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9/24/2008 

NATURAL CONTROL 
BIOSERVICIOS PARA LA AGRICULTURA

CONTROL BIOLOGICO Y 
SU EFECTO COMO 
BIOFERTILIZANTE 


9/24/2008 

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9/24/2008 

BIOFERTILIZACION 
La agricultura sustentable consiste en mantener la producción sin 
deterioro del medio ambiente, y entre los elementos más valiosos 
de una agricultura sostenible están los biofertilizantes, los 
bioestimulantes y los bioplaguicidas, productos constituidos por 
microorganismos que se encuentran en el suelo. La biotecnología 
ha abierto nuevas posibilidades para la introducción de 
microorganismos benéficos en suelos con el fin de promover el 
crecimiento de plantas y llevar a cabo un control biológico de 
patógenos que podrían afectar cultivos. 

Además, el uso de microorganismos procura 
mejorar la salud y fertilidad del suelo, un proceso 
paulatino, pero que requiere de especial interés, 
si se desea mantener y mejorar la estructura del 
suelo, las características físico­químicas y 
biológicas, y por ende, la productividad. 

TRICHODERMA  BURKHOLDERIA  PAECILOMYCES  B. THURINGIENSIS  MICORRIZAFER


9/24/2008 

Una de las posibles alternativas es la BIOFERTILIZACIÓN CON 
MICROORGANISMOS DEL SUELO, la que constituye una tecnología 
racional que responde a la Agenda 21 de la Conferencia de Río sobre 
Medio Ambiente y Desarrollo, en lo referente a encontrar sustitutos o 
mejoras racionales de los procesos de producción que resultan nocivos 
para el medio ambiente. Desde el punto de vista ecológico, la utilización y/o 
aplicación correcta de estos microorganismos permite reducir el uso de 
energía, la degradación del agroecosistema y las pérdidas de nutrientes. 
En adición, se mantiene la capacidad productiva del sistema, se preserva 
la biodiversidad y se contribuye con una producción más estable y 
sostenida, a largo plazo, en equilibrio con el entorno. 
Cultivos Tropicales, 2003, vol. 24, no. 1, p. 15­24 

Suelos Supresivos
Suelo que provee un ambiente en el cual el 
patógeno no causa daño o causa muy poco, aún 
cuando el patógeno y el hospedero susceptible 
están presentes. 


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Organismo  Número/Ha  Kg./Ha 


Bacterias  2.0 x 10 18  2,914 
Actinomicetos  5.0 x 10 16  1,457 
Hongos  5.0 x 10 14  2,914 
Algas  9,8 x 10 8  101 
Protozoarios  5.0 x 10 12  101 
Nemátodos  1.9 x 10 8  50 
Artrópodos  2.0 x 10 7  930 
Gusanos  9.8 x 10 4  499 

Testigo 
Organismo  Tratado con  Bacillus (UFC/gr.) 
(UFC/gr.) 
Bacterias Aerobias  12.000.000  52.000.000 
Bacterias Anaerobias  1.500.000  180.000 
Levaduras y Hongos  36.000  120.000 
Actinomicetes  130.000  2.400.000 
Ralstonia  51.000  18.000 
Bacterias fijadoras de N  < 1.000  4.500


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Programa 
LLVB 

JUSTIFICACIÓN


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“LLVB”


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Meloidogyne spp por 100 cc de suelo 

Dosis por  Población  % de 


Ttos  cama  inicial  final  control 
Rutinal  1 lt  2935  264  91 
Rutinal  2 lt  801  334  58 
Rutinal  4 lt  2312  1303  44 
Carbofuran  0.1 lt  1008  897  11 

NATURAL CONTROL


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Nudos 

Paecilomyces spp

NATURAL CONTROL 


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PARASITISMO DEL PAECILOMYCES SOBRE 
NEMATODOS FITOPARASITOS

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RESULTADOS EVALUACIÓN SAFELOMYCES 
(Paecilomyces lilacinus) 
POBLACIÓN FINAL 
POBLACIÓN  %  DE 
TRATAMIENTO  GÉNERO 
INICIAL  CONTROL 
SANOS  PARASITADOS 

Meloidogyne 
Meloidogyne  157  166  49  23 
23 
SAFELOMYCES 
SAFELOMYCES 
Pratylenchus 
Pratylenchus  60  62  8  11 
Meloidogyne 
Meloidogyne  230  26  0  89 
89 
ALDICARB 
ALDICARB 
Pratylenchus 
Pratylenchus  112  17  0  85 

NATURAL CONTROL 

EVALUACION INVIVO DE LA CAPACIDAD SOLUBILIZADORA DE 
FOSFORO DEL HONGO PAECILOMYCES LILACINUS 
INGREDIENTE ACTIVO DEL PRODUCTO SAFELOMYCES 

CULTIVO: Pompon 
UBICACIÓN: Invernadero de pruebas in­vivo de NATURAL CONTROL 
FECHA: Mayo del 2008 

METODOLOGIA 

TRATAMIENTO  DOSIS/LT  FRECUENCIA  OBSERVACIONES 


Safelomyces  0.1 gr  8 y 30 días 
Aplicación en 
Safelomyces  1 gr  después de la 
drench con 200 lts 
siembra de los 
de agua por cama 
Safelomyces  10 gr  esquejes 
Testigo  ­  ­  Solo agua

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RESULTADOS 
PESO FRESCO DE LA  PESO SECO DE LA  %  DE FOSFORO EN 
TRATAMIENTO 
PLANTA grs  PLANTA  TEJIDO 

SAFELOMYCES 0.1 gr/lt  30.282  3.962  0.18 

SAFELOMYCES 1 gr/lt  29.986  4.125  0.15 


SAFELOMYCES 10 gr/lt  52.941  7.046  0.16 
TESTIGO  23.673  3.045  0.16 

PORCENTAJE DE ABSORBANCIA  DE  DIFERENCIA RESPECTO AL 


TRATAMIENTOS 
FOSFORO  TESTIGO 

SAFELOMYCES 0.1 gr/lt  71.3  > 22.6 


SAFELOMYCES 1 gr/lt  61.8  Ø13 
SAFELOMYCES 10 gr/lt  112.7  Ø 64 
TESTIGO  48.72 

EFECTO DEL SAFELOMYCES SOBRE EL 
DESARROLLO DE LAS PLANTAS
Pompon  Tomate 

Pompon 
Tomate 

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INFECCIÓN POR MICORRIZAFER
INFECCIÓN POR MICORRIZAFER 
MICELIO 

ARBUSCULO 
VESICULA 

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EVALUACION DEL SISTEMA AEREO Y PESO DE LAS 
PLANTAS 

80 

PROMEDIO (cm s,grs) 
70 
60 
50 
40 
30 
20 
10 

LONGITUD DEL  PESO DEL 
TALLO  TALLO 
MICORRIZAFER  77  44 
CONTROL  68  36 

FLORES LOS SAUCES. ANO 2000. 

NATURAL CONTROL 

VENTAJAS DE LA MICORRIZACIÓN 

Las ventajas proporcionadas por la micorrización para las 
plantas son numerosas. Gracias a ella, la planta es capaz 
de explorar más volumen de suelo del que alcanza con sus 
raíces,  al  sumársele  en  esta  labor  las  hifas  del  hongo; 
también  capta  con  mayor  facilidad  ciertos  elementos 
(fósforo,  nitrógeno,  calcio  y  potasio)  y  agua  del  suelo.  La 
protección  brindada  por  el  hongo  hace  que,  además,  la 
planta sea más resistente a los cambios de temperatura y 
la  acidificación  del  suelo  derivada  de  la  presencia  de 
azufre,  magnesio  y  aluminio.  Por  si  todo  esto  fuera  poco, 
algunas reacciones fisiológicas del hongo inducen a la raíz 
a  mantenerse  activa  durante  más  tiempo  que  si  no 
estuviese micorrizada. (Wikipedia la enciclopedia libre)

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EFECTO DEL MICORRIZAFER EN ARROZ

MICORRIZAFER  TESTIGO 

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FITOTRIPEN W.P. 
Trichoderma  sp. 

ü Trichoderma viridae. 

ü T. koningii. 

ü T. harzianum.

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FITOTRIPEN W.P. 
ü Crecimiento directo – lectinas. 
ü Enrollamiento de hifas y 
estructuras de presión – 
Apresorios. 
ü Secreción de quitinasas, 
proteasas, glucanasas, lipasas y 
antibióticos. 
ü T. viride, 6 ­pentyl alfa pirona, 
inhibe crecimiento de 
Phytophthora. 
üT. koningii biomineralización de calcio 
üDegrada compuestos orgánicos complejos 
üInductor  de  resistencia  –  Terpenoides, 
peroxidasa, fitoalexinas 

TRICHODERMA  
Trichoderma  contribuye  al  crecimiento  de  las  raíces  de  las 
plantas,  haciendo  que  estos  cultivos  sean  más  resistentes  a  la 
sequía.  Las  raíces  colonizadas  por  Trichoderma  requieren  un 
40%  menos  de  fertilizantes  nitrogenados  con  relación  a  las 
raíces que no se encuentran colonizadas. (Montero et al.,­­­­) . 

Otra  de  sus  funciones  es  la  bioremediación,  ya  que  tiene  la  capacidad  de 
degradar  compuestos  organoclorados,  clorofenoles,  y  otros  insecticidas  como 
DDT,  endosulfán,  pentacloronitrobenceno,  aldrin  y  dieldrin,  herbicidas  como 
trifluralin y glifosato. (Esposito y Da Silva, 1998). (Kaytama y Marsumara, 1993). 

El hongo T. koningii posee la capacidad 


de biomineralizar calcio, elemento 
importante para evitar el cabeceo en 
algunas variedades de flores.

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REGISTRO DE VENTA ICA


No. 6204

El registro de venta de Botrycid es el


primero que se otorga en Colombia a
un producto que tenga como
ing rediente activo una bacteria
antagonista del complejo Burkholderia
cepacia , cumpliendo con todos los
requisitos exigidos por el ICA entre los
que se cuentan; pruebas de eficacia,
pruebas de toxicología e identificación
molecular.

NATURAL CONTROL BOTRYCID 
Burkholderia cepacia 

ü Antagonista de Botrytis , 
Cylindrocarpon, Fusarium, Pythium, 
Rhizoctonia,  Phytophthora, 
Sclerotinia, Thielaviopsis, Erwinia, 
Xanthomonas ….. 
ü Pyrrolnitrin y otros. 
üControl de nematodos. 
üMejor acción en suelos 
con pH 5.8 y Fe 80 ppm. 

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NATURAL CONTROL 
BOTRYCID 

üRizobacteria promotora 
crecimiento de plantas 
(PGPR). 
üSideróforos, incrementan la 
asimilación de Fe 2+ por las 
plantas. 
üBiodegradación de 
compuestos aromáticos 
clorados (pesticidas y 
herbicidas). 
Ornibactin y Piochelin ‐ Phenolates o hydroxamates 

Actividad biocontroladora de 
BOTRYCID 

Producción 
Nematodos

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BURKHOLDERIA 

La bacteria Burkholderia cepacia fue desde 1992 y durante varios años la 
única especie fijadora de nitrógeno representante del género. En los años 
recientes nuestro  grupo  mostró  que la fijación  de  N 2  (evaluada mediante 
ensayos  de  reducción  de  acetileno  y  detección  de  los  genes  nifHDK)  es 
una característica común del género Burkholderia, demostrada también a 
través de ensayos con  15 N 2 (resultados no publicados) con las especies B. 
unamanae, B. tropica, B. vietnamensis. 
Estas especies fueron aisladas de la rizosfera de varios cultivos como: 
B. unamanae, B. tropica, B. silvatlantica de maíz y caña de azúcar. 
B. unamanae, B. tropica, B. xenovorans de tomate y cafeto. 
B. vietnamensis de arroz, maíz, sorgo y cafeto. 
(Abril­Junio, 2006; Volumen 48: Número 2. Rev Latinoam  Microbiol   2006; 48 (2)) 

EVALUACION DE LA FIJACION DE NITROGENO POR 
BURKHOLDERIA CEPACIA INGREDIENTE ACTIVO DE 
BOTRYCID 
•  METODOLOGIA 
Siembra de la bacteria en medio cromo génico FNB. 
•  EVALUACION 
El cambio de color del medio de verde a azul es el indicador  de la 
capacidad que tiene la bacteria de fijar Nitrógeno ambiental.

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Caracterización de rizobacterias asociadas al cultivo del 
maíz en la producción de metabolitos del tipo AIA, 
sideróforos y ácido salicílico  
Annia Hernández * , Narovis Rives * *, Alberto Caballero ** *, Ana N. Hernández ** **, Mayra Heydrich * 
Facultad de Biologia. Universidad de la Habana 

RESUMEN 
Se  ha  demostrado  que  las  rizobacterias  tienen  la  capacidad  de  producir  metabolitos  de 
interés  agrícola,  entre  los  que  se  destacan  el  ácido  salicílico,  los  sideróforos  y  las 
fitohormonas;  dentro  de  estas  últimas,  el  ácido  Indol  acético  (AIA)  es  la  auxina  más 
conocida y estudiada, la cual desempeña un papel rector en el crecimiento de los cultivos. 
Esta  investigación  se  realizó  con  el  objetivo  de  caracterizar  rizobacterias  asociadas  al 
cultivo  del maíz en cuanto  a la producción de AIA, sideróforos  y ácido salicílico. Para ello 
se  empleó  un  conjunto  de  cepas  de  Burkholderia  cepacia  y  Pseudomonas  fluorescens 
previamente  aisladas  de la rizosfera  del  maíz variedad  Francisco mejorado.  Se utiliza­ron 
técnicas colorimétricas y cromatográf icas para la detección de los metabolitos estudiados, 
y análisis multivariado de conglomerado jerárquico y ligamiento completo para la selección 
de  las  mejores  cepas  con  respecto  a  la  producción  de  los  metabolitos  de  interés.  Los 
resultados  demostraron  que  la  mayoría  de  las  cepas  estudiadas  produce  metobolitos  del 
tipo  AIA,  sideróforos  y  ácido  salicílico,  desta­cándose  de  forma  integral  las  cepas  de 
Burkholderia cepacia MBf21, MBp 1, MBp2, MBf22, MBp3, MBf20, MBf 15 y Pseudomonas 
fluorescens  MPp4,  por  las  mayores  producciones  de  los  metabolitos  en  estudio,  lo  que 
evidencia  que estas cepas pueden  ser utilizadas  en la promo­ción  del crecimiento  vegetal. 

REVISTA COLOMBIANA DE BIOTECNOLOGÍA VOL. VI No.1 Julio 2004 6 ­ 13 

PROGRAMA “ FBN”

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CONTROL DE ENFERMEDADES EN BANCOS DE 
ENRAIZAMIENTO CON LA  MEZCLA 
FITOTRIPEN WP,  BOTRYCID SL  Y  NEOFAT CE (FBN) 
ANO 1998­2008 

Porcentaje de esquejes perdidos 
Numero de  Fitotripen 
Cultivo  Control químico 
siembras  Botrycid 
convencional 
Neofat CE 
F. Silvestres  104  0.6  2.5 
F. Esmeralda  15  0.5  1.8 
C.I. Caribe  6  0.8  1.2 
COSTO POR BANCO  $ 10.000  $ 20.000 

CONTROL DE ENFERMEDADES EN AREA DE PLANTAS MADRES CON LA 
MEZCLA  FITOTRIPEN WP, BOTRYCID SL Y  NEOFAT CE (FBN) 
FLORES SILVESTRES 
ANO 1998­2008 

%  PROMEDIO  %  PROMEDIO 
COSTO POR 
TRATAMIENTO  INCIDENCIA  INCIDENCIA 
CAMA 
BOTRYTIS  SEPTORIA 

“FBN” 
Fitotripen 
Botrycid 
1.26  2.66  $ 3.672 
Neofat 

TESTIGO  30.3  28.9  $ 5.148

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CONTROL DE ENFERMEDADES EN AREAS DE 
PRODUCCION CON LA MEZCLA 
FITOTRIPEN WP, BOTRYCID SL Y  NEOFAT CE (FBN) 
ANO 1998­2008 

TRATAMIENTO “FBN”  TRATAMIENTO 
Fitotr ipen, Botr ycid, Neofat  TRADICIONAL 
SEMANA DE 
EVALUACION 
   Botr ytis     Botr ytis 
Botr ytis  Botr ytis 
monospor ica  monospor ica 

COSECHA  4.6 %   0.3 %   9.6 %   5.4 %  


COSTO POR 
CAMA  $ 4.322  $ 4.900 
   Botrytis monosporica conocida 
como Stemphylium 

METODOLOGÍA NATURAL CONTROL 
PRODUCTO  DOSIS/CAMA  EPOCA DE APLICACIÓN 

RUTINAL  250 cc 


Presiembra 
OASIS  400 cc 

MICORRIZAFER  2 kg  Presiembra 

BOTRYCID  25 cc 
FITOTRIPEN  25 g  Semana 1 y 4 
OASIS  100 cc 
SAFELOMYCES  25 gr 
Semana 2 y 3 
OASIS  100 

COSTO POR CAMA   16.726 
COSTO CALDERA TESTIGO  60.000

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9/24/2008 

Resultados  
NATURAL CONTROL 

Población de nemátodos fitoparásitos y saprobios por 
1gr de raíz 
T e s tig o 

1000 
800 
N ú m e ro  d e 
In d i v id u o s 

T e s tig o 

600 
B o s q u e 

B o s q u e 
Bo s q u e 

T e s tig o 

400 
L LV B 

L L VB 

L L V B 

200 

Meloidogyne  Parat ylenchus  Saprobios

Test igo  663  53  293 

Programa LLVB  0  38  29 

Bosque  6  0  6 

NATURAL CONTROL 

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Mi croorganism os benéficos en suelo 

LLVB 
4,00E+05 

LLVB 
Población (UFC/gr de suelo)  3,50E+05 
3,00E+05 
2,50E+05 
2,00E+05 
1,50E+05 
Testigo 

Bosque 
Testigo 

Bosque 
Bosque 

Bosque 
Testigo 

Testigo 
1,00E+05 

LLVB 
LLVB 
5,00E+04 
0,00E+00 
B urkho lderia  Trichoderma  Paecilomyces  Penicillium 
Bact erias  Hongo s 

Test igo  0,0 0E+0 0  0,00 E+00  0,00E+00  0 


Pro grama LLV B  3,10E+0 5  6,00 E+03  0,00E+00  4,00 E+05 
Bo sque  0,0 0E+0 0  0,00 E+00  1,0 0E+0 3  0 

NATURAL CONTROL 

M ic r o o r g a n is mo s p a t ó g e n o s y s a p r o b io s e n s u e lo 

3,50E+06 
Testigo 
Población (ufc/gr de suelo) 

3,00E+06 

2,50E+06 

2,00E+06 
Testigo 

1,50E+06 

1,00E+06 
Testigo 

Testigo 

Bosque 
Bosque 
Bosque 

Bosque 
LLVB 

LLVB 
LLVB 

LLVB 

5,00E+05 

0,00E+00 
Ralst o nia  F usarium  Lev aduras  Hum í co la 
B ac terias  Ho ngo s

T est igo  2,40E+06  1,00E+05  1,00E+06  1,00E+05 


P ro gram a LLVB  0,00E+00  0,00E+00  0  0 
B o s que  0,00E+00  0,00E+00  0  0 

NATURAL CONTROL 

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Esporas de micorriza arbuscular en suelo 

LLVB 
200 

Espo ras/gr. de 

Bosque 
150 

Testigo 
suelo 
100 

50 


Número de esporas 

Testigo  0 
Programa LLVB  130 
Bosque  25 

NATURAL CONTROL 

Porcentaje de infección de micorriza en raíz 
LLVB 

100 
Po rcen taje (%) 

Testigo 

50 


Tratamientos
Testigo  0 
Programa LLVB  54 

NATURAL CONTROL 

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9/24/2008 

pH y Conductividad en suelo 

Testigo 
10 
co n d u ct ivid ad  (m δ /cm ) 
Ran g o:  p H(un idad es), 

Bosque 
LLVB 

Testigo 

LLVB 

Bosque 

0  pH  Conduct ividad(mδ/ cm) 

Test igo  6,58  1,3 


Programa LLV B  5,83  0,88 
B osque  5,21  0,056 

NATURAL CONTROL 

Relación carbono/nitrógeno en suelo 
T es tigo 

30 
Bos que 
LLV B 
R elac ió n  C /N 
( u n id ad es ) 

20 

10 


Relación C/N

Testigo  24,2 
Programa LLVB  7,5 
Bosque  6,6 

NATURAL CONTROL 

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PROGRAMA “LLVB” 
RELACION COSTO­BENEFICIO 

CICLOS SIN  PRODUCTIVIDAD  COSTO/  DIFERENCIA 


TRATAMIENTO 
ESTERILIZ.  RAMOS/CAMA  CICLO  % 

“ LLVB”   20  242  $ 3.010.680  100 

CALDERA  2­3  243  $ 8.307.692  275 

FUMIGANTE  1­2  215  $ 6.300.000  209 


Variedad: Delistar 
Densidad de siembra: 2500 esquejes por cama 
Cosecha: Ramos por 10 tallos 

EFECTO ADICIONAL DEL PROGRAMA “LLVB” 
SUELOS SUPRESIVOS 

EFECTO DEL PROGRAMA “ LLVB”  EN EL CONTROL DE 


ENFERMEDADES COMUNES A LA VARIEDAD STANDAR 
Finca: Flores Silvestres. 2000 

ENFERMEDAD  TESTIGO  “ LLVB”  

Cylindrocarpon destructans  > 50 %  0 % 

Viroide  > 20 %  1 ­ 5 % 

Botrytis  > 15 %  1 – 3 %

28 
9/24/2008 

RESULTADOS DEL “LLVB” 
SUELOS SUPRESIVOS 

CONCLUSIONES 
DE UN PROGRAMA DE BIOCONTROL 
Y BIOFERTILIZACION 
•  Eliminación de uso de calder a y fumigantes de suelo. 
•  Disminución  consider able  de  costos  de  producción  y  de  ingrediente 
activo/ha/ano. 
•  Mejor amiento de las condiciones nutr icionales de la planta gr acias al efecto 
solubilizador de los microor ganismos aplicados. 
•  Gar antía en productividad y calidad de las cosechas. 

•  For mación de “SUELOS SUPRESIVOS”. 


•  Calidad de vida de los oper ar ios, conser vación del agua, flor a y fauna. 

•  La  Tecnología  Llenado de  Vacio Biológico  “LLVB”  facilita  el  alcance  de 


los par ámetros establecidos en los progr amas de FLOR VERDE .

29 
9/24/2008 

Gracias 

Población de nemátodos fitoparásitos y saprobios por 
100cc de suelo 
T e s tig o 

1800 
L L V B 
B o s q u e 

1500 
L L V B 
N ú m e r o  d e 
i n d iv id u o s 

B o s q u e 

1200 
T e s tig o 

900 
L L V B 
T e s tig o 
L L V B 

B o s q u e 

B o s q u e 
T e s tig o 

600 
300 
0  Meloidogyne  Pr atylenchus  Par atylenchus  Sapr obios

Testigo  131  0  1703  393 

Pr ogr ama LLVB  110  331  882  1103 

Bosque  606  0  0  840 

NATURAL CONTROL 

30 
9/24/2008 

Lon gitud(cm) y peso radicular(gr) pro medio 

90 

LLVB 
Testigo 
60 

Testigo 

LLVB 
30 


Longitud (cm)  Peso radicular (gr) 

Testigo  19,2  2,8 


Programa LLVB  25,8  4,45 
% de diferencia  82,8  85,4 

NATURAL CONTROL 

RAIZ AFECTADA POR CYLINDROCARPON

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9/24/2008 

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