DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS

RESUMEN.
Introducción: el ciclo celular es el resultado de la coordinación de una serie
de procesos que involucran la integración de diferentes señales que
conducen a la duplicación de DNA, su condensación, segregación y posterior
descondensación. Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante la cual
una célula da origen a dos células hijas con igual dotación de cromosomas
Objetivo: Ejecutar adecuadamente la técnica de laboratorio para el
reconocimiento de la división celular: mitosis y sus respectivas fases
mediante la observación microscópica de raíz de cebolla.
Metodología: A través de los objetivos de 4x y 40X que posee el microscopio
y de técnicas de fijación y tinción, se observaron las células de raíz de
cebolla para identificar las fases de la mitosis.
Resultados: se pudo observar las distintas fases de la mitosis a través de
una observación detallada.
Conclusión: se identificaron las fases de la división celular, utilizando las
bases teóricas vistas en clases

Palabras clave: células de cebolla, mitosis, división.

 INTRODUCCION
MÉTODOS Y MATERIALES
Este laboratorio se realizó con el fin
de identificar, visualizar y diferenciar
los diferentes tipos de bacterias
según su tincion Los materiales
utilizados esta práctica fueron:
 Microscopios
 Porta objetos
 Cubre objetos
 mechero
 agar sangre
 lugol
 cristal violeta
 alcohol
 safranina
 aceite de inmercion
 suero fisiologico
 muestra de placa
 muestra de saliva
se tomó una caja de Petri con un
medio de cultivo agar sangre y con
un marcador y asa se dividio en
dos partes para para hacer dos
siembras. En un lado con un asa
previamente esterilizada con calor
utilizando
RESULTADOS
Al colocar la muestra en el
microscopio y observarla con el
objetivo de 4x se pudieron
distinguir las estructuras básicas
de la célula de cebolla como la
pared celular y el núcleo teñido de
rosado. Figura N°1.
En 40x se pudo observar la
membrana plasmática (bicapa
fosfolipidica). Figura N°2.
Se pudo observar todas las fases
de la mitosis:
 Profase: se pudo observan
el núcleo en forma de
vesículas esparcidos por
todo el citoplasma. Figura
N°3.
 Metafase: se observaron los
cromosomas ubicados en la
línea del ecuador. Figura
N°4.
 Anafase: los cromosomas
se encontraban separados
hacia los polos de la célula.
Figura N°5.
 Telofase y citocinesis: las
dos etapas empezaron
simultáneamente el núcleo
empezó a reensamblarse y
la separación de las dos
células hijas se evidenció.
Figura N°6.
Figura N°1.
Figura N°2
DISCUSIÓN
El tamaño de la mayoría de las
células bacterianas es tal que
resultan difíciles de ver con el
microscopio óptico. La principal
dificultad es la falta de
contraste entre la célula y el
medio que la rodea, y el medio
más simple de aumentar el
contraste es la utilización de
colorantes. Las células
generalmente son tratadas
para coagular el protoplasma
antes de teñirlas, proceso
llamado fijación. Para
bacterias, la fijación por el
calor es lo más comun.
Después de la fijación, si se
añade el colorante, no se
producen ulteriores cambios
estruturales en el protoplasma.
La fijación se realiza
habitualmente en células que
han sido fijadas sobre un
portaobjetos, tratando después
éste con el agente fijador, y
siguiendo inmediatamente el
proceso de tinción. La fijación
produce habitualmente el
encogimiento de las células; la
tinción, hace que las células
aparezcan mayores que lo que
son realmente, La mayoría de
los colorantes son compuestos
orgánicos que tienen alguna
afinidad específica por los
materiales celulares. Muchos
colorantes utilizados con
frecuencia son moléculas
cargadas positivamente
(cationes) y se combinan con
intensidad con los
constituyentes celulares
cargados negativamente, tales
como los ácidos nucleicos y los
polisacáridos ácidos.
Esta tinción se denominada así por
el bacteriólogo danés Christian
Gram, quien la desarrolló en 1844.
Sobre la base de su reacción a la
tinción de Gram, las bacterias
pueden dividirse en dos grupos,
grampositivas y gramnegativas (en
este caso, los términos positivo y
negativo no tiene nada que ver con
carga eléctrico, sino simplemente
designan dos grupos morfologicos
distintos de bacterias).
CONCLUCION
Este laboratorio se realizó con el
fin de conocer las características
morfológicas de las celulas
bacterianas propias en la cavidad
bucal mediante el uso del
microscopio, así como diferenciar
los tipos de bacterias según su
tinción ( gram-negativas, gram-
positivas)
BIBLIOGRAFÍA
 Arbo, Ma. Mercedes.,
González Ana María. 2013.
Morfología de Plantas
Vasculares.
 CHIRIBOGA, Carlos E. 1970
“Nueva Biología” Edición
tercera, Editorial Misión
Andina del Ecuador.
 SHELEER, Phillip, 1993,
“Biología Celular”, Primera
Edición, Editorial Limusa.
Debido a su importancia en taxonomía
bacteriana y a que indica diferencias
fundamentales de la pared celular de las
distintas bacterias, describiremos aquí
con algún detalle la tinción de Gram y las
interpretaciones que actualmente se
hacen sobre el porqué de su
funcionamiento.
Las células fijadas al calor sobre un
portaobjetos se tiñen, primero con una
solución de cristal violeta (otros
colorantes básicos no son tan efectivos) y
son lavadas después para quitar el exceso
de colorante. En este estado, todas las
células, tanto las grampositivas como las
gramnegativas, están teñidas de azul.
El portaobjetos se cubre entonces con una
solución de yodo-yoduro potásico. El
ingrediente activo es aquí el I2; el KI
simplemente hace soluble el I2 en agua. El
I2 entra en las células y forma un complejo
insoluble en agua con el cristal violeta. De
nuevo tanto las células grampositivas
como las gramnegativas se encuentran en
la misma situación.
Se
lleva a
cabo
después la decoloración, usando una
mezcla de alcohol-acetona, sustancias en
las que es soluble el complejo I2-cristal
violeta. Algunos organismos
(grampositivos) no se decoloran, mientras
que otros (gramnegativos) lo hacen. La
diferencia esencial entre esos dos tipos de
células está por tanto en su resistencia a
la decoloración; esta resistencia se debe
probablemente al hecho de que en el caso
de bacterias gram-negativas, la mezcla de
alcohol/acetona es un solvente lipídico y
disuelve la membrana exterior de la pared
de la célula (y también puede dañar la
membrana citoplásmica a la que se une
peptidoglicano). La delgada capa de
peptidoglicano es incapaz de retener el de
complejo cristal violeta-yodo y la célula se
decolora. Las células grampositivas, a
causa de sus paredes celulares más
espesas (tienen más peptidoglicano y
menos lípido), no son permeables al
disolvente ya que éste deshidrata la pared
celular y cierra los poros, disminuyendo
así el espacio entre las moléculas y
provocando que el de complejo cristal
violeta-yodo quede atrapado dentro de la
pared celular. Después de la decoloración
las células grampositivas son todavía
azules, pero las gramnegativas son
incoloras.
Para poner de manifiesto las células
gramnegativas se utiliza una coloración de
contraste. Habitualmente es un colorante
de color rojo, como la safranina o la
fucsina básica. Después de la coloración
de contraste las células gramnegativas
son rojas, mientras que las grampositivas
permanecen azules.
Deben destacarse algunos aspectos
cruciales de la tinción de Gram:
1) El tratamiento con cristal violeta debe
preceder al tratamiento con yodo. El yodo
por sí solo tiene poca afinidad con las
células.
2) La decoloración debe realizarse con
poca agua para evitar que pierdan la
tinción las células grampositivas. EI
proceso de decoloración debe ser corto y
es esencial un cálculo preciso del tiempo
para obtener resultados satisfactorios.
3) Cultivos más viejo de 24 horas pueden
perder su habilidad de retener el complejo
cristal violeta - yodo.
El carácter de grampositivo no es siempre
un fenómeno del todo o nada. Algunos
organismos son más grampositivos que
otros y algunos son gram-variables, es
decir, unas veces grampositivos y otras
gramnegativos.
Morfología

ultramicroscópica de

las bacterias:

estructuras internas

Pared celular
Tiene una capa
Debajo de las sustancias extracelulares, delgada de
como son las cápsulas y cubiertas peptidoglicano
mucilaginosas, y en la periferia de una (mureina) unida a
delicada membrana que está en inmediato una membrana
contacto con el citoplasma, se encuentra exterior por
la pared celular, que es una estructura Tiene una capa lipoproteínas. La
rígida que da forma a la célula. Las gruesa de membrana exterior
paredes celulares pueden destruirse o peptidoglicano está hecha de
romperse en condiciones especiales. (mureina) y dos proteína, fosfolípido y

clases de ácidos lipopolisacárido. En el

Constituyentes importantes de la pared
teicoicos. Ácido lipopolisacárido, la
celular son los aminoácidos,
Lipoteicoico que está porción de lípido está
aminoazúcares, azúcares y grasas. Estas
en la superficie, embebida en el
sustancias (proteínas, Hidratos de
empotrado en la capa fosfolípido y el
carbono, grasas) están enlazadas
de peptidoglicano y antígeno O
formando el polímero complejo que forma
unido a la membrana polisacárido está en
la pared celular.
citoplásmica. Y ácido la superficie. El lípido

teicoico de la pared se llama Lípido A y es

Entre los constituyentes de la pared
que está en la tóxico, pero el
celular de las bacterias Gram-
superficie y se une lipopolisacárido
positivas y Gram-negativas existen
sólo a la capa de entero se llama
importantes diferencias. Por ejemplo, las
peptidoglicano. El Endotoxina. La pared
paredes de las bacterias gram-positivas
ácido Teicoico es el de la célula tiene
contienen menos aminoácidos que las
responsable del poros llamado
gram-negativas; el contenido graso es
determinante Porines para el
mucho más elevado en las gram-
antigénico del transporte de
negativas que en las gram-positivas. Este
organismo. substancias de peso
hecho se ha propuesto como explicación
molecular bajo. Entre
del mecanismo de la reacción al gram
la membrana
(ver las dos imágenes juntas).
citoplásmica y la

pared celular hay un

Bacteria Gram Bacteria Gram espacio periplásmico
Positiva Negativa con enzimas
 compacta en todo el citoplasma. Estas
hidrolíticas, enzimas
partículas de RNA-proteína se denominan
inactivadoras de
ribosomas, y son el equivalente en las
antibióticos y
bacterias de los microsomas, o partículas
proteínas de
que se encuentran en las células animales
transporte.
y vegetales.

También existen diferencias en la Estructuras Citoplasmáticas

composición de la pared entre las células
de las diversas especies. Nucleoide (cuerpo cromatínico)

Membrana Citoplásmica Las células bacterianas no contienen el

(citoplasmática o núcleo característico de las células de las
protoplasmática) plantas y animales superiores. Sin
embargo, contienen en el citoplasma
Inmediatamente debajo de la pared "cuerpos" que se consideran como una
celular, existe una membrana fina, o estructura nuclear, el ADN de la célula
envoltura, que se denomina membrana bacteriana se encuentra confinado en este
citoplásmica o protoplásmica y está espacio, es único y circular, doble hélice
formada por una bicapa de fosfolípido sin proteínas. Como no se trata de un
integral y proteínas periféricas núcleo discreto, se ha sugerido que se dé
empotradas. La membrana citoplásmica a estas estructuras las denominaciones de
tiene una significación funcional de suma cuerpo cromatínico, nucleoides,
importancia. Se trata de una membrana equivalentes nucleares, y aun
semipermeable, selectiva, que controla el cromosomas bacterianos. Se demuestra
paso de los elementos nutritivos dentro de con el método de tinción de Feulgen,
la célula y la salida de los productos de específico para el DNA, y por microscopia
desecho. Tiene enzimas respiratorias y electrónica, porque la sustancia nuclear es
durante la división celular el cromosoma menos densa que el citoplasma
se une a la membrana de la célula en el cincundante.
sitio llamado Mesosoma.
Ribosomas
Citoplasma
Tienen estrecha relación con la síntesis de
El material celular contenido dentro de la proteínas (30S y 50S para formar un
membrana citoplásmica puede dividirse complejo 70S).
en tres partes, región citoplásmica, de
apariencia granular, la cual es rica en Plásmidos
RNA, región nuclear o cromatínica, que es
rica en DNA, y la parte líquida que Lazos extracromosómicos de ADN, algún
mantiene disueltos los elementos código para la resistencia a drogas,
nutritivos. El RNA, combinado con toxinas y otros factores.
proteínas, forma partículas o corpúsculos
macromoleculares, de unos 200 A de Endosporas
diámetro, que forman una masa densa y
Algunas bacterias pueden transformarse Formas básicas en que se puede
en pequeños ovoides o esferas, que son visualizar la morfología bacteriana en una
formas celulares muy resistentes, tinción GRAM:
denominadas esporas, o endosporas,
porque se producen intracelularmente. Cocos
Todos los organismos de los
géneros Bacillus y Clostridium se Micrococos, aparecen aislados y dispersos

caracterizan, en parte, por su propiedad tras la división celular. Diplococos,

de producir esporas. También tienen esta aparecen por pares. Estreptococoss,

propiedad otros géneros de bacterias tienden a unirse formando cadenas.

verdaderas, pero sólo en casos aislados. Estafilococos, aparecen en grupos

Las bacterias capaces de esporular irregulares, a veces de gran tamaño

pueden crecer y reproducirse en forma de

células vegetativas durante muchas
generaciones. Sin embargo, en cierto
período del desarrollo del cultivo en medio
nutritivo apropiado, se produce, dentro
del citoplasma, la síntesis de nuevo
protoplasma destinado a transformarse
en espora.

Tinción GRAM:

Morfología Bacteriana

Ya hemos visto que la tinción de

GRAM aporta dos ideas básicas para la
deficinión "taxonómica" de las bacterias:
el color que adquieren tras la tinción y la
forma que presentan las células
bacterianas.

En lo relativo a la coloración, ya hemos

explicado anteriormente que hablamos de
microorganismos Gram-
positivos cuando aparecen teñidos de
color azul-violeta y de Gram
negativos cuando se visualizan de color
rojo-rosado.