Técnica de Ziehl-Niehlseen

Material
 Muestra de esputo pedir al paciente que tosa profundamente y que escupa
cualquier flema que provenga de sus pulmones en un recipiente especial
 Carbofucsina.
 Alcohol/ácido (3 ml de HCl 0.36N en 100 ml de etanol de 96º).
 Azul de metileno al 0.3%
 Agua destilada.
 Portaobjetos.
 Asa de siembra de platino.
 Mechero Bunsen.
 Barras de tinción
 Papel de filtro.

Metodología
1. Realizar un frotis bacteriano del esputo y fijar la extensión con calor.
2. Añadir el primer colorante: Carbofucsina.
3. Se pasa por el mechero varias veces, durante cinco minutos, sin permitir que
hierva el colorante.
4. Decantar y lavar con agua destilada el exceso de colorante.
5. Decolorar con alcohol/ácido hasta que la muestra tenga un color rosado.
6. Lavar con agua destilada.
7. Teñir con el colorante azul de metileno durante un minuto.
8. Lavar con agua destilada hasta retirar el exceso de colorante.
9. Secar la extensión al aire.
10. Observar al microscopio óptico y anotar los resultados.

Resultados

 Son bacilos delgados de forma recta o ligeramente curvada, de tamaño de 1-10

µ de largo por 0,2-0,6 µ de ancho
 si el microorganismo aparece de color rosa es AAR+ o ácido alcohol resistente
positivo. En cambio, si el microorganismo aparece de color azul, en el
microscopio óptico, es AAR- o ácido alcohol resistente negativo

Ilustración 1- AAR (+)

Técnica de Mantoux

Material
1. Tuberculina PPD 23
2. jeringas de 1ml graduada en milésimas
3. Torundas con alcohol
4. Contenedor para agujas
5. 1 regla milimetrada flexible
6. Bolígrafo
7. Guantes no estériles

Metodología
1. Realizar la asepsia necesaria (utilizando los guantes no estériles y dando
asepsia a la zona con la torunda con alcohol)
2. Cargamos en la jeringa 0.1 ml de tuberculina PPD 23
3. Elegiremos el brazo no dominante del paciente, en la cara ventral del
antebrazo (en la unión del tercio medio y el tercio superior)
4. Colocamos el brazo del paciente en una superficie firme
5. Insertamos la aguja con un ángulo de 10º a 15º e introducimos lentamente el
liquido
6. Se debe de observar una pápula blanquecina de no ser así se repetirá la
prueba
7. Retiramos la jeringa y desechamos, nos lavamos las manos
8. Citar al paciente a 72hrs
9. Dar indicaciones al paciente (evitar rascarse), evitar lavarse con productos
agresivos

Para la interpretación de resultados

1. Determinar ausencia o presencia de induración
2. Con un bolígrafo marcara de manera perpendicular al eje del longitudinal del
antebrazo, para delimitar la zona
3. Medir con la regla flexible
Resultados
Negativo: Ausencia de induración
La induración de 5 milímetros o más se considera una reacción positiva en:
 personas infectadas por el VIH
 una persona que tuvo contacto reciente con otra persona enferma de
tuberculosis
 personas con cambios fibróticos que se observen en la radiografía de tórax
indicativos de una tuberculosis previa
 pacientes que hayan recibido trasplantes de órganos
 personas inmunodeprimidas por otras razones (p. ej., que estén tomando el
equivalente a >15 mg/día de prednisona durante 1 mes o más, o antagonistas
de-TNF-a)
La induración de 10 milímetros o más se considera una reacción positiva en:
 inmigrantes recién llegados a los Estados Unidos (< de 5 años) provenientes
de países con alta prevalencia
 usuarios de drogas inyectables
 residentes y empleados de establecimientos o instituciones que congregan a
grupos de alto riesgo
 personal de laboratorios de análisis micobacteriológico
 personas con afecciones o trastornos que las predispongan a un riesgo elevad
 niños < 4 años de edad
  bebés, niños y adolescentes expuestos a adultos que pertenezcan a grupos de
riesgo elevado
La induración de 15 milímetros o más se considera una reacción positiva en todas las
personas, incluso en las que no tengan factores de riesgo conocido de tuberculosis.
Sin embargo, los programas selectivos de pruebas cutáneas de la tuberculina solo
deben realizarse en grupos de alto riesgo.