UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

PERÍODO OCTUBRE 2019-FEBRERO 2020
ACADÉMICO
ASIGNATURA HEMATOLOGÍA II SEMESTRE: PARALELO:
CUARTO “B”
NOMBRE DEL Mgs. Mercedes Balladares Saltos
DOCENTE
FECHA 19-12-2019
NÚMERO DE 5 HORA: 09:00-12:00 DURACIÓN: 3
PRÁCTICA
GRUPO 1 GRUPO 2
ALMEIDA ENRIQUEZ ADRIANA ESTEFANIA MOROCHO NINABANDA EMMA PATRICIA

BARRIGAS PEÑAFIEL EVELYN KATHERYNE MUÑOZ GUEVARA ALEJANDRO

BECERRA GUEVARA JUAN JOSE PUJOS AGUALONGO ARIANA ESTEFANIA

CARRASCO TIERRA JOSELYN TATIANA ROJAS NUÑEZ EVELYN MERCEDES

CARRILLO BECERRA JENNIFER IVETTE SERRANO PACA ELVIS ALEXANDER

CHINCHE ADRIANO YESENIA MARIBEL UGSIÑA FLORES NELLY ELIZABETH

NOMBRE DE
ESTUDIANTES GARZON SALAZAR KAREN VERONICA ULLOA AGUILERA MYLENA ALEJANDRA

GUAMAN ÑAMO EVELYN KATHERIN URQUIZO CORDOVA KARLA ISABEL

GUAMANI CARRILLO THALIA LISSETTE VISTIN GARCIA JESSICA ANDREA

LOPEZ ALDAZ SOFIA ALEXANDRA YUGCHA VERDESOTO ARACELLY IBETH

MALACATUS VALDIVIEZO JOEL ALEXANDER

LUGAR DE LA LABORATORIO DE DOCENCIA

PRÁCTICA
TÍTULO DE LA HEMOSTASIA
UNIDAD
TEMA DE LA
RECUENTO DE PLAQUETAS.METODO DIRECTO
PRÁCTICA
RESULTADO DE APRENDIZAJE:
Identifica alteraciones plaquetarias con la aplicación de técnicas de recuento plaquetario directo e indirecto
para aportar al diagnóstico médico.
OBJETIVO Analizar la técnica por el método directa para el recuento de plaquetas
GENERAL
OBJETIVOS ESPECÌFICOS:

 Aplicar la técnica directa para el recuento de plaquetas

 Diluir la sangre en pipetas de Thoma o en tubos de ensayo
 Observar y contar las plaquetas en la cámara de Neubauer
 Validar los resultados obtenidos
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FUNDAMENTO TEÓRICO:

LAS PLAQUETAS
Los trombocitos, o plaquetas, son los componentes celulares más pequeños de la sangre con un diámetro
mucho menor que los eritrocitos aproximadamente de 2 a 3 micrones, tienen forma ovoide de frente y en
forma de huso o cilíndrica de perfil, carecen de núcleo. Se tiñen de un color violeta púrpura con el colorante
de Giemsa. Presenta 2 regiones una zona central fuertemente basófila (la granulómera) y una zona periférica
pálida homogénea (hialómera) Circulan sin actividad, hasta que entran en contacto con un vaso sanguíneo
dañado. En este punto, las plaquetas se acumulan, se adhieren unas a otras y cierran el vaso. Secretan
compuestos químicos que modifican a una proteína córnea de la sangre, el fibrinógeno, de modo que forma
una malla de fibras en el lugar dañado. El coágulo se forma cuando quedan atrapadas entre las fibras,
plaquetas y células sanguíneas blancas y rojas. La coagulación comienza pocos segundos después de la
lesión. El mismo proceso puede producir coágulos indeseables en vasos sanguíneos no dañados. Su vida
media 6 a 7 días.
MATERIALES Y MÉTODOS
Equipos Materiales Reactivos
MICROSCOPICO Pianos cuenta células, Pipetas de Thoma, cámaras de Neubauer Plaquetest
PROCEDIMIENTO/TÉCNICA
TÉCNICA

Se realiza una dilución de sangre 1:200 o 1:20 con una solución hipotónica, luego se cuentan las
plaquetas en cámara de Neubauer y se calcula su número x mm3.

Reactivo de dilución (solución hipotónica) 1%

• Oxalato de amonio 1 g.

• Agua destilada 100 ml.

PROCEDIMIENTO

• Con una pipeta de glóbulos rojos, se aspira líquido de dilución hasta la marca 0,5

• Luego aspirar sangre hasta la marca 1.0

• Finalmente se aspira líquido hasta la señal 101. Retirar el tubo aspirador y obturar los
extremos de la pipeta

• Se mezcla inmediatamente por 2 a 3 min.

• Descartar las 6-7 gotas primeras y cargar en la cámara de Neubauer (2 cuadrículas)

• Se deja sedimentar durante 20 min. En una caja Petri, cuyo fondo este ocupado con papel
filtro húmedo
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• Se cuenta con lente objetivo de 40 x en las mismas cuadrículas para glóbulos rojos(5)

CÁLCULO

N x 200 x 10 x 400/80 N x 10.000

VALORES DE REFERENCIA: 150.000 400.000 plaquetas x mm3

*Se denomina trombocitopenia a la disminución del número de plaquetas

*Se denomina trombocitosis al aumento del número de plaquetas

*Se denomina trombocitemia cuando las cifras alcanzan de uno a varios millones de plaquetas de
forma permanente

VARIACIONES FISIOLÓGICAS

 Puede aumentar de 2 a 3 veces después de ejercicios físicos bruscos, ascenso a grandes

alturas, después del parto
 Puede causar aumento después de la inyección de adrenalina, etc.

Puede disminuir en

 Anemia aplásica (un trastorno en el cual la médula ósea no produce suficientes glóbulos)
 Cáncer en la médula ósea como leucemia
 Cirrosis (cicatrización del hígado)
 Deficiencia de folato, etc

RESULTADO (Gráficos, cálculos, etc.)

Imagen 1. Muñoz A., Extracción sanguínea por vacutainer en tubo con EDTA. Riobamba: Ecuador. 2019.
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Imagen 2. Muñoz A., Realización de frotis sanguíneo de sangre con EDTA. Riobamba: Ecuador. 2019.

Imagen 3. Muñoz A., Tinción de los frotis sanguíneos con colorante de Wright. Riobamba: Ecuador. 2019.

Imagen 4. Muñoz A., Pipeteo de reactivo y de muestra de sangre con EDTA, por ambas técnicas, para recuento
indirecto de plaquetas. Riobamba: Ecuador. 2019.
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Imagen 5. Muñoz A., Cámara de Neuvauer cargada y en reposos por 20 minutos previos a la visualización
microscópica, para recuento indirecto de plaquetas. Riobamba: Ecuador. 2019.

Imagen 6. Muñoz A., Visualización microscópica con objetivo de 100X, identificación y recuento de plaquetas por
método directo. Riobamba: Ecuador. 2019.

Imagen 7. Muñoz A., Visualización microscópica con objetivo de 40X en cámara de Neuvauer, identificación y
recuento de plaquetas por método indirecto. Riobamba: Ecuador. 2019.
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Imagen 8. Muñoz A., Recuento de plaquetas por método directo. Riobamba: Ecuador. 2019.

OBSERVACIONES

 Se aprecio que para llenar la pipeta de toma se debe aspira líquido de dilución, luego se
aspira sangre y finalmente se aspira líquido, para que exista una buena homogenización.

 Se observo que para una mejor lectura se debe desechar las 6 primeras gotas para
posteriormente cargar en la cámara de Neubauer.

 Observamos que se deja sedimentar durante 20 min en una caja Petri, en el cual el fondo
contiene papel húmedo.

CONCLUSIONES

 En la aplicación del método directo se realizó un frotis de sangre periférica con EDTA,
posteriormente realizar la tinción de Wright, una vez finalizado este paso y seca la placa,
colocar una gota de aceite de inmersión enfocar con objetivo de 100x y proceder al contaje.

 Se realizó la dilución de plaquetas 1:200 llenando la pipeta de Thoma de glóbulos rojos en

0,5 con líquido de dilución, en este caso oxalato de amonio, luego aspirar sangre hasta la
marca 1.0 y finalmente se aspira líquido hasta la señal 101.
 Para el contaje de plaquetas en la cámara de Neubauer utilizar los mismo 5 cuadrantes que
para glóbulos rojos, es importante que permanezca 20 minutos dentro de la caja Petri, esto
garantiza la lisis de eritrocitos y el mejor contaje de plaquetas.
 El reporte de resultados es de manera cuantitativa señalando el número de plaquetas
observadas por mm3, utilizando las fórmulas correspondientes para el método directo e
indirecto, acompañado de sus valores de referencia.

RECOMENDACIONES
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 Preparar y ordenar todos los materiales y reactivos antes de empezar la práctica pues sino se
dispone de cada uno de estos elementos la sesión de estudio tendrá menos tiempo para ser
ejecutada.
 Realizar un control cada cierto tiempo de los reactivos utilizados en las practicas evitando
su posible contaminación con agentes externos, en este caso el líquido que contiene oxalato
de sodio con el cual será más fácil el conteo de plaquetas por la lisis de eritrocitos en el
Método Directo.
 Antes y después de utilizar la Cámara de Neubauer para contar los leucocitos esta debe ser
limpiada rigurosamente pues si se realizara otra lectura después puede afectar los resultados
de la solución en estudio.

BIBLIOGRAFÍA
HENRY, John Bernal. ”El laboratorio en el Laboratorio Clínico de Tood Sanford y Davinson, Tomo I y II
2005, Editorial MARBAN
GONZALEZ DE BUITRAGO, José Manuel. MASSON, S.A.
DESKA PAGANA, Kathleen. Guía de pruebas diagnósticas de laboratorio .Mosby/ Doyma
ANEXOS

ADRIANA ALMEIDA
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EVELYN BARRIGAS

EVELYN GUAMAN

SOFÍA LÓPEZ
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ALEJANDRO MUÑOZ
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Mgs. Ximena Robalino F Mgs. Mercedes Balladares S. LIc. Franklin Ramos

DIRECTOR/A DE CARRERA DOCENTE RESPONSABLE DEL LABORATORIO