Dirigido a la proteína inducida por el estrés NUPR1 para tratar

Adenocarcinoma de páncreas

Resumen:

las células cancerosas activan mecanismos de respuesta al estrés para adaptarse a una variedad de

factores estresantes

condiciones Entre estos mecanismos de protección, los controlados por el nuclear inducido por el estrés.

La proteína 1 (NUPR1) pertenece a las más conservadas. NUPR1 es un monómero básico básico de 82

residuos

y proteína intrínsecamente desordenada (IDP), que en algunos casos se sobreexpresa invariablemente,

si no todos, tejidos cancerosos. Sorprendentemente, nosotros y otros hemos demostrado previamente que

la inactivación genética

del gen Nupr1 antagoniza el crecimiento del cáncer de páncreas, así como varios otros tumores.

Con el uso de una estrategia multidisciplinaria combinando biofísica, bioquímica, bioinformática,

y enfoques biológicos, se ha identificado un compuesto derivado de trifluoperazina, llamado ZZW-115

como inhibidor de las funciones NUPR1. La actividad anticancerígena del ZZW-115 se validó por

primera vez en

Un gran panel de células cancerosas. Además, ZZW-115 produjo una regresión tumoral dependiente de la

dosis de

El tamaño del tumor en ratones xenoinjertos. Mecánicamente, hemos demostrado que NUPR1 se une a

varias importinas Debido a que ZZW-115 se une a NUPR1 a través de la región alrededor del aminoácido

Thr68,

que se encuentra en la región de señal de ubicación nuclear (NLS) de la proteína, demostramos que El

tratamiento con ZZW-115 inhibe completamente la translocación de NUPR1 desde el citoplasma al

núcleo compitiendo con importinas.

METODO

Por qué la respuesta al estrés es esencial para las células cancerosas y por qué podría ser

explotable?

Ruta terapéutica?

Similar a las plantas, bacterias, levaduras y otros organismos unicelulares o multicelulares que se han

desarrollado

vías para responder a condiciones ambientales adversas, las células cancerosas han desarrollado

molecular

mecanismos para facilitar la adaptación a una variedad de condiciones estresantes. Respuestas al estrés

celular

representan un rango de cambios moleculares activados cuando una célula se enfrenta a células

ambientales y celulares hostiles

condiciones

Dirigirse a la proteína de respuesta al estrés NUPR1 es una terapia prometedora para tratar el cáncer.

Las células cancerosas pancreáticas son extremadamente desafiadas por un ambiente estresante debido a

una concentración pobre

de nutrientes y oxígeno, entre otros factores

La proteína de estrés intrínsecamente desordenada NUPR1 en PDAC

NUPR1 se describió por primera vez como activado durante la fase aguda de la pancreatitis [10].
Posteriormente, se descubrió que la expresión transitoria de NUPR1 era un sustituto de la respuesta al

estrés.

causado por muchos estímulos (incluyendo estímulos mínimos) en la mayoría de los tipos de células,

caracterizando a NUPR1 como un

protei típica asociada al estrés

Detección de compuestos pequeños como agentes anticancerígenos contra NUPR1

Estructuralmente, NUPR1 es una proteína intrínsecamente desordenada (IDP) de 82 residuos de largo

[31-35]. Por lo tanto,

la detección actual de alto rendimiento basada en objetivos para la selección de fármacos, utilizada para

proteínas bien plegadas,

es un desafío para NUPR1

ZZW-115 es un compuesto derivado de trifluoperazina fuertemente mejorado con un nuevo

mecanismo

de acción

Hemos desarrollado un enfoque multidisciplinario para mejorar la eficiencia de la PTF al: (1) aumentar

su efecto anticancerígeno tanto como sea posible con el objetivo de disminuir las dosis para tratar a los

pacientes;

y (2) reducir sus efectos secundarios neurológicos indeseables

ZZW-115 induce la muerte de células tumorales por necroptosis y apoptosis

A nivel celular, hemos demostrado que ZZW-115 induce la muerte celular por ambos necroptóticos

(medido por la liberación de l-lactato deshidrogenasa (LDH)) y apoptótico (medido por la caspasa 3/7

actividad) mecanismos. Además, hemos realizado experimentos de rescate utilizando Necrostatin-1 y

Z-VAD-FMK, solo o en combinación

ZZW-115 está activo en algún tipo de cáncer

Dado que NUPR1 se sobreexpresa en varios (si no todos) los tumores, hemos evaluado el efecto del

tratamiento

líneas celulares derivadas de varios tumores con concentraciones crecientes de ZZW-115. Tratamiento de

células como U87 (glioblastoma), A375 y B16 (melanoma), U2OS y SaOS-2 (osteosarcoma), HT29,

SK-CO-1 y LS174T (cáncer de colon), H1299 y H358 (cáncer de pulmón)

ZZW-115 inhibe la translocación nuclear de NUPR1 al competir con las importinas

NUPR1 es una proteína nuclear que contiene un dominio bipartito canónico de carga positiva

aminoácidos, típicos de NLS, que involucran residuos de proteínas 63–78, según lo probado por

predicciones teóricas

y mutagénesis dirigida al sitio

El análisis de interactoma de NUPR1 reveló que puede unirse a

30 componentes del poro nuclear, incluidas varias importinas o carioperinas (KPNA1, KPNA2,

KPNA3, KPNA4 y KPNA6) y 17 proteínas NUP (datos no publicados). En nuestro trabajo anterior,

nosotros

han demostrado que NUPR1 se une a ZZW-115 mediante el uso de residuos alrededor de Ala33 y Thr68

[38], los dos

regiones de puntos calientes de NUPR1 [35,37]. Debido a que Thr68 pertenece a la región NLS de

NUPR1, es probable
que ZZW-115 puede dificultar la interacción entre NUPR1

Conclusiones

Nuestro trabajo proporciona una prueba de concepto de que las proteínas del estrés son

objetivos terapéuticos efectivos para tratamiento de cánceres En nuestro trabajo, hemos

demostrado cómo la reutilización de un medicamento puede usarse como un comienzo

apuntan a mejorar el diseño y la eficiencia de mejores moléculas contra el cáncer, incluso para

los desafíos objetivos como los desplazados internos. Nuestros estudios constituyen un

ejemplo innovador de diseño exitoso basado en ligandos (a diferencia del diseño basado en

estructura, empleado en el diseño de fármacos de proteínas bien plegadas) de un inhibidor de

una proteína completamente desplegada