DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE Fe (ll) EN UN

PRODUCTO FARMACÉUTICO: CURVA DE ERROR

Karen Bedoya Sánchez
bedoya.karen@correounivalle.edu.co
Natalia Castillo Moreno
natalia.castillo.moreno@correounivalle.edu.co
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento de Química, Universidad del Valle, Sede
Yumbo, Colombia.

Fecha de realización: 03/noviembre/2019

Fecha de entrega: 06/noviembre/2019
Entregado a: Harold Díaz Segura

RESUMEN
En la práctica de laboratorio se llevó acabo la determinación de Fe2+ por medio de
espectrofotómetria, partiendo de una solución madre preparada con la sal de Mohr, de la cual se
obtuvo una solución de 2.0ppm. posteriormente con estas se prepararon las soluciones estándares
y se realizó un barrido espectral para hallar la longitud de onda de máxima absorción para el
tratamiento de la muestra; se tomó una alícuota de jarabe, la cual fue digestada y tratada con HCl
al 1%, de esta se tomó una alícuota a la que se adiciono una solución de cloruro de hidroxilamina,
1-10 fenantrolina y solución de acetato de sodio para realizar sus respectivas mediciones de
absorbancia , dando una concentración de 2412.5ppm de Fe en la muestra.

DATOS, CÁLCULOS Y RESULTADOS se le agregó 1Ml de etanol, diluyendo con 10ml

de agua y enrasando a 50ml. Los cálculos se
Se preparó una solución madre de 50ppm a muestran a continuación:
partir de la sal de Mohr. De ésta se preparó
una solución de 25mL con una concentración
Hidroxilamina 10% p/v:
de 2,0ppm. Se realizó el siguiente cálculo para
hallar los mL necesarios: 10𝑔
∗ 25𝑚𝐿
𝑚𝐿
𝑔 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 =
50mg 1mmol sal de mohr 1mmolFe 100
∗ ∗
L 392.13mg 1mmol sal de mohr 𝑔 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 = 2.5𝑔
55.85mgFe
∗ ∗ 0,25L = 1,78mg Fe
1mmolFe Acetato de sodio 10% p/v:

10𝑔
∗ 200𝑚𝐿
C1*V1 = C2*V2 [ec.1] 𝑚𝐿
𝑔 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 =
100
V1 = (C2*V2)/C1; 𝑔 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 = 20𝑔

2.0ppm*50mL/50ppm = 2mL sln 50ppm Fe

HCl 1% v/v:
Posteriormente se preparó 25mL de cloruro de
hidroxilamina al 10% p/v, 25mL de acetato de
sodio al 10% p/v, 200mL de HCl al 1% v/v y 1 mL 1,18 g 100 mL
200mL sln ∗ ∗ ∗ = 6,37mL
una solución de 1-10 fenantrolina, utilizando 100 mL 1 mL 37 g
0,05g de monohidratado de 1-10 fenatrolina y
1
Soluciones patrón: Continuación de la tabla. 2

Se prepararon las soluciones estándar a partir 506 0,308

de la ecuación 1, se hallaron los volúmenes
508 0,31
(Ml) de los patrones de 2,0 y 50ppm
necesarios para éstas y se consignaron en la 510 0,311
tabla 1. 512 0,312
514 0,309
Tabla 1. Volúmenes de estándares 516 0,305
520 0,294
Concentración Volumen Volumen 540 0,164
de sln 2,0 de sln 50 560 0,058
ppm (mL) ppm (mL) 580 0,023
0,04 0,5 600 0,014
0,08 1,0
0,16 2,0
0,24 3,0
0.35
0,40 5,0
0.3

ABSORBANCIA
1,0 0,5
0.25
2,0 1,0
4,0 2,0 0.2
8,0 4,0 0.15
10,0 5,0 0.1
16,0 8,0 0.05
0
A cada solución se le agregó 1mL de cloruro 350 450 550 650
de hidroxilamina, 2,5 de fenantrolina, 8mL de LONGITUD DE ONDA
acetato de sodio y se enrasó con agua
destilada hasta el aforo en matraces de 25mL. Grafica 1. Espectro de absorción de Fe
Se preparó un blanco con todos los reactivos
excepto la muestra. Curva de error

Luego se hizo un barrido espectral con la
solución de 2,0ppm de Fe para conocer la
longitud de onda de máxima absorción,
usando el blanco como referencia. Los datos
se muestran en la tabla 2.
Se tomó la absorbancia que arrojaron las
soluciones estándares a diferentes
concentraciones, usando el blanco como
referencia y la longitud de onda de máxima
absorción en el barrido espectral.

Tabla 2. Barrido espectral en una solución Se grafica la curva Crawford con el fin de que
2,0ppm Fe el rango de las concentraciones del error en
las mediciones sea mínimo. Para ello se utilizó
longitud de la absorbancia de las soluciones estándares
Absorbancia para hallar las respectivas transmitancias
onda
400 0,114 usando la ecuación 2, este valor es utilizado
420 0,173 para obtener la curva de error, haciendo usos
440 0,216 de la ecuación 3, considerando un error
460 0,25 fotométrico constante de ∆T=0,05%. Los
datos se registran en la tabla 3.
480 0,284
500 0,301
502 0,304 %𝑇 = 10−𝐴 ∗ 100 [𝐸𝑐. 2]
504 0,306
2
 ∆𝐶 0,434 ∆𝑇 Continuación de la tabla 4.
= [𝐸𝑐. 3]
𝐶 𝑇 log 𝑇
-0,620 5,811
-0,398 9,0087
0,000 31,609
Tabla 3. Datos curva de error 0,301 50,909
0,602 76,719
Patrón 0,903 94,517
(ppm) A T %T ∆C/C 1,000 96,888
0,04 -0,002 1,005 100,461579 10,800 1,204 98,758
0,08 0,003 0,993 99,3116048 -7,283
0,16 0,015 0,966 96,6050879 -1,498 Curva de Ringbom
0,24 0,026 0,942 94,1889597 -0,886
120
0,40 0,041 0,910 90,9913273 -0,582
100
1,0 0,165 0,684 68,3911647 -0,192
2,0 0,309 0,491 49,0907876 -0,143 80

100-%T
4,0 0,633 0,233 23,2809126 -0,147 60
8,0 1,261 0,055 5,48276965 -0,314 40
10,0 1,507 0,031 3,11171634 -0,463
20
16,0 1,906 0,012 1,24165231 -0,917
0
-2.000 -1.000 0.000 1.000 2.000
-20
15.000 log [Fe]

10.000
Gráfica 3. Curva de Ringbom
5.000
∆C/C

Curva de calibración
0.000
0.00 50.00 100.00 150.00 De acuerdo a la curva de Ringbom se tomaron
-5.000 los puntos de mejor linealidad para de esta
forma construir la curva de calibración como
-10.000 se muestra en la gráfica 4 y los datos en la
%Transmitancia
tabla 5.

Tabla 5. Datos curva de calibración

Gráfica 2. Curva de error
concentración
Para construir la curva de Ringbom se calculó (ppm) A
el logaritmo de la concentración contra cien
menos el porcentaje de transmitancia (100- 0,40 0,041
%T). Se consignaron los datos en la tabla 4. 1,0 0,165
2,0 0,309
Tabla 4. Datos de la curva de Ringbom. 4,0 0,633
8,0 1,261
log [ ] 100-%T
-1,398 -0,462
-1,097 0,6884
-0,796 3,3949
3
 Con la curva de calibración se aplicó la
Curva de calibración ecuación de Beer para hallar la concentración
1.4 de la muestra como se observa a
1.2 y = 0.159x - 0.008 continuación:
R² = 0.9995
1
𝐴 = 0.159𝐶 − 0,008
0.8
0.6 𝐴 + 0.0215
0.4 𝐶=
0,1863
0.2
0 0.299 + 0.008
0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 𝐶=
0,159

Gráfica 4. Curva de calibración

𝐶 = 1,93𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒

Concentración de Fe en la muestra:
Determinación de Fe muestra problema
1,93 𝑚𝑔 𝐹𝑒 25 𝑚𝐿 100 𝑚𝐿 1000𝑚𝐿
Se tomaron 0,5mL de jarabe con una 𝑥 𝑥 ∗
1000 𝑚𝐿 𝑠𝑙𝑛 4,0 𝑚𝐿 0.5 𝑚𝐿 1𝐿
concentración de 2,5g de jarabe por cada = 2412,5 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒
100mL de jarabe y le fueron añadidos 4,0mL
de HCl para realizar la digestión en la plancha Concentración de Fe como ppm de FeSO4
de calentamiento para reducir su volumen a la
mitad. Seguidamente se realizó la filtración 2412,5𝑚𝑔 𝐹𝑒 1 𝑚𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒 1 𝑚𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒𝑆𝑂4
𝑥 𝑥
haciendo lavados con HCl al 1% hasta 1000 𝑚𝐿 𝑠𝑙𝑛 55.85 𝑚𝑔 𝐹𝑒 1 𝑚𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒
completar el aforo de 100mL. También se
realizó un blanco con todos los reactivos 151.908 𝑚𝑔 𝐹𝑒𝑆𝑂4
𝑥
menos el estándar. 1 𝑚𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒𝑆𝑂4

A continuación se muestran los cálculos = 6,56 𝑝𝑝𝑚 𝐹𝑒𝑆𝑂4

respectivos para hallar la concentración de Fe |𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝑹𝒆𝒂𝒍−𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝑬𝒙𝒑.|
en la muestra: % 𝑬𝒓𝒓𝒐𝒓 = ∗ 100 [Ec. 4]
𝑽𝒂𝒍𝒐𝒓 𝑹𝒆𝒂𝒍

2,5𝑚𝑔 1 𝑚𝑔 |2500𝑝𝑝𝑚−2412,5𝑝𝑝𝑚|
0,5 𝑚𝐿 𝑗𝑎𝑟𝑎𝑏𝑒 ∗ ∗ = 12,5 𝐹𝑒 % 𝑬𝒓𝒓𝒐𝒓 = ∗ 100
2500 𝑝𝑝𝑚
1000 𝑚𝐿 0,1 𝐿 𝐿
% 𝑬𝒓𝒓𝒐𝒓 = 3,5%
Se realizó la solución de 2,0ppm de Fe a partir
de la solución preparada haciendo los cálculos Absortividad molar del complejo Fe-
para obtener el volumen necesario: fenantrolina.
2 𝑚𝑔 𝐹𝑒 1000 𝑚𝐿 𝑠𝑙𝑛 Hallando la pendiente de la curva de
25 𝑚𝐿 𝑠𝑙𝑛 ∗ ∗ = 4,0 𝑚𝐿
1000 𝑚𝐿 12,5𝑚𝑔 𝐹𝑒 calibración gráfica 4, se determinó el
coeficiente de absorción molar.
A este volumen se le adicionó agua destilada
y los mismos reactivos utilizados 𝐴 = 𝜀𝑏𝐶
anteriormente para las soluciones patrón. 𝑚 = 𝜀𝑏

La muestra fue llevada al espectrofotómetro, 0.59 𝑝𝑝𝑚−1

𝜀=
donde con una longitud de onda de 514nm se 1.00 𝑐𝑚
registró una absorbancia de 0,299. 𝐿 1000𝑚𝑔 55,85 𝑔 𝐹𝑒
𝜀 = 0.159 𝐹𝑒 𝑐𝑚−1 𝑥 ∗
𝑚𝑔 1𝑔 1 𝑚𝑜𝑙 𝐹𝑒

4
𝜀 = 8880,15𝑀−1 𝑐𝑚−1

|11100−8880,15|
% 𝑬𝒓𝒓𝒐𝒓 = ∗ 100
11100

% 𝑬𝒓𝒓𝒐𝒓 = 19,99%

ANÁLISIS DE RESULTADOS

La espectroscopia por absorción molecular se

basa en la medición de la trasmitancia o de la
absorbancia de soluciones que están en
celdas transparentes que tienen longitud de
trayectoria de b cm. Normalmente, la
concentración de un analito absorbente se
relaciona en forma lineal con la absorbancia
según la ley de beer. [2] Figura 1. Espectrofotómetro genesys 20.

Componentes
La ley de Beer establece que la intensidad de
un haz de luz monocromática disminuye 1. Interruptor de encendido/apagado
2. Pantalla digital
exponencialmente al aumentar
3. Tapa de compartimiento de muestras
aritméticamente la concentración de la 4. Teclado
sustancia absorbente, cuando este haz pasa a 5. Impresora interna opcional
través de un medio homogéneo. [3] 6. Puerta del compartimiento de la lámpara

Para la determinación de hierro en la práctica Este se trabajó en el rango visible ya que el

se utilizó el espectrofotómetro de un solo haz;
su funcionamiento se basa en la luz de la
lámpara especial que posee, que es guiada
por medio de un conector que selecciona y
separa la luz de la longitud de onda, para
luego pasar por una muestra. La intensidad de
la luz que sale de esa muestra es captada y se
compara con la intensidad de la luz que incidió
en esa muestra, con esa información se puede
calcular la transmitancia, la cual dependerá de
la concentración de la sustancia. [4]
hierro con el 1-10 fenantrolina generan un
complejo con un color rojizo. El análisis
colorimétrico es la variación en la intensidad
del color de una solución con cambios en la
concentración. [1]
Este obedece a la ley de Beer en la
concentraciones menores a 10ppm de Fe (II),
ya que en concentraciones más altas se
pierde su linealidad; por esto de 2.0ppm se
observó una linealidad y un porcentaje de
error bajo.

A continuación en la figura 1 se muestra el tipo

de espectrofotómetro que se utilizó.

Imagen 2. Reacción de hierro y fenatrolina

En la gráfica dos se observa la curva de error

donde se puede ver que las concentraciones
más altas y más diluidas generan un error un
5
poco más grandes que las otras soluciones ANEXOS.
que tiene una linealidad. A concentraciones
altas, solutos se convierten prácticamente en 1) Suponiendo un error fotométrico del
disolventes, para concentraciones de soluto 1%, demuestre matemáticamente que el error
suficientemente altas el índice de refracción en la medición de la transmitancia es mínimo
cambia y la variación de la absorbancia parece cuando el valor es alrededor del 37%.
no obedecer la ley de Beer.[5] con las
concentraciones más pequeñas la detección Como se indica a continuación se
será pequeña y arrojara que no hay suficiente puede demostrar que el mínimo error
soluto. relativo se obtiene para una
absorbancia de 0.434.
Con lo anterior expuesto se descartaron los
datos de mayor concentración y menor La primera derivada de la ley de Beer
concentración, teniendo un intervalo desde es:
0.40ppm hasta 8.0 ppm de Fe, para que
linealidad de la ley de Beer no pierda. 𝐴 = ℰ∗𝑏∗𝑐
𝐴 = −𝐿𝑜𝑔 𝑇 ∗ ℰ ∗ 𝑑𝐶
La curva de Ringbom se construyó con el fin 𝐴 = −𝐿𝑜𝑔 ℮ ∗ 𝑑𝑇 ∗ 𝑇
obtener el intervalo de concentraciones óptimo
o el intervalo de la relación lineal entre
absorbancia y concentración. Donde dT representa el error
indeterminado en la lectura de la
El porcentaje de error de la muestra es bajo escala de transmitancia y dC indica la
dando a conocer que el manejo del equipo de incertidumbre en la concentración.
espectrofotometría necesario para el análisis Se tiene que
químico fue muy bueno.
𝐿𝑜𝑔 ℮ = 0,434
𝑇
ℰ ∗ 𝑏 = −𝐿𝑜𝑔
𝐶
CONCLUSIONES. 𝑇
ℰ ∗ 𝑏 = −𝐿𝑜𝑔
 las curvas de calibración constituyen 𝐶
una herramienta muy útil para la Se obtiene:
cuantificación de sustancias a partir de 𝑑𝐶 ∗ 𝐶 = 0,434 ∗ 𝑇(𝐿𝑜𝑔𝑇) ∗ 𝑑𝑇
espectros de absorción.
 Para poder cuantificar una sustancia
Derivando esta ecuación de nuevo e
su espectro debe tener un intervalo de
linealidad de la curva de calibración. igualando a cero, se obtiene que la
Las curvas de Ringbom constituyen transmitancia óptima corresponde a
una ayuda valiosa para determinar 36.8 % o 37% que equivale a una
dichos rangos de concentración absorbancia de 0.434.
óptimos. Reemplazando ΔT y T
 El barrido espectral es necesario para respectivamente como 1% y 37% en la
la elección de la longitud de onda
ecuación se tiene:
óptima para la elaboración de la curva
de calibración. ΔC 0.434 (1%)
=
C 0.37 log(0.37)
= 2.716% mínimo error

6
6. REFERENCIAS.

[1]. Determinación colometrica from.

sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/jpn/file/Qui
mica_Inorganica/1_Determinacion_Colorimetr
ica_del_Hierro.pdf

[2] Douglas A Skoog; Fundamentos de

química analítica; Andover; Grupo editorial
Cengage learning. p. 336

[3]Química from.
file:///C:/Users/Usuario/AppData/Local/Packa
ges/Microsoft.MicrosoftEdge_8wekyb3d8bbw
e/TempState/Downloads/Guia_TP_2_Quimic
a_II_2010%20(1).pdf

[4]Materiales laboratorio, espectrofotómetro-¿Qué

es, como funciona y para que sirve? From
https://materialesdelaboratorio.pro/espectrofotome
tro/

[5] Harris, D; “Espectrofotometría”. En Análisis

químico cuantitativo; Paniagua R; Grupo editorial
Iberoamérica. México. (pág. 499)
.