1 Manual de Practicas Analisis de Fluidos

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA
FACULTAD DE LA SALUD HUMANA
CARRERA DE LABORATORIO CLINICO
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LA
ASIGNATURA DE ANÁLISIS DE
FLUIDOS ORGÁNICOS I
LOJA – ECUADOR
Elaborado por: BQ. María del Cisne Luzuriaga Moncada. Mg.Sc. Abril 2019.
2
Manual de Prácticas de Laboratorio
Biología
Carrera de Laboratorio Clínico – Facultad de la Salud Humana
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA
FACULTAD DE LA SALUD HUMANA
CARRERA DE LABORATORIO CLINICO
GUÍAS DE PRÁCTICAS DE ANALISIS DE FLUIDOS
CICLO: Quinto
SÍLABO: Análisis de Fluidos I
CÓDIGO DE ASIGNATURA Institucional: D3C5A4 Unesco: 3201.99
CÓDIGO DE LABORATORIO: S953
NOMBRE DEL LABORATORIO: Laboratorios de Microbiología y Parasitología
NORMAS BÁSICAS DE BIOSEGURIDAD:

- Mantener estrictamente el orden y la disciplina en todo el espacio físico del
laboratorio.
- Dejar los materiales (mochilas, cartucheras, teléfonos, chaquetas) el en lugar
dispuesto para este fin, antes de entrar al laboratorio. Ingresar al laboratorio
portando únicamente un cuaderno de laboratorio, guía práctica y material de
escritorio.
- Usar el mandil blanco cerrado, siempre y únicamente dentro del laboratorio. Jamás
utilizar el mandil fuera de las instalaciones del laboratorio, puesto que es un
vehículo de contaminación.
- Utilizar zapatos bajos, cerrados y con suela de goma (no resbalosos). En ningún caso
se puede acceder a los laboratorios con zapato de tacón alto o zapatillas abiertas
que dejen expuestos los pies.
- Llevar el cabello recogido siempre.
- Lavarse las manos antes y después de cada práctica de laboratorio.
- No se puede ingresar a ningún laboratorio comida o bebida. De igual manera está
prohibido fumar, aplicar cosméticos, manipular teléfonos o lentes de contacto.
- Utilizar guantes de látex o nitrilo en las prácticas en las que el docente lo señale.
Nunca tocar partes del cuerpo con los guantes y, al acabar la práctica, desecharlos
de forma adecuada en el recipiente destinado para ese fin.
- Identificar que los materiales y equipo para trabajar se encuentren en buen estado
antes de iniciar la práctica correspondiente.
- Conocer el funcionamiento y operatividad tanto de materiales y equipos antes de
hacer uso de ellos.
- Manejar con cuidado todos los reactivos y equipos.
- Aquellas normas de bioseguridad adicionales que sean indicadas por el docente.
NORMAS DEL APRENDIZAJE PRÁCTICO:

- La sesión práctica es obligatoria para todos los estudiantes.
- El estudiante que no asista a la sesión práctica, no podrá entregar el informe de
resultados de la práctica.
- Es responsabilidad del estudiante y del docente registrar su práctica de acuerdo a
las indicaciones del técnico o responsable del laboratorio.
- El docente tiene la potestad de dar indicaciones y regular su clase de forma
autónoma.
- Cualquier inquietud o sugerencia debe dirigirse a la Coordinación de Laboratorios.
3
Biología
PRÁCTICA NRO: 1
TEMA DE LA PRÁCTICA:
Normas de Bioseguridad y Buen Uso del Laboratorio
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
 Utilizar adecuadamente el equipo de bioseguridad de acuerdo al Nivel de
Bioseguridad del Laboratorio y explicar la importancia de las Normas de Buen Uso
del Laboratorio.
 Identificar los recipientes adecuados para el desecho de materiales.
RESULTADOS DE APRENDIZAJE DE LA PRÁCTICA:
 El estudiante entiende la importancia y necesidad del equipo de bioseguridad y sabe
utilizarlo adecuadamente.
 El estudiante conoce los diferentes tipos de desecho que se producen en el
laboratorio y puede clasificarlos.
FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA

El laboratorio es el recinto en el que se trabaja con material vivo o muestras tomadas a partir de
seres vivos. Estos pueden ser de origen microbiano (patógeno o no), humano o vegetal. Los
laboratorios de Ciencias Biológicas incluyen varios tipos: Laboratorios Químicos, Bioquímicos,
de Biología, de Microbiología, de Biología Molecular, de Ingeniería Ambiental, de Ingeniería
Genética, de Histología, de Patología, de Microbiología, de Parasitología, de Ecología, de
Zoología, de Botánica, etc; y sin importar la rama, van a compartir las normas básicas de
comportamiento y manejo.
Seguridad en el laboratorio de ciencias biológicas (Bioseguridad):

La bioseguridad e es un conjunto de normas y medidas para proteger al operador, a la muestra
biológica o a ambos. Engloba:
 Equipos de Seguridad (Barreras Primarias)
 Diseño y Construcción de Instalaciones (Barreras Secundarias)
 Normas de Bioseguridad y Buen Uso del Laboratorio
Niveles de Bioseguridad BSLs

No todos los laboratorios tienen las mismas características, puesto que dependen de los
organismos que se manejen en su interior y del tipo de muestra que se manipule.
Niveles de Bioseguridad y de Contención:
Son el conjunto de prácticas, técnicas y barreras que existen para el manejo de agentes y
sustancias. En general, los laboratorios de todo el mundo están clasificados en 4 categorías de
bioseguridad:
 Nivel de Bioseguridad 1: Organismos no patógenos humanos o animales. Este tipo de

microorganismos no representan un riesgo potencial para seres humanos o animales;
esto significa que el nivel de contención del laboratorio es mínimo. Las personas tienen
acceso restringido por factores administrativos, más no por riesgos de fuga de un
microorganismo. En esta categoría entran todos los laboratorios de docencia. Las
barreras primarias y secundarias son básicas; sin embargo las normas de bioseguridad y
buen uso del laboratorio deben observarse en todo momento.
 Nivel de Bioseguridad 2: En este nivel de bioseguridad se manejan microorganismos

patógenos humanos o animales de difícil diseminación (por ejemplo: transmisión
sexual) y que cuentan con tratamientos o vacunas eficaces. Generalmente, las personas
4
Biología
que trabajan con este tipo de microorganismos deben contar con vacunas al día; sin
embargo, la contención del microorganismo no es mayor puesto que su forma de
transmisión no representa un riesgo grave de generar un foco infeccioso. El uso de
equipo de bioseguridad para el personal, no obstante, sí es fuertemente observado. El
uso de guantes es obligatorio en todo momento y en algunos procedimientos,
mascarillas y gafas de seguridad pueden ser requeridas. Algunos de los microorganismos
que se manejan en este nivel son: el virus de la Hepatitis B, el HIV, salmonella, y el
Toxoplasma spp. A esta categoría pertenecen los laboratorios de hospitales, clínicas,
laboratorios clínicos humanos o animales, laboratorios de epidemiología, etc.
 Nivel de Bioseguridad 3: Este nivel permite el manejo de microorganismos cuya

diseminación es muy probable (por ejemplo: transmisión por aerosoles). Este tipo de
microorganismo representa un grave riesgo de salud pública si existiera fuga del mismo,
del laboratorio. Es el caso de Mycobacterium tuberculosis, el virus de la encefalitis de St.
Louis, y el Coxiella burnetii. También en este nivel se manejan algunos virus animales
como el de la fiebre aftosa, porque una epidemia o pandemia de estas enfermedades
animales resultaría en un golpe económico muy fuerte para los países afectados. En el
Ecuador, no existen estos laboratorios, por lo tanto, no se puede aislar estos patógenos
para investigación.
 Nivel de Bioseguridad 4: Este es el nivel de máxima contención y bioseguridad. Son

laboratorios con infraestructuras que aseguran el mínimo riesgo de fuga de un patógeno
y gran experticia de los investigadores. Generalmente estos laboratorios son
subterráneos y tienen varios muros de contención para evitar riesgo de fuga en caso de
terremotos y otros fenómenos naturales. Aquí, los investigadores nunca trabajan solos
y siempre están bajo supervisión de alguien fuera del laboratorio. Los tiempos de
exposición al patógeno son rigurosamente controlados y el personal de laboratorio usa
trajes que aseguran su total aislamiento del ambiente. Los patógenos que se manejan
aquí son de fácil diseminación y no existe vacuna ni tratamiento efectivo para tratar las
enfermedades que pueden causar. Aquí se manipula virus como Marburg, ébola o la
fiebre hemorrágica Congo- Crimeana. En el Ecuador, no existen estos laboratorios, por
lo tanto, no se puede aislar estos patógenos para investigación.
Para el Uso de los Laboratorios de Docencia de la Facultad de la Salud Humana, las normas
mínimas a observarse por bioseguridad son:
 Método aséptico: trabajo limpio, pulcro, en donde ningún factor externo pueda
contaminar la muestra, el órgano, el individuo con el que se está trabajando y sin que
ningún material contaminado pueda contaminar el ambiente exterior. Algunas pautas a
tomar en cuenta incluyen:
a) Vestimenta que cubra piernas y pies.
b) Recogida de cabello
c) Uso del mandil cerrado y con las mangas que lleguen al puño.
d) Lavado de manos antes de la práctica
e) Uso de guantes, mascarilla, cofia u otras barreras de bioseguridad.
f) Limpieza de la zona de trabajo antes de la práctica.
g) Trabajo calmado y concentrado con movimientos lentos y medidos.
h) Limpieza de la zona de trabajo al acabar la práctica.
i) Manejo adecuado de desechos.
j) Lavado de manos después de la práctica
 Rotulado: cuando se maneja muestras, el rotulado es fundamental para evitar
confundirlas. El etiquetado de tubos, cajas, placas debe contener generalmente:
5
Biología
nombre del operador, muestra, fecha. El rotulado adecuado es crítico en el caso de
diagnóstico médico, puesto que impacta directamente en el tratamiento del paciente.
 Registro de toda actividad, material, método, procedimiento, inconveniente o error que
se cometa en la práctica del experimento. Esto asegura que los resultados obtenidos
puedan ser reproducidos y los métodos, revisados.
 Manejo de desechos: En el caso de laboratorios clínicos o del área de la salud, se suele
trabajar con muestras de origen humano. Estas muestras se tratan como material
“contaminado”. Dicha denominación del material se utiliza debido que, al manipular
fluidos o biopsias de una persona, el operador no puede estar seguro de qué
microorganismos inocuos o patógenos están presentes en el fluido.
En los laboratorios se utiliza 3 recipientes básicos para el manejo de desechos:

- Guardianes rojos: para material corto-punzante, para precautelar la seguridad del
personal que hace la limpieza en la Facultad, como también la del personal que
recoge la basura de todos los laboratorios de la ciudad. Aquí se desechan: agujas,
placas, material de vidrio roto u otros desechos con puntas.
- Basureros negros: para desechos comunes. Es decir, envolturas, papeles, toallas
desechables para secarse las manos, envases, entre otros materiales que no hayan
estado en contacto con la muestra biológica.
- Basureros rojos: para desechos infecciosos. Es decir, algodones, torundas, gasas,
mascarillas, guantes u otros materiales que estén contaminados.
PROCEDIMIENTO:
- Revisión del sustento teórico de la práctica.
 Explicación del docente del fundamento de la práctica.
 Resolución de preguntas sobre el fundamento teórico.
TRABAJO DEL ESTUDIANTE: Sera realizado y presentado por el estudiante luego de realizar la
práctica de acuerdo a las instrucciones del docente
FORMATO TIPO ARTICULO CIENTIFICO CON NORMAS APA QUE CONTENGA:
1. Portada
2. Resumen
3. Palabras clave
4. Introducción
5. Resultados
6. Discusión
7. Referencias
PREGUNTAS DE CONTROL:
1. ¿Qué nivel de bioseguridad tiene el laboratorio en el que se realizarán las prácticas?
2. ¿Qué equipo de Bioseguridad se necesita en este laboratorio?
3. ¿Se puede usar el mandil abierto dentro del laboratorio?
4. ¿Se puede usar zapatillas abiertas dentro del laboratorio?
5. ¿Se puede usar pantalonetas o faldas dentro del laboratorio?
6. ¿Se puede tomar agua dentro del laboratorio?
7. ¿Se puede usar el mandil fuera del laboratorio?
8. ¿Se puede llevar el cabello suelto dentro del laboratorio?
9. ¿Por qué es importante seguir las normas de bioseguridad de un laboratorio?
10. ¿Cómo se clasifica los desechos en el laboratorio?
BIBLIOGRAFÍA:
- Organización Mundial de la Salud. (2005). Manual De Bioseguridad En El Laboratorio.
6
Biología
Tercera Edición. Ginebra. ISBN 92 4 354650 3. Consulta virtual desde:
http://www.who.int/topics/medical_waste/manual_bioseguridad_laboratorio.pdf
- Manual de Buen Uso del Laboratorio de los Laboratorios de la Facultad de la Salud
Humana.
Fecha _____________________
Hora de______________________ a ______________________
______________________________ _______________________________
Estudiante Docente
CI: ___________________________ CI:____________________________
7
Biología
PRÁCTICA NRO: 2
Análisis de caracteres macroscópicos de la orina: Color, aspecto, olor y volumen.
 Desarrollar habilidades, destrezas y actitudes a través de la realización de técnicas y
procedimientos en el análisis macroscópico de la orina para contribuir al
diagnóstico, prevención y solución de los problemas de enfermedades que afectan
el tracto urinario.
 Fundamenta el proceso de formación de la orina
 Analiza y reporta los resultados de la observación macroscópica de la orina,
observando criterios de control de calidad.

Mediante el examen físico y/o químico de la orina que comprende una serie de pruebas
químicas, macroscópicas y microscópicas donde se evalúan infecciones del tracto urinario,
enfermedad renal y enfermedades de otros órganos que provocan la aparición de metabolitos
anormales (productos de descomposición) en la orina. El estudiante estará en la capacidad de
observar de identificar las características físicas presentes en la muestra de orina.
MATERIALES Y REACTIVOS: (por estudiante)
 Muestras de orina
 Tubo de ensayo de 10 ml
 Gradillas
EQUIPOS Y HERRAMIENTAS: (por grupo)

 Mesa de trabajo.
PROCEDIMIENTO:
1. Verificar el volumen de orina contenido en el frasco de recolección de orina y anotar los
resultados.
2. Colocar 10 mL de orina en un tubo de ensayo.
3. Observar el color de la orina y compararlo con la cartilla de colores de la orina: estos pueden
variar desde: sin color, pajizo, amarillo claro, amarillo oscuro, ámbar, café, rosado o rojizo,
naranja, azul o verde, espumosa.
4. Verificar el aspecto de la orina, al colocar el tubo de ensayo frente a una hoja de papel bond
con letras impresas y compararlo con la cartilla de turbiedad.
8
Biología
5. Abanicar la mano por encima del tubo de ensayo y percibir el olor que esta emite, reportar
como: aromático, similar al amoniaco, frutado o dulce, rancio, col, lejía.
TRABAJO DEL ESTUDIANTE: será realizado y presentado por el estudiante para la valoración de
la práctica, de acuerdo a las instrucciones del docente.

1. Portada
2. Resumen
3. Palabras clave
4. Introducción
5. Resultados
6. Discusión
7. Referencias
 ¿Cuál podría ser la causa de una orina turbia?
 ¿Un color ámbar oscuro de la orina qué podría indicar?
BIBLIOGRAFÍA
 G.Prats, Microbiología Clínica. 2da ed.1987 España. Editorial Médica Panamericana
 Jose Manuel González de Buitrago, Técnicas y Métodos de Laboratorio Clínico, 3ra ed.2010
Ed. Elsevier Masson.
9
Biología
PRÁCTICA NRO: 3
Determinación de Peso específico
procedimientos en el análisis macroscópico de la orina para contribuir al
diagnóstico, prevención y solución de los problemas de enfermedades que afectan
el tracto urinario.
 Analiza y reporta los resultados de la observación macroscópica de la orina,
 Demuestra calidez, calidad y respeto al usuario al momento de toma de la muestra

El peso específico o la densidad indica la proporción especifica de compuestos sólidos disueltos
en el volumen total de la muestra de orina.

 Tira reactiva de orina
 Tubos de ensayo de 10 mL
 Gradillas
 Urinómetro
EQUIPOS Y HERRAMIENTAS (por grupo)

 Mesa de trabajo
PROCEDIMIENTO:
1. Mezclar la muestra de orina en el frasco recolector y luego colocar 10 mL en un tubo
cilíndrico que requiere de 15 ml de orina para hacer la lectura. Es necesario eliminar las
burbujas porque interfieren en la lectura del menisco. El refractómetro no debe contactar
con el fondo ni con las caras del tubo. Es necesario hacer girar el instrumento de manera
que flote en el fondo del tubo. Hacer la lectura en la parte inferior del menisco con el
hidrómetro a la altura del ojo.
2. Identificar la zona reactiva de la tirilla que permite la medición del Peso específico.
3. Describir las partes y funcionamiento del urinómetro.
4. Explicar el procedimiento para la medición del peso específico mediante el uso de tirilla
reactiva y del urinómetro.
5. Realizar la práctica individualmente.
6. Proporcionar al estudiante las hojas de registro de datos
1. Portada
2. Resumen
3. Palabras clave
4. Introducción
5. Resultados
10
Biología
6. Discusión
7. Referencias
1. ¿Qué nos indican la medición de peso específico u osmolalidad?
2. Si se encuentra un peso específico elevado en una orina clara, qué se debe sospechar?
3. ¿Cuáles son los valores de referencia del peso específico en adultos sanos y con una
ingesta de líquidos normal?
4. En casos de deshidratación, ¿cómo se encuentra el peso específico?
BIBLIOGRAFÍA:
 Jose Manuel González de Buitrago. Técnicas y Métodos de Laboratorio Clínico, 3ra ed.2010
Ed. Elsevier Masson.
11
Biología
PRÁCTICA NRO: 4
Análisis químico de la orina con tiras reactivas
procedimientos en el análisis macroscópico y microscópico de la orina para
contribuir al diagnóstico, prevención y solución de los problemas de enfermedades
que afectan el tracto urinario.
 Analiza y reporta los resultados de la observación macroscópica de la orina.
 Demuestra calidez, calidad y respeto al usuario al momento de toma de la muestra.

Es el primer paso para buscar el diagnóstico de múltiples cambios patológicos a partir a partir
del resultado obtenido con el uso de la tira reactiva.
Es una prueba de pesquisaje que nos proporciona información rápida y confiable sobre
alteraciones patológicas de la orina.

 Tiras reactivas de orina para la medición de los parámetros químicos: densidad, pH,
bilirrubina, glucosa, urobilinógeno, cuerpos cetónicos, proteínas.
 Tubos de ensayo
 Gradilla
 Registros
 Tabla indicadora con las variaciones de color para determinar la concentración de cada
parámetro.

 Mesa de trabajo
PROCEDIMIENTO:
1. Leer el inserto adjunto en el frasco de tiras reactivas de orina.
2. Describir y analizar el fundamento del método para el examen químico de la orina.
3. Colocar 10 mL de orina en un tubo de ensayo.
4. Introducir la tira reactiva dentro del tubo de ensayo, esperar unos segundos y retirarla.
5. Dejar reposar 60 segundos y realizar la lectura.
6. Comparar los colores de la tira con los marcados en el frasco de las tiras de orina.
7. Anotar los resultados en cruces.
1. Portada
2. Resumen
3. Palabras clave
12
Biología
4. Introducción
5. Resultados
6. Discusión
7. Referencias
1. Cuáles serían las diferencias entre una célula vegetal y una célula animal?
2. Dibuje ambos tipos de células y enumere las diferencias.
BIBLIOGRAFÍA:
- Bernardo Chataing, Elsa Nieves, Universidad de Los Andes, Manual de laboratorio de
Biología, Primera edición, 2009, Venezuela.
- Curtis Helena, Schnek Adriana, Flores Graciela, Biología, 7ta edición
13
Biología
PRÁCTICA NRO: 5
Preparación del sedimento y análisis microscópico
 Conocer e identificar caracteres morfológicos, estructurales, composición de la orina en
su estado normal y sus alteraciones, con precisión.
procedimientos en la preparación del sedimento urinario para el análisis microscópico de
la orina.
 El estudiante identifica y clasifica las principales estructuras que se encuentran en el
sedimento urinario en relación al tipo de orina.
 Analiza y reporta los resultados de la observación macro y microscópica de la orina,

En una muestra con sedimento urinario se pueden encontrar hematíes, leucocitos, uratos
amorfos, células renales, bacterias, mucina, espermatozoides, células de descamación, cristales
de oxalato cálcico y fosfatos triples. Todos estos elementos tienen importancia clínica en el
paciente y así somos ayuda vital en el diagnóstico.

 Protocolo para la preparación del sedimento urinario
 Tubos de ensayo de 10 ml
 Gradilla
 Guantes desechables

 Centrífuga
 Microscopio óptico
PROCEDIMIENTO:
1. El análisis de la muestra de orina debe hacerse por centrifugado. Se mezcla la muestra de
orina y se coloca entre 10-15 ml de orina en un tubo de ensayo. Centrifugar a 2000 rpm
durante 5 minutos. Se elimina el líquido sobrenadante, y se suspende el sedimento de la
orina que baja por las paredes del tubo. Se dan golpecitos en la parte inferior del tubo para
mezclar el sedimento. Se coloca una gota de este en un porta objeto limpio. Se cubre
inmediatamente con un cubre objeto y examinar al microscopio.
2. Enfocar con el lente de 10X y luego pasar al lente de 40X
3. Identificar la presencia de diversos elementos presentes en la muestra: elementos formes,
cilindros, microorganismos, cilindros, cristales, parásitos, etc.
4. Anotar los resultados en la hoja de registros de datos.
1. Portada
2. Resumen
3. Palabras clave
4. Introducción
5. Resultados
6. Discusión
7. Referencias
14
Biología
1. Los microorganismos (bacterias, hongos , células , parásitos, etc. ), son elementos
extraños al sistema urinario, sin embargo por qué es importante su identificación?
2. ¿Cuál es el origen de las células presentes en el sedimento urinario?
BIBLIOGRAFÍA:
 Jose Manuel González de Buitrago. Técnicas y Métodos de Laboratorio Clínico, 3ra ed.2010
Ed.elsevier masson.
15
Biología
PRÁCTICA NRO: 6
Análisis Elemental y Microscópico de Orina (EMO)
procedimientos a partir de la interacción comunitaria, para contribuir al diagnóstico,
prevención y solución de los problemas de enfermedades del aparato urinario.
 Identificar caracteres morfológicos y la composición de la orina, en su estado normal y
sus alteraciones con precisión así como interpretar el análisis microscópico de la orina

 Clasifica las principales estructuras que se encuentran en relación al tipo de orina.
 Demuestra calidez, calidad y respeto al usuario al momento de toma de la muestra.
Sedimento que se obtiene de una muestra de orina de emisión reciente, de la cual se centrifugan
10 cm a 2.000 revoluciones por minuto, durante cinco minutos, y se desechan los 9 cm del
sobrenadante. En una persona sana, la orina contiene menos de 3 hematíes por campo, menos
de 5 leucocitos por campo y algunos cilindros hialinos, células epiteliales y cristales.
La aparición, en el estudio del sedimento urinario, de elementos anormales como cilindros

hemáticos, cilindros leucocitarios, cilindros granulosos, etc., hace pensar en diversas nefropatías
o enfermedades parenquimatosas renales

 Material biológico: muestras de orina
 Gradilla
 Portaobjetos y cubre objetos

 Macro centrífuga
 Microscopio
 Mesa de trabajo
PROCEDIMIENTO:
1. Realizar el análisis físico, químico y microscópico de la orina, según las indicaciones de las
prácticas anteriores.
2. Explicar con cuáles son las características físicas de la orina.
3. Realizar de forma correcta la lectura de la tira reactiva para el examen químico.
4. Identificar con precisión los elementos presentes en el sedimento urinario.
5. Interpretar los resultados del análisis físico, químico y microscópico de orina.
6. Anotar los resultados en la hoja de registro de datos.
1. Portada
2. Resumen
16
Biología
3. Palabras clave
4. Introducción
5. Resultados
6. Discusión
7. Referencias
 ¿Por qué la muestra de orina debe ser estudiada en fresco?
 Anote consideraciones importantes sobre la interpretación de resultados.
BIBLIOGRAFÍA:
 G.Ruiz Reyes, A.Ruiz Arguelles, Fundamento de Interpretación clínica de los Exámenes de
Laboratorio, 2da edición, Madrid, editorial Medica Panamericana.
17
Biología
PRÁCTICA NRO: 7
Análisis: Gram de Gota fresca y BAAR de orina
procedimientos, para contribuir al diagnóstico, prevención y solución de los problemas de
enfermedades del aparato urinario.
 Identificar caracteres morfológicos y la composición de la orina, en su estado normal y
sus alteraciones con precisión así como interpretar el análisis microscópico de la orina.
 Clasifica las principales estructuras que se encuentran en relación al tipo de orina.

La tinción de Gram y BAAR de orina consiste en una prueba de laboratorio útil para detectar la
presencia de microorganismos, especialmente bacterias y algunas veces hongos, en una
muestra obtenida del foco infeccioso o sospechoso de serlo. Proporciona resultados con relativa
rapidez y facilidad acerca del tipo de bacteria que puede estar presente.

 Material biológico: muestras de orina
 Gradilla
 Portaobjetos
 Parrilla para realizar la tinción
 Mechero
 Agua de grifo
Reactivos:
 Colorantes para GRAM: violeta de genciana, lugol, alcohol-acetona, fucsina para
Gram/safranina.
 Colorantes para Tinción de Zieehl Nelsen: safranina/fucsina, alcohol-ácido y azul de
metileno
 Aceite de inmersión.

 Macro centrífuga
 Microscopio
PROCEDIMIENTO:
GRAM DE GOTA FRESCA:

1. Preparación de una extensión (frotis): cargar el asa estéril con la orina, se deposita una
cantidad que no sea excesiva en el centro del porta y se extiende por rotación del asa en un
18
Biología
pequeño círculo alrededor de uno – dos cm. de diámetro que facultativamente ha sido
marcado en la cara inferior del portaobjetos.
2. Una vez efectuada la extensión, secar la preparación a temperatura ambiente, o por pases
rápidos por la llama, controlando que la temperatura no sea excesiva. La preparación está
en condiciones de ser fijada y teñida.
3. Tinción de Gram: aplicar el protocolo técnico proporcionado
4. Dejar secar el frotis al ambiente.
5. Observación del extendido al microscopio, con objetivo de inmersión para identificar la
presencia de bacterias Gram positivas y/o Gram negativas
6. Realizar el informe de resultado del examen de acuerdo a normas establecidas.
BAAR DE ORINA:
1. Preparación de una extensión (frotis): la muestra de orina se divide en dos a cuatro tubos y
se centrifugan a 3000 – 3500 rpm por 30 minutos. Se decanta el sobrenadante dejando unos
2 ml de sedimento en cada tubo. Los tubos se mezclan con un mezclador y los sedimentos
se combinan.
2. Una vez efectuada la extensión se deja secar a temperatura ambiente y está en condiciones
de ser fijada y teñida.
3. Tinción de Ziehl Neelsen: aplicar el protocolo técnico proporcionado.
4. Dejar secar el frotis al ambiente.
5. Observación del extendido coloreado al microscopio con objetivo de inmersión, para
identificar la presencia del bacilo ácido-alcohol resistente (BAAR)
6. Realizar el informe de resultado del examen de acuerdo a normas establecidas.
1. Portada
2. Resumen
3. Palabras clave
4. Introducción
5. Resultados
6. Discusión
7. Referencias
 Señale la importancia del examen de Gram de gota fresca
 ¿Qué nos indica el examen de BAAR de orina positivo?
BIBLIOGRAFÍA:
 Todd-Sanford-Davidsohn, Diagnóstico y tratamiento Clínicos por el laboratorio, 7ª edición.
Barcelona –Madrid. Editorial Salvat.
 G.Ruiz Reyes, A.Ruiz Arguelles, Fundamento de Interpretación clínica de los Exámenes de
Laboratorio, 2da edición, Madrid, editorial Medica Panamericana.
 G.Prats, Microbiología Clínica. 2da ed.1987 España. Editorial Médica Panamericana.
19
Biología
20
Biología

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CARRERA DE LABORATORIO CLINICO

NORMAS BÁSICAS DE BIOSEGURIDAD:

NORMAS DEL APRENDIZAJE PRÁCTICO:

FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA

Seguridad en el laboratorio de ciencias biológicas (Bioseguridad):

Niveles de Bioseguridad BSLs

 Nivel de Bioseguridad 1: Organismos no patógenos humanos o animales. Este tipo de

 Nivel de Bioseguridad 2: En este nivel de bioseguridad se manejan microorganismos

 Nivel de Bioseguridad 3: Este nivel permite el manejo de microorganismos cuya

 Nivel de Bioseguridad 4: Este es el nivel de máxima contención y bioseguridad. Son

En los laboratorios se utiliza 3 recipientes básicos para el manejo de desechos:

Hora de______________________ a ______________________

FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA

EQUIPOS Y HERRAMIENTAS: (por grupo)

FORMATO TIPO ARTICULO CIENTIFICO CON NORMAS APA QUE CONTENGA:

FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA

MATERIALES Y REACTIVOS: (por estudiante)

EQUIPOS Y HERRAMIENTAS (por grupo)

FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA

MATERIALES Y REACTIVOS: (por estudiante)

EQUIPOS Y HERRAMIENTAS: (por grupo)

FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA

MATERIALES Y REACTIVOS: (por estudiante)

EQUIPOS Y HERRAMIENTAS: (por grupo)

RESULTADOS DE APRENDIZAJE DE LA PRÁCTICA:

FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA

La aparición, en el estudio del sedimento urinario, de elementos anormales como cilindros

MATERIALES Y REACTIVOS: (por estudiante)

EQUIPOS Y HERRAMIENTAS: (por grupo)

FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA

MATERIALES Y REACTIVOS: (por estudiante)

EQUIPOS Y HERRAMIENTAS: (por grupo)

GRAM DE GOTA FRESCA:

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