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Introducción
Como viéramos en la APO 1, el análisis de la organización de células procariotas y
eucariotas permite identificar características básicas compartidas. Así, ambos tipos celulares:
− ·están rodeados por una membrana plasmática que las separa del medio ambiente y a
través de la cual realizan intercambios;
− poseen información codificada en sus moléculas de ADN para dirigir sus actividades y,
− contienen ribosomas que participan en la síntesis de proteínas.
Esta actividad presencial obligatoria se organiza en torno a las dos últimas características,
abordando procesos vinculados al flujo de la información genética contenida en el ADN.
Contenidos
• El flujo de la información genética: transmisión y expresión de la información genética.
Dogma central de la biología molecular.
• Replicación del ADN en eucariotas: concepto de molde, burbuja y horquilla de
replicación, principales enzimas y proteínas de la replicación. Cadenas adelantada y retrasada,
fragmentos de Okazaki.
• Transcripción del ADN en eucariotas: síntesis y procesamiento del ARN.
Espliceosomas. Concepto funcional de gen. Secuencias promotoras, reguladoras, intrónicas y
exónicas.
• Traducción: etapas (activación del aminoácido; iniciación, elongación y terminación);
principales enzimas y factores. El ARNt como adaptador. Ribosomas: organización,
composición química, génesis y funciones.
• Reparación del ADN: concepto general e importancia biológica.
• Expresión génica en los eucariotas: concepto general. Puntos de control de la
expresión génica. Plegamiento proteico: las chaperonas. Proteasomas y ubiquitina.
• Reacción en cadena de la polimerasa (PCR), características generales y aplicaciones en
Medicina Veterinaria.
Objetivos
− Interpretar, en el contexto celular eucariota, el flujo de la información genética.
− Analizar los procesos de replicación, transcripción y traducción.
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Biología celular y del desarrollo 2015
− Caracterizar los puntos de control de la expresión génica.
− Establecer relaciones significativas entre el flujo de la información genética y el control
de la expresión génica.
− Trabajar por equipos en un clima de respeto hacia sus pares y docentes.
Preguntas guía
Las primeras ocho preguntas guía de esta APO están destinadas a la revisión de aspectos
básicos sobre los ácidos nucleicos; estos conceptos resultan indispensables para la comprensión
de los procesos genéticos básicos. Las restantes preguntas abordan los contenidos específicos
de esta APO.
1. Los nucleótidos son los monómeros con los que se construyen el ADN y el ARN. En la
siguiente imagen 1, identifique sus componentes.
2. Entre los componentes de los nucleótidos se pueden encontrar dos tipos diferentes de
bases nitrogenadas: las bases púricas (derivadas de la estructura de la purina: dos anillos
fusionados, uno de seis átomos y el otro de cinco y cuatro átomos de carbono) y las bases
pirimidínicas (derivadas de la estructura de la pirimidina: compuesto orgánico, similar al
benceno, con dos átomos de nitrógeno).
a. ¿Cuáles son las bases púricas que se encuentran en el ADN y el ARN?
b. ¿Cuáles son las bases pirimidínicas que se encuentran en el ADN y el ARN?
3. ¿Qué diferencias presentan el ADN y el ARN en el azúcar de sus nucleótidos?
4. La imagen 2de la página siguiente muestra un nucleótido en el cual se ha destacado con una
línea de puntos su grupo fosfato. ¿Cómo se denomina la unión química entre el grupo fosfato y
el azúcar?
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Tomado y modificado de www.biologia.arizona.edu
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Tomado de http://www.asturnatura.com/
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Tomada de http://pendientedemigracion.ucm.es/info/genetica/grupod/Estruadn/olinu.jpg
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6. La imagen 4 corresponde a un sector de una molécula de ADN. Observe que se trata de dos
cadenas polinucleotídicas con las bases nitrogenadas enfrentadas unidas entre sí y unidas por
enlaces o puentes de hidrógeno. Establezca:
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Tomada de http://www.scientificpsychic.com/
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8. A modo de resumen sobre los ácidos nucleicos, con ayuda de su libro de texto, complete el
siguiente cuadro comparativo.
ADN ARN
Número de cadenas
polinucleotídicas
Sus cadenas se encuentran
unidas por enlaces puente de
hidrógeno.
Monómeros
Pentosa
Bases nitrogenadas
Localización en la célula
eucariota
Funciones
Su estructura molecular fue
descripta por Watson y Crick.
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Biología celular y del desarrollo 2015
g. Además de las de su respuesta al ítem anterior, ¿qué otras proteínas están implicadas en el
desenrollamiento de la molécula de ADN?
h. Otra de las características es que este proceso ocurre de manera semidiscontinua.
Relacione esta característica con los términos cadena adelantada y cadena retrasada.
i. Unas de las enzimas que participan en la replicación del ADN son las ADN polimerasas que
sintetizan ADN en la dirección 5’ 3’ exclusivamente. En una horquilla de replicación, las
cadenas (o hebras) del ADN son antiparalelas, es decir corren en forma opuesta: una lo hace
en dirección 5’ 3’ y la otra en dirección 3’ 5’. ¿Cómo pueden las ADN polimerasas
producir las dos hebras en una horquilla?
j. ¿Qué son los cebadores de ARN?
k. ¿Cómo se unen entre si los fragmentos de Okazaki?
l. Resuma en un cuadro todas las enzimas y proteínas que participan en la replicación del
ADN.
12. Respecto de la reparación del ADN:
a. Enumere algunos ejemplos de los daños más frecuentes que se producen en el ADN.
b. Los mecanismos de reparación del ADN dañado pueden resumirse en tres etapas que son
comunes a todos ellos. Describa que ocurre en cada una de esas etapas; no omita de su
descripción las enzimas que participan en ellas.
c. ¿Cómo se repara el ADN si ambas cadenas de la molécula sufren rupturas?
d. ¿Cómo explica la importancia de la reparación del ADN para los organismos?
13. En biología ¿qué significado tiene el término “transcripción”?
14. Respecto de la transcripción:
a. Si la transcripción se produce a partir de una cadena deADN como molde ¿en qué se
diferencia esto de la replicación?
b. De manera general, las cuatro etapas en que se desarrolla este proceso son: 1) la unión de
la ARN polimerasa al promotor, 2) la iniciación de la síntesis de ARN, 3) la elongación del
ARN y 4) la terminación de la síntesis del ARN.
Describa los principales sucesos de estas etapas en los eucariotas e incluya en su descripción
los siguientes términos: promotor, factores de transcripción, ARN polimerasa, señales de
terminación. Puede agregar aquellos que considere necesarios.
c. ¿Qué particularidades presentan los diferentes tipos de polimerasas?
d. Si bien las ARN polimerasas catalizan las mismas reacciones químicas que las ADN
polimerasas, existen algunas diferencias entre ellas ¿cuáles son esas diferencias?
15. ¿A qué se denomina transcripto primario?
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Biología celular y del desarrollo 2015
16. De acuerdo al tipo de ARN que se esté produciendo, los transcriptos primarios son
procesados antes de ser transportados al citoplasma. Respecto de las modificaciones que
sufren los transcriptos primarios destinados a producir moléculas de ARNm:
a. ¿A qué se denomina cola poli A?
b. ¿Qué función tiene la cola poli A?
c. ¿Qué función cumple el casquete que se agrega en el extremo 5'?
d. ¿Qué son los intrones y los exones?
e. Nombre el proceso por el cual se eliminan los intrones y el complejo proteico que la
cataliza.
f. ¿Qué función cumplen los intrones?
g. ¿Por qué la célula emplea tanta energía en eliminar los intrones?
17. Resuma los principales cambios químicos que experimentan los transcriptos primarios
destinados a producir a) ARNr y b) ARNt.
18. Antes de iniciar su lectura acerca de la traducción, responda los siguientes ítems sobre los
ribosomas, organelas fundamentales para que la célula realice la síntesis proteica. Respecto a
ellos:
a. ¿Qué composición química tienen?
b. ¿Qué diferencias existen entre los ribosomas de una célula procariota y una eucariota?
c. ¿Cuántos tipos de RNAr se encuentran en los ribosomas de células eucariotas?
d. Utilice alguna de las imágenes de los libros de texto para caracterizar cómo se observan los
ribosomas de células procariotas y eucariotas con el microscopio electrónico de transmisión
(MET). ¿Qué similitudes y diferencias encuentra?
19. La traducción es un proceso en el que se cambia del lenguaje de nucleótidos de los ácidos
nucleicos (ADN y ARN) al lenguaje de los aminoácidos que formarán un péptido o una
proteína.
a. ¿A qué se refiere la frase “un gen - una proteína”? ¿Se cumple este concepto hoy en día?
b. ¿Por qué son necesarios tres nucleótidos para codificar un aminoácido?
c. Si hay 64 tripletes de bases (o 64 codones) y sólo 20 aminoácidos ¿qué ocurre con los
tripletes sobrantes?
d. ¿Por qué se dice que el código genético es degenerado?
e. La degeneración es una de las características del código genético. Resuma las restantes
características: unidireccionalidad, universalidad, ausencia de ambigüedad y de solapamiento.
20. Respecto del proceso de traducción:
a. ¿Cuáles son las fases en que se divide?
b. ¿Qué función cumple el codón AUG?
c. En eucariotas ¿qué pasos están involucrados en la iniciación?
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Biología celular y del desarrollo 2015
d. ¿Cuál es el extremo por donde comienza la adición de aminoácidos para formar un
polipéptido?
e. Explique el papel del ARNt como adaptador.
f. Enumere la secuencia de pasos durante la elongación.
g. ¿Cuáles son los codones STOP?
h. ¿Cuál es la función que cumplen estos codones?
17. Una vez que se ha sintetizado una proteína, para que esta pueda cumplir con su función
específica debe adquirir su configuración tridimensional.
a. ¿Qué componentes celulares colaboran en este proceso?
b. ¿Qué sucede con una proteína que se plegó incorrectamente? Relacione esta situación con
lo visto en la APO 4 (El tráfico vesicular y el sistema de endomembranas, pregunta guía 11).
c. ¿Cómo se denomina el complejo enzimático que degrada una proteína mal plegada?
d. ¿Cómo se realiza el proceso de degradación de una proteína? ¿Cuáles son los pasos?
18. La expresión génica es el proceso por el cual un gen ejerce sus efectos sobre una célula u
organismo al dirigir la síntesis de una proteína con una actividad característica. Este tema será
retomado en profundidad en las APOs relacionadas con el desarrollo.
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Descargada de http://www.aportes.educ.ar/
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Bibliografía
Becker, W. et al. (2009 y posteriores) El mundo de la célula. Pearson. Capítulo 18: Base
estructural de la información celular, Capítulo 19: Ciclo celular, replicación del DNA, Capítulo
21: Expresión génica I: El código genético y la transcripción, Capítulo 22 Expresión génica II:
Síntesis y clasificación de las proteínas, Capítulo 23: La regulación de la expresión génica.
Alberts B. et al. (2006 y posteriores) Introducción a la biología celular. Editorial Médica
Panamericana. Capítulo 5: Estructura y función del ADN, Capitulo 6: Replicación, reparación y
recombinación del DNA, Capítulo 7: Del DNA a la proteína, Capítulo 8: Control de la
expresión génica.
Gen A Gen B
ADN 5‘ ACC GGT TAT 3‘ ADN 5‘ AGC CGA CCG AAT TTC3‘
ARNm ____________________________ ARNm ____________________________
Secuencia de aminoácidos Secuencia de aminoácidos
_________________________________ ________________________________
Aspecto Aspecto
__________________________________ __________________________________
Gen C Gen D
ADN 5‘ GGA CGC CGA AGT 3‘ ADN 5‘ TTT AAC3‘
ARNm ____________________________ ARNm____________________________
Secuencia de aminoácidos Secuencia de aminoácidos
_________________________________ _________________________________
Aspecto Aspecto
__________________________________ __________________________________
Gen E Gen F
ADN 5‘ GGG AGG AAA CCC3‘ ADN 5‘ GTC TTC CTA 3‘
ARNm ____________________________ ARNm___________________________
Secuencia de aminoácidos Secuencia de aminoácidos
_________________________________ _________________________________
Aspecto Aspecto
__________________________________ __________________________________
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Biología celular y del desarrollo 2015
b. Una vez hecho lo anterior, tiene los codones del ARNm. Emplee ahora el “decodificador de
ARNm” para traducir la secuencia nucleotídica del ARNm en la secuencia de aminoácidos para
una proteína. Para orientarse en esta tarea, analice este ejemplo:
Ejemplo para el codón AAA del ARNm
1. Busque en el círculo central la primera base (A).
2. Luego busque, en el segundo círculo la base A.
3. En el tercer círculo encuentre la base A.
Para este codón AAA corresponde al aminoácido lisina.
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e. Dibuje el organismo hipotético de acuerdo al aspecto determinado en el ítem anterior.
f. Designe un miembro del equipo para presentar los resultados a todos los compañeros y
docentes.
Fragmento de ADN
5´...CCCGCCGCGCAGTCCGGGCCCGGCGCGATGGGGGCCGCCGCGCGCCGGAGC
CCCCACCTGGGGCCCGCGC...3´
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
c. Por último, traduzca el ARN transcripto. Utilice la tabla del código genético que encontrará
al final.
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En este punto debe tener en cuenta que el segmento puede ser leído de tres maneras
diferentes. Esto es lo que se denomina “marco de lectura” y se muestra a continuación para un
segmento hipotético. El marco de lectura 1 toma al primer nucleótido (C) como la primera
base del codón inicial. El marco de lectura 2 toma al segundo nucleótido (U) como la primera
base del codón inicial, en tanto que el marco de lectura 3 toma al tercer nucleótido (C) como
la primera base del codón inicial.
ARNm 5’ CUCAGCGUUACCAU 3’
Marco de lectura 1
Marco de lectura 2
Marco de lectura 3
d. ¿Existen diferencias en los péptidos obtenidos en los tres marcos posibles? ¿Qué
consecuencias puede traer esto a una célula?
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3. En los últimos años se han desarrollado pruebas que permiten analizar con un alto
porcentaje de precisión el material genético y así realizar un diagnóstico precoz de una
enfermedad, administrar nuevos medicamentos o intervenir para que determinada enfermedad
no se manifieste. Se emplean técnicas bioquímicas, citogenéticas y más recientemente
moleculares. Veamos ahora algunos aspectos que abordan estas técnicas.
Técnicas bioquímicas. Las pruebas bioquímicas pueden usarse para medir directamente la
actividad de una proteína (enzima), la medición indirecta de la actividad de una proteína y el
tamaño o la cantidad de proteínas (proteínas estructurales). Para estas pruebas se necesita una
muestra de tejido que contenga la proteína; por lo general se emplea la sangre, la orina, el
líquido amniótico o el líquido cerebroespinal. Dado que las proteínas son menos estables que
el ADN y pueden degradarse más rápido, las muestras deben tomarse y almacenarse en forma
adecuada y luego trasladarse rápidamente según las instrucciones del laboratorio.
Técnicas citogenéticas. La citogenética implica la evaluación de todos los cromosomas.
Luego de varios días de cultivo celular, los cromosomas se fijan, se distribuyen en portabojetos
y finalmente se tiñen, permitiendo de esta manera identificar a los cromosomas en forma
individual. Los diferentes patrones de bandas de cada cromosoma revelados por el teñido
permiten analizar además la estructura cromosómica.
Técnicas moleculares. Las pruebas de ADN se pueden realizar en cualquier muestra de
tejido, incluso con muestras muy pequeñas. Para realizar estas pruebas, se pueden usar
diferentes tecnologías, como la secuenciación directa del ADN, los ensayos de reacción
en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) y la hibridación in situ. La
secuenciación directa del ADN en virus, bacterias, mitocondrias y cloroplastos es
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relativamente sencilla porque son moléculas pequeñas, no así para los cromosomas de
eucariotas cuya cadena de ADN es muy larga. La PCR es una técnica que ha reemplazado a las
técnicas de clonación del ADN. Consiste en un sistema de amplificación in vitro del ADN por el
que pueden conseguirse en poco tiempo grandes cantidades de un gen.
Para la detección de un gen determinado en el cromosoma, se utiliza la hibridación in situ, que
consiste en hibridar el gen que se desea detectar con una molécula de ADN complementario
que además lleva un marcador para poder identificarlo luego.
Teniendo en cuenta los párrafos anteriores discuta en su grupo de trabajo las siguientes
preguntas:
a. ¿Qué técnica emplearía si desea conocer cuál de los perros de un criadero es el padre de su
mascota?
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b. ¿Qué debería tomar como muestra para que el laboratorio pueda analizarla?
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c. ¿Qué precisión (confiabilidad) tiene esa prueba que seleccionó? ¿Por qué?
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d. Si tiene la posibilidad de organizar un laboratorio para poder llevar a cabo esta técnica ¿qué
elementos necesita? (leer la técnica de PCR).
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