ACTIVIDAD ENZIMATICA

Laura Milena Valencia Horta¹, Danna Valentina Duque Bermúdez¹, Rosa del
Carmen Guerrero Zambrano
1. Estudiantes de bioquímica del segundo semestre de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
Universidad de la Amazonia, octubre 2019.

ABSTRAC sustrato (E-S). Entonces, a medida

que la reacción avanza, el producto (p)
In the laboratory the practice of
se libera y la enzima € vuelve a su
enzymatic activity was carried out,
estado original: el cual es
which is a measure of the amount of
E+S_ES_E+P.
active enzyme present and the level of
activity thereof, so that the measure of Palabras clave: Enzima, catalizada,
activity is dependent on the conditions, sustrato, reacción.
which must be specified when activity
values are given. In an enzymatically
catalyzed reaction, the enzyme
temporarily combines with the reaction
or substrate (s), forming an enzyme- INTRODUCCION
substrate (E-S) complex. Then, as the Las células llevan a cabo
reaction proceeds, the product (p) is simultáneamente una gran cantidad
released and the enzyme returns to its de reacciones químicas necesarias
original state: which is E + S_ES_E + para la vida. Muchos de los productos
P. de esas reacciones se necesitan
Keywords: Enzyme, catalyzed, inmediatamente, y si no fuera por la
substrate, reaction. participación de las enzimas, algunas
reacciones no se producirían tan
RESUMEN rápido. Las enzimas, en su mayoría
proteínas o riboenzimas, son
En el laboratorio se realizó la práctica
catalizadores químicos que agilizan
de actividad enzimática, lo cual es una
una reacción que envuelve la
medida de la cantidad
formación o rompimiento de enlaces
de enzima activa presente y del nivel
químicos. Las enzimas no se
de actividad de la misma, por lo que la
consumen en las reacciones, ni
medida de la actividad es dependiente
tampoco se alteran, razón por lo cual
de las condiciones, que deben ser
no se necesitan en grandes
especificadas cuando se dan valores
cantidades. Las enzimas actúan sobre
de actividad. En una reacción
los sustratos formando un complejo
catalizada enzimáticamente, la
enzima-sustrato; esto ocurre en un
enzima se combina temporalmente
lugar en específico conocido como el
con la reacción o el sustrato (s),
sitio activo de la enzima. Las enzimas
formando un complejo enzima-
son muy selectivas porque pocas
moléculas pueden interactuar bien con Solución de almidón, HCl,
este sitio. Uno de los principales Sacarosa.
estudios que se realizan en una
enzima es medir el efecto en la  Corte dos trozos de zanahoria y
velocidad de la reacción cuando se dos trozos de papa, introduzca
modifican las concentraciones del cada muestra en un tubo de
sustrato y se mantienen constantes la ensayo, ponga 3 ml de agua
concentración de enzima, el pH, la destilada y ponga a hervir un
temperatura; etc. La influencia de tubo con zanahoria y otro tubo
con papa en un baño maría
estos valores se evalúa en la
durante 15 minutos, pasado
reacción catalizada por enzimas con este tiempo deje enfriar el tubo,
la finalidad de determinar los retire el agua y adicione 10
intermediarios en una reacción y el gotas de peróxido de hidrógeno
papel que juegan en la reacción (H2O) a cada tubo.
enzimática, es decir, para predecir
mecanismos de reacción. Por lo tanto,  Añadíamos cierta cantidad del
también es usual medir la actividad reactivo y llevamos durante
enzimática con diferentes sustratos unos 15 minutos en baño
para entender su especificidad o bien maría, dejar reposar por 30
sea, para medir la actividad de la minutos, observar los
enzima de diferentes tejidos u resultados y tabular la
información.
organismos para entender como las
diferencias en actividad están
relacionadas con la función o la MATERIALES
fisiología del organismo del que
producen.
 Zanahoria
En la saliva se encuentra una enzima  Papa
llamada ptialina que descompone  Manzana
 Levadura
(hidroliza) el almidón produciendo
 Rábano.
glucosa. Vamos a comprobar la
presencia de glucosa tras la acción de
la enzima realizan una reacción de EQUIPOS
Fehlin y Lugol en el punto 2 de esta
práctica.  15 Tubos de ensayo
 Vaso de precipitado de 250 mls
MATERIALES Y METODOS  Pinzas para tubo de ensayo.
 Pipetas graduadas de 2, 5 y 10
 Rotular cada uno de los tubos mls
para cada elemento de acuerdo  Caja de Petri
a la guía de trabajo, los  Espátula
reactivos a trabajar en este  Gradilla
caso son Agua oxigenada,  Balanza
Fehling A, Fehling B,  Plancha de calentamiento
Metabisulfitode sodio, Lugol ,
 Todas las enzimas son proteínas. Por
lo tanto, todas las enzimas sufren
RESULTADOS Y DISCUSION
desnaturalización frente al calor. Esto
quiere decir que cuando la
temperatura es muy elevada, la
1. Presencia de catalasa en enzima pierde su estructura terciaria,
tejidos vegetales. por lo tanto su sitio activo también se
desnaturaliza, y ya no puede cumplir
La catalasa es una enzima que actúa su función.
sobre el peróxido de hidrógeno
descomponiéndolo en H2 O y O2, con
Tubo Lugol Fehling
N°
1 Coloración azul,
sin partículas
flotando.
2 Coloración típica 2. Hidrólisis del almidón por
del Lugol acción de la amilasa.
3 Coloración azul
celeste en la parte Comprobamos la presencia de
superior y más glucosa tras la acción de la enzima
oscuro al fondo. realizan una reacción de Fehling. La
Partículas flotando. desnaturalización de la enzima la
4 Se decoloró realizaremos cambiando el pH por
5 Coloración medio de la adición de ácido (HCl)
verdosa, sin
partículas flotando. Tabla 2. Hidrolisis del Almidón
6 Coloración típica
del Lugol
desprendimiento de energía en forma
En la saliva se encuentra una enzima
de calor. Esta enzima está presente en
llamada ptialina que descompone
todos los tejidos animales y vegetales.
(hidroliza) el almidón produciendo
En esta práctica realizamos una glucosa
desnaturalización mediante una
elevación de la temperatura en baño
maría.
3. Hidrólisis de la sacarosa por
Tabla 1. Acción de la Catalasa la glucosidad de las
Sustrato Reacción con el levaduras.
H2O2
Papa hervida No tuvo reacción. La sacarosa es un glúcido sencillo
Papa sin hervir abundante formado por la unión de glucosa y
burbujeo fructosa. Cuando se rompe el enlace
Zanahoria hervida No tuvo reacción. entre estas dos sustancias (hidrólisis)
Zanahoria sin Abundante
hervir burbujeo se libera por lado glucosa y por otro,
fructosa. Para comprobar que se ha
producido la reacción y revelar la azúl intenso, esto se debe a
presencia de glucosa realizaremos que el almidón en presencia de
una prueba con Fehling. lugol se forma de color azúl
violeta, esto significa que la
amilasa salival no degrada el
almidón debido a que el pH
Al realizar la reacción de Fehling
óptimo para que la amilasa
detectamos la hidrólisis de la sacarosa
realice su actividad enzimática,
que es un azúcar no reductor. Cuando está dentro del rango normal,
se adiciona ácido a las sacarosa se en este caso la amilasa fue
produce la hidrólisis parcial de la desnaturalizada por el medio
sacarosa (glucosa + fructosa), acido donde se encontraba.
dándonos el color rojo ladrillo de un
azúcar. Reductor.  La amilasa en un medio con
temperatura cálida (37 °C) y con
pH casi neutro realiza
adecuadamente su actividad
enzimática.
CONCLUSIONES
 La temperatura baja disminuye o
Como producto del análisis de los influye en la actividad de la
resultados del experimento realizado amilasa, así podemos concluir
que la amilasa requiere de una
en el laboratorio, se pudieron extraer
temperatura de 37 °C para
las siguientes conclusiones: realizar una óptima actividad
enzimática.
 Se cumplió con el objetivo que
era conocer la actividad de la .
catalasa en tejidos vegetales,
así la temperatura es un factor
que ayuda a las enzimas a lograr
su actividad enzimática máxima.
Pero si la temperatura aumenta y
sobrepasa la temperatura optima,
puede desnaturalizar la enzima.
Como podemos observar el
aumento de la temperatura altero
la estructura química de la
catalasa provocando una
disminución de su actividad,
afectando la velocidad y
efectividad de la reacción.

 La amilasa degrada el almidón

según los factores y medios en
donde sea la actividad
enzimática. En este caso
podemos concluir que el color
de la muestra se torna de color