La fotocolorimetría es un método cuantitativo usado para hallar la concentración de una muestra

a través de la medición de la cantidad de luz absorbida por una sustancia coloreada. Como
estudiantes de medicina es muy útil aprender este método pues nos servirá más adelante para
calcular las concentraciones de determinadas soluciones en los experimentos que se realizaran en
el laboratorio.

También se usa en los laboratorios médicos como herramienta para hallar las concentraciones de
glucosa, hemoglobina y diversos componentes de la sangre.

Está basado en las siguientes leyes de absorción:

Cuando la luz atraviesa una muestra, solo una fracción de ella es transmitida. La proporción de luz
transmitida se denomina transmitancia (T).

 Ley de Lambert
Cuando un rayo de luz pasa a través de un medio absorbente, su intensidad disminuye
exponencialmente a medida que la longitud del medio aumenta.
 Ley de Beer
Cuando un rayo de luz pasa a través de un medio absorbente, su intensidad disminuye
exponencialmente a medida que la concentración del medio absorbente aumenta.
 Ley de Lambert-Beer
Relación exponencial entre la transmisión de la luz a través de una sustancia y la
concentración de la sustancia, así como también entre la transmisión y la longitud del
cuerpo que la luz atraviesa.
6.

Calcular la concentración de la muestra problema por los métodos

A)

B) Analíticamente, multiplicando la absorbancia por el Fc promedio y el factor de dilución

Tenemos dos muestras problema que en primer lugar se hizo una comparación del color de estas
con las de las muestras estándar, evidenciando así que una de ellas poseía un color similar a las
estándar, en cambio la otra era de un color más intenso.

Se procedió a diluir la muestra de color más intenso agregando agua destilada en una proporción
de 1 a 29 (siendo 0.5 de muestra y 14.5 de agua),para que se asemeje al color de las muestras
estándares.

Finalmente llevar ambas muestras problema al espectrofotómetro, donde nos dará sus
absorbancias.

[Mp] = Fc (promedio) x absorbancia x factor de dilución

Fc (promedio) = 6,68

[Mp1] = 6,86 x 0,396 = 2,71 mg %

[Mp2] = 6,86 x 0,333 x 30 = 68,53 mg %

Absorbancia Factor de dilución Concentración

MP1 No diluida 0,396 - 2,71 mg %
MP2 Diluida 0,333 30 68,53 mg %
2. Mencione los factores que afectan la Ley de Lambert y Beer.

Los factores que afectan a esta ley son los siguientes:

 No es aplicable a concentraciones mayores a 0,01 M pues en disoluciones concentradas la

distancia entre partículas absorbentes es muy pequeña lo que produce una alteración en
la absorción de la longitud de onda.se puede eliminar mediante la disolución.
 Si la radiación usada no es monocromática.
 Presencia de impurezas o falta de uniformidad.
 Desviaciones químicas por existencia de reacciones entre el absorbente y el disolvente.