CLASE 3 BACTERIAS

CONCENTRACION MINIMA INHIBITORIA:

- es la concentración más baja de un antimicrobiano que inhibe el crecimiento de

un microorganismo después de su incubación. La concentración mínima inhibitoria es
importante en diagnósticos de laboratorio para confirmar la resistencia de
microorganismos a un agente antimicrobiano y además para monitorizar la actividad de
los nuevos agentes antimicrobianos.

Las concentraciones mínimas inhibitorias pueden ser determinadas mediante métodos de

microdilución en caldo, normalmente siguiendo las directrices de centros de referencia tales como
el CLSI (Clinical Laboratory Institute Standards). Existen otro método basado en la difusión en agar:
las tiras de Etest, consiste en unas tiras de plástico inerte que incorporan un gradiente de
concentración de antimicrobiano. Cuando se depositan sobre las placas de agar inoculadas, el
antimicrobiano difunde en el medio, y tras la incubación, se determina la CMI en el punto de
intersección de la elipse de inhibición del crecimiento.

En medicina, la concentración mínima inhibitoria no sólo se usa para determinar la concentración

de antimicrobiano que recibirá el paciente sino también el tipo de antimicrobianos a utilizar, lo
que a su vez reduce la oportunidad de resistencia microbiana a agentes antimicrobianos
específicos.
COCOS GRAM POSITIVOS: - ESTAFILOCOCOS
- GENERALIDADES:
 Son bacterias esféricas u ovoides compuestas por capas de peptidoglucano culpable
de la retencion del colorande de gram (cristal violeta)
 En general son aerobios o anaerobios facultativos
 Son inmóviles
 No forman esporas
 Según la respuesta de catalasa se dividen en dos grandes grupos
Catalasa positiva (estafilococos y micrococos)
Catalasa negativo (estreptococo enterococos)
- PRUEBA DE LA CATALASA
 PRINCIPIO: la enzima catalasa es una hemoproteina de estructura similar a la
hemoglobina, que descomponen el peróxido de hidrogeno en aguan y oxigeno; el
peróxido de hidrogeno se forma como uno de los productos finales de la oxidación en
el metabolismo aerobio de los hidratos de carbono.
 INTERPRETACION: la aparición rápida y sostenida de burbujas o efervescencia
constituye una reacción positiva.

GENERO STAPHYLOCOCCUS

- TAXONOMIA

Contiene al menos 35 especies de importancia clínica y son:

 Staphylococcus aureus
 Staphylococcus epidermis
 Staphylococcus saprophyticus

El S.AUREUS: patógeno humano de gran importancia todos tenemos contacto con esta bacteria en
algún momento de la vida por enfermedades que pueden ir desde una intoxicación alimenticia a o
enfermedades mortales.

MORFOLOGIA
anaerobios facultativos
la pared es muy
de crecimiento rapido,
importante no solo por
Los estafilococos son: colonias, que varian
la rigidez y por ser el
1. gram positivos desde el colordorado
sitio de accion de los
2.catalasa positivos hasta el blanco
antibioticos, tambien
3.usualmente tambien hay color
es mecanismo de
agrupados en racimos crema colores que
adherencia y de
sirven para su
actividad patogenica
clasificacion.
- HABITAT:
 el personal de la salud es más susceptible a la colonización por S aureus.
 También son susceptibles los pacientes VIH positivos, los diabéticos, los drogadictos,
los pacientes con hemodiálisis o diálisis peritoneal y los que sufren algunas
enfermedades de la piel.
 La mayoría de estas cepas son más resistentes a múltiples antibióticos.
 S. epidermidis: en la piel
 S. capitis: en glándulas sebáceas
 S. hominis y S haemolyticus: glándulas de la axila y del pubis
 S. auricularis: en conducto auditivo externo
 S. saprofiticus: en recto, uretra en la orina o en cérvix de mujeres jóvenes y
sexualmente activas.
- PATOGENESIS
 S aureus es el de mayor dotación para esto dada por:
/ componentes de la pared celular
/ toxinas producidas y excretadas por los gérmenes cuya acción es a distancia
/ enzimas cuya acción se limita al sitio de la infección favoreciendo invasión de tejidos

- ESTRUCTURA ANTIGENICA
 PEPTIDOGLUCANO: impotortante en la patogénesis de la infección. Induce
producción de interleucina-1 (pirógeno endogeno), atrae PMN, activa el
complemento, induce producción de opsoninas.
 ACIDOS TEICOICOS: activa celula de las mucosas, linfocitos plasmáticos; como
resultado observamos adherencia de los cocos a la fibronectina, estimula producción
de Ac, activa el complemento, inhibe quimiotaxis de los mastocitos.

ESTRUCTURA ANTIGENICA
PROTEINA A:
componente de la
pared celular de
muchos S aureus,
activa y se une a la
fraccion FC de la igG1,
2y4 es antigenica.
CAPSULA: presente en
GLICOCALIX, SLIME: se
algunas cepas del
adhieren al plastico y a
Saureus, produce
otros materiales
exopolisacarido, es
extraños, forma una
antigenica, inhibe
barrera impenetrable a
fagocitosis por PMN,
los fagocitos y es foco
promueve adherencia a
de reinfeccion o de
celulas huesped
persistencia.
produce 8 inmunotipos
 TOXINAS

- TOXINAS ALFA, BETA, GAMA: actúan sobre los eritrocitos (hemolisina potente), actúan
también sobre los leucocitos (lisis leucocitarias, forman poros) tienen actividad sobre
plaquetas y fibroblastos, perturban membranas biológicas

- LEUCOCIDINAS: actúan sobre la membrana plasmática de leucocitos PMN. Factor de

virulencia importante.

- EXFOLIATINA O TOXINA EPIDERMOLITICA: son sinérgicas:

 Toxina a: termoresistente (cromosomica)

 Toxina b: termolábil (mediada por plásmidos), hidrolizan el cemento intercelular y
producen síndrome de piel escaldada.

- ENTEROTOXINAS A.B: superantigenos, termoestables y resistentes a enzimas del

intestino, causa vómito, diarrea ante de intoxicación por alimentos ricos en carbohidratos
y proteínas, producen dolor abdominal, porque actúa directamente sobre sistema
simpático SON CROMOSOMICAS Y MEDIADAS POR PLASMIDOS.

- C1, C2, C3, DYE: actúan sobre subgrupos de linfocitos T y activan interleuquina1,
interferón y TNF que actúan como súper antígenos.

- TOXINAS DE SINDROME DE CHOQUE TOXICO: toxinas denominadas TSST-1 produce

fiebre, choque y afección multisistemica, erupción descamativa de la piel, activa
interleuquinas1, interferón y TNF que actúan como súper antígenos.

intereaccion entre super-antigeno y celulas T

activacion masiva de celulas T

liberacion masiva de citocinas

signos clinicos, fiebre, vomitos, rash eritematoso hipotension

daño tisular.
IMPLICACIONES CLINICAS

Dos tipos de enfermedades en humanos:

- LAS LESIONES SUPERATIVAS O PIOGENAS: comienzan localizadas, producen lesiones a

distancia que pueden extenderse hasta llegar a generalizarse
- LAS ENFERMEDADES NO SUPURATIVAS: causadas por toxinas como intoxicación
alimentaria, o el síndrome del choque toxico.

Como buenos gérmenes opotunistas necesitan daño de la piel o de las mucosas para llegar a los
tejidos. También cuando hay un cuerpo extraño o enfermedades de base predisponentes.

PATOLOGIA

Las infecciones estafilocócicas más, frecuentes son las de la piel asociadas generalmente a
folículos pilosos y/o glándulas anexas (esa es su hábitat). Son localizadas, pero sino se tratan
pueden volverse por extensión; celulitis, linfagitis, linfadenitis o verdadera facitis necrosante
(similar a la de S, piogenes). Puede diseminarse por vía hematógena a otros órganos llegando a
bacteriemia y sepsis generalizada.

S aureus es el más patógeno, pero S epidermis es el que más enfermedades nosocomiales

produce, sobre todo en cirugía para instalación de prótesis.

PROCEDIMIENTOS DIAGNOSTICOS

- Se debe evitar al máximo la contaminación con flora normal de piel y mucosas.

- MUESTRAS: frotis superficiales, pus, sangre, material aspirado de la traquea, trayectos
fistulosos, LCR, puntas de catéteres o cuerpos extraños.
- Se pueden recoger en tubos estériles evitando aplicadores o torundas de algodón en lo
posible.
- Los hemocultivos de 2 o 3 muestras.
- GRAM: se realiza previamente una coloración de gram de la muestra o muestras, sembrar
un agar sangre, en medio con inhibidor de gram negativos (agar sangre con colisticina,
agar sangre azida de sodio o agar manitol sal que es inhibidor e indicador de la presencia
de S aureus).

PRUEBAS CONFIRMATORIAS

- A todos los cocos gram positivos se les hace:

 Prueba catalasa: a los que sean positivos se les hace coagulasa en tubo (formación de
coagulo a las 4 horas) se usa plasma de conejo, el único coagulasa positivo es el S
aureus. La coagulasa negativa proveniente de orina se les hace prueba de novobiocina
de 5ug y si hay resistencia se clasifica como S saprophyticus. El S epidermidis se
clasifica por la resistencia a polimixia B HALOS DE INHIBICION
  También se puede usar pruebas de ureasa.

SENSIBILIDAD A LOS ATIBIOTICOS.

- Resistencia a los B- lactamicos en las cepas hospitalarias 100%. En infecciones de la

comunidad aún se observan sensibilidad en un 20 a 30 % de cepas.

- Inactiva los anillos B-lactamicos y a las cefalosporinas

- Resistencia a las meticilinas o resistencia intrínseca es cromosómica altera los receptores

de la penicilina

- Resistencia a la oxacilina tienen gran producción de betalactamasa. En laboratorio se

observan en presencia de altas concentraciones de NaCl

- Resistencia a glicopeptidos (vancomicina y teicoplanina) adquirida horizontalmente por

transferencia conjugacional de enterococcus feacalis: se ha observado en personal
hospitalario.

TRATAMIENTO

- Para tratamiento a largo plazo se usa TETRACICLINAS

- Abscesos y otras lesiones supurantes se hace drenaje y tratamiento antimicrobiano.
- Osteomielitis drenaje quirúrgico extirpación de hueso muerto mas fármacos prolongados.
- Bacteremia endocarditis o neumonía: tto intravenoso con penicilinas resistentes a
betalactamasa
- Lo mas indicado es realizar un cultivo y antibiograma de la lesión.
CULTIVO

 crecen casi sobre todos los medios a 37 C

 son aerobicos o microaerofilicos
 el pigmento se forma mejor entre 20-25 C
 colonias redondas, prominentes y brillantes
 s aureus: sus colonias son grises o amarrillo dorado intenso, fermenta el manitol crece
en medios con 7.5% de NaCl
 resistente a los betalactamicos (produce beta lactamasa)
 resistencia a metilcilina y oxacilina
 resistencia variable a VANCOMICINA.

FACTORES DE RIESGO PARA EL DESARROLLO DE CELULITIS E INFECCIONES DE TEJIDOS BLANDOS

1. traumatismos (laceraciones, quemaduras, abrasiones, fracturas abiertas)

2. mordeduras (animales o humanos)
3. adicción a drogas intravenosas
 4. situaciones con predisposición a infecciones: diabetes insuficiencia arterial, linfaedema,
insuficiencia renal, cirrosis, neutropenia, hipogamaglobulinemia
5. mastectomía radical con disección axilar
6. disección de la cena safena.

HALLAZGOS CLINICOS QUE SUGIEREN UNA FASCITIS NECROTIZANTE

1. Crecimiento rápido del área de infección

2. Desarrollo de ampollas violáceas
3. Coloración rojo purpurica de la piel
4. Induracionleñosa de la zona infectada
5. Desarrollo de áreas palidas en las zonas infectadas
6. Dolor o tumefacción desproporcionada para la presentación de celulitis
7. Manifestaciones sistémicas toxicas
8. Síndrome séptico
FACTORES QUE INFLUYEN EN LA RESISTENCIA NATURAL DE LA PIEL A LAS INFECCIONES

1. Ph bajo, temperatura baja

2. Presencia de sustancias antibacterianas naturales péptidos antimicrobianos endógenos
secreción sebacea
3. Factores de inmunidad celular y humoral
4. Sequedad relativa de la piel
5. Interferencia bacteriana

ESTREPTOCOCOS
GENERALIDADES

- Cocos gram positivos

- Catalasa negativo
- Anaerobio facultativos o anaerobios estrictos
- Acido lipoteicoico que es adhesina (para fijarse al epitelio)
- Proteína de pared (encargada de la virulencia)

CLASIFICACION

Se tienen en cuenta dos parámetros

1. Acción hemolítica:
- Beta hemolíticos: denominada verdadera hemolisis, destuccion completa de los globulos
rojos, se observa zona clara que rodea la colonia, clínicamente las especies mas frecuentes
en aislamiento son:
 S, pyogenes o grupo A
 S, agalactiae o grupo B
 S, del grupo C: se encuentran algunas especies B hemolíticas que pueden
ocasionalmente causar enfermedad en el hombre y normalmente son microbiota
faríngea, vaginal y de la pies como:
/ S, equi subespecie equi y sub especie zooepidemicus
/ S, dysgalactiae subespecie aquisimiles
/ S, disgalactiae subespecie dysgalactiae
- Alfa hemolíticos: hemolisis de tipo parcial (hemolisis imcompleta sobre agar sangre, zona
verduzca alrededor de la colonia)
 streptococcus viridans
 streptococcus pnuemoniae
- gramma hemolisis: no se observa hemolisis alrededor de las colonias
STREPTOCOCCUS DEL GRUPO D pueden presentar alfa, beta, gamma hemolisis asociado a este
grupo junto a S equinus y S bovis se estudia genero

Enterococcus (fecalis, faecium y e durans) asociados a infecciones de heridas y abscesos

intrabdominales generalmente los Streptococcus del grupo D, habita en a piel tracto respiratorio,
grastrointestinal y genitourinario.

esquema de identificacion segun hemolisis

se es beta hemolitico efectuamos las siguientes pruebas
para identificacion preseuntiva.
prueba CAMP factores
extracelular
SUSCEOTIBILIDAD A resistencia al STX
producido por determinacion de
LA BACITRACINA. generalmente los
streptococcus del polisacarido del
halo de inhibicon de streptococcus beta
grupo B que aumenta grupo: aglutiacion
cualquier diametro: hemoliticos del grupo
la actividad hemolitica especifica de grupo
presuntivo; A y B son resistentes
de la beta lisina prueba de latex con el
streptococcus B a estos antibioticos.
estafilococcica del S antisuero especifico
hemolitico del grupo minetras la mayoria
aureus. es el se observa por
A (streptococcus de los streptococcus
sinergismo de dos aglutinacion.
pyogenes) son susceptibles.
hemolisinas en
condiciones aerobicas

IDENTIFICACION

Si es alfa hemolítica: se realizan para identificar si es un S. pneumoniae un S del grupo viridans un

S grupoD o un enterococcus:

1. prueba de optoquina: o disco p es un derivado de la quinina que inhibe selectivamente el

crecimiento del s pneumoniae si es resistente será un s del grupo viridans. S viridans no
corresponde a una especie sino a un grupo de especies que no calificable dentro del
esquima de lancefield son integrantes de la microbiota orofaringra pero pueden causar
cuadros clínicos importantes como caries dentales endocarditis abscesos cerebrales y
septicemias

pruebas de confirmación para s pneumonie

2. solubilidad en bilis las sales el desoxicolato sódico y taurocolato de sodio estimulan el

fenómeno de autolisis producido por una enzima que hidroliza la pared celular
3. fermentación de la inulina todas las cepas de spneumoniae fermentan la inulina, en
presencia de un indicador de ph se detecta la producción de acido
si es un gamma hemolítico: para identificar si se trata de un enterococcus o un streptococcus del
grupo D debemos realizar

1. prueba de hidrolisis de la bilis esculina; los s del grupo D y los enterococcus tienen la
capacidad de crecer e hidrolizar la esculina glucosido en presencia de sales biliares
produciendo 6.7 dihidroxicumarina, que con las sales de hierro del medio forma un
complejo marron oscuro-negro
2. prueba de tolerancia al cloruro de sodio

NEUMOCOCO
S. PNEUMONIAE:

- coco gram positivo encapsulado morfológicamente en pares

- alfa hemolítico
- son mesofilos
- son normales en vías respiratorias en el 5-40% de los humanos
- pueden producir neumonía meningitis bronquitis bacteriemia
- se lisan en presencia de BILIS DE BUEY o DEXOCICOLATO SODICO
- sensibles a la optoquina ( clohidrato de elti hidro cupreina)

CULTIVO

Colonia pequeña redonda alfa hemolítica – crecimiento aumenta en presencia de un 5-10% de

CO2 – la capsula se pierde en repiques seguidos de cultivos.

ESTRUCTURA ANTIGENICA

- polisacáridos es antígeno que produce reacción de células b

- reacción de quellung: reacción ag-ac para evidenciar la presecia de capsula la cual se
hincha

PATOGENESIS

- la enfermedad se produce por la presencia de la capsula que evita fagocitosis

- perdida de la resistencia natural:
 infecciones virales
 intoxicación alcohólica
 dinámica circulatoria anormal
 otros mecanismos.

PATOLOGIA

- exudación del liquido fribroso edematoso en alveolos consolidación del pulmón por
infiltacion de eritrocitos leucocitos de allí pueden alcanzar el torrente sanguíneo. La
fagocitosis es el mecanismo de defensa.
- Hay fiebre escalofríos y dolor pleural agudo esputo sanguíneo o herrubroso
- Puede producir meningitis endocarditis y artritis séptica

DIAGNOSTICO
 - Gram de esputo
- Prueba de quellung
- Cultivo de agar sangre en CO2

TRATAMIENTO

- Dosis altas de penicilina G

STREPTOCOCCUS PYOGENES
- Contiene antígenos del tipo A
- Beta hemolítico, anaerobio facultativo capsula de ácido hialuronico
- Susceptibles a la bacitrocina

HABITAD

- Orofaringe y árbol respiratorio

Via de infección: gota de saliva causante de la faringitis – amigdalitis

ESTRUCTURA ANTIGENICA

- Proteína M su presencia es indicativo de patogenisidad evitan fagocitosis: SUSTANCIA

T y NUCLEOPROTEINAS.
- Toxinas y enzimas
- Estreptocinasa: convierte el plasminogeno en plasmina puede disolver coágulos
intravasculares
- Estreprodornasa: licua exudados (pus y tejido necrosado)
- Hialuronidasa: daña tejido conjuntivo (permite la propagación del microorganismo)
- Exotoxina pirógenas: (fago lisogenico) asociado a síndrome de choque toxico
estreprococico y fiebre escarlatina
- Difosfopiridina nucleotidasa: lisis de leucocitos
- Hemolinasas: estreptolisina O.

PATOGENESIS

Enfermedades por invasión

- Eripsela: puerta de entrada la piel (edema masivo indurado)

- Celulitis: infección aguda de la piel y tejidos subcutáneos, se presenta después de
lesión leve de la piel. La lesión no se eleva y el tejido lesionado no se distingue del
sano
- Fascitis necrotizante (gangrena estreptococica): infección de los tejidos subcutáneos y
la fascia
- Fiebre puerperal: septicemia- endometritis
 - Bacteremia: infección de heridas traumáticas o quirúrgicas.

Enfermedades a infección local

- Faringitis estreptocócica
- Pioderma estreptocócico

Enfermedades invasivas por estreptococo: síndrome del choque toxico

Enfermedades post – estreptococicas: aparecen después de una infección por estreptococo

- Glomerulonefritis aguda: después de una infección de la piel hay un deposito de

complejos ag-ac sobre la membrana basal glomerular hay hematuria proteinuria
- Fiebre reunatica: después de una faringitis estreptocica los AG del estrptococos se
parecen al tejido cardiaco. Se puede reactivar con las infecciones estreprococicas.

DIAGNOSTICO

- Frotis y cultivo en agar sangre otros en 10% de CO2

- Pruebas para detección de Ag del frotis de la faringe
- Pruebas serológicas
- Inmunidad de tipo igM junto con inmunidad celular

TRATAMIENTO

- Penicilina G
- Eritromicina

Tratamiento de personas con fiebre reumática: con penicilina VIM c/3-4 semanas o sulfonamida
por VO todos los días

EPIDEMIOLOGIA Y CONTROL

Erradicar pronto los estreptococos del paciente 10 dias de tratamiento con penicilina G
benzatinica VIM.