FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS PECUARIAS - UDENAR

Universidad De Nariño
Tema: EVALUACIÓN DE DESINFECTANTES USADOS EN LA INDUSTRIA
CÁRNICA E IDENTIFICACIÓN DE ANTIBIÓTICOS Y Listeria EN CARNE
Programa: Zootecnia Asesor del tema: Henry Jurado Gámez

Informe 8. Laboratorio; Microbiología de la producción pecuaria. EVALUACIÓN

DE DESINFECTANTES USADOS EN LA INDUSTRIA CÁRNICA E
IDENTIFICACIÓN DE ANTIBIÓTICOS Y Listeria EN CARNE

Presentado por:
Adrián Agudelo (1); Luis Ortiz (4); Luis Vallejo (2); Vanessa Delgado (3); Yessica
Valencia (5); Paola Guerrero (6); Byron Quiroz (7)
1. UDENAR; Código estudiantil; 218071004
2. UDENAR; Código estudiantil; 218071341
3. UDENAR; Código estudiantil; 218071130
4. UDENAR; Código estudiantil; 218071243
5. UDENAR; Código estudiantil; 218071345
6. UDENAR; Código estudiantil; 215122185
7. UDENAR; Código estudiantil; 215122354

INTRODUCCION
En él laboratorio se llevó a cabo diferentes procedimientos en el cual, se evaluaron los antibióticos
de una parte de un bovino, de esto se obtuvo un resultado favorable. En las plantas de procesamiento
de alimentos cuenta con una serie de productos que pueden estar expuestos a varios microorganismos,
se debe garantizar la obtención de productos de buena calidad. Muchas son obligatorias las Buenas
Prácticas de Manufactura, que, referencian múltiples consideraciones respecto al tema del buen
manejo, control y calidad de los diferentes productos. Las áreas y equipos, son parte íntegra del
sistema de aseguramiento de calidad. En muchos casos, el mismo equipo puede ser usado para la
elaboración de diferentes productos subsecuentes; es esencial entonces, no solo un buen
procedimiento de limpieza, sino también una adecuada evaluación de desinfección. Con mucha
frecuencia, se desarrollan completos estudios sobre esos componentes microbiológicos referente a
métodos y sistemas de producción y procesos. Se debe demostrar la eficacia de los procedimientos
usados a fin de conseguir el control de instalaciones, equipos, ambientes y todos los elementos que
intervienen en un proceso de producción como condición importante para la obtención de la calidad
intrínseca del producto.
Para que los resultados sean realmente confiables es la conservación de los buenos manejos en la
planta de procesamientos ya que de ella depende la confiabilidad de los resultados. Se debe, por lo
tanto, tener particular cuidado al respecto siguiendo las indicaciones que se dan a conocer en ese
ámbito primordial importancia, además de los aspectos técnicos, introducir un control de calidad
interno mediante el uso de las cepas de control. Estas son de uso universal, se trata de cepas de S.
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aureus, E. coli y Ps aeruginosa las cuales tienen un patrón de sensibilidad ya conocido frente a los
antimicrobianos sensibilidad que debe ser reproducida en cada laboratorio con ello que el
procedimiento empleado esté operando en óptimas condiciones.
La presencia de bacterias mesófilas como coliformes son un indicativo usado en un amplio margen
de productos alimenticios para identificar la calidad microbiológica de los elementos comercializados
para consumo humano, representa con mayor aceptación, no obstante dichos productos se hacen un
análisis de la calidad y de las condiciones de comercialización. Varios estudios se permiten examinar
la carga bacteriana y la calidad higiénica de muestras tomadas al azar, el cual se debe encontrar
crecimiento bacteriano, referente a PH, humedad y temperatura y la totalidad de las muestras que se
comercializan sin refrigeración. Recuentos tan marcados evidencian una deficiente calidad sanitaria
en estos alimentos, representado peligro potencial para la salud pública de los consumidores.
Un antibiótico ha sido definido como una sustancia química producida por un microorganismo capaz
de inhibir el desarrollo de microorganismo. El antibiograma es la prueba microbiológica que se realiza
para determinar la sensibilidad de una colonia bacteriana a un antibiótico o grupo de antibióticos.
El antibiograma, una vez realizado, da la siguiente información:
 Grado de sensibilidad de la colonia bacteriana a un determinado antibiótico.

 Diferencia de sensibilidad por parte de la colonia a diferentes antibióticos.

OBJETIVOS
 Utilizar hipoclorito de sodio en diferentes concentraciones sobre microorganismos
patógenos.
 Conocer la relación que existe entre la concentración del hipoclorito de sodio y el tiempo en
el control de microorganismos patógenos.
 Evaluar la susceptibilidad antimicrobiana, la sensibilidad de una cepa bacteriana que se
sospecha es la responsable de una infección a uno o varios antibióticos.

MATERIALES
 1 tubo de ensayo con 10 mL de caldo nutritivo.
 1 tubo de ensayo con 10 mL de hipoclorito de sodio al 6%.
 1 tubo de ensayo con 10 mL de hipoclorito de sodio al 3%.
 1 tubo de ensayo con 10 mL de hipoclorito de sodio al 1.5%.
 1 tubo de ensayo con 10 mL de hipoclorito de sodio al 0.75%.
 10 tubos de ensayo con 10 mL de caldo nutritivo cada uno.
 15 cajas de Petri vacías estériles.
 10 pipetas estériles de 1 mL.
 300 mL de Agar Cuenta Colonias (Plate Count Agar) fundido a 45°C.
 Incubadora.
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 1 tubo con 20 mL de caldo nutritivo inoculado con bacterias patógenas (E. coli, Clostridium
perfringens, Salmonella spp.)
 Sensidiscos de diferentes antibióticos.
 Agar Müeller-Hinton.
 Pinzas estériles.
 Cultivos de bacterias ajustadas a una misma concentración mediante la escala de Macfarland.
 Incubadora compatible-kis
 Kis kidney inhibition swab (KIS)

PROCEDIMIENTO
 IDENTIFICACION DE ANTIBIOTICOS EN CARNE

1. Con la ayuda del dispositivo llamado KIS KIDNEY INHIBITION SWAB

2. desenroscando la tapa, liberando un hisopo.

3. El hisopo se lo introdujo profundamente en el riñón tomando una muestra en este.

Con el lector de antibióticos para carnes a una temperatura constante de 64°C
verificado con un termómetro se realizó esta prueba durante un tiempo de 2 horas y
media.
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4. Al finalizar el tiempo determinado se procedió a realizar la lectura. Observando si

la prueba obtuvo otro color de acuerdo a los estándares de medición de esta actividad

 LISTERIA: POR MEDIO DE ESPONJA O HISOPOS

1. Por medio de hisopos estériles humedecidos con medio para listeria.

Realizamos el procedimiento de cultivo de la bacteria E. Coli por toda la superficie
y alrededor de las cajas Petri.
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1. Después de haber realizado el cultivo se procede a poner discos de diferentes antibióticos

en las cajas Petri.

UTLIZANDO LOS SIGUIENTES ANTIBIOTICOS

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• Novobiocin (NV 5)
• Chiorampenicol (C 30)
• Oxytetracicline (OT 30)
• Cefoxitin (FOX 30)

2. Se llevó a encubar a 36°C por un periodo de 16 a 18 horas pero se dejó más de 24 horas.

3. Después de haber finalizado el tiempo se realizó la respectiva lectura identificando

(SENCIBLE, INTERMEDIO, RESISTENTE); si el antibiótico reaccionaba o no con la
bacteria.

 EVALUACION DE DESINFECTANTES

1. Como materia a trabajar en esta actividad se dispuso de tubos de ensayos con

diferentes concentraciones (%), más un tubo de testigo (sin hipoclorito de sodio), y
un tubo de cultivo de bacterias patógenas. En cada tubo se deposita 1mL de caldo
nutritivo y 1mL de cultivo patógenas
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2. Ya con los tubos inoculados con una pipeta esterilizada se procedió a colocar en
cajas Petri con tiempos de 3, 15 y 30 minutos 1 mL del cultivo de sus respectivas
concentraciones

3. Se procede a encubar a una temperatura de 36°C por 24-48 horas por consiguiente
de acuerdo al tiempo terminado se realizó la lectura, comparando el crecimiento en
cada concentración con el testigo (sin hipoclorito de sodio).
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RESULTADOS
IDENTIFICACION DE ANTIBIOTICOS EN CARNE

Transcurridas 2 horas y 30 minutos

observamos en nuestro lector de
antibióticos para carnes (KIS KIDNEY
INHIBITION SWAB) que la prueba
obtuvo un color marrón, por lo que de
acuerdo a los estándares de medición de
esta actividad el resultado es
NEGATIVO EN PRECAUSIÓN para
esta prueba. Lo que quiere decir que no
hay antibióticos para el riñón que
usamos, ya que, en presciencia de
antibióticos, el crecimiento bacteriano se
inhibe y la prueba permanece azul /
púrpura.

LISTERIA: POR MEDIO DE ESPONJA O HISOPOS

La mejor sensibilidad frente a Escherichia coli

la presentó la Cefoxitin (FOX 30) y la
Chiorampenicol (C 30) por encima de un
diametro favorable del 10% en 24 horas.
Por otra parte, Escherichia coli presentó tasas
de resistencia a la Novobiocin (NV 5) y la
Oxytetracicline (OT 30) en un 100% dentro de
las 24 horas.
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EVALUACION DE DESINFECTANTES

Después de 48 horas en la incubadora a una

temperatura de 36°C se realizó la lectura,
comparando el crecimiento en cada
concentración por lo que obtuvimos lo
siguiente:
1. En las cajas Petri con concentración
bacteriana de 0,45 no se observa
crecimiento en ninguna de las 3 cajas
Petri (3, 15 y 30 minutos)

2. En las cajas Petri con concentración

bacteriana de 1 tampoco se observa
crecimiento en ninguna de las 3 cajas
Petri (3, 15 y 30 minutos)

3. En las cajas Petri con concentración

bacteriana de 1,5 se observa un
crecimiento estable de la bacteria en
las 3 cajas Petri (3, 15 y 30 minutos)

4. En las cajas Petri con concentración

bacteriana de 3 se observa un
crecimiento considerable de la
bacteria en las 3 cajas Petri (3, 15 y
30 minutos)

5. En las cajas Petri con concentración

bacteriana de 3 se observa un
crecimiento muy favorable de la
bacteria en las 3 cajas Petri, sin
embaro, se nota un crecimiento
mayor en la caja de 3 minutos.
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DISCUSIÓN
 En la práctica de EVALUACIÓN DE DESINFECTANTES USADOS EN LA INDUSTRIA
CÁRNICA Y LÁCTEA se puso a prueba a las diferentes soluciones de hipoclorito de sodio
con las siguientes concentraciones: 6%, 3%, 1.5% y 0.75%, con un tiempo diferente entre
ellas. Lo cual nos dio como resultado que la solución no era eficaz al momento de realizar la
desinfección para E. coli ya que hubo crecimiento en las cajas de Petri
Desinfectante: Los desinfectantes son sustancias químicas capaces de destruir un germen
patógeno que debido a su alta toxicidad celular se aplican solamente sobre tejido inanimado,
es decir material inerte

 ANTIBIOGRAMA POR EL MÉTODO DE KIRBY-BAUER

En esta prueba lo que se busco fue comprobar para que antibióticos el organismo era
resistente, intermedio o sensible a el antibiótico aplicado en el cultivo que se realizó con
E.coli, para esta prueba se preparó dos cultivos en cajas de Petri cada una con dos antibióticos
diferentes, se incubo por 16 a 18 horas a 36ºC, una vez transcurrido este tiempo se confirmó
el crecimiento en las cajas de Petri, pero alrededor de los discos de antibiótico se observó que
avía presencia y ausencia del microrganismo, en lo cual se concluyó que dos de los cuatro
antibióticos que se empleó para dos la bacteria presento resistencia y para los otros dos
sensibilidad.

 IDENTIFICACIÓN DE ANTIBIÓTICOS EN CARNE

Para esta prueba se empleó el Kidney Inhibition Swab (KIS) para detectar si el riñón a
estudiar tenía presencia de antibióticos, para esto se introdujo en el pedazo de riñón el hisopo,
de tal manera, que este quedo impregnado de la muestra, se introdujo el hisopo en un medio
de cultivo el cual se colocó a 64°C por 2 horas, lo cual nos dio como negativo para
antibióticos ya que hubo fermentación del medio lo que nos muestra que el organismos pudo
crecer sin problemas indicando que la carne del animal era de buena calidad

CONCLUSION
 En el laboratorio realizado se logró evaluar la acción del desinfectante como es el
hipoclorito de sodio en distintas concentraciones lo cual se hizo la relación con las
bacterias patógenas, sembrándolas en las cajas de Petri con el fin de observar el
crecimiento en el medio de cultivo y su respectivo conteo de colonias en el tiempo
de siembra determinado.
 El método de KIRBY-BAUER cuenta con cepas de control de calidad, que son
seleccionadas con base a su susceptibilidad o resistencia a los antimicrobianos y su
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desempeño confiable para administrar el adecuado tratamiento a dichas

enfermedades.
 El control de calidad que tiene el método de KIRBY-BAUER es uno de los más
eficientes y muy sencillo y fácil de mantener, debido al monitoreo de los reactivos,
los medios de cultivo, así como otros factores externos. Mediante este control de
calidad nos damos cuenta si los resultados obtenidos son confiables.

BIBLIOGRAFÍA
SENSIBILIDAD MICROBIANA DE ESCHERICHIA COLI
EN INFECCIONES URINARIAS EXTRAHOSPITALARIAS
(http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0210-48062003001000003)

KIS™ Test Instructions, United States Department of Agriculture

(https://www.fsis.usda.gov/wps/wcm/connect/0a89eec9-ea8c-4ac0-9435-
a5e7f108a42b/KIS_Booklet_0710_2.pdf?MOD=AJPERES)