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I
Máster en Ciencias. Centro de Toxicología Experimental, Centro Nacional para la
Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB). Ciudad de La Habana, Cuba.
II
Doctor en Ciencias Químicas. Instituto Superior de Ciencias y Tecnologías
Aplicadas (InsTEC). Ciudad de La Habana, Cuba.
III
Doctora en Ciencias Veterinarias. Médico Veterinario. Investigadora Auxiliar.
CENPALAB. Ciudad de La Habana, Cuba.
IV
Máster en Ciencias Químicas. Ingeniera Química. Investigadora Auxiliar.
CENPALAB. Ciudad de La Habana, Cuba.
V
Máster en Ciencias en Toxicología Experimental. Médico Veterinario. Investigador
Auxiliar. CENPALAB. Ciudad de La Habana, Cuba.
VI
Máster en Ciencias en Prevención de Enfermedades. Médico Veterinario.
CENPALAB. Ciudad de La Habana, Cuba.
RESUMEN
1
los animales de los grupos Dosis alta y control.
RESULTADOS: durante el estudio murió 1 hembra del gurpo Dosis baja, el resto
de los animales alcanzó el final del estudio con buen estado. Los signos clínicos
descritos estuvieron distribuidos por todos los grupos y no guardaron relación con
la sustancia de ensayo. La curva de peso corporal fue similar para todos los grupos.
El consumo de agua se incrementó en los animales tratados con la dosis mayor, el
consumo de alimento no se vio afectado. Los parámetros de laboratorio clínico
presentaron diferencias, aunque se mantuvieron dentro de los rangos normales
reportados para la especie. Los hallazgos de anatomía patológica no guardaron
relación con la administración del polvo de taninos.
CONCLUSIONES: la administración oral durante 6 meses del polvo de taninos de
corteza de P. caribaea no produjo toxicidad.
ABSTRACT
Key words: Pinus caribaea, tannin powders, chronic toxicity, medicinal plants.
INTRODUCCIÓN
Los polifenoles, grupo al que pertenecen los taninos, han demostrado poseer
propiedades importantes que generan aplicaciones industriales, cosméticas o
farmacéuticas. Los taninos vegetales constituyen una familia de sustancias que ha
2
llamado poderosamente la atención de la comunidad científica en los últimos años
por causa de sus interesantes propiedades y crecientes aplicaciones.1
Los taninos son metabolitos secundarios que acumulan las plantas durante de su
vida y cumplen con determinadas funciones.1 Varios autores le han asignado a
estos compuestos un papel defensivo contra plagas o en el ataque de herbívoros
depredadores.2-4 Otros autores consideran que los taninos son productos de reserva
que la planta moviliza ante condiciones no propicias para el crecimiento como
pueden ser altas temperaturas, alta intensidad luminosa, estrés hídrico, entre
otras.5
MÉTODOS
El estudio fue conducido bajo los Principios de las Buenas Prácticas de Laboratorio
no Clínico de Seguridad Sanitaria y Medio Ambiental12 y por lo establecido en la
Guía para el Cuidado, Uso, y Reproducción de los Animales para la Experimentación
en el Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB,
2000).
Sustancia de ensayo
Biomodelo
3
acero inoxidable. Se ofreció como alimento la fórmula EMO 1002 granulada
(AlyCo®, CENPALAB). Tanto el agua como el alimento fueron esterilizados en
autoclave. Durante todo el ensayo el alimento se retiró 12 h antes de administrar la
sustancia y se suministraba nuevamente 3 h después la administración. El consumo
de agua se realizó a voluntad.
Para mantener las dosis constantes a lo largo del estudio se varió el volumen de
sustancia a administrar, en función del peso corporal y respetando el factor de
volumen de administración (1 mL/100 g de peso corporal).
Condiciones ambientales
Observaciones clínicas
Hematología
4
corpuscular media (HCM) y concentración de hemoglobina corpuscular media
(CHCM); conteo de plaquetas (PLT); conteo total de leucocitos (LEU); y conteo
diferencial de leucocitos: neutrófilos (N), linfocitos (L), eosinófilos (E) y monocitos
(M). Todos los parámetros se determinaron en un contador de células MICROS ABX
(Roche Diagnostic Systems), con excepción de las células diferenciadas que se
observaron al microscopio.
Bioquímica sanguínea
Exámenes de patología
Análisis estadístico
RESULTADOS
Observaciones clínicas
5
estudio con buen estado físico y manteniendo un comportamiento típico de la
especie. Un total de 79 animales no presentaron ningún signo clínico (49,4 %). La
manifestación clínica más frecuente fue la caída de pelo, fundamentalmente en la
parte anterior del cuerpo (cabeza, patas delanteras y zona escapular), la cual se
observó en 60 animales, distribuidos en todos los grupos y en los 2 sexos.
Presentaron inflamación del pabellón auricular 3 hembras, 2 del grupo Control y 1
del grupo Dosis alta. Esta manifestación apareció en la segunda mitad del estudio y
se mantuvo en los 3 animales hasta concluir el estudio.
Peso corporal
Hematología
6
a
1,1 4,0 ± ± ± 6 3, ± 0,
6 9 1, 0, 0, 5 3, 3
6 52 57 4
a a
7
5 55 97 6
Do 12, 7,76 42, 5 15 28 513, 4,26 6, 9 0, 0,
sis 21 ± 46 4, ,7 ,7 7± ± 5 3, 3 1
baj ± 0,41 ± 7 5 8 68,0 0,97 ± 1 ± ±
b,c a
a 0,6 2,1 ± ± ± 2, ± 0, 0,
7a,c 5a,b 1, 0, 0, 3 2, 5 3
4 41 31 2
Do 13, 8,30 44, 5 15 29 578, 4,83 5, 9 0, -
sis 10 ± 91 4, ,8 ,1 7± ± 7 4, 1
me ± 0,51 ± 2 1 7 141, 1,02 ± 2 ±
a,c a
dia 0,8 2,7 ± ± ± 3 1, ± 0,
* 1b 8a 3, 0, 0, 9 1, 3
1 68 70 9
Do 12, 7,53 41, 5 16 29 538, 6,19 7, 9 0, -
sis 10 ± 15 4, ,0 ,4 8± ± 1 2, 1
alta ± 0,71 ± 6 7 0 120, 0,92 ± 8 ±
b b
1,0 3,3 ± ± ± 6 3, ± 0,
3c 3b 1, 0, 0, 5 3, 3
1 61 93 5
HB: hemoglobina, HTC: hematócrito, ERI: eritrocitos, VCM: volumen corpuscular medio,
HCM: hemoglobina corpuscular media, CHCM: concentración de hemoglobina corpuscular
media, PLT: conteo de plaquetas, LEU: conteo total de leucocitos, N: neutrófilos, L:
linfocitos, E: eosinófilos, M: monocitos, -: valor 0, n= 10, *n= 9. Letras iguales: no hay
diferencias. Letras diferentes: diferencias significativas p 0,05.
8
baj ± 0,76 ± ± ± 9 116, 1,30 ± ± 6 ±
a
a 1,4 4,8 1, 0,4 ± 0 4, 5, ± 0,
3 1 8a, 6a,b 0, 7a 9a 1 5
b
46 ,
4
Do 10, 5,62 36, 65 18, 28 694, 6,64 1 86 0 0,
sis 60 ± 65 ,4 91 ,9 7± ± 3, ,4 , 0
me ± 0,55 ± ± ± 7 114, 1,49 2 ± 3 5
b
dia 1,0 3,5 2, 1,1 ± 7 ± 5, ± ±
2 0 2b 5b 1, 5, 0b 0 0,
26 2b , 2
5
Do 10, 5,76 36, 63 18, 28 654, 5,63 1 85 0 0,
sis 40 ± 24 ,0 08 ,7 6± ± 3, ,8 , 1
alt ± 0,47 ± ± ± 3 130, 1,52 8 ± 2 ±
c
a 0,8 2,7 2, 0,6 ± 6 ± 4, ± 0,
4 6 5c 8a 0, 4, 5b 0 3
35 6b ,
4
2 Co 15, 9,29 50, 53 16, 30 563, 5,76 6, 93 0 0,
ntr 14 ± 08 ,9 29 ,2 0± ± 6 ,1 , 0
ol ± 0,41 ± ± ± 4 196, 1,62 ± ± 2 1
a
0,6 2,2 1, 0,3 ± 7 2, 2, ± ±
1a 9a 4 1a 0, 5a 4a, 0 0,
b
56 , 3
4
Do 14, 8,58 47, 54 16, 30 665, 6,38 9, 90 0 0,
sis 19 ± 02 ,8 51 ,1 3± ± 1 ,6 , 1
baj ± 0,60 ± ± ± 4 104, 1,25 ± ± 2 ±
b
a 1,1 3,3 1, 0,7 ± 5 3, 4, ± 0,
0b 5b 8 2a,b 0, 7b 1a 0 3
49 ,
4
Do 14, 8,62 47, 55 16, 30 627, 5,69 4, 95 0 -
sis 61 ± 59 ,2 94 ,7 7± ± 9 ,0 ,
me ± 0,30 ± ± ± 0 62,8 1,22 ± ± 1
b
dia 0,4 1,9 1, 0,3 ± 2, 2, ±
7a,b 9b 3 7b 0, 1a 1b 0
56 ,
3
Do 14, 8,64 46, 53 16, 30 700, 5,66 6, 93 0 -
sis 08 ± 53 ,8 33 ,2 4± ± 0 ,8 ,
alt ± 0,29 ± ± ± 9 86,2 0,94 ± ± 2
b
a 0,5 2,2 1, 0,5 ± 2, 2, ±
4b 8b 9 1a 0, 1a 1b 0
46 ,
4
3 Co 13, 8,74 46, 53 15, 28 540, 6,03 9, 90 0 -
ntr 18 ± 50 ,2 06 ,3 1± ± 4 ,4 ,
ol ± 0,79 ± ± ± 7 71,2 2,29 ± ± 2
1,1 3,8 1, 0,4 ± 4, 4, ±
0a 4a,b 6 8a 0, 1 1 0
26 ,
a
4
9
Do 12, 8,27 44, 53 15, 28 493, 7,45 7, 92 0 0,
sis 59 ± 51 ,8 20 ,2 9± ± 0 ,4 , 2
baj ± 0,69 ± ± ± 7 127, 2,68 ± ± 4 ±
a 1,1 4,1 2, 0,6 ± 4 3, 3, ± 0,
5a 0a 3 9a 0, 8 9 0 4
37 ,
a
5
Do 14, 8,76 48, 54 15, 29 550, 7,02 7, 92 0 -
sis 21 ± 44 ,1 91 ,3 1± ± 6 ,2 ,
me ± 0,70 ± ± ± 6 82,5 1,37 ± ± 2
dia 0,7 2,4 1, 0,5 ± 3, 3, ±
5b 0b 5 3b 0, 2 4 0
74 ,
b
4
Do 12, 8,30 43, 52 15, 29 541, 5,80 5, 94 0 -
sis 77 ± 57 ,5 38 ,2 6± ± 4 ,2 ,
alt ± 0,74 ± ± ± 4 142, 1,43 ± ± 4
a 1,2 3,8 2, 0,5 ± 1 1, 1, ±
9a 0a 0 7a 0, 6 9 0
74 ,
b
5
HB: hemoglobina, HTC: hematócrito, ERI: eritrocitos, VCM: volumen corpuscular medio,
HCM: hemoglobina corpuscular media, CHCM: concentración de hemoglobina corpuscular
media, PLT: conteo de plaquetas, LEU: conteo total de leucocitos, N: neutrófilos, L:
linfocitos, E: eosinófilos, M: monocitos, -: valor 0, n= 10. Letras iguales: no hay
diferencias. Letras diferentes: diferencias significativas p 0,05.
Bioquímica sanguínea
U/L U/L g/L umol/L g/L mmol/L mmol/L mmol/L mmol/L mmol/L mmol/L
4,0 ± 137,7 40,6 38,93 6,13 ± 47,31 ± 8,07 ± 7,60 ± 2,57 ± 4,98 ± 1.92 ± 0.45 ±
52,0a ± ± ± 1,17a 4,76a 1,38a 1,83a 0,21a 0,95a,b 0.38a 0.10a
20,1a 8,2a 2,96a,c
8,9 ± 146,1 45,2 40,24 6,84 ± 55,63 ± 6,99 ± 8,50 ± 2,20 ± 5,33 ± 1.96 ± 0.19 ±
65,7b ± ± ± 1,73a 2,74b 0,90b 1,26a 0,25b 0,56a 0.39a 0.08b
13,1a 7,8a 1,13b
009,9 156,0 66,2 37,82 6,25 ± 50,78 ± 6,08 ± 8,46 ± 2,64 ± 4,99 ± 2.20 ± 0.65 ±
22,4b ± ± ± 1,16a 1,85b 0,87c 1,79a 0,30a 0,37a,b 0.36b 0.20c
10
21,0b 9,8b 1,03a
9,2 ± 156,7 63,3 40,17 7,72 ± 55,65 ± 6,02 ± 9,88 ± 2,61 ± 4,69 ± 2.40 ± 0.59 ±
64,6b ± ± ± 0,93b 4,04c 0,68c 1,54b 0,16a 0,49b 0.31b 0.21c
29,8b 12,8b 2,28b,c
9,3 ± 117,7 51,8 47,23 6,24 ± 125,47 6,04 ± 7,89 ± 3,04 ± 3,46 ± 1.68 ± 1.23 ±
75,5 ± ± ± 0,37a ± 9,77a 0,72a 1,50a 0,13 0,20 0.29 0.42a
24,6a,b 8,7a 2,30
7,3 ± 102,7 49,7 46,60 5,86 ± 120,97 6,72 ± 8,46 ± 2,95 ± 3,48 ± 1.84 ± 1.20 ±
48,5 ± ± ± 0,62a ± 0,63b 1,17a 0,15 0,32 0.23 0.35a
18,2a 11,1a 2,02 11,43a,b
5,4 ± 130,4 61,2 47,79 7,88 ± 126,98 5,93 ± 11,40 3,12 ± 3,46 ± 1.61 ± 1.75 ±
54,5 ± ± ± 1,21b ± 0,89a ± 0,29 0,26 0.26 0.53b
25,7b 3,9b 1,99 19,83a 1,62b
6,1 ± 99,5 56,0 46,81 6,00 ± 111,91± 6,99 ± 9,89 ± 2,81 ± 3,14 ± 1.60 ± 1.51 ±
40,9 ± ± ± 1,52a 7,88b 0,63b 1,42c 0,42 0,38 0.25 0.57a,b
10,6a 4,5a,b 2,13
2,5 ± 106,2 61,4 50,43 5,56 ± 90,41 ± 5,60 ± 7,60 ± 2,51 ± 2,27 ± 1.67 ± 1.21 ±
72,2 ± ± ± 0,63a,b 5,82a 0,73 0,67a,c 0,15 a 0,20 0.24a 0.57
26,2 18,4a 2,59
5,6 ± 117,4 63,4 53,81 6,27 ± 97,78 ± 5,93 ± 8,40 ± 2,89 ± 2,49 ± 2.21 ± 1.32 ±
25,8 ± 9,3 ± ± 0,80a 6,22b 0,88 1,12a 0,25b 0,35 0.50b 0.56
24,7a 2,95
3,3 ± 111,5 45,6 50,26 5,12 ± 86,65 ± 6,27 ± 6,21 ± 2,71 ± 2,22 ± 1.88 ± 1.40 ±
48,1 ± ± ± 0,66b 5,17a 0,60 0,82b 0,12c 0,18 0.28a,c 0.85
12,9 7,0b 2,48
7,1 ± 107,3 46,3 51,14 5,46 ± 90,10 ± 6,60 ± 6,87 ± 2,62 ± 2,35 ± 2.04 ± 1.17 ±
36,7 ± ± ± 1,04b 8,33 a 1,38 1,37c 0,12 a 0,11 0.29b,c 0.48
18,6 8,6b 4,08
11
11 ± 7, ± 10 6a 88 41 29 60 44 07 ,0 0,
a a a a,b a a a
2, 1 7 1, 4
4a 7, a
7 3a
3 8a
,c
D 10 1 4 3 5, 54, 6, 8, 2, 5, 1, 0, 50 2,
os 16 6 6, 9, 92 24 77 32 57 46 89 20 ,8 7
is ,9 1, 8 8 ± ± ± ± ± ± ± ± ± 4
ba ± 1 ± 6 1, 3,3 0, 2, 0, 0, 0, 0, 5, ±
ja 17 ± 7, ± 27 1b 74 16 35 69 32 10 9b 0,
b b a,b a a b
2, 2 4 1, 3
1b 3, a
9 3b
7 7b
D 11 1 6 3 6, 51, 5, 7, 2, 5, 1, 0, 50 2,
os 22 4 9, 7, 76 95 91 18 66 39 92 82 ,2 6
is ,0 7, 7 5 ± ± ± ± ± ± ± ± ± 2
m ± 1 ± 8 1, 2,7 0, 1, 0, 0, 0, 0, 10 ±
ed 18 ± 1 ± 15 6c 60 51 20 43 24 33 ,2 0,
a c b a,b a c b
ia 2, 1 0, 1, 1
3b 8, 3 6 7b
b
2 3a ,c
D 11 1 6 3 7, 54, 6, 8, 2, 5, 2, 0, 50 2,
os 14 5 5, 8, 00 28 17 08 91 07 14 80 ,5 5
is ,2 7, 3 9 ± ± ± ± ± ± ± ± ± 4
alt ± 4 ± 0 0, 3,5 0, 1, 0, 0, 0, 0, 9, ±
a 22 ± 1 ± 57 4b 82 26 44 36 27 41 5b 0,
a b c b b c
2, 1 2, 1, 1
2b 8, 2 9 7c
b
8 0b
,c
2 Co 38 1 5 4 6, 11 6, 8, 2, 3, 1, 0, 75 0,
nt 1, 3 9, 3, 56 2,7 09 48 99 88 73 97 ,4 6
rol 4 5, 2 2 ± 0± ± ± ± ± ± ± ± 3
± 6 ± 6 1, 9,5 0, 1, 0, 0, 0, 0, 3, ±
59 ± 1 ± 01 0 94 23 16 33 33 33 1a 0,
a a a a a
,8 3 4, 1, 0
2, 9 6 5
8a 2a
,b
D 37 1 5 4 5, 11 6, 7, 2, 3, 1, 0, 75 0,
os 0, 2 5, 1, 11 2,0 48 39 77 65 44 98 ,0 6
is 7 1, 9 6 ± 9± ± ± ± ± ± ± ± 0
ba ± 2 ± 3 0, 11, 1, 0, 0, 0, 0, 0, 2, ±
ja 75 ± 1 ± 57 56 36 63 16 30 21 57 7a 0,
b b b,c a b
,1 1 0, 2, 0
8, 0 1 8
0a 4a
,b
D 40 1 5 4 6, 11 6, 9, 2, 3, 1, 1, 70 0,
os 7, 0 7, 4, 21 1,3 07 95 89 30 47 07 ,8 6
is 4 0, 0 3 ± 9± ± ± ± ± ± ± ± 7
m ± 2 ± 8 0, 8,7 0, 1, 0, 0, 0, 0, 2, ±
ed 43 ± 3, ± 88 0 75 00 14 23 19 17 7b 0,
a,c c a,c b b
ia ,1 1 5 1, 0
6, 6 8
12
8b 0b
D 40 1 5 4 5, 10 6, 8, 2, 3, 1, 1, 72 0,
os 2, 1 9, 2, 57 9,0 17 38 66 31 51 09 ,2 6
is 9 6, 5 1 ± 5± ± ± ± ± ± ± ± 4
alt ± 9 ± 2 0, 10, 0, 0, 0, 0, 0, 0, 2, ±
a 10 ± 9, ± 81 68 58 64 15 20 21 28 4b 0,
b,c a b b b
3, 2 3 2, 0
3 3, 0 6
1a 8a
,b
3 Co 28 1 5 4 4, 83, 5, 7, 2, 2, 1, 1, 64 1,
nt 7, 2 9, 5, 95 57 75 06 70 54 87 09 ,2 2
rol 4 1, 7 8 ± ± ± ± ± ± ± ± 2
± 1 ± 5 1, ± 0, 0, 0, 0, 0, 0, 5, ±
47 ± 8, ± 03 5,2 60 36 18 16 46 37 7 0,
a a,b a
,5 1 5 1, 2 1
a
8, 4 0
0 9
D 30 1 6 4 5, 85, 6, 7, 2, 2, 1, 1, 63 1,
os 5, 2 7, 6, 76 47 08 62 81 68 86 07 ,4 2
is 3 9, 4 7 ± ± ± ± ± ± ± ± ± 2
ba ± 4 ± 6 1, 5,7 1, 0, 0, 0, 0, 0, 4, ±
ja 48 ± 9, ± 48 0 19 63 26 26 21 47 3 0,
b a a
,5 1 1 2, 1
b
8, 1 3
2 6
D 26 1 5 4 4, 82, 6, 5, 2, 2, 1, 1, 61 1,
os 6, 1 0, 5, 95 22 32 98 57 32 97 31 ,9 2
is 4 5, 3 8 ± ± ± ± ± ± ± ± ± 7
m ± 7 ± 7 1, 5,5 1, 0, 0, 0, 0, 0, 3, ±
ed 35 ± 6, ± 28 3 28 55 14 18 36 43 1 0,
ia ,4 2 3c 1, c b b
0
2, 7 9
9 8
D 26 1 5 4 5, 81, 5, 6, 2, 2, 2, 0, 65 1,
os 9, 0 0, 6, 00 79 51 31 53 54 07 95 ,0 2
is 8 9, 0 0 ± ± ± ± ± ± ± ± ± 9
alt ± 1 ± 7 0, 5,3 0, 0, 0, 0, 0, 0, 3, ±
a 68 ± 7, ± 62 5 80 66 24 14 27 24 6 0,
,4 3 9c 2, c b a
0
3, 4 7
9 3
El sodio alcanzó valores superiores en las hembras de los grupos Dosis media y alta
en el muestreo 3 (tabla 5).
Exámenes de patología
13
El peso relativo de las adrenales fue significativamente mayor en las hembras del
grupo Dosis alta y el peso del hígado fue menor en los machos de los grupos Dosis
media y alta (tabla 6).
Tabla 6. Valores de media (X) y desviación estándar (DE) del peso relativo de
órganos (%)
14
02 3 01
N= 20, *N= 19. Letras iguales: no hay diferencias. Letras diferentes: diferencias
significativas p 0,05.
DISCUSIÓN
15
efectos adversos sobre este indicador por la administración repetida del polvo de
taninos.
El alimento fue retirado todos los días (excepto los sábados) en horas de la tarde,
reanudándose el suministro 3 h después de la administración. Si bien esto puede
haber resultado un factor de estrés al principio del estudio, después los animales se
adaptaron perfectamente al régimen, presentaron valores de consumo algo
superiores a los obtenidos en otros estudios realizados en condiciones similares
(Toxicidad a dosis repetida del 4-hidroxi-3-metoxibenzaldehído (vainillina) en ratas,
2003) y de los valores reportados por la literatura especializada para esta especie
con alimento suministrado a voluntad.17,18
El consumo de agua del grupo Dosis alta fue significativamente mayor con respecto
a los grupos restantes o a los grupos Dosis baja y Control, esto puede estar
relacionado con las características astringentes del producto, que provocan un
aumento de la sed y por ende del consumo de agua.
El hemograma en las hembras del grupo Dosis alta en el tercer muestreo presentó
valores inferiores a los del grupo Control, esto responde al comportamiento de un
animal que presentó valores por debajo de los límites normales (HB= 9,9, ERI=
6,13, HTC= 34,5) y afectó la media del grupo. Clínicamente, este animal presentó
inflamación del pabellón auricular y los resultados de histopatología reportaron
nefrocalcinosis.
En los machos las diferencias observadas no se cree que guarden relación con la
administración del polvo de taninos dado que las medias obtenidas en los grupos
tratados no son representativas de procesos tóxicos o patológicos y se
corresponden con lo reportado para la especie.17,18
La interpretación de los datos de bioquímica, así como de los resultados del análisis
estadístico no refleja que exista afectación de los indicadores estudiados por la
administración del polvo de taninos durante 6 meses por la vía oral. La no
existencia de un comportamiento estable de las diferencias de un muestreo a otro,
no evidencian una relación entre la administración de la sustancia de ensayo y las
variaciones en los parámetros de bioquímica sanguínea.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
16
1. Santana JL. Determinación de propiedades de taninos condensados extraídos de
la corteza de residual de especies forestales [Tesis en opción al grado científico de
Doctor en Ciencias Químicas]. La Habana: InsTEC; 2003.
2. Feeny P. Biochemical coevolution between plants and their insect herbivores. En:
Gilbert L, Raven P, editors. Coevolution of plants and animals. Texas: Texas
University Press; 1975. p. 3-24.
10. OECD. Organization for Economic Cooperation and Development. Guidelines for
the Testing of Chemicals. Section 4, "Health effects". 452 "Chronic Toxicity
Studies"; 2001.
11. FDA. Food and Drug Administration. Federal Register. Vol. 64. International
Conference on Harmonisation. Guidance on the duration of Chronic Toxicity Testing
in Animals (Rodent and Nonrodent Toxicity Testing). Availability; 1999.
14. Vega Montalvo R, Lagarto Parra A, García López A, Piloto Ferrer J, Santana
Romero JL, Gabilondo Ramírez T. Toxicidad de un extracto tánico de Pinus caribaea
Morelet. Rev Cubana Plant Med. 2005;10(2).
17
15. Weisbroth SH. Bacterial and Mycotic deseases. In: Baker HJ, Lindsey JR,
Weisbroth SH, editors. The laboratory rat. Vol. I. New York: Academy Press; 1979.
p. 193-241.
16. Ho CT, Lee C, Huang M. Phenolic compounds in food and their effects on health.
Analysis, occurrence and chemistry. Series 506. New York: ACS Symposium;1991.
p. 300-3.
17. Olfert ED, Cross BM, McWilliam A. Consejo Canadiense de Protección de los
Animales. Manual sobre el Cuidado y uso de los animales de experimentación. 2da.
ed. Vol. 1 ; 1998. p. 280-6.
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