UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMETO DE FARMACIA
AREA DE MICROBIOLOGIA
Jerson Fabiana Santamaria Meneses 25151463

El siguiente es un informe que recopila la información, datos y procedimientos realizados tras la emergencia
generada al regreso de la sonda Mars Science Laboratory – MSL, conocida como Curiosity y la posterior
liberación y contención de un patógeno extraño que generó una pandemia.

El astromóvil de exploración marciana Curiosty, fue lanzado el 26 de noviembre de 2011 por la NASA, con la
misión de elaborar una descripción cartográfica de la distribución y concentración de elementos
químicos y minerales en la superficie del planeta, así como la búsqueda de hielo y agua, reconocimiento
esencial para una futura misión tripulada a Marte y consecuente colonización y explotación de recursos.

Debido a la falta de identificación de riesgos biológicos y a la aplicación inadecuada de procedimientos, un

patógeno fue liberado mientras las muestras recolectadas eran analizadas por el Departamento de Geología.
Se cree que el patógeno escapó tras la fragmentación de un mineral congelado con presencia de hielo en su
superficie, la cual se derritió por el calor generado por la sierra de disco de diamante. Al parecer los
investigadores de la NASA fueron los primeros infectados, estos se encontraban pesando y empacando material
particulado después del proceso de molienda.

El patógeno escapó de las instalaciones de la NASA y el brote comenzó como un resfriado común afectando a
personas que fuman cigarrillo hasta llevarlos a una neumonía mortal; la instalación principal de la NASA en
Cabo Cañaveral, a unos 72 km de Orlando, se convirtió en el principal vector de propagación dada la afluencia
turística de la zona (más de 50 millones de visitantes del mundo cada año), la rápida propagación puso en alerta
al mundo entero y la OMS declaró la pandemia por un agente infeccioso, trasmitida de persona a persona, con
una mortalidad significativa del 50% al 90%, generando alerta Nivel 6.

Se convocó a las grandes mentes científicas a nivel internacional para la investigación y desarrollo de una cura,
incluyendo un equipo técnico de la Universidad Nacional de Colombia, liderado por el profesor Milton Josué
Crosby Granados, reconocido por sus estudios en inmunología, producción y caracterización de anticuerpos,
farmacia experimental y aportes a los métodos para el estudio del ciclo de la infección y desarrollo de
anticuerpos monoclonales de bacterias intracelulares. Él y un grupo de sus mejores estudiantes, diseñaron los
procedimientos a seguir para identificar los riesgos, mitigar y corregir la epidemia a nivel mundial.

Para el aislamiento del microorganismo y la caracterización microbiología del mismo, se tomaron muestras
hematológicas, secreción nasal y frotis de garganta, provenientes de algunos pacientes enfermos. También se
realizó un muestreo postmorten del baso, pulmón y líquido pleural, para identificar los daños y cambios
patológicos en los distintos órganos. Previo a la toma de muestra, fue necesario un análisis de riesgo para el
desarrollo de estos procedimientos ya que se encontró contaminación en las uniones de goma alrededor de las
ventanas, en los componentes de los trajes espaciales, en los aislantes de cables de cobre, en las tuberías y
en los dispositivos de comunicación de la nave y las instalaciones en Cabo Cañaveral. Por lo anterior, se
recomendó un procedimiento de limpieza y desinfección que incluía alcohol isopropílico y fenol.

Figura 1: Procedimiento de toma de muestras

La vestimenta y el equipo de protección personal para la recolección de muestras fueron diseñados para actuar
como barrera y reducir al mínimo el riesgo de exposición a aerosoles, salpicaduras e inoculación accidental. Se
inoculó 1 ml de muestra de secreciones y 1 gramo de muestra de tejidos en un tubo con caldo común compuesto
por: Triptona 5g, Extracto de carne 1g, Cloruro sódico 5g, Extracto de levadura 2g, y se incubó a 37 ºC
aproximadamente, durante 48 horas. Con este caldo de cultivo mixto se sembraron dos placas de agar nutritivo,
una mediante la técnica del agotamiento de asa y otra mediante la de estrías escocesas.

Se realizó una identificación macroscópica de la colonia, describiendo sus características: tamaño, forma,
consistencia y color. Luego de su aislamiento, se usó el recuento por técnicas espectrométricas y se realizaron
diluciones seriadas a partir del cultivo del microorganismo aislado para obtener distintas concentraciones que
nos sirvieron como patrón de calibración. Con esta técnica, conseguimos obtener un recuento del número de
bacterias en el cultivo y determinar la cinética del crecimiento bacteriano, determinada por la curva de
crecimiento encontrada, a su vez una herramienta útil para identificar el tiempo de propagación y el tiempo en
el que se da la repuesta inmune.

Figura 2: Procedimiento de identificación microbiológica

Por último, dada la emergencia y urgencia, se optó por la técnica PCR, que basada en la filogenia en ADN
bacteriano, permitió identificar la fuente infecciosa, un microrganismo bacteriano estrechamente relacionado
con otras cepas presentes en la Península mexicana de Yucatán. Pruebas de carbono 14 indican una
antigüedad de las muestras de 65,5 millones de años, lo que apoya la teoría de que un meteorito impactó la
tierra llevando el microrganismo a través del espacio hasta Marte, donde fue preservado por las bajas
temperaturas. Las características patológicas de los distintos tejidos concluyeron que se trata de un tipo de
neumonía intersticial producida por una bacteria gram positiva emparentada con Staphylococcus aureus spp.

Se observó que la infección era más grave en fumadores, ya que la exposición al humo de tabaco ocasiona
variadas alteraciones en la respuesta inmune celular y humoral de los individuos, incluyendo una disminución
en los niveles circulantes de inmunoglobulinas, inhibición de la respuesta de anticuerpos a ciertos antígenos,
disminución del recuento sanguíneo y pulmonar de linfocitos CD4+ y aumento de CD8+, disminución de la
actividad fagocitaria y liberación de citoquinas pro inflamatorias. El patógeno desarrolló resistencia a
antibióticos, el uso de betalactamicos y aminoglucósidos fue inadecuado para las características de la neumonía
intersticial, en donde el patógeno desarrolló betalactamasas, por la baja biodisponibilidad del tejido pulmonar y
pleural de los pacientes. Una concentración inferior a la mínima inhibitoria necesaria y los vectores bacterianos
presentes en el hospital, promovieron el desarrollo de distintos mecanismos de resistencia a los betalactamicos,
los aminoglucósidos son de un espectro más específico hacia las bacterias gram negativas y algunas pocas
gram positivas además de la resistencia, por lo que se declaró que fue una falla terapéutica debido a un error
médico en la prescripción. Se encontraron fallas en los procedimientos de limpieza en la UCI del hospital donde
fueron atendidos los primeros afectados, se recomendó la revisión de los procedimientos y protocolos de
limpieza.

el análisis serológico de los pacientes mostró la presencia de anticuerpos, que aglutinan la bacteria en placas
lo que indica una fase aguda de la infección y la respuesta inmune generada. Las pruebas para identificar
anticuerpos específicos son llevadas a cabo, titulando seriadamente antisueros en diluciones al doble en
presencia de una cantidad constante de antígeno; para la obtención de este suero se tomaron muestras de
pacientes ya sanos de esta manera asegurarnos de la producción de anticuerpos, y se realizó la inmunización
en conejos para la obtención de las cantidades requeridas. Este procedimiento arrojo como resultado la
identificación de una proteína de membrana que actuaba como antígeno y la cual desencadenaba una
respuesta inmune especifica.

Para la producción de la vacuna, en general, las operaciones se dividieron en : 1) el procesamiento upstream,

que consistió en la obtención de los antígenos que conformarán la vacuna, en nuestro caso gracias a el análisis
serológico de los pacientes mostró la presencia de anticuerpos, que aglutinan la bacteria en placas, se identificó
un antígeno de membrana de tipo proteico. El procesamiento upstream incluyo tanto la incubación o
fermentación del agente inmunogénico, como la obtención de la materia prima principal parte una cepa
bacteriana, es completamente necesario que esta sea caracterizada a nivel genético ya que servirá como Banco
Celular Maestro, del cual se derivan múltiples Bancos Celulares de Trabajo para garantizar un suministro
esencialmente ilimitado de 2) el procesamiento downstream, donde se separaron y purificaron los antígenos,El
procesamiento downstream incluyo varias operaciones de cromatografía, centrifugación y filtración y 3) la
formulación, que incluye la adición de excipientes como los adyuvantes y la dilución para obtener la potencia
adecuada como el hidróxido de aluminio. Por último el envasado debe presentar todas las condiciones que
garanticen su esterilidad.

Figura 3. Proceso para la producción de una vacuna con los controles que se deben realizar en cada operación (gris oscuro) y las
propiedades que se deben caracterizar en las materias primas y productos en proceso o terminados (gris claro).

Cabe resaltar que la producción de vacunas suele realizarse en campañas. Así mismo, el procesamiento de las
vacunas se realiza en sistemas cerrados, por lo cual no hay contacto directo entre el producto y el ambiente de
las áreas. Aun así es necesario el manejo de las áreas de producción, garantizando calidad del aire y gradientes
de presión para prevenir contaminación.

Figura 3: Distribución planta, Calidad del aire por áreas, Gradiente de presiones entre las diferentes áreas.

La vacuna fue probada y usada con éxito, y gracias a ella fue contenida la epidemia, reduciendo el riesgo de
infección hasta en un 60 %, y su tasa de mortalidad disminuyo al 5% de los infectados.
Para diseñar una estrategia terapéutica El método Kirby-Bauer es empleado para determinar la sensibilidad de
un agente microbiano frente al microorganismo de interés. Este método de difusión en gel, fue aplicado según
las recomendaciones y el método oficial descrito en la USP (33-35), además de confirmar la Resistencia
bacteriana a betalactamicos y aminoglucósidos, el microrganismo es sensible a rifampicina y vancomicina.
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