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rc Entender claramente los procesos de Bio-remediación y sus aplicaciones.

 cc
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rc =efinir los procesos biológicos naturales de las plantasc
rc Äediante el uso de Bio-remediación dar un apoyo a la agriculturac
rc =eterminar las formas posibles de descontaminación in-situc
rc realizar un estudio de las labores a realizarse para evitar la perturbación de los lugares
a descontaminarse y sus alrededoresc
rc ðomentar el cuidado del ambiente, tanto plantas, árboles y animales que contribuyen
a mantener el equilibrio del medio.c
c


c
c
El crecimiento de la población y el avance de las actividades industriales a partir del siglo XIX
trajeron serios problemas de contaminación ambiental. =esde entonces, los países generan
más desperdicios, muchos de ellos no biodegradables o que se degradan muy lentamente en la
naturaleza, lo que provoca su acumulación en el ambiente sin tener un destino seguro o un
tratamiento adecuado. =e este modo, en lugares donde no existe control sobre la emisión y el
tratamiento de los desechos, es factible encontrar una amplia gama de contaminantes.

Habitualmente, los casos de contaminación que reciben mayor atención en la prensa son los
derrames de petróleo. Pero, en el mundo constantemente están sucediendo acontecimientos
de impacto negativo sobre el medio ambiente, incluso en el entorno directo, generados por un
gran abanico de agentes contaminantes que son liberados al ambiente. Un ejemplo lo
constituyen algunas industrias químicas que producen compuestos cuya estructura química
difiere de los compuestos naturales, y que son utilizados como refrigerantes, disolventes,
plaguicidas, plásticos y detergentes. El problema principal de estos compuestos es que son
resistentes a la biodegradación, por lo cual se acumulan y persisten en el ambiente y lo
perjudica tanto como a los seres vivos, entre ellos el ser humano.

En las últimas décadas, entre las técnicas empleadas para contrarrestar los efectos de los
contaminantes, se comenzó a utilizar una práctica llamada Bio-remediación. El término Bio-
remediación fue acuñado a principios de la década de los ͚80, y proviene del concepto de
Y
, que hace referencia a la aplicación de estrategias físico-químicas para evitar el
daño y la contaminación en suelos. Los científicos se dieron cuenta que era posible aplicar
estrategias de remediación que fuesen biológicas, basadas esencialmente en la observación de
la capacidad de los microorganismos de degradar en forma natural ciertos compuestos
contaminantes.

Entonces, la Bio-remediación surge como una rama de la biotecnología que busca resolver los
problemas de contaminación mediante el uso de seres vivos (microorganismos como hongos o
bacterias y plantas) capaces de degradar compuestos que provocan desequilibrio en el medio
ambiente, ya sea suelo, sedimento, fango o mar.

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Los organismos que se utilizan para estos fines están presentes en el medio. Tal es el caso de
bacterias como Lactobacillus, Bacillus, Spirillum, Pseudomonas͙o de hongos como Aspergillus,
Penicillium, Candida, Äucor. Estos organismos se han utilizado para eliminar el vertido
producido en el mar o en las playas como consecuencia de mareas negras, tal es el caso de la
limpieza de 10.000 m de playa del Parque Nacional de las Islas Atlánticas que sufrió los efectos
de la marea negra. Este tipo de bacterias también fueron utilizadas en la limpieza de 110 millas
de playa en el vertido del Exxon Valdez en Alaska en Äarzo de 1989. Estas bacterias eliminan
los hidrocarburos al digerirlos en su metabolismo.

c c

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c
También existen bacterias quimioautotróficas, que actúan a pH ácidos y temperaturas
elevadas, que eliminan minerales sulfurados al utilizarlos como sustrato para la obtención de
energía. Estas mismas bacterias pueden utilizarse en la recuperación de fósforo y de metales
asociados a óxidos, para ello ha de generarse un medio ácido, para que las bacterias puedan
actuar.

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c  cc
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ðig. 3. Esquema de Bio-remediación

Todos estos organismos son susceptibles de selección, de mejora y de manipulación mediante

técnicas de ingeniería genética. Esto plantea numerosas dudas e inquietudes debido al escaso
conocimiento que se tiene de las interacciones que puedan existir con los organismos
modificados genéticamente, tanto entre sí como entre ellos y el medio. =ebe existir un control
muy estricto de estos organismos cuando han sido manipulados mediante técnicas de
ingeniería genética dado que pueden competir de forma ventajosa con los organismos del
medio desplazándolos, ocasionando con esto alteraciones en las redes tróficas. Asimismo
existe el riesgo de que una proliferación de estos organismos pueda causar daños en las
instalaciones humanas, de no existir controles, como es el caso de los depósitos de
combustible, tanques de combustible, yacimientos de hidrocarburos que puedan ser
contaminados con bacterias devoradoras de petróleo.

cc !c
c
En los procesos de Bio-remediación generalmente se emplean mezclas de ciertos
microorganismos o plantas capaces de degradar o acumular sustancias contaminantes tales
como metales pesados y compuestos orgánicos derivados de petróleo o sintéticos.
Básicamente, los procesos de Bio-remediación pueden ser de tres tipos:

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"#$c%&cc cc !$c

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Este tipo de degradación consiste en el empleo de enzimas en el sitio contaminado con el fin
de degradar las sustancias nocivas. Estas enzimas se obtienen en cantidades industriales por
bacterias que las producen naturalmente, o por bacterias modificadas genéticamente que son
comercializadas por las empresas biotecnológicas.
Por ejemplo, existe un amplio número de industrias de procesamiento de alimentos que
producen residuos que necesariamente deben ser posteriormente tratados.
En estos casos, se aplican grupos de enzimas que hidrolizar (rompen) polímeros complejos
para luego terminar de degradarlos con el uso de microorganismos. Un ejemplo lo constituyen
las enzimas lipasas (que degradan lípidos) que se usan junto a cultivos bacterianos para
eliminar los depósitos de grasa procedentes de las paredes de las tuberías que transportan los
efluentes.

Otras enzimas que rompen polímeros utilizados de forma similar son las celulosas, proteinasas
y amilasas, que degradan celulosa, proteínas y almidón, respectivamente.
Además de hidrolizar estos polímeros, existen enzimas capaces de degradar compuestos
altamente tóxicos. Estas enzimas son utilizadas en tratamientos en donde los microorganismos
no pueden desarrollarse debido a la alta toxicidad de los contaminantes. Por ejemplo, se
emplea la enzima peroxidasa para iniciar la degradación de fenoles y aminas aromáticas
presentes en aguas residuales de muchas industrias.

—$c  !c c

En este tipo de remediación se usan microorganismos directamente en el foco de la

contaminación. Los microorganismos utilizados en Bio-remediación pueden ser los ya
existentes (autóctonos) en el sitio contaminado o pueden provenir de otros ecosistemas, en
cuyo caso deben ser agregados o inoculados.

La descontaminación se produce debido a la capacidad natural que tienen ciertos organismos

de transformar moléculas orgánicas en sustancias más pequeñas, que resultan menos tóxicas.
El hombre ha aprendido a aprovechar estos procesos metabólicos de los microorganismos, de
esta forma, los microorganismos que pueden degradar compuestos tóxicos para el ambiente y
convertirlos en compuestos inocuos o menos tóxicos, se aprovechan en el proceso de Bio-
remediación. =e esta forma, reducen la polución de los sistemas acuáticos y terrestres.

La gran diversidad de microorganismos existente ofrece muchos recursos para limpiar el medio
ambiente y, en la actualidad, esta área está siendo objeto de intensa investigación.
Existen, por ejemplo, bacterias y hongos que pueden degradar con relativa facilidad petróleo y
sus derivados, benceno, tolueno, acetona, pesticidas, herbicidas, éteres, alcoholes simples,
entre otros. Los metales pesados como uranio, cadmio y mercurio no son biodegradables, pero
las bacterias pueden concentrarlos de tal manera de aislarlos para que sean eliminados más
fácilmente.

Las actividades microbianas en el proceso de Bio-remediación se pueden resumir en el

siguiente esquema:

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c ccc 

c  cc
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c

ðig. 5: ͞ÄETABOLISÄO ÄICrOBIANO͟. Los microorganismos ingieren contaminantes como fuente de carbono y
algunos nutrientes como fósforo y nitrógeno. La digestión de estos compuestos en sustancias más simples como
parte del metabolismo del microorganismo, puede resultar en la degradación del compuesto en forma parcial
(transformación) o total a dióxido de carbono (CO 2) y agua (H 2O).

ß$c  !ccc) !*c

La fitorremediación es el uso de plantas para limpiar ambientes contaminados. Aunque se

encuentra en desarrollo, constituye una estrategia muy interesante, debido a la capacidad que
tienen algunas especies vegetales de absorber, acumular y/o tolerar altas concentraciones de
contaminantes como metales pesados, compuestos orgánicos y radioactivos. La
fitorremediación ofrece algunas ventajas y desventajas frente a los otros tipos de Bio-
remediación:

Ventajas:
wc Las plantas pueden ser utilizadas como bombas extractoras de bajo costo para depurar
suelos y aguas contaminadas.
wc Algunos procesos degradativos ocurren en forma más rápida con plantas que con
microorganismos.
wc Es un método apropiado para descontaminar superficies grandes o para finalizar la
descontaminación de áreas restringidas en plazos largos.

Limitaciones&c
c
wc El proceso se limita a la profundidad de penetración de las raíces o aguas poco
profundas.
wc Los tiempos del proceso pueden ser muy prolongados.
wc La Bio-disponibilidad de los compuestos o metales es un factor limitante de la captación.

Las plantas pueden incorporar las sustancias contaminantes mediante distintos procesos que se
representan en la siguiente ilustración y se explican en la tabla que continúa:

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c ccc 

c  cc
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c

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ðig. 6. ðITOrrEÄE=IACIÓN: Tipos de fitorremediación, en donde se indica la zona de la planta en donde ocurre el
proceso.

c +cc ,c  !cc

"-!c Las plantas se usan para concentrar metales Cadmio, cobalto, cromo, niquel,
en las partes cosechables (hojas y raíces) mercurio, plomo, plomo selenio, zinc
'!c Las raíces de las plantas se usan para Cadmio, cobalto, cromo, niquel,
absorber, precipitar y concentrar metales mercurio, plomo, plomo selenio, zinc
pesados a partir de efluentes líquidos isótopos radioactivos, compuestos
contaminados y degradar compuestos fenólicos
orgánicos
"'!cLas plantas tolerantes a metales se usan para Lagunas de deshecho de yacimientos
reducir la movilidad de los mismos y evitar el mineros. Propuesto para fenólicos y
pasaje a napas subterráneas o al aire. compuestos clorados.
" ,!c Se usan los exudados radiculares para Hidrocarburos derivados del petróleo
promover el desarrollo de microorganismos y poliaromáticos, benceno, tolueno,
degradativos (bacterias y hongos) atrazina, etc
"'!c Las plantas captan y modifican metales Äercurio, selenio y solventes
pesados o compuestos orgánicos y los liberan clorados (tetraclorometano y
a la atmósfera con la transpiración. triclorometano)
"#!c Las plantas acuáticas y terrestres captan, Äuniciones (TNT, =NT, r=X,
almacenan y degradan compuestos orgánicos nitrobenceno, nitrotolueno), atrazina,
para dar subproductos menos tóxicos o no solventes clorados, ==T, pesticidas
tóxicos. fosfatados, fenoles y nitrilos, etc.

Se conocen alrededor de 400 especies de plantas con capacidad para hiperacumular

selectivamente alguna sustancia. En la mayoría de los casos, no se trata de especies raras, sino
de cultivos conocidos. Así, el girasol (V 
c 

) es capaz de absorber en grandes

cantidades el uranio depositado en el suelo. Los álamos (género  

) absorben
selectivamente níquel, cadmio y zinc. También la pequeña planta Y c  de gran
utilidad para los biólogos es capaz de hiperacumular cobre y zinc.

cc
c ccc 

c  cc
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 c
c

Incluso existen especies vegetales capaces de eliminar la alta salinidad del suelo, gracias a su
capacidad para acumular el cloruro de sodio.
En general, hay plantas que convierten los productos que extraen del suelo a componentes
inocuos, o volátiles. Pero cuando se plantea realizar un esquema de fitorremediación de un
cuerpo de agua o un área de tierra contaminados, se siembra la planta con capacidad (natural
o adquirida por ingeniería genética) de extraer el contaminante particular, y luego del período
de tiempo determinado, se cosecha la biomasa y se incinera o se le da otro curso dependiendo
del contaminante. =e esta forma, los contaminantes acumulados en las plantas no se
transmiten a través de las redes alimentarias a otros organismos. c
c
cc# c c#. cc !c
c
En los últimos años, los avances en ingeniería genética han permitido el desarrollo de
organismos transgénicos. Y la biorremediación hace uso de esta nueva tecnología para resolver
varios problemas de contaminación.

Äuchos grupos de investigación están desarrollando en el laboratorio, plantas y

microorganismos genéticamente modificados para ser mejores agentes de biorremediación, es
decir que degraden mejor o más eficientemente a los agentes contaminantes.

Un grupo de investigación utilizó un gen llamado
Y, que codifica para la enzima Y 
 c
 c  c
YY , altamente tóxico, que cataliza su reducción hasta la forma volátil y poco
tóxica de mercurio elemental, gaseoso en condiciones de temperatura no muy elevadas. Estos
investigadores, consiguieron la transferencia del gen bacteriano
Y a cultivos de Y  Y c

 Y (álamo amarillo). El gen se expresó adecuadamente en ese material vegetal, de modo
que las plántulas regeneradas germinaron y crecieron vigorosamente en los medios de cultivo,
que contenían niveles de iones mercurio que son normalmente tóxicos, siendo capaces de
captarlo en su forma iónica y de reducirlo en el interior de la planta, tras lo cual era liberado en
la forma gaseosa no tóxica.

Se están perfeccionando nuevos métodos de biotecnología para el tratamiento del agua, que
eliminarán los compuestos que contengan fósforo, nitrógeno y azufre. Este bioprocesamiento
se está extendiendo a varios procesos industriales, entre ellos los de las industrias
petroquímicas, químicas y mineras, con el uso de bacterias oxidantes.

La Bio-remediación mediante bacterias ofrece grandes posibilidades de limpiar y

descontaminar sistemas complejos y gracias a sus ventajas económicas y ambientales será una
de las tecnologías más desarrolladas durante este siglo. Se están utilizando cepas
especializadas de microorganismos de alta actividad para tratar agentes contaminantes en
diferentes sectores, como las industrias que utilizan catalizadores, las textiles, las curtiembres,
el procesamiento de celulosa y almidón, la galvanoplastia, la minería, el desengrasado y
recubrimiento de superficies y la impresión.

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c
Entre los desarrollos biotecnológicos que se están llevando a cabo para procesos de
fitorremediación se encuentran los siguientes:

Oc rizofiltración para la extracción de Uranio de aguas subterráneas en Asthabula, Ohio, EEUU.

Oc rizofiltración a nivel de cultivo c  Y c para detoxificar compuestos fenólicos en aguas
contaminadas (por ejemplo los derivados de los herbicidas tradicionales y contaminantes

cc
c ccc 

c  cc
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 c
c

como el 2,4-=) en la Universidad Nacional de río Cuarto, Córdoba por el grupo de

investigación de la =ra. Elizabeth Agostini.
Oc ðitovolatilización de mercurio (Hg) por medio de plantas transgénicas (Y c
) que fueron transformadas con dos genes provenientes de microorganismos que
pueden transformar el mercurio iónico en mercurio más estable.
Oc Plantas transgénicas de tabaco con genes provenientes de bacterias que le permiten
detoxificar TNT y GTN en suelos de campos minados.
Oc Plantas transgénicas de Y c c que toleran la acumulación de cadmio,
arsénico y mercurio.
Oc Bacterias Pseudomonas transgénicas que son capaces de degradar compuestos tóxicos que
contienen cloro en compuestos menos nocivos.
Oc Äicroorganismos capaces de degradar TNT, un explosivo de gran potencia y muy agresivo
para el entorno.
Oc Bacterias capaces de reducir las formas altamente tóxicas de mercurio en otras menos
tóxicos y volátiles.
Oc Bacterias que transforman metales del suelo en formas menos tóxicas o insolubles. Por
ejemplo: la reducción de cromo (Cr+6 a Cr+3).
Oc La utilización de la bacteria =   
c Y 
Y para eliminación de elementos
radiactivos presentes en el suelo y aguas subterráneas. Este microorganismo es un
extremófilo que resiste condiciones extremas de radiación, sequedad, agentes oxidantes y
diversos compuestos mutagénicos.
Oc Cianobacterias a las que se le han introducido genes de bacterias 

 con
capacidad de degradar diferentes hidrocarburos o pesticidas.

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c
El fundamento bioquímico de la biorremediación se basa en que en la cadena respiratoria, o
transportadora de electrones de las células, se van a producir una serie de reacciones de
óxido-reducción cuyo fin es la obtención de energía. La cadena la inicia un sustrato orgánico
(compuestos hidrocarburados) que es externo a la célula y que actúa como dador de
electrones, de modo que la actividad metabólica de la célula acaba degradando y
consumiendo dicha sustancia.

ðig. 7. Parámetros implicados en el proceso de bio -remediación

cc
c ccc 

c  cc
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c

Los aceptores más comúnmente utilizados por los microorganismos son el oxígeno, los
nitratos, el hierro (III), los sulfatos y el dióxido de carbono. Cuando el oxígeno es utilizado
como aceptor de electrones la respiración microbiana se produce en condiciones aerobias, y
los procesos de biodegradación serán de tipo aerobio; sin embargo, si utiliza los sulfatos o el
dióxido de carbono se produce en condiciones reductoras o anaerobias, y los procesos de
biodegradación serán de tipo anaerobio
c

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La concentración y composición de la comunidad microbiana y la tasa de transformación de
contaminantes está influenciada por diversos factores:

rc Necesidad de nutrientes: El metabolismo microbiano está orientado a la reproducción

de los organismos y éstos requieren que los constituyentes químicos se encuentren
disponibles para su asimilación y sintetización. Los nutrientes principalmente
requeridos son el fósforo y el nitrógeno. Por lo general suele haber en el suelo una
concentración de nutrientes suficiente, sin embargo, si estos no se encontrasen en el
rango normal se puede adicionar mayor cantidad al medio. El rango normal de C:N:P
depende del sistema de tratamiento a emplear, siendo de modo habitual 100:10:1.

rc pH del suelo: afecta significativamente en la actividad microbiana. El crecimiento de la

mayor parte de los microorganismos es máximo dentro de un intervalo de pH situado
entre 6 y 8. Así mismo el pH también afecta directamente en la solubilidad del fósforo
y en el transporte de metales pesados en el suelo. La acidificación o la reducción del
pH en el suelo se puede realizar adicionando azufre o compuestos del azufre.

rc Temperatura: generalmente las especies bacterianas crecen a intervalos de

temperatura bastante reducidos, entre 15 y 45 ºC (condiciones mesófilas),
decreciendo la biodegradación por desnaturalización de las enzimas a temperaturas
superiores a 40 ºC e inhibiéndose a inferiores a 0 ºC.

rc Humedad: los microorganismos requieren unas condiciones mínimas de humedad para

su crecimiento. El agua forma parte del protoplasma bacteriano y sirve como medio de
transporte a través del cual los compuestos orgánicos y nutrientes son movilizados
hasta el interior de las células. Un exceso de humedad inhibirá el crecimiento
bacteriano al reducir la concentración de oxígeno en el suelo. El rango varía en función
de la técnica.

rc Estructura química del hidrocarburo: la inherente biodegradabilidad de un

hidrocarburo depende, en gran medida, de su estructura molecular. Siendo los
parámetros que más van a afectar la halogenación, la existencia de ramificaciones, la
baja solubilidad en el agua y la diferente carga atómica.

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c ccc 

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c
La técnica del bioventing es un tratamiento de biorrecuperación de tipo ͞in situ͟, consistente
en la ventilación forzada del suelo mediante la inyección a presión de oxígeno (aire) en la zona
no saturada del suelo a través de pozos de inyección.

=ebido a la aireación del suelo se va a favorecer la degradación de los hidrocarburos por dos
motivos: por volatilización, facilitando la migración de la fase volátil de los contaminantes, y
por biodegradación, ya que al incrementar la oxigenación del suelo se van a estimular la
actividad bacteriana.

Los factores a tener en cuenta en la aplicación del bioventing o inyección de aire natural son:

rc Se degradarán más fácilmente las moléculas más pequeñas (hasta C20), siendo más
fácilmente biodegradables los compuestos parafinados o de cadena lineal que los
compuestos aromáticos. En general, son favorables los compuestos de alta volatilidad
(presión de vapor mayor de 10 mm de Hg a 20ºC).

rc Los suelos deben contener bajos contenidos en arcilla y ser lo más homogéneamente
posible, con un valor de permeabilidad al aire adecuado (> 10-10 cm2).

rc El principal problema es la biodisponibilidad de los microorganismos. Cuanto menor es

la solubilidad de los contaminantes menor será la biodisponibilidad.

rc Los aportes de oxígeno deben ser suficientes, así como la existencia de fuentes de
carbono, aceptores de electrones y energía suficientes.

rc No debe existir de producto libre en flotación sobre el nivel freático.

rc =eben existir unas condiciones óptimas de pH (6 y 8), de humedad (12-30% en peso),

potencial redox mayor de -50 mV, temperatura entre 0 y 40 ºC y los nutrientes del
suelo en relación N:P de 10:1.

c
c
La técnica de biopilas es un tratamiento de biorrecuperación de tipo ͞ex situ͟ en condiciones
no saturadas, consiste en la reducción de la concentración de contaminantes derivados del
petróleo en suelos excavados mediante el uso de la biodegradación.

La técnica consiste en la formación de pilas de material biodegradable de dimensiones

variables, formadas por suelo contaminado y materia orgánica (compost) en condiciones
favorables para el desarrollo de los procesos de biodegradación de los contaminantes. Estas
pilas de compost pueden ser aireadas de forma activa, volteando la pila, o bien de forma
pasiva, mediante tubos perforados de aireación.

En principio, las biopilas se pueden aplicar a la mayoría de los compuestos orgánicos, siendo
más eficaz en los compuestos de carácter más ligero. Entre los factores que influyen en la
aplicación de las biopilas destacan:

cc
c ccc 

c  cc
c
 c
c

rc Los hidrocarburos deben ser no halogenados y deben encontrarse en el suelo en

concentraciones menores a 50.000 ppm.
rc =ada la necesidad de excavación y posterior depósito del suelo contaminado, se
requiere una superficie de trabajo relativamente grande cuyas dimensiones dependen
del volumen de suelo a tratar.
rc Necesidad de una densidad de poblaciones microbianas (>1.000 CðU/gramo de suelo),
condiciones de humedad (40-85% de capacidad de campo), temperatura (10 y 45ºC),
rc Necesidad de tiempos de actuación cortos (meses) y coste medio-alto. textura (baja
proporción de arcillas), pH del suelo adecuadas (6 y 8) y baja presencia de metales
pesados (< 2.500 ppm).
rc La concentración de nutrientes en el suelo cuyo rango normal de C:N:P sea de
100:10:1.
rc El tiempo de actuación puede ser alto (meses a años) y el coste bajo.

,!c,c
c
La atenuación natural, aunque no está considerada como una técnica de descontaminación
propiamente dicha, está englobada dentro de las técnicas de remediación in situ de muy bajo
coste. Su característica principal es la utilización de los procesos fisicoquímicos de interacción
contaminante-suelo y los procesos de biodegradación que tienen lugar de forma natural en el
medio. Estos procesos se conocen como procesos de biotransformación natural.

Los procesos de biotransformación natural son aquellos que van a reducir la concentración de
los contaminantes y entre los que se encuentran la dilución, dispersión, volatilización,
adsorción, biodegradación y aquellas reacciones químicas que se producen en el suelo oen el
agua y que contribuyen de alguna forma a la disminución de la contaminación.

Esta técnica se aplica en aquellos casos en los que exista contaminación tanto en suelos como
aguas subterráneas producida por hidrocarburos de tipo halogenado o nohalogenado.
Entre los factores que influyen en la eficacia y viabilidad de la atenuación natural destacan:

rc La exigencia de protección y el riesgo de los potenciales receptores durante el tiempo

que dura la atenuación.
rc La existencia de unas condiciones geológicas y geoquímicas favorables.
rc Las necesidades de reducción de la masa contaminante en un intervalo razonable de
tiempo (meses a años), tanto en la superficie del suelo como en la zona más
subsuperficial del mismo, así como de la calidad de las aguas subterráneas.
rc Confirmación de la existencia de los tipos y número de poblaciones de
microorganismos que puedan biodegradar los contaminantes.
rc Producción y conservación en el medio de subproductos de carácter persistente o más
tóxico que los iniciales, durante y después de la atenuación natural.
rc No existencia de producto libre en flotación sobre el nivel freático
rc Para condiciones aerobias la condición ambiental óptima de concentración de oxígeno
disuelto en el agua debe ser superior a 0,5 mg/l.
rc La concentración de los compuestos utilizados como aceptores de electrones en
condiciones anaerobias debe ser superior a 0,21 mg/l para nitratos, la de ðe 3+ para
que pueda ser reducido a ðe 2+ debe ser superior a 21,8 mg/l y la de sulfatos mayor de
0,21 mg/l.
rc El potencial redox debe estar situado entre un rango de -400 y 800 mV.
rc Existencia de un coeficiente de retardo favorable para que se produzcan los
fenómenos de sorción con suficiente eficacia.

cc
c ccc 

c  cc
c
 c
c

rc ±ue se produzca una dilución suficiente para que la concentración se vea disminuida
aguas abajo del foco contaminante.
rc La dispersión de los contaminantes aguas abajo del foco y en la dirección de flujo debe
ser adecuada para que exista una mayor disponibilidad proporción entre los
contaminantes y los aceptores de electrones.

 ,!c

La bioestimulación consiste en la introducción de modificaciones en el medio, mediante el

aporte de nutrientes, aireación y otros procesos (͞biostimulation͟ o ͞enhanced
bioremediation͟). En ocasiones será suficiente añadir oxígeno mediante aireación, aunque en
otros se podría requerir la adición de nutrientes o ajustes de pH. En todo caso, estas
aproximaciones son válidas siempre y cuando los microorganismos autóctonos sean capaces
de degradar el contaminante tras un proceso más o menos largo de aclimatación previa.

En lo que se refiere a la adición de nutrientes, la biorremediación requiere que estos entren en

contacto con el área impregnada por el contaminante y que su concentración sea suficiente
para soportar el crecimiento máximo previsto de la población degradadora en el transcurso de
las operaciones de remediación. Estos dos factores van a resultar claves en los intentos de
biorremediación en las costas afectadas por el vertido del Prestige.
c
, !c
c
Otras líneas de investigación han llevado a la introducción de microorganismos aclimatados o
incluso modificados genéticamente en el medio, con el fin de mejorar la biodegradación
(56c1997; cy  6c1999). Esta técnica funciona en condiciones de laboratorio o
birreactor, pero en ambientes externos (suelo, agua) su implantación depende de una serie de
factores (-6c1999).

ͻ El tamaño de la población de microorganismos degradadores crece rápidamente como

respuesta a la contaminación del medio y es muy difícil, si no imposible, incrementar la
población microbiana más allá de esos valores.
ͻ La capacidad de carga de muchos ambientes viene determinada por factores tales como la
presencia de toxinas, nutrientes y condiciones ambientales, movilidad y/o distribución de los
microorganismos y la presencia de abundante materia orgánica.
ͻ Los microorganismos añadidos deben sobrevivir a los depredadores y competir con éxito con
la población autóctona antes de ocupar los nichos potenciales.
ͻ En general, los ambientes más selectivos y la utilización de consorcios microbianos (ver
abajo) favorecen la bioaumentación.

Existen en el mercado productos comerciales, ensayados en el laboratorio, que reúnen

microorganismos con gran potencial biodegradados (7c et al., 1997).Sin embargo, la
reintroducción de microorganismos indígenas, aislados del sitio contaminado y cultivados
posteriormente, es más efectiva, especialmente cuando se acompañan de un suplemento
nutricional y oxígeno. Por otro lado, es probable que el desarrollo de microorganismos
manipulados genéticamente (ÄÄG) ( c y +6c1999; c2'6c2001) pueda en el
futuro permitir abordar con éxito la degradación a escala real de compuestos que por sus
características químicas son resistentes. Esta aproximación incluye también la ampliación de la
capacidad degradativa de una bacteria frente a distintos compuestos, así como el incremento
de las tasas de degradación.

cc
c ccc 

c  cc
c
 c
c

No obstante, los problemas de persistencia de cepas modificadas en el ambiente y los aspectos

legales relacionados con la liberación de ÄÄG, hacen esta solución no factible a corto plazo.

c ccc c

c
La capacidad de obtener en el laboratorio, mediante manipulación genética, microorganismos
con mejores propiedades degradativas de compuestos contaminantes no debe oscurecer el
hecho de que, en los ambientes naturales, los microorganismos poseen una notable capacidad
de adaptación, lo que se favorece por su integración en poblaciones dentro de una comunidad.
La base de este fenómeno se encuentra, por una parte, en la adquisición de nuevas
capacidades metabólicas, mediante mecanismos de variación genética convencionales
(mutación, conversión génica, duplicación, transposición) o intercambio de genes y, por otra,
en la posibilidad de complementación de las actividades metabólicas de los distintos grupos. La
capacidad de intercambio genético entre las poblaciones, mediante conjugación,
transformación y transducción se ha comenzado a analizar a nivel de laboratorio (89cet
al., 1996) y constituye una fuerza directora notable en la evolución que conduce a la
adaptación a nuevos ambientes, incluyendo los contaminados (+,6c1999).

Esta aproximación incluye también la ampliación de la capacidad degradativa de una bacteria

frente a distintos compuestos, así La complementación de las actividades metabólicas se lleva
a cabo mediante relaciones de cometabolismo y/o sintrofismo. El cometabolismo es una
actividad importante desde el punto de vista medioambiental, con matices complejos, que no
podemos desarrollar en este espacio. Implica, esencialmente, el metabolismo "gratuito" (es
decir, no útil para el crecimiento u obtención de energía) de un substrato secundario
(compuesto contaminante) por enzimas que requieren otro substrato primario diferente, el
cual proporciona la energía y/o los cofactores reductores necesarios. Ambas actividades
enzimáticas pueden ser diferentes y el resultado es, en teoría, la acumulación de productos de
reacción a partir del contaminante. En la práctica, la existencia de otros microorganismos hace
factible la degradación posterior de esos productos mediante reacciones sintróficas y, en
última instancia, su mineralización (descartando la posibilidad, a tener en cuenta, de que
dichos productos sean tóxicos, y/o persistentes) (-6c 1999; 59c y :;#6c
2001).

El término de sintrofía, por tanto, implica la acción concertada de diferentes microorganismos

sobre un sustrato(-s), mediante la combinación de sus actividades metabólicas, lo que permite
su degradación. Esta no sería posible en presencia de los microorganismos aislados. Se
comprende entonces la importancia de las poblaciones mixtas (que a veces se denominan
consorcios) para la degradación más efectiva de los contaminantes orgánicos. Todo esto se
refleja en el creciente aumento de datos experimentales, en los que la bioaumentación con
consorcios microbianos, tanto a nivel de laboratorio como en el campo, está produciendo
resultados esperanzadores (ejemplos aplicados al petróleo o sus derivados se encuentran en
;c cc2001; ë,cet al., 2001; +cy ,6c2001; ; c cc2002; ëc
cc2002).

Por último, y no menos importante en cuanto a facilitar la degradación de los compuestos

orgánicos por las poblaciones microbianas, está la capacidad de producir biosurfactantes y
bioemulsionantes (ron y rosenberg, 2001; Lang, 2002; Christofi e Ivshina, 2002). Los primeros
se manifiestan como agentes que disminuyen la tensión superficial del agua (tensioactivos) y
los segundos estabilizan las emulsiones entre el agua y otro líquido. La presencia o utilización
de microorganismos con esa capacidad en un medio contaminado es un factor a considerar,
por facilitar la disponibilidad de los compuestos hidrofóbicos (aspecto ya mencionado atrás) y

cc
c ccc 

c  cc
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c

por la propia biodegradabilidad de los biosurfactantes, que descarta los efectos

potencialmente nocivos de estas moléculas
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El diseño de estos sistemas de tratamiento se llevará a cabo estableciendo varias etapas de
trabajo.

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El primer paso para preparar el diseño de biotratamiento en el suelo es la realización de una
completa investigación del medio, que incluye principalmente el estudio exhaustivo de la
caracterización del emplazamiento y del tipo y concentración de la contaminación existente.

La caracterización del emplazamiento se llevará a cabo mediante el estudio del mismo

detallando la volumetría del suelo a tratar, las condiciones geológicas e hidrogeológicas,
analizando las características del suelo y sus propiedades (pH, granulometría, humedad,
porosidad, etc.).

La caracterización del contaminante se centrará en la investigación del tipo y concentración del

mismo, así como la biodisponibilidad de los compuestos en el suelo (aceptores de electrones,
metales pesados, nutrientes, etc.).

(c/c!ccc cc

c
=e la fase de investigación inicial, una vez identificadas las características del emplazamiento,
del suelo y del contaminante, se podrá pasar al análisis y elección de las medidas
biocorrectivas más adecuadas. Para ello será necesario:
1. Identificar y cuantificar los contaminantes. =efiniendo sus propiedades físico-químicas más
importantes.

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c ccc 

c  cc
c
 c
c

rc Identificación y clasificación de compuestos.

rc Concentración en suelos y aguas subterráneas.
rc Caracterización de la presión de vapor, constante de Henry, densidad y grado de
solubilidad.

2. Conocer los factores que influyen en la transformación biológica de los contaminantes

rc ðactores ambientales: tales como humedad, oxígeno disuelto, temperatura, pH,

disponibilidad de nutrientes.
rc ðactores microbiológicos: presencia de microorganismos y aclimatación de las
poblaciones microbianas.

=esignar las medidas biocorrectivas. En función de los factores anteriormente expuestos, se

elegiría el sistema de biotratamiento más adecuado.

>c/c,!cc c
c
Para el diseño de un sistema de biorrecuperación es necesario establecer unas etapas de
trabajo, en las cuales se determinan y evalúan los parámetros fundamentales necesarios para
su eficacia.

Las etapas a seguir en el diseño de un sistema de biotratamiento son:

1. Evaluación de la viabilidad de la técnica. Se estudiarán los parámetros de evaluación que

definen el sistema elegido, así como se evaluará las condiciones de biotratabilidad, los
objetivos de limpieza exigidos y los costes de tratamiento necesarios.
2. Evaluación del diseño. Se estudiarán los factores que afectan la eficacia de la técnica y las
posibles mejores o acondicionamientos a aplicar.
3. Evaluación del control y seguimiento

c/c#, c
c
Para asegurar la correcta ejecución y un progreso adecuado del tratamiento se debe llevar a
cabo un plan de control y seguimiento del sistema.

Para una correcta optimización se deberán controlar los siguientes puntos:

1. Control de las condiciones de degradación y biodegradación. Se registrará la variación de

concentración de TPH, BTEX, COV͛s, CO2 desprendido y Oxigeno disuelto, variación de
nutrientes (N, P, etc)
2. Control de los parámetros que afectan directamente en el funcionamiento del sistema
c
(cc!cc,c
c
En esta última etapa se analizan los resultados obtenidos, haciendo un balance de los objetivos
alcanzados y los marcados inicialmente. En este punto, si fuese necesario, se deberán
proponer y estudiar aquellas mejoras o modificaciones necesarias para la optimización del
sistema.

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c  cc
c
 c
c

 23
3c
c
rc Las medidas biocorrectivas o los sistemas de biorremediación son técnicas de
descontaminación suficientemente estudiadas y evaluadas, basados en los procesos de
biodegradación y fácilmente aplicables.

rc Se utiliza la Bio-remediación para el tratamiento de aguas residuales, para

descontaminar el aire o el agua, también para limpieza de suelos que hayan recibido
contaminantes.

rc Todos los microorganismos utilizados en Bio-remediación son susceptibles de

selección, de mejora y de manipulación mediante técnicas de ingeniería genética. Esto
plantea numerosas dudas e inquietudes debido al escaso conocimiento que se tiene de
las interacciones que puedan existir con los organismos modificados genéticamente,
tanto entre sí como entre ellos y el medio.

rc =ebe existir un control muy estricto de estos organismos cuando han sido
manipulados mediante técnicas de ingeniería genética dado que pueden competir de
forma ventajosa con los organismos del medio desplazándolos, ocasionando con esto
alteraciones en las redes tróficas.

rc Existe el riesgo de que una proliferación de estos organismos pueda causar daños en
las instalaciones humanas, de no existir controles, como es el caso de los depósitos de
combustible, tanques de combustible, yacimientos de hidrocarburos que puedan ser
contaminados con bacterias devoradoras de petróleo.

 2
"1c

rc Breve presentación sobre biorremediación, en castellano:

http://universidaddesantiago.cl/ima/bioremed.htm
rc Aplicaciones de la biorremediación (caso del desastre del Prestige en la costa de Galicia)
http://www.belt.es/noticias/2003/febrero/24_28/28/prestige.htm
rc Biorremediación en Äendoza (Universidad de Cuyo)
http://www.eco2site.com/informes/biorremediacion.asp
rc =ocumento de INTI (Instituto Nacional de Tecnología Industrial y UBA:
http://www.inti.gov.ar/cequipe/dicaria.pdf
rc Biorremediación: reportaje al =r. en Ciencias Bernardo González.
http://www.bioplanet.net/magazine/bio_julago_2001/bio_2001_julago_reportaje.htm
rc Utilización de la biorremediación en minería.
http://www.yloenvias.com/usuarios/ecopest_sl/bsr.htm
rc Aplicación de la biorremediación en el derrame del Prestige en Galicia. http://www.belt.es
rc Äicrobiología y metales pesados. revista ±uímica viva. Vol. 2, número 3, 2003.
http://www.quimicaviva.qb.fcen.uba.ar
rc ðitorremediación. http://www.cam_mx.com; http://www.sefv.org; http://www.ucm.es;
http://eclipse.red.cinvestav.mx c
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