Objetivo: Extraer ADN de un organismo marino aplicando el método de NaCl para obtener un

producto de alta calidad

Tema: Etapas de extracción del ADN

INTRODUCCION

Todo organismo vivo está formado por la ampliamente estudiada y conocida molécula de ADN.
El ADN es el componente fundamental del material genético que ha pasado de los progenitores
a la descendencia y propaga las características de la especie. La estructura del ADN en doble
hélice fue descubierta por James Watson y Francis Crick en el año 1953. La unidad básica del
ADN es el nucleótido que está formado por una base nitrogenada (púrica o pirimidínica), un
azúcar pentosa: desoxirribosa en el ADN y una molécula de ácido fosfórico. Las bases son las
siguientes: Bases púricas (adenina (A) y citosina (C)), Pirimidínicas (timina (T), guanina (G))
(Uracilo (U) en vez de T en el ARN). (Tobella & Sales, 2010)

El ADN o ácido desoxirribonucleico está compuesto por dos largas cadenas enrolladas entre sí,
formándose una doble hélice en espiral. Cada una de las dos cadenas constituyentes del ADN,
es a su vez, un compuesto orgánico formado por tres componentes: Fosfatos, azucares y bases
nitrogenadas. Sin embargo, es una frase muy difícil de leer. El ADN solo es visible en el
microscopio electrónico. (Pimentel, 2011)

El proceso de extracción de ADN posee numerosos usos, al ser necesitado en varios campos se
ha adaptado varios protocolos, pero con el mismo objetivo. El método de NaCl proporciona
iones Na+ que bloquean la carga negativa del fosfato del ADN. Esta negatividad en el ADN
provoca que las moléculas se repelen unas a otras. Los iones Na+ forman un puente iónico con
los grupos fosfatos, neutralizando las cargas y permitiendo una mayor afinidad entre las
moléculas de ADN. (Muñoz A, 2015)

EDTA

El ácido etilendiaminotetraacético, también denominado EDTA o con menor frecuencia AEDT,

es una sustancia utilizada como agente quelante que puede crear complejos con un metal que
tenga una estructura de coordinación octaédrica. Coordina a metales pesados de forma
reversible por cuatro posiciones acetato y dos amino, lo que lo convierte en un ligando
hexadentado, y el más importante de los ligandos quelatos. (Luque, 2001)

ACETATO

Es un carboxilato y es la base conjugada del ácido acético.Un éster de acetato es un éster del
ácido acético, con la fórmula general C2H3O2R, donde R es un grupo orgánico pudiendo ser
principalmente acetato de sodio y acetato de potasio (Muñoz , 2015).

SDS

El dodecilsulfato sódico (Sodium Dodecyl Sulphate, SDS, laurilsulfato sódico). Es una técnica
ampliamente utilizada en bioquímica, genética, biología molecular y ciencia forense para
separar las proteínas de acuerdo con su movilidad electroforética (en función de la longitud de
la cadena polipeptídica, masa molecular, modificaciones postraduccionales y otros factores).
Gracias al SDS las proteínas se desnaturalizan, perdiendo su conformación tridimensional. De
este modo se obtiene un fraccionamiento que obedece a: la diferencia de peso; la longitud de
la cadena (tamaño); y la forma de la proteína. Es el método de electroforesis empleado con
mayor profusión para analizar proteínas. (weber & Osborn , 1969)
TRIS

Tris es el nombre abreviado del compuesto orgánico conocido como tris

(hidroximetil)aminometano, de fórmula (HOCH2)3CNH2. Se utiliza ampliamente en bioquímica
y biología molecular, en particular para preparar disoluciones tampón (por ejemplo, tampones
Tris-HCl, Tris-Gly, TAE y TBE). Es una amina primaria, con la reactividad típica. La forma de uso
más frecuente se llama Tris base (es la forma básica, no ionizada, de la amina); en ocasiones se
utiliza también la forma ácida o hidrocloruro (Tris·HCl). En la electroforesis, es el agente
tamponante que mantiene el pH. Se incluye tanto en el gel como en el tampón de cubeta.
(Gomori , 1955)

Hidróxido de Sodio.

Su fórmula química es (NaOH), también conocido como sosa cáustica es un sólido blanco
cristalino sin olor que absorbe humedad del aire (Gomori , 1955)

METODOLOGIA

RESULTADOS

CONCLUSIONES

El método utilizado para la extracción del ADN en la muestra de camarón fue mediante el
método NaCl, permite purificar en un grado muy alto, ya que depende con la precisión de la
toma de muestra y el cumplimiento de los procedimientos además podemos determinar que es
muy factible utilizarlo para obtener ADN de calidad.

Al realizar adecuadamente el procedimiento sobre extracción del ADN pudimos observar la

estructura fibrilar del ADN. A través de este experimento se podrá analizar la molécula en la
siguiente práctica, mediante técnicas de electroforesis

Bibliografía

 Gomori G, (1955). Preparation of buffers for use in enzyme studies

 Luque (2001). Técnicas de laboratorio en bioquímica
 Muñoz A, (2015). Primer taller de técnicas moleculares
 Tobella , J., & Sales, G. (2010). Medicina personalizada posgenómica
 Weber K, Osborn M (agosto de 1969). «The reliability of molecular weight
determinations by dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis