MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE LEVADURAS Y ANÁLISIS DE CASOS
 MOLECULAR
IDENTIFICACIÓN MEDIANTE
CRITERIOS MOLECULARES
Polimorfismo del ADN
mitocondrial
El tamaño del mtDNA puede variar
entre los 6 y los 25µm. (forma circular)
Necesita un trabajo previo de
extracción del ADNmt, obtención de
protoplastos y purificación del material
genético.
Otro método: Digestión total del ADN
y utilización de enzimas
restricción(cortan ADN nuclear)
IDENTIFICACIÓN MEDIANTE
CRITERIOS MORFOLÓGICOS
CRITERIOS
 BIOQUÍMICO
 MORFOLÓGICO
Mediante este método, la
Polimorfismo
molécula de DNA previamente
longitudinal de los
digerida con endonucleasas de
cromosomas-
restricción de corte poco
Electroforesis de
frecuente, es sometida a un
cariotipo-
campo eléctrico a velocidad
Cariotipificación.
constante en un gel de
electroforesis, de forma tal que
debido a la carga negativa que
posee a pH fisiológico, migre hacia
el polo positivo.
Análisis de Esta técnica se basa en el uso de la
Reacción en Cadena de la Polimerasa
microsatélites
(PCR) y consiste en la amplificación de
fragmentos con cebadores de
oligonucleótidos específicos para
secuencias simples repetitivas presentes
en el DNA, denominadas microsatélites.
de Entre los más utilizados se encuentran
(GTC)5, (GACA)4, Fago DNA M13 y la
secuencia del M13 GAGGGTGGCGGTTCT.
CRITERIOS  Este criterio tiene en cuenta el aspecto
MACROSCÓPICO del crecimiento de levaduras en
diferentes medios de cultivo.
SS
 El agar glucosado de Sabouraud (SDA),
con o sin antibióticos añadidos, es el
medio de aislamiento por excelencia
para la identificación de levaduras.
 Prueba del tubo germinal o
filamentación: el tubo germinal es
una extensión filamentosa de la
CRITERIOS levadura, sin estrechamiento en su
MICROSCÓPICOS origen, cuyo ancho suele ser la
S mitad de la célula progenitora y su
longitud tres o cuatro veces mayor
que la célula madre.
 IDENTIFICACIÓN
IDENTIFICACIÓN MEDIANTE BASADA EN Sistema Uni-Yeast Tek: Está
CRITERIOS BIOQUÍMICOS MÉTODOS DE constituido por una placa plástica con
ASIMILACIÓN DE múltiples compartimentos que
NUTRIENTES contienen un medio con agar para la
asimilación diferencial de siete
hidratos de carbono. También
incorpora una cubeta central con agar
harina de maíz-Tween 80 para
crecimiento micelial

API 20C AUX®: La galería API 20 C AUX

SEMIAUTOMÁTICA (bioMérieux) se compone de 20
cúpulas con sustratos deshidratados
que permiten realizar 19 pruebas de
asimilación. Las cúpulas se inoculan
con un medio mínimo semisólido y
las levaduras sólo se reproducen si
son capaces de utilizar el sustrato
correspondiente.

Sistema Vitek 2® (bioMérieux):

incluye 63 pocillos con pruebas
AUTOMÁTICA bioquímicas (utilización de
carbohidratos y de compuestos
nitrogenados) que permiten la
identificación de 51 especies del
género Candida en 15 h,
aproximadamente. La lectura se
realiza por emisión de fluorescencia
correspondiente.

Detectan dos enzimas que sólo están

ENZIMÁTICA presentes en C. albicans: ß-
galactosaminidasa (MUGAL) y L-prolina
aminopeptidasa (PRO). El sistema se
ayuda de sustratos fluorogénicos o
cromogénicos.