess y Hickey, 1992b).
De acuerdo con lo anterior, se puede afirmar que de los coprocesados para compresión
directa evaluados, para el Starlac® se presenta la menor influencia de las fuerzas
cohesivas sobre el flujo, seguido por el Microcelac®. Generalmente se espera que las
partículas de mayor tamaño presenten ángulos de reposo bajos debido a que tienden a
adherirse en menor proporción que las partículas pequeñas. Esto no se cumple para el
caso del Retalac® que es el coprocesado que presenta el tamaño de partícula más
Resultados y Discusión 99
grande, lo que pudo deberse a que en la determinación del ángulo de reposo para este
material, predominó el efecto de la morfología irregular de las partículas y no su tamaño.
A partir de los resultados presentados en la Figura 6-41c se evidencia que una vez el
Retalac® entra en contacto directo con el agua, el tiempo que requiere para alcanzar su
máxima capacidad de sorción es mayor respecto a los otros dos coprocesados
estudiados. Lo anterior podría atribuirse a que en las cadenas de la fracción del
coprocesado que corresponde a hipromelosa, debe ocurrir inicialmente un proceso de
relajación para posteriormente hincharse y así capturar el agua que las rodea (Bettini y
col., 2001). Las variaciones obtenidas en la medición podrían explicarse teniendo
presente que al estar la muestra expuesta al medio ambiente durante la ejecución del
ensayo, y dado su carácter higroscópico, la humedad relativa tendría algún efecto sobre
la capacidad de sorción del Retalac®.
De otro lado, según la Tabla 6-12 los coprocesados evaluados no presentaron problemas
de laminación. Desde el punto de vista del diseño de formas farmacéuticas sólidas, la
laminación es asociada con la fractura de la tableta en capas a causa de la elevada
velocidad de compresión, la elevada tensión residual en las paredes del punzón, las
108 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Los resultados obtenidos indican que el mayor cambio en el volumen lo presentaron los
compactos elaborados con Retalac®.
Otro de los ensayos efectuados a los compactos obtenidos durante la evaluación del
comportamiento bajo compresión de los materiales fue la determinación del tiempo de
desintegración. La desintegración se define como el estado en el cual cualquier residuo
de los compactos puestos en el estudio permanece en la rejilla o disco inferior del
aparato utilizado, y corresponde a una masa suave que no presenta un núcleo firme
palpable. La desintegración no implica la completa disolución de los compactos puestos
en el estudio (USP 38, 2015). Los resultados obtenidos evidenciaron que tanto el
110 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-42: Comportamiento de hinchamiento y gelificación de los comprimidos obtenidos con Retalac® durante el ensayo de
desintegración.
* No se muestra la imagen correspondiente a las 7 horas de ejecución del ensayo, debido a que gran parte del material ya estaba disperso en la canasta del
equipo.
113 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
(USP 38, 2015). Como se observa en la Figura 6-43, el granulado preparado a partir de
Retalac® tiene la distribución de tamaño de partícula más amplia (span 1.85), lo que se
traduce en una mayor presencia de finos. De otro lado, los gránulos preparados con
Starlac®, así como con su respectiva combinación con Retalac®, presentan tamaños de
gránulo muy cercanos (d50 alrededor de 250 µm), encontrándose mayor cantidad de finos
para el granulado preparado a partir de la combinación Starlac® - Retalac®.
De otro lado, la humedad de los granulados fue de 1.08 % ± 0.02 % para el granulado
que contenía Starlac®, de 0.82 % ± 0.02 % para aquel que contenía Retalac® y de 1.58 %
± 0.08 % para los granulados a base de Starlac® – Retalac®. En todos los casos se
cumplió con la especificación prevista (1 – 2 %), la que según la experiencia del grupo de
investigación y del proveedor de los coprocesados, permite la compresión.
Resultados y Discusión 115
De otro lado, los resultados presentados en la Tabla 6-13 muestran que las tabletas
preparadas a partir del granulado conteniendo la mezcla de los coprocesados Starlac® -
Retalac® son las de mayor peso y contenido de activo, y su dureza se encuentra dentro
del rango estipulado. Así mismo, permite una mayor homogeneidad en la cantidad de
micropartículas presentes por tableta lo que se manifiesta en el menor valor de
coeficiente de variación en los resultados de valoración del activo. Desde el punto de
vista del desarrollo de la operación, en estos ensayos se logró un arranque de la
máquina con mayor facilidad, traduciéndose en la obtención de un mayor número de
116 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
tabletas comparado con los otros dos granulados trabajados. Por su parte, el granulado a
base de Starlac® presentó un buen desempeño en el equipo en el momento de efectuar
la compresión, obteniéndose valores intermedios para el peso, la altura, la dureza y el
contenido de activo, comparándolas con aquellas preparadas a partir de los granulados
conteniendo Retalac® y Starlac® - Retalac®.
De otro lado, las tabletas preparadas a partir del granulado a base de Retalac® no
permitieron un control marcado sobre el tiempo de liberación de la quercetina (Figura 6-
44), comportamiento que no se esperaba teniendo en cuenta los resultados obtenidos
para este coprocesado durante las pruebas de caracterización farmacotécnica. De
hecho, podría decirse que estas tabletas presentaron un comportamiento similar al de las
tabletas preparadas a partir del granulado conteniendo Starlac®, donde las
micropartículas se vieron expuestas de forma temprana al medio de liberación. Lo
118 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
anterior podría estar asociado con la dureza de los comprimidos preparados a partir del
granulado a base de Retalac® y el grado de distribución de las micropartículas en su
interior. Las tabletas de Retalac® tienen los valores de dureza más bajos entre los
compactos estudiados (Tabla 6-13), lo que pudo comprometer la integridad del
comprimido en una magnitud tal, que una vez se encontraba en el medio de disolución
podría verse favorecida la rápida entrada de agua en el núcleo de la tableta. Sumado a lo
anterior, dada la elevada heterogeneidad en la distribución de las micropartículas al
interior de la tableta, según lo proponen Sandoval y col. (2009), quizás aquellas
partículas que se encontraban hacia la superficie del comprimido comenzaron a liberar el
activo antes de que la hipromelosa se hidratara, hinchara y formara la matriz de gel
característica de los comportamientos observados en la Figura 6-42.
Así mismo, los resultados presentados en la Figura 6-44 muestran que las tabletas
preparadas a partir del granulado a base de la mezcla de los coprocesados Starlac® -
Retalac® retardan la liberación del activo, respecto a los otros granulados estudiados. Lo
anterior podría deberse al efecto combinado de dos factores: la dureza de los
comprimidos y el contenido de almidón dentro de su formulación. Por un lado, la dureza
de las tabletas (Tabla 6-13) les permite mantener su integridad por más tiempo cuando
son sumergidas en el medio de disolución. En cuanto a los componentes presentes en la
tableta, la fracción del coprocesado correspondiente al almidón del Starlac® al estar
íntimamente mezclado con la fracción del coprocesado correspondiente a la hipromelosa
del Retalac®, podría facilitar la formación de los poros en la tableta de una forma más
homogénea en toda su estructura. De esta forma, la entrada del medio de liberación
hacia el interior de la tableta pudo verse regulada, probablemente por un mecanismo de
capilaridad predominante, provocando que el proceso de hinchamiento de la estructura
aportada por la hipromelosa ocurriera gradualmente. Como consecuencia, las
micropartículas pudieron quedar atrapadas en la estructura de gel aportada por la
hipromelosa como se observa en la Figura 6-47, produciendo de esta forma la lenta
liberación del activo desde su estructura.
Resultados y Discusión 119
Figura 6-44: Estudio de liberación in vitro de quercetina desde las matrices sólidas
preparadas a partir de los granulados de Starlac®, Starlac® - Retalac® y Retalac®: a. pH
6.8 y b. pH 7.4.
120 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-45: Comportamiento de desintegración de las tabletas preparadas a partir del granulado de Starlac® a pHs 6.8 y 7.4.
121 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-46: Comportamiento de desintegración de las tabletas preparadas a partir del granulado de Retalac® a pHs 6.8 y 7.4.
122 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
Figura 6-47: Comportamiento de desintegración de las tabletas preparadas a partir del granulado de Starlac® - Retalac® a pHs 6.8 y
7.4.
123 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
De forma complementaria los datos de los perfiles de liberación obtenidos a partir de las
matrices a base de la mezcla de los coprocesados (Figura 6-44), fueron tratados
matemáticamente según los modelos cinéticos de orden cero, primer orden, Higuchi y
Korsmeyer – Peppas, con el propósito de entender mejor los procesos involucrados en la
liberación del activo. Es necesario aclarar que únicamente se emplearon los resultados
de la cantidad de activo liberada a partir de las tabletas preparadas con el granulado
conteniendo Starlac® - Retalac®, debido a que en las otras dos formulaciones estudiadas
solo se dispone de tres puntos en la gráfica de liberación de quercetina, y a que la
máxima cantidad de activo que fue posible cuantificar de forma confiable con el método
analítico empleado, fue la que se liberó a las 2 h de duración del ensayo. Por tal razón,
para estos casos no se avanzó hasta el análisis de los modelos cinéticos que podrían
explicar los comportamientos obtenidos.
Tabla 6-14: Resultados de la evaluación del ajuste algunos modelos cinéticos del perfil
de liberación de activo obtenido a pH 6.8 y a pH 7.4 para tabletas conteniendo
micropartículas a base de alginato y quercetina y preparadas con Starlac® - Retalac®.
Los resultados presentados en la Tabla 6-14 muestran que los datos del perfil de
liberación de la quercetina a partir de las matrices sólidas preparadas empleando el
granulado Starlac® - Retalac® y en medio de liberación pH 7.4, son explicados de mejor
forma según el modelo de Korsmeyer – Peppas, el que ha sido propuesto para aquellos
casos en los que no se conoce con exactitud el mecanismo de liberación o donde pueden
estar involucrados dos o más mecanismos de liberación (Costa y Sousa, 2001; Sandoval
y col., 2008). Teniendo en cuenta que el valor del exponente n es igual a 1.0, es posible
que la liberación de la quercetina a partir de los comprimidos ocurra principalmente
124 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
micropartículas de alginato formuladas en matrices sólidas
mediante un Transporte Caso II, donde se presentan procesos de relajación con posterior
erosión de la matriz. No obstante, considerando el comportamiento descrito previamente
cuando se investigó la desintegración de compactos a base de Retalac® (Figura 6-42),
podrían ocurrir además procesos de hinchamiento y erosión de dicha matriz.
De otro lado, a partir de los resultados reportados en la Tabla 6-14, no fue posible
analizar el comportamiento de la liberación de la quercetina a pH 6.8 empleando los
modelos cinéticos propuestos. Lo anterior, debido a que el coeficiente de determinación
obtenido en el análisis de datos para todos los casos es bajo, indicando que en la
presente investigación, la cinética de liberación de quercetina bajo esta condición de pH
no se ajusta a ningún modelo entre los seleccionados.
7.1 Conclusiones
De acuerdo con los resultados obtenidos, se puede concluir que el tamaño de partícula
es determinado por la naturaleza del alginato, su concentración y el calibre de la aguja de
extrusión. Así, los menores tamaños de partícula (dvs 0.40 y span 0.73) se logran con
alginato de sodio Protanal® LF, a una concentración de 1.5 % y calibre de aguja de
extrusión 27 G. La temperatura y el tiempo de secado no influencian el tamaño de la
partícula ni su dureza, lo que puede estar relacionado con la consolidación de la
estructura de la partícula, la que una vez lograda, no es modificada por condiciones
externas. De forma complementaria, el estudio orientado a evaluar la incidencia del
volumen adicionado de dispersión de alginato, el pH de la solución entrecruzante y la
concentración disponible de iones Ca2+ sobre el tamaño de las partículas, reveló que la
128 Estudio del comportamiento de liberación de quercetina a partir de
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