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"Año de la lucha contra la corrupción e impunidad"

UNIVERSIDAD NACIONAL
PEDRO RUIZ GALLO
Facultad de ingeniería Química e Industrias Alimentarias

Escuela profesional de ingeniería en Industrias Alimentarias

FERMENTACION DE
CARBOHIDRATOS:
PRUEBAS BIOQUIMICAS
Materia:

Bioquímica general

Docente:

MSc. Mblgo. Cesar Alberto Cabrejos Montalvo

Semestre:

2019-II

N° de práctica:

02

Integrantes:

 Maco Bellodas Neysi


 Samaniego Quiñones Anali
Introducción

Las pruebas Bioquímicas determinan la actividad metabólica de una cepa pura.

Son empleadas para detectar reacciones bioquímicas, con carácter diferencial de

grupos, géneros o especies microbianas, mediante el viraje de color del indicador

presente en el medio, mostrando algunas de sus características. Estos medios son

el TSI, LIA, Citrato de Simmons, SIM, caldo de urea.

La prueba del TSI busca determinar la capacidad de la bacteria para degradar

azucares y la formación de gas y de H2S. El LIA es un medio bioquímico que

permite evidenciar la descarboxilacion del aminoácido lisina.

El citrato de Simmons nos permite comprobar la capacidad de la bacteria de

utilizar el citrato como fuente exclusiva de carbono. La degradación de citrato

conlleva a la alcalinización del medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de

verde a azul Prusia.

En medio SIM la movilidad se pone de manifiesto por la turbidez difusa del medio

de cultivo alrededor del canal de picadura. La no movilidad se caracteriza por el

crecimiento producido exclusivamente a lo largo de la línea de inoculación. La

producción de H2S se reconoce por el ennegrecimiento de la zona de crecimiento o

del medio debido a la presencia de tiosulfato sódico. Para la demostración del Indol

se usa el reactivo de Kovacs, que manifiesta la degradación del triptófano por la

enzima triptofanasa en Indol, que se combina con el aldehído presente en el

reactivo Kovacs, para producir un color rojo.

En el caso del medio de caldo de urea, se observa la capacidad de la bacteria de

degradar la urea por medio de la enzima ureasa formando amoniaco y carbonato de

amonio, que alcalinizan el medio por lo cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza.

(Vasquez, 2010)
I. Objetivos
 Identificar las diversas reacciones que se llevan a cabo en las distintas
pruebas bioquímicas.
 Lograr reconocer el proceso de fermentación de algunos carbohidratos en
las pruebas bioquímicas, mediante el viraje producido en cada una de ellas.
 Saber leer e interpretar las diversas pruebas bioquímicas.

II. Materiales

Tabla 1
Materiales e insumos utilizados

Pruebas Microbiológicas
Prueba de TSI
Prueba de LIA
Prueba de citrato
Prueba de SIM

Elaboración propia – 2019

III. Procedimiento
Se realizó en laboratorio la lectura e interpretación de las diversas pruebas
bioquímicas proporcionadas por el docente.

 Para el TSI (color rojo ladrillo): Por fermentación de azúcares, se producen


ácidos, que se detectan por medio del indicador rojo fenol, el cual vira al
color amarillo en medio ácido.
1. Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se siembre por
estrías en el pico

 Para el LIA (color lila): La descarboxilación de la lisina se detecta en la base


mediante una reacción alcalina (color morado en todo el tubo).
2. Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se siembre por
estrías en el pico

 Para el citrato (color verde): la degradación del citrato conlleva a la


alcalinización del medio y el viraje del azul de bromotimol de verde a azul
Prusia
3. Se siembra por picadura profunda con aguja y luego se siembre por
estrías en el pico

 Para el SIM (color crema): para la demostración del Indol se utiliza el


reactivo de Kovacs que manifiesta la degradación del triptófano por la
enzima triptofanasa en Indol, que se combina con el aldehído presente en el
reactivo de Kovacs, para producir un color rojo.
4. Se siembra por picadura.

IV. Conclusiones

 Se logró conocer e identificar las diversas reacciones que se llevan a cabo en


las distintas pruebas bioquímicas.

 Se aprendió a leer e interpretar las diversas pruebas bioquímicas. Pudiendo


explicar por qué se producen los distintos virajes en ellas, así como la
producción de burbujas en el medio.

V. Recomendaciones

 Al realizar una siembra de microorganismos, debemos tener en cuenta que


técnica se va a utilizar, debido a que estas varían respecto a las
características del microorganismo a tratar.
VI. Anexos
Anexo 1 Anexo 2

Figura 2. Prueba SIM, La degradación del


triptófano se manifiesta por el viraje de color
crema a rojo. Fuente: elaboración propia 2019
Figura 1. Pruebas bioquímicas de TSI, LIA, citrato y SIM. Fuente:
elaboración propia 2019

Anexo 3 Anexo 4

Figura 3: resultado positivo en la


fermentación de la glucosa, sacarosa y
lactosa, por el viraje del color rojo a
amarillo. (Prueba TSI). Fuente:
https://www.lifeder.com/wp-
content/uploads/2019/02/TSI.jpg

Figura 4. Prueba de citrato positiva y


negativa. Fuente:
Anexo 5 https://www.segundomedico.com/wp-
content/uploads/2018/08/Citrato-.jpg

Figura 5. Prueba positiva de LIA. Fuente:


https://image.slidesharecdn.com/pruebasbioquimicascur
so-150704054925-lva1-app6892/95/pruebas-
bioquimicas-en-enterobacterias-11-
638.jpg?cb=1435989030
VII. Bibliografía

Mendoza, J. (2018). Pruebas bioquímicas de identificación: Familia


Enterobacteriaceae. Universidad de Concepcion , Facultad de Microbiologia ,
Concepcion - Chile . Obtenido de
https://www.studocu.com/es/document/universidad-de-
concepcion/microbiologia/apuntes/tsi-lia-mio-citrato-urea-rojo-
metilo/4709640/view
Vasquez, H. A. (08 de abril de 2010). medios diferenciales. Obtenido de
https://es.slideshare.net/Prymer/medios-bioqumicos

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