Práctica 6 LIGAMIENTO, RECOMBINACIÓN

VI - 1
Y MAPEO CROMOSÓMICO

Práctica
LIGAMIENTO, RECOMBINACION
Y MAPEO CROMOSÓMICO
Dr. Luis Mejía

INTRODUCCIÓN

La propuesta de que los factores Mendelianos estaban localizados en los cromosomas

formulada por Sutton en 1903 dio gran impulso al campo de la citología, muchos investigadores se
involucraron en el estudio de la constitución cromosómica de plantas y animales. La identificación
de un creciente número de mutaciones pronto condujo a la conclusión de que debería existir un mayor
número de genes que de cromosomas, por lo que cada cromosoma debería contener varios genes. De
ser esto cierto, era de esperarse que los genes localizados en un mismo cromosoma fueran
transferidos, de una generación a otra, como un solo grupo. Estos genes estarían entonces ligados
entre sí y cada cromosoma constituiría un grupo de ligamiento. Por lo tanto, habrían tantos grupos de
ligamiento como pares de cromosomas en una especie determinada (cuatro en el caso de Drosophila
melanogaster).

Sin embargo, la evidencia experimental estableció que los genes ligados no siempre se
heredaban como una sola unidad. La frecuencia con la cual dos genes ligados se heredaban de
manera conjunta variaba según el par de genes del que se tratara. Esta evidencia permitió a T. H.
Morgan proponer, en 1911, que el grado o fuerza de ligamiento depende de la distancia en el
cromosoma entre los genes ligados, sentando las bases para la construcción de mapas genéticos o de
ligamiento de los cromosomas.

En Drosophila, cuando las moscas difieren del tipo normal o silvestre en dos o más
características siempre existe la posibilidad de que los genes determinadores de estas características
estén localizados en el mismo cromosoma, estos pueden:

1) Siempre heredarse juntos y entonces se dice que están completamente ligados.

2) Algunas veces heredarse de manera independiente, por lo que se dice que están
incompletamente ligados.

Por razones no bien entendidas, los genes que están localizados en el mismo cromosoma en machos
Drosophila exhiben ligamiento completo.

El hecho de que los genes estudiados muestren distribución independiente, ligamiento completo o
ligamiento incompleto puede determinarse en hembras Drosophila observando los resultados de los
diferentes cruces.

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PROCEDIMIENTO Y ANÁLISIS

 Primero se considerarán genes autosómicos usándose como ejemplo las mutaciones hipotéticas a
y b.
 Si una mosca homocigota para las mutaciones anteriores es cruzada con otra mosca homocigota
para los álelos silvestres de estos genes, toda la progenie tendrá el fenotipo normal pero será
heterocigota.
 Un cruce de prueba de las hembras F1 con los machos mutantes producirá diferentes clases de
progenie, dependiendo de si los genes están ligados uno con el otro o son independientes.

Posibles resultados:

1. Distribución independiente: Si no hay ligamiento se esperará obtener cuatro clases fenotípicas

en proporciones 1:1:1:1.
2. Ligamiento completo: Si existe ligamiento completo, se esperarán dos clases fenotípicas con
igual frecuencia.
3. Ligamiento incompleto: Si hay ligamiento incompleto se esperará obtener cuatro clases
fenotípicas con frecuencias desiguales.

Cruce 1:

Pl ++/++Xab/ab
Fl ++/ab
P2 + +/a b X a b / a b

Progenie
Fenotipos Genes independientes Genes totalmente Genes
ligados incompletamente
ligados
++ 0.25 0.50 0.40
ab 0.25 0.50 0.40
+b 0.25 - 0.10
a+ 0.25 - 0.10

En este caso ocurre un 20% de recombinación entre los genes a y b, por lo que se concluye
que se encuentran a 20 unidades de mapa de distancia en el mismo cromosoma.

Al considerar la progenie F2 de un cruce involucrando los mismos genes del ejemplo anterior,
solamente que ligados en el cromosoma X (ligados al sexo), puede notarse que únicamente la
progenie masculina permite la determinación del grado de ligamiento (el porcentaje de
recombinación) debido a que en la progenie femenina la dominancia interfiere con la clasificación de
cada genotipo en un fenotipo diferente.

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Cruce 2:
Pl a+/a+X+b/¬
Fl hembras a + / + b y machos a + / ¬
F2 hembras + + 0.5 machos: a + 0.4
a + 0.5 + b 0.4
+ + 0.1
a b 0.1

FRECUENCIA DE RECOMBINACIÓN EN CRUCES F1 X F1

En estudios de ligamiento autosómico en los que no pueden realizarse cruces de prueba, es

posible calcular frecuencias de recombinación en poblaciones F2. En un cruce entre heterocigotos Fl
para dos genes (AaBb) se espera obtener una F2 con proporciones fenotípicas 9:3:3:1 (AB:Ab:aB:ab)
de acuerdo al principio de la distribución independiente. Cualquier desviación significativa de esta
proporción podría ser causada por el ligamiento, el porcentaje de recombinación puede calcularse
mediante el método producto proporción de la manera siguiente:

1. Asignar valores al, a2, a3 y a4 a cada categoría fenotípica de la F2 de la manera siguiente: AB

(a1), Ab (a2), aB (a3) y ab (a4).

2. Calcular la proporción Z (producto de tipos recombinantes) / (producto de tipos parentales).

Para heterocigotas Fl en acoplamiento (AB/ab): Z = a2 X a3 / a1 X a4

Para heterocigotas Fl en repulsión (Ab/aB): Z = a1 X a4/ a2 X a3

3. Determinar el porcentaje de recombinación en el Cuadro.

Ejemplo: Si un cruce entre heterocigotas en repulsión produce los siguientes fenotipos F 2:

1031 AB, 473 Ab, 465 aB y 31 ab.

Z = (1031 X 31) / (465 X 473) = 0.15, lo cual significa una frecuencia de recombinación de
aproximadamente 25%.

Alternativamente, puede utilizarse el método de la raíz cuadrada. En este caso la frecuencia

de¡ fenotipo doble recesivo es utilizada como indicador de la frecuencia de gametos, no -
recombinantes cuando la Fl está en fase de acoplamiento y recombinantes cuando está en repulsión.
En el ejemplo anterior, los datos F2 indican que 1.55% de la progenie es doble recesiva, entonces el
porcentaje de gametos recombinantes es 2  .0155 = 2 (.125)= .25 o 25%.

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