Es el método por el cual se obtiene el ADN a partir de material biológico, utilizando técnicas físicas

y químicas.

Consiste en la separación y purificación del ADN con el fin de poder estudiarlo, analizarlo
o manipularlo. En la investigación biomédica el ADN se utiliza para analizar y diagnosticar
a pacientes con enfermedades neurodegenerativas, cáncer, infecciones, etc.

Recursos o material

 Material biológico: Células, tejidos , órganos o fluidos corporales

 Proteasas: sirven para la degradación de proteínas.
 Centrífuga: equipo que ayuda a acelerar el proceso de separación de componentes
de diferentes densidades por medio de una fuerza giratoria.
 RNAsa: enzima que degrada ARN.
 Espectrofotómetro: equipo que sirve para medir la concentración de sustancias
como ácidos nucleicos, proteínas entre otras.

Procedimiento

 Obtención de la muestra celular Lisis celular: es el proceso físico o químico por el

cual se rompen las membranas para liberar sus componentes celulares.
 Degradación de proteínas: se rompen las proteínas que cubren al ADN usando
proteasas. Procesos de Separación: procesos físicos o químicos mediante los cuales
se separan diferentes componentes celulares como lípidos, proteínas, ARN, ADN y
moléculas pequeñas. Para esto se usa una centrífuga.
 Degradación de ARN por RNAsa: proceso que rompe específicamente cadenas
ARN remanente con el fin de evitar contaminación de este material.
 Cuantificación de ADN: técnica mediante la cual se mide la concentración del
material genético usando un espectrofotómetro.

Fuentes de error más frecuentes

Todos los materiales y reactivos que se usan para la extracción deberán estar limpios y
esterilizados. Además, deben estar libres de nucleasas, con el fin de evitar la degradación
de ADN.

1. Extracción de ADN [Internet]. Conogasi. 2016 [cited 30 January 2020]. Available from:
http://conogasi.org/articulos/extraccion-de-adn/
El ADN que ha sido extraído de un tejido debe ser cuantificado y su calidad verificada. El método
más empleado para la determinación simultánea de estas características es la electroforesis en gel de
agarosa (Fig. 3). Esta técnica se fundamenta en la migración de las moléculas de ADN, a través de
una matriz gelatinosa, debida a la aplicación de un campo eléctrico. La detección visual del ADN se
lleva a cabo utilizando una sustancia sensible a la luz ultravioleta, el bromuro de etidio (Sambrook
et al. 2002). Este compuesto es un agente carcinogénico que actua intercalándose dentro de la doble
hélice del ADN.
La cuantificación también se puede realizar empleando un espectrofotómetro, el cual detecta la
radiación emitida por las bases nitrogenadas presentes en el ADN luego de ser excitadas con luz de
260 nm. De igual manera se puede emplear un fluorómetro, el cual cuantifica la emisión de energía
de los compuestos químicos (fluorocromos) que se intercalan dentro del ADN.

2. [Internet]. Www2.inecc.gob.mx. [cited 31 January 2020]. Available from:

http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones2/libros/710/extraccion.pdf

3. Zambrano A, Demey J, Martinez G, Fuenmayor F, Gutierrez Z, Saldaña G et al. MÉTODO RÁPIDO,

ECONÓMICO Y CONFIABLE DE, MINI PREPARACIÓN DE ADN PARA AMPLIFICACIONES POR RAPD EN
BANCOS DE GERMOPLASMA. Agronomia tropical. 2002;52:235-243.