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PRÁCTICA NO 3
TEMA: Practica 3
INTEGRANTES:
GRUPO NO 1
PARALELO: 2
primera reacción de Biuret, la cual dará positiva para aminoácidos, presentando un color
violeta y azul. La segunda xantoproteica con la cual también se utilizó fenol tiroxina,
esta identifica proteínas con grupos aromáticos, presentando una coloración amarrillo
agua, esta reacciona con todos los aminoácidos presentando una coloración azul,
coagulación de las proteínas por efecto de alta temperatura en la cual solo hubo un
cambio de color. Se observó y registro cada reacción para cada una de estas.
2. MARCO TEÓRICO
3. RECURSOS UTILIZADOS
3.1 MATERIALES
Cantidad Apreciación
Descripción Por Por Rango (R) (A∓)
curso grupo
Gradilla 5 3 - -
Varilla de vidrio 5 1 - -
Huevo de gallina/ 5 1 - -
estudiantes
3.2 EQUIPOS
CANTIDAD
DESCRIPCION
POR CURSO POR GRUPO
Baño de maría 1 0
3.3 REACTIVOS
Nombre/ Cantidad Cantidad Concentración Fórmula química (estado
por grupo (M,N,%, etc.) de agregación)
Glucosa 4 mL 1% C6H12O6(ac)
Albumina 4mL 1% -
Caseína 4mL 1% -
Aminoácido 4mL -
Aminoácido X 4mL -
Fenol 4mL -
4. PROCEDIMIENTO
I.-Reacciones de coloración de una proteína
a. Reacción de Biuret:
Utilizar 2,0 mL de las soluciones listadas en la tabla siguiente cada una
en un tubo de ensayo, agregar 2 mL de NaOH 10% y mezclar.
Posteriormente se agregan gota a gota 0,5 mL de CuSO41% y mezclar
de nuevo. Observar el resultado.
Nota: Preparación del reactivo de Biuret: (Opcional)
Pesar 3 gr. De CuSO4.5H2O, adicionarle 9 gr. De tartrato de sodio y
potasio y disolver en 500 ml de NaOH 0.2 M; Añadir 5 gr. De KI y
completar a 1000 ml con NaOH.
(NaOH 0.2 M: 8 gramos de NaOH en 1 litro de agua)
b. Reacción Xantoproteica:
A 2.0mLde las soluciones listadas en la tabla siguiente cada una en un
tubo de ensayo, se le agrega 1 mL de HNO3 concentrado. Calentar
cuidadosamente hasta ebullición. Dejar enfriar la solución y agregar con
precaución NaOH al 10% en exceso (por lo menos 3 mL). Anotar los
cambios
c. Reacción de la Ninhidrina:
d. Reacciones de Precipitación:
Procedimiento:
5. BIORREACCIONES
a) Reacción de Biuret
b) Reacción Xantoproteica
c) Reacción de Ninhidrina
a. Reacción de Biuret
Presenta un color
transparente, azul
1 Albúmina 1% pálido (Positivo).
Presenta un color
transparente,
2 Caseína 1% violeta (Positivo).
Presenta un color
transparente,
3 Aminoácido celeste
(negativo).
Presenta un color
transparente,
4 Glucosa 1% celeste claro
(negativo).
Presenta un color
blanco, violeta
5 Leche (positivo).
b. Reacción Xantoproteica
c. Reacción de la ninhidrina
N°
La solución
presento una
1 Albúmina
homogenización
transparente.
Se observó tres
capas la primera
2 Caseína transparente, la
segunda celeste y
la tercera azul
violeta.
Se observó tres
capas la primera
amarillo, la
3 Aminoácido segunda amarillo
x pálido y la tercera
naranja.
La solución
presento una
4 Glucosa
homogenización
transparente.
La solución
presento una
5 Agua homogenización
transparente.
Se observó tres
capas la primera
blanca, la
segunda violeta
azul y la tercera
6 Leche lila.
d. Reacciones de Precipitación
.
e. Coagulación de las proteínas por efecto de alta temperatura
Se observó que a los dos minutos el tubo se coagulo.
La albumina se coagulo en pequeños trozos blancos.
No se pudo disolver la proteína coagulada.
6. CÁLCULOS
No existieron
7. RESULTADOS
REACCIÓN XANTOPROTEICA
Se observó cambios en la
consistencia de la albúmina
con resultados heterogéneos
Calor dando lugar a pequeñas
partículas presentes en la
(2 – 3 min) solución.
8. DISCUSIÓN
Esta prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. Por
ejemplo, en aquellos casos donde la prueba de Biuret es negativa y positiva
la de Ninhidrina, indica que no hay proteínas, pero si hay aminoácidos libres.
(MIKI, 2017)
Los anillos fenilo que contengan un grupo activante pueden ser nitrados
produciendo un compuesto Amarillo. La producción de un producto coloreado
Amarillo al añadir ácido nítrico es una prueba para la presencia de tirosina o
triptófano en una proteína. La adición de base fuerte hace que el color se
torne más oscuro hacia anaranjado. Las manchas amarillas en la piel
causadas por ácido nítrico son el resultado de la reacción xantoproteica.
9. CONCLUSIONES
Se determinó que existen diferentes pruebas para la identificación de
proteínas y aminoácidos que permitieron establecer un resultado positivo
o negativo de acuerdo a las características y composición de cada una de
ellas, evidenciado en coloraciones, presencia de anillos, etc.
Se identificaron las características respectivas de las sustancias de
prueba mediante diversas reacciones como la Reacción de Biuret que fue
positiva debido a que las proteínas dieron un color violeta, el color
desarrollado se debe a la formación de un complejo de coordinación con
el Cu++ como es el caso de la leche y la albumina o La reacción
xantoproteica la cual fue positiva para prótidos que contienen
aminoácidos con anillos aromáticos. En la reacción estos anillos se nitran,
por lo que aparece el color amarillo intenso de sus derivados nitrados
como en el caso de Caseína o Tirosina.
También se determinó que, si se somete a las proteínas a la acción de
ciertos agentes que trastornan su organización, se alteran sus
propiedades físicas, químicas y biológicas naturales, y se dice que las
proteínas se desnaturalizan.
La importancia de estas reacciones es establecer las características
principales en las diferentes pruebas para la identificación cualitativa de
sustancias que pueden contener aminoácidos, proteínas o péptidos. Y
cuando se usan varias pruebas en la muestra, se pueden determinar
ciertas sustancias en específico.
10. CUESTIONARIO
a) Explique a que se deben las diferencias observadas. discuta
los resultados de todas las pruebas realizadas.
REACCIÓN DE BIURET
Reacción Xantoproteica
REACCIÓN DE LA NINHIDRINA
REACCIONES DE PRECIPITACIÓN
REACCIÓN DE COAGULACIÓN
Ácido Acético 0.5 ml: Se formó una precipitación de color blanco espeso y
baboso con el Ácido acético, que da como resultado negativo debido a que
“las proteínas presentes se desestabilizaron por el efecto del calor sobre los
enlaces de la estructura terciaria (en gran parte enlaces de hidrogeno),
causando así un desdoblamiento de la proteína y una disminución progresiva
de su solubilidad”
Reacción Xantoproteica
Reacción de la Ninhidrina
Reacción de Coagulación
j) ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo?
Reacción de Biuret: Se formó una coloración violeta, su resultado es
positivo para el reconocimiento de proteínas, “debido a la formación de un
complejo de coordinación entre los cationes cúpricos (𝐶𝑢2+ ) en medio
alcalino con las uniones peptídicas (los pares de electrones no
compartidos del nitrógeno)” Fuente especificada no válida.
Bibliografía
Amaya, Y. M. (13 de Septiembre de 2011). es.scribd.com. Recuperado el 30 de Abril de 2019,
de https://es.scribd.com/doc/64873507/Carbohidratos-Lab-3
12. ANEXOS