PRÁCTICA DE LABORATORIO # 1

Asignatura: Microbiología
Título: Introducción al laboratorio de Microbiología. Uso y manejo del
microscopio óptico.

Tema: Morfología, citología y reproducción de bacterias, levaduras y hongos

filamentosos.

Duración: 2 horas

Objetivos:

Identificar los aspectos relacionados con el uso y manejo del microscopio

óptico para obtener habilidades en la identificación de células de diferentes
tipos de microorganismos y poder así clasificarlos de acuerdo al grupo que
pertenecen, morfología y formas de agrupación.

Bibliografía:

 Conferencias de Microbiología
 Pelczar. Microbiología. pp 49- 56

Orientación para la elaboración del informe:

Cada estudiante debe presentar el informe el día sábado del siguiente

encuentro, el mismo debe tener presencia y debe contener la información
referente al título y objetivos de la práctica, la técnica operatoria o
procedimiento para la realización de la parte experimental y medidas de
protección e higiene. Se deben anotar las observaciones y luego deben
hacerse las conclusiones sobre la base de los objetivos propuestos.
Los estudiantes deben prepararse teóricamente en los aspectos que serán
tratados en la práctica y realizarán preguntas de entrada y de salida según lo
estime el profesor responsable de la práctica, cuyos resultados se tendrán en
cuenta para la nota final de la práctica.

Fundamento teórico:

Explicar el trabaja en los laboratorios de Microbiología, sus objetos de trabajo:

los microorganismos. Que éstos son seres vivos microscópicos y en su
mayoría son patógenos (causan enfermedades), por lo que se debe tener
mucho cuidado al manipularlos.
Para adquirir los conocimientos propios de esta ciencia, la práctica debe
realizarse con seguridad y sin miedo pero observando muy estrictamente las
medidas de seguridad en el laboratorio entre las que debemos destacar las
siguientes:
 Usar siempre la bata de laboratorio para evitar el contacto directo con
reactivos y cepas de microorganismos.
 Usar guantes protectores.
  No oler ni llevar a la boca ni a la nariz las manos después de haber
trabajado con los microorganismos (m.o).
 Desinfectar con alcohol al 70 % las mesetas de trabajo y con solución de
fenol al 3 %.
 No oler las placas Petri ni los tubos de ensayo que contengan
microorganismos.
 Lavar las manos con agua y jabón luego del trabajo con los m.o.
 Al destapar los tubos de ensayo y placas Petri debe estar encendido el
mechero para garantizar esterilidad en el área de trabajo.
 Ante un derrame de medio de cultivo líquido o semisólido en la meseta o
en el piso, proceder a la aplicación de un agente antimicrobiano para
garantizar la no propagación de los m.o., luego limpiar con detergente y
agua.
 Después de terminar el trabajo con placas Petri o tubos de ensayo
donde se encuentren crecidos m.o, esterilizar en autoclave antes de
lavar los mismos.

Uso y manejo del microscopio:

El microscopio es el instrumento mediante el cual se hace posible el estudio de

las células de los microorganismos, así como también su identificación y
clasificación interespecífica, se utilizará además en nuestras prácticas para la
determinación del número de células en un cultivo por el método de recuento
directo (cámara de Neubauer). El microscopio óptico (Fig. 1) aumenta lo que
estamos observando cientos de veces, mientras que el electrónico produce un
aumento de miles de veces.
En la Fig. 1 se muestran las partes del microscopio. De manera general estas
partes están agrupadas dentro de dos clasificaciones:
Parte óptica: oculares (u ocular si se trata de uno solo), objetivos,
condensados, diafragma, espejo, fuente de luz.
Los oculares y objetivos constituyen el aparato de aumento.
Los condensadores, diafragma, espejo y fuente de luz constituyen el aparato
de iluminación.
Parte mecánica: tubo binocular (o tubo ocular si es un solo ocular), revólver
porta-objetivos, pinzas, platina, brazo, pie o soporte y tornillos macro y
micrométricos.
El microscopio es el instrumento (Fig. 1) mediante el cual se hace posible el
estudio de las células de los microorganismos, así como también su
identificación y clasificación interespecífica, se utilizará además en nuestras
prácticas para la determinación del número de células en un cultivo por el
método de recuento directo (cámara de Neubauer).

Morfología de los microorganismos:

En este punto deben estudiar todo lo relacionado con las formas de agrupación
de las bacterias, así como con la morfología de los microorganismos de
importancia para el Lic. Química Industrial (estudiar conferencia)

Fig. 1: Partes del microscopio óptico

Preguntas de Control:

1. ¿Cómo se clasifican de forma general lo microscopios, cuál de ellos es

utilizado por el Ingeniero químico?
2. ¿Cuáles son las partes del microscopio óptico y cómo se clasifican?
3. ¿Cuáles son los microorganismos más importantes?
4. ¿Cuáles son las formas de agrupación de las bacterias, represéntelas?
5. ¿Cómo se observaría al microscopio óptico las bacterias (con sus formas de
agrupación), las levaduras y los hongos filamentosos? Dibuje estas
morfologías aproximadamente.
6. Mencione varias industrias donde se utilicen m.o y constituyan campos de
ocupación profesional de la Q. Industrial

Equipo:
 Microscopio óptico

Materiales:
 Preparaciones de células vegetales, de bacterias teñidas por el
método de tinción de Gram y de levaduras.

Procedimiento:

1) Encienda el microscopio óptico y observe como funciona cada una de

sus partes.
2) Coloque las preparaciones de células que se encuentran en la meseta
de trabajo sobre la platina y enfoque cada una de modo que pueda
observarse la morfología de cada grupo de microorganismo.
3) Dibuje lo observado y sugiera el grupo a que pertenece cada
microorganismo observado.
4) Apague el microscopio y desconéctelo.
Resultados:

Para el ajuste del microscopio al campo visual se utilizan las preparaciones

antes mencionadas, entre ellas, las de células vegetales que tienen un color
llamativo y por tener un tamaño mayor que las células de los microorganismos
es posible aprender con mayor facilidad a trabajar con este equipo.
Es necesario aprender a realizar observaciones con el microscopio para
desarrollar habilidades en la identificación de microorganismos según su
morfología, formas de agrupación y clasificación en Gram positivos y Gram
negativos.

Un ejemplo de observaciones realizadas puede ser:

Hoja de pino. Sección transversal Tejido epidérmico vegetal

Hoja de Elodea Staphylococcus sp.

Levadura Espirilos
Conclusiones:

En esta práctica se realizó el ajuste del microscopio al campo visual utilizando

preparaciones frescas de distintos tipos de células: Vegetales y de algunos
microorganismos.
El estudio microscópico de las células permite su identificación y el
conocimiento de su morfología y algo de su fisiología (lo que puede observarse
a través de la multiplicación) que da una medida de la adaptación de la célula
al medio de cultivo y de su ciclo de vida.