UNIVERSIDAD NACIONAL “SAN LUIS GONZAGA” DE ICA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE BIOLOGÍA

CÁTEDRA DE QUÍMICA BIOLÓGICA II

FOSFORILACION OXIDATIVA – MECANISMOS DE

TRANSPORTE DE ELECTRONES- INHIBIDORES –

DESACOPLANTES – CONTROL RESPIRATORIO.

PRESENTADO POR: Casavilca Mitma, Estefany.

Guardia Gutiérrez, Sandra.

Quispe Hernández, Luisa.

Muñoz Gutiérrez, Anyelina.

Perales Gutiérrez, Elizabeth.

Rivera Vargas, Yoselyn.

Docente: Mag. Margarita Geng Olaechea.

ICA – PERU

2017

1
 Dedicatoria:

Este trabajo lo dirigimos a nosotros mismos

por el empeño que hemos dado en cada

palabra que escribimos y las constantes

investigaciones que realizamos.

AGRADECIMIENTOS
2
Gracias de corazón, a nuestra tutora y maestra, la Magister

Margarita Geng Olaechea, por su paciencia, dedicación,

motivación, criterio y aliento. Puesto que este trabajo nos servirá

de mucho en nuestra vida fututa tanto como alumnos y

profesionales.

Cabe agradecer a nuestros familiares ya que gracias a ellos

estamos en este camino académico para ser mejores

profesionales para un futuro mejor lleno de oportunidades.

INDICE

3
 Pág.

RESUMEN………………………………………………………….. i

ABSTRACT ……………………………………………………….. ii

I. INTRODUCCIÓN ………………………………………… 07

II. FOSFORILACION OXIDATIVA…………………………… 08

III. MECANISMO DE TRANSPORTE DE ELECTRONES…. 16

IV. DESACOPLANTES E INHIBIDORES DE LA CADENA

RESPIRATORIA………………………………………………. 21

V. CONTROL RESPIRATORIO………………………………… 24

VI. CONCLUSIONES…………………………………………….. 27

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS………………………. 28

VIII. ANEXOS ………………………………………………….. 29

RESUMEN

4
A través de las distintas rutas catabólicas, se ha ido produciendo una liberación de

energía neta, en forma de ATP, y un segundo tipo de energía denominado poder

reductor, en forma de coenzimas reducidas. Los principales coenzimas, que han

participado en reacciones de óxido-reducción tanto en el citoplasma como en la

mitocondria, son NADH y FADH2; los cuales iniciarán ahora, una ruta metabólica, la

cadena de transporte electrónico, que permitirá, por un lado, la recuperación de los

coenzimas en su forma oxidada, y por otro, que los electrones sean conducidos a

través de una serie de etapas sucesivas hasta el O2, para formar agua. La

fosforilación oxidativa se define como la formación de ATP generada por la

transferencia de electrones. Intervienen, además, sustancias como inhibidores, que

actúan en el complejo enzimático (ATP sintasa) catalizando síntesis de ATP,

bloquean el paso en el cual el ADP se une al fosfato impidiendo que la energía del

potencial electroquímico llegue al sistema fosforilante; y desacoplantes, la acción de

estos consiste en disociar la oxidación en la cadena respiratoria, de la fosforilación.

Bloquean la síntesis de ATP, al tiempo que permite que continúe el transporte

electrónico a lo largo de la cadena respiratoria hasta el O2.

Palabras clave: Ruta metabólica, liberación de energía, coenzimas

reducidas, oxido-reducción, transferencia de electrones, producción de

ATP.

ABSTRACT

5
Through the various catabolic routes, it has been producing a net energy release, in

the form of ATP, and a second type of power called a power reducer, in the form of

reduced coenzymes. The major coenzymes, which have been involved in oxidation-

Reduction reactions both in the cytoplasm and in the mitochondria, son NADH and

FADH2; They now initiated a metabolic pathway, the electronic transport chain or

the respiratory chain, which allow, on the one hand, the recovery of coenzymes in

their oxidized form, and on the other, that the electrons are driven through a series

Successive steps up to O2, to form water. Oxidative phosphorylation is defined as

the formation of ATP generated by electron transfer. Within the complex process,

Interfere substances such as inhibitor, which act on the enzyme complex

(ATPsinase), catalyze the synthesis of ATP, block the passage in which the ADP

binds to the phosphate, preventing the energy of the electrochemical potential from

reaching the Phosphorylation; and the decoupling, the action of these consists of

dissociating the oxidation in the respiratory chain, of the phosphorylation. They block

the synthesis of ATP, while allowing electronic transport to continue along the

respiratory chain to O2.

Key words: Metabolic route, energy liberation, coenzymes, Oxidation-

reduction, electron transfer, production ATP.

INTRODUCCION

6
La fosforilación oxidativa es el proceso de producción de energía en los organismos

aeróbicos. Todos los pasos de degradación de azúcares, grasas y aminoácidos se

unen en la etapa final de la respiración celular en la que la energía de la oxidación

impulsa la síntesis de ATP. La fotofosforilación es un mecanismo por el cual las

plantas captan la energía de la luz solar y la utilizan para la síntesis de ATP.

Inhibidores- desacoplantes; los desacoplantes son ácidos débiles, liposolubles, con

propiedades hidrofóbicas que permite difundir a través de las membranas, una

matriz disipando de esta forma el gradiente de protones; es decir desacoplan la

oxidación de la fosforilación, como el DNP: 2,4-dinitrofenol y el FCCP:

carbonilcianida-p-trifluorometoxifenilhidrazona, desacoplan la fosforilación oxidativa

de la cadena respiratoria, se conocen como agentes desacopladores.

Los inhibidores, son sustancias que inhiben oxidaciones biológicas, actúan en el

complejo enzimático (ATP sintasa) que cataliza la síntesis de ATP, bloquean el paso

en el cual el ADP se une al fosfato impidiendo que la energía del potencial

electroquímico llegue al sistema fosforilante, y tienen una ventaja secundaria en

comprensión del mecanismo de acción de ciertos venenos y drogas.

Control respiratorio, proceso de fosforilación oxidativa acoplado al transporte de

electrones, permite a la célula producir solo la cantidad de ATP que se requiere de

inmediato para mantener sus actividades, el transporte electrónico y la síntesis de

ATP estrechamente acopladas; en otras palabras, el control general de la velocidad

de la fosforilación oxidativa está ligado a la demanda de energía celular.

II. FOSFORILACION OXIDATIVA

7
 Se define como la síntesis de ATP a partir de ADP y fosfato. Teniendo en

cuenta el papel central que el ATP presenta como fuente de energía para

todos los procesos endergonicos celulares siendo importante en el

metabolismo celular.

ADP + Pi ATP

II.1. Ubicación

El evento se lleva a cabo en la membrana plasmática bacteriana,

membrana interna mitocondrial y en los tilacoides de los cloroplastos.

En los procariotas, la cadena respiratoria y los complejos para la síntesis de

ATP se localizan en la membrana citoplasmática (la más interna de las dos

membranas). La membrana externa de las bacterias, al igual que la de las

mitocondrias, es permeable a la mayoría de moléculas pequeñas debido a

la presencia de porinas (proteínas transmembranales que se ubican en la

membrana externa de las bacterias y cumplen diversas funciones).

Asimismo, la síntesis de ATP es una reacción endergónica, en la cual la

respiración o consumo de O2 acopladas a la fosforilación de ADP, genera

energía.

La energía libre disponible como consecuencia de la transferencia de 2

electrones desde el NADH y el succinato al oxigeno molecular es de –57 a

–36 kcal/mol, respectivamente. La fosforilación oxidativa atrapa la energía

en la forma de ATP de alta energía.

Para que la fosforilación oxidativa continúe, se deben reunir dos

condiciones principales:

8
  Primero, la membrana mitocondrial interna debe estar físicamente

intacta de tal manera que los protones solamente puedan re-

ingresar a la mitocondria por el proceso que esta acoplado a la

síntesis de ATP.

 En segundo lugar, un gradiente de protones debe ser desarrollado a

través de la membrana mitocondrial interna.

II.2. La energía del gradiente de protones

La energía del gradiente de protones se conoce con el nombre de

potencial quimio-osmótico, o fuerza motil de protones (PMF). Este

potencial es la suma de las diferencias de concentración de protones a

través de la membrana y de la diferencia en la carga eléctrica a través

de la membrana. Los dos electrones del NADH generan un gradiente de

6 protones. Así, la oxidación de un mol de NADH lleva a una

disponibilidad de PMF con una energía libre de aproximadamente –31,2

kcal (6 x –5,2 kcal). La energía del gradiente se utiliza para la síntesis de

ATP cuando los protones se transportan siguiendo su gradiente

termodinámico dentro de la mitocondria.

Los protones regresan a la matriz mitocondrial a través de la proteína de

membrana denominada ATP sintasa (o complejo V). La sintasa de ATP

es complejo proteico compuesto de múltiples subunidades que se une al

9
 ADP y al fosfato inorgánico en su sitio catalítico, y que requiere un

gradiente de protones para su actividad. La ATP sintasa está compuesta

de 3 fragmentos: F0, que se localiza en la membrana; F1, que protruye

desde la membrana mitocondrial interna hacia la matriz mitocondrial; y la

proteína que le confiere sensibilidad a la oligomicina (OCSP), que

conecta los fragmentos F0 y F1. Cuando la membrana mitocondrial está

dañada, es permeable a los protones, la reacción de la ATP sintasa es

activa pero en la dirección reversa y actúa como una hidrolasa de ATP o

ATPasa.

COMPLEJOS FUNCIONALES

En la membrana interna se encuentran los complejos que forman la cadena

transportadora de electrones y la enzima que va a formar ATP a partir de

ADP y Pi.

La membrana interna es bastante permeable, sin embargo posee una

permeabilidad selectiva a moléculas pequeñas y a iones, los que pasan a

través de ella gracias a transportadores especiales. Está formada

aproximadamente por un 70 % de proteínas y un 30% de lípidos, y es

probablemente la membrana biológica más rica en proteínas.

Aproximadamente la mitad de los componentes proteicos que posee

participan tanto en la cadena transportadora de electrones y en la

fosforilación oxidativa. Estas proteínas se encuentran ensambladas en cinco

complejos multiproteicos.

 Complejo I: NADH deshidrogenasa (FeS y FMN)

Está formado por aproximadamente 25 unidades proteicas. Posee como

grupo prostéticos: flavina mononucleótido (FMN) y fierro-azufre. Las

10
 proteínas que poseen como grupo prostético fierro-azufre se denominan

proteínas ferrosulfuradas. Posee específicamente, al menos siete

proteínas que tienen centros ferrosulfurados. Este complejo se

encuentra completamente embebido en la membrana interna de la

mitocondria, y está orientado de tal manera que el sitio de fijación de

NADH está mirando hacia la matriz mitocondrial. Su masa es de

aproximadamente 850 kilodaltons.

 Complejo II: Succinato Deshidrogenasa

Va a recibir los electrones directamente del succinato. Posee al menos

cuatro proteínas diferentes. Es mucho más pequeño que el complejo I.

Como grupo prostético posee a: flavina adenina dinucleótido (FAD) y

fierro-azufre (Fe-S). Su masa es de aproximadamente 140 kilodaltons.

 Complejo III: Citocromo C coenzima Q Reductasa

Es un dimero de dos monómeros idénticos de 11 cadenas polipeptidicas

cada uno, compuesto por los citocromos b562 y b566. Contiene una

proteína ferrosulfurada y al menos otras seis subunidades proteicas.

11
 Posee como grupos prostéticos fierro-azufre y el grupo Hemo. Su masa

es de aproximadamente 250 kilodaltons. El complejo III transfiere los

electrones desde el ubiquinol (QH2) al citocromo C, junto al transporte

de protones (H+) desde la matriz al espacio intermembranoso, por un

proceso denominado Ciclo Q. Su inhibidor es la antimicina A.

 Complejo IV: Citocromo C Oxidasa

Cataliza la transferencia de cuatro electrones desde 4 citocromos c a

una molécula de O2.

4 Cit creducido + O2 + 8 H+ matriz → 4 Cit coxidado + 2 H2O + 4 H+

citosol

La reducción de O2 por el citocromo c conlleva la desaparición de 8

protones de la matriz y la aparición de 4 protones en el espacio

intermembrana.

A diferencia de las reacciones catalizadas por los dos centros anteriores,

que son reversibles, siendo posible llevar a cabo un flujo inverso de

electrones, la reacción catalizada por el centro IV es irreversible en

condiciones celulares.

Formado por 13 cadenas polipeptidicas; dimeriza, formando un complejo

de peso molecular total aproximadamente de 204 KDa. Contiene dos

átomos de cobre formando un complejo con 2 Cys, en la subunidad II.

La subunidad I tiene un hemo a, y un hemo a3 próximo a otro átomo de

cobre. Es en este último centro redox donde se reduce el oxígeno. Los

cuatro electrones necesarios para reducir al oxígeno lo suministran 4

12
 moléculas de citocromos c, que los ceden al par de átomos de cobre Cu

A, de allí pasan al hemo a y finalmente al par hemo a3- Cu B. 3

subunidades están codificadas ppor el ADN mitocondrial

Flujo de electrones a través del complejo IV.

Las tres cadenas polipeptídicas esenciales en el flujo electrónico son I, II

y III. El contorno más claro incluye las 10 cadenas restantes del

complejo. La transferencia electrónica comienza cuando dos moléculas

de citocromo c reducidas donan un electrón cada una al centro binuclear

Cu A. A continuación los electrones pasan a través del hemo a al centro

Fe-Cu (citocromo a3 y Cu B). El oxígeno se une ahora al hemo a3 y se

reduce a su forma peroxi (O2 2- ) gracias a los electrones del centro Fe-

Cu. La aportación de dos electrones adicionales del citocromo c

convierte al O2 2- en dos moléculas de agua, consumiendo cuatro

protones “sustrato” de la matriz. Simultáneamente, se bombean cuatro

protones más desde la matriz por un mecanismo todavía desconocido.

La subunidad III es aparentemente esencial para la función del complejo

IV, aunque su papel no se comprende bien.

 Complejo V: ATP sintetasa

Este complejo cataliza la síntesis de ATP aprovechando el gradiente de

protones.

Está constituido de dos subunidades F1 (α3, β3) y F0 (c10-14),

conectadas a través de un tallo (γ, ε) y una columna externa (a, b2, δ).

13
 La ATP sintasa cataliza la síntesis de ATP mediante el “mecanismo del

cambio de unión”: Cambios conformacionales de las subunidades β son

los responsables de la catálisis. β alterna entre:

 Forma O (open), abierta: Puede abrirse y cerrarse para

liberar/unir ATP o ADP + Pi.

 L (loose), relajada. Conformación cerrada, mantiene unidos ADP

y Pi sin liberarlos pero no los convierte en ATP.

 T (tight), apretada: Conformación cerrada, convierte ADP + Pi en

ATP.

Los cambios de conformación de β son inducidos de forma cíclica por el

giro del tallo γε.

Otro componente presente en la cadena de electrones, que no pertenece a

ningún complejo y que participa activamente en ella es la ubiquinona o

coenzima Q. Es una benzoquinona liposoluble, y se mueve con bastante

libertad en la membrana interna mitocondrial. Es capaz de captar

electrones de los complejos I y II, y los cede al complejo III.

POTENCIAL DE REDUCCION

Teóricamente podríamos orientar los potenciales de reducción de cada una

de estos complejos, y veríamos de qué forma se encuentran

secuencialmente orientados en la membrana interna mitocondrial para

movilizar los electrones hacia el oxígeno. Un transportador de electrones va

a ceder sus electrones desde un menor potencial de reducción hacia uno

14
 mayor. Cuando se estudió la composición de la mitocondria y de los

complejos que participarían en la cadena transportadora de electrones, se

determinaron estos potenciales de reducción:

 El complejo I cede los electrones del NADH con un potencial de

reducción de -0.4, el complejo II con un potencial de reducción cercano a

-0.2, la coenzima Q con un potencial cercano a 0, para llegar a el

complejo III, IV, y al O2, con un potencial mucho mayor.

 Así, estos complejos están dispuestos en forma secuencial en la

membrana interna mitocondrial. El complejo I completamente embebido

en ella (recibe los electrones del NAD), y el complejo II (recibe los

electrones del succinato), y se los ceden a la ubiquinona, la cual se los

cede al complejo III, el cual a través del citocromo C se los cede al

complejo IV, el que va a reducir al oxígeno para transformarlo en agua.

 Los complejos I, III y IV van a liberar protones hacia el espacio

intermembrana.

CARACTERISTICAS DE LOS COMPONENTES DE LOS COMPLEJOS

 Proteínas ferro-sulfuradas

Tienen como grupo prostético Fe y S. Los centros ferro-azufre pueden

ser muy sencillos, donde un solo ión Fe está rodeado de átomos de S de

cuatro residuos de cisteína que forman parte de la proteína. En otros

centros hay átomos de S inorgánicos y orgánicos, como en los centros

2Fe-2S o 4Fe-4S. Estos centros ferro-azufre son capaces de aceptar y

15
 ceder 1 sólo electrón. En general poseen potenciales de óxido-reducción

bastante bajos, por lo tanto tendrán tendencia siempre a donar sus

electrones.

 Citocromos

También poseen fierro en su composición, pero formando un grupo

Hemo. Los citocromos del tipo A poseen grupos Hemo a, están unidos a

una larga cadena hidrocarbonada. El grupo Hemo b, también

denominado ferroprotoporfirina IX compone la hemoglobina y la

mioglobina. El grupo Hemo c del citocromo C. Se distinguen por el

espectro de absorción de luz que poseen las proteínas con grupo Hemo.

Se puede medir el espectro de luz que posee la proteína y así

determinar si es una proteína con un grupo Hemo de tipo a, b o c. Estos

citocromos también van a aceptar y ceder un electrón a la vez.

 Coenzima Q

También llamada ubiquinona (UQ), es una benzoquinona liposoluble que

contiene una larga cadena hidrocarbonada. Es capaz de aceptar un

electrón para llegar a ser un radical semiquinona (UQH), o dos

electrones formando ubiquinol (UQH2).

III. MECANISMO DE TRANSPORTE DE ELECTRONES

16
 Consiste en una serie de transportadores electrónicos, la mayoría proteínas

integrales de membrana, con grupos prostéticos capaces de aceptar y ceder

uno o dos electrones. El flujo de electrones a través de estos complejos

produce también un bombeo de protones al espacio intermembranal.

Cada componente de la cadena puede aceptar electrones del transportador

precedente y transferir los al siguiente en una secuencia específica.

III.1. Grupos de transporte de electrones de la cadena

III.1.1. Ubiquinona Coenzima Q

Derivado quinona con larga cadena isoprenoide, el número

de unidades de isopreno depende de la especie. Puede

presentar tres estados de oxidación.

Sus reacciones de transferencia de electrones están

acopladas a la unión o liberación de protones: propiedad

clave a la hora de transportar protones a través de la

membrana ya que al ser al mismo tiempo pequeña e

hidrofóbica puede difundir libremente a través de la

membrana interna mitocondrial.

III.1.2. Flavina Mononucleótido (FMN)

17
 Al igual que la ubiquinona, sus reacciones de transferencia

de electrones están acopladas a la unión o liberación de

protones. También al poder existir en forma de

semiquinona, transportar tanto un electrón como un par.

El aceptor de los electrones es el anillo de isoaloxazina,

que es idéntico al del FAD semiquinona, transportar tanto

un electrón como un par.

III.1.3. Grupos hemo

Presentes en los citocromos, los fuertes colores

característicos de los citocromos se deben a la presencia

del grupo prostético hemo.

 Los citocromos que intervienen en la cadena de transporte

electrónico se designan a, b, y c y se distinguen por sus

diferentes espectros de absorción. (Cerca de 600 nm para

tipo a,, cerca de 560 nmen los del tipo b y cerca de 559

nmen los del tipo c).

 Para distinguir entre citocromos de un tipo estrechamente

relacionados, se utiliza en su nombre la longitud de onda

de absorción máxima (citocromo b562).

 Los grupos hemo de los citocromo a y b: unidos

fuertemente de manera no covalente, a sus proteínas

respectivas.

 Los grupos hemo de los citocromos c están unidos de

forma covalente a través de residuos de Cys.

 Su átomo de hierro oscila entre Fe3+y Fe2+.

18
  Diferentes citocromos tienen diferentes potenciales redox

(diferente entorno para cada grupo hemo): intervienen en

diferentes pasos en la cadena de transporte de electrones.

III.1.4. Centros Fe-S

Fe está presente no en forma de hemo (como en los

citocromos) sino en asociación con átomos de azufre

inorgánico o con átomos de azufre de residuos de Cys de

la proteína transportadora, o con los dos al mismo tiempo.

Se pueden presentar en tres tipos.

 Centro de Rieske: complejo [2Fe-2S] donde los S son de

Hisen lugar de Cys.

 El Fe de estos complejos alterna entre los estados oxidado

Fe3+y reducido Fe2+.

 Suelen intervenir en reacciones redox sin aceptar o liberar

protones.

III.2. Lanzadores de electrones NAD

III.2.1. Lanzadera malato- aspartato

Es una lanzadera de electrones. Lo que hace es ingresar los

electrones que están en el NADH proveniente del citosol,

hacia la matriz mitocondrial para que ingresen a la cadena

de electrones. El NADH, que se produce en el citosol,

intenta entrar a la matriz, pero no puede por la membrana

interna, entonces se queda en el espacio intermembrana, en

donde está la enzima malato deshidrogenasa, la cual

19
 transfiere los electrones del NADH al oxalacetato, para

producir malato. En la membrana interna de la mitocondria

hay una proteína capaz de transportar al malato sin gasto de

energía, desde el espacio intermembrana hacia la matriz

mitocondrial, para que así el malato participe en el ciclo de

Krebs. Dicha proteína es la malato-cetoglutarato

deshidrogenasa que está en el interior de la mitocondria y

que participa en el ciclo de Krebs, va a oxidar al malato para

formar oxalacetato y, paralelamente, se forma NADH. Así,

indirectamente, el NADH que estaba afuera de la matriz

mitocondrial pasa a estar en ella.

El oxalacetato formado, mediante la enzima aspartato

aminotransferasa, va a producir aspartato el cual pasa por

un transportador llamado glutamato-aspartato desde la

matriz al espacio intermembrana para repetir el ciclo (este

aspartato se transforma en oxalacetato en el espacio

intermembrana). La enzima que transforma oxalacetato en

aspartato (específica de la matriz) no es igual a la que

transforma aspartato en oxalacetato (específica del espacio

intermembrana), ambas son isoenzimas.

III.2.2. Lanzadera del glicerol-fosfato:

20
 También ingresa NADH (indirectamente) desde el citosol

hacia la matriz mitocondrial. En el citosol está la enzima

glicerol-3-fosfato deshidrogenasa, la cual transforma la

dihidroxiacetona fosfato en glicerol-3-fosfato. Este último es

sustrato de la enzima glicerol-3-fosfato deshidrogenasa

mitocondrial, está unida a la membrana interna mitocondrial,

pero mirando al espacio intermembrana, esta enzima es una

flavoproteína capaz de captar 2 electrones que provienen

del glicerol 3 fosfato y se los cede a la ubiquinona. Así el

NADH del citosol entregó, en forma indirecta, los electrones

a la cadena transportadora.

En la lanzadera malato aspartato, lo que se obtiene en el

interior de la mitocondria es el NADH, el cual entra a nivel

del complejo I, donde se producen 6 protones hacia el

espacio intermembrana, en total; por cada 2 protones se

produce una molécula de ATP, por lo cual se generan 3 ATP.

Por su parte, en la lanzadera del glicerolfosfato, los

electrones del NADH citosólico entran a nivel de la

Ubiquinona que cede los electrones al complejo III (Ciclo Q).

En total se producen sólo 4 protones, lo que origina 2

moléculas de ATP.

IV. DESACOPLANTES E INHIBIDORES DE LA CADENA

RESPIRATORIA

21
 Dentro del complejo proceso de la cadena respiratoria, interfieren ciertas

sustancias, estos son los inhibidores que detienen el transporte de

electrones y los desacoplantes que no detienen el transporte de

electrones

IV.1. Acoplamiento

Como la energía de oxidación de los sustratos es la que dirige la síntesis de

ATP, la inhibición del paso de electrones al O2 en la cadena respiratoria,

bloqueará la síntesis de ATP. La inhibición de la síntesis de ATP también

bloquea la transferencia de electrones en mitocondrias intactas.

La Oligomicina y la Venturicidina inhiben la síntesis de ATP,

específicamente la ATP sintetasa. Por lo tanto, el flujo de electrones en la

cadena de transporte de electrones y la síntesis de ATP han de encontrarse

obligatoriamente acoplados: una reacción no ocurre sin la otra.

IV.2. Desacoplantes

Algunas condiciones y reactivos pueden producir un desacoplamiento de la

oxidación y la fosforilación. Cuando las mitocondrias se rompen por

detergentes o tratamientos físicos, las membranas pueden tener todavía

una cadena funcional que no acopla la síntesis de ATP a esta respiración.

Algunos agentes químicos causan desacoplamiento sin alterar la estructura

de la mitocondria.

Los desacoplantes son ácidos débiles con propiedades hidrofóbicas. Su

hidrofobicidad les permite difundir a través de las membranas, una vez en

22
 la matriz en su forma protonada, pueden liberar el protón, disipando de esta

forma el gradiente de protones formado por la cadena respiratoria y

permiten que la oxidación de sustratos por la cadena de transporte de

electrones se efectúe en forma rápida con poca o ninguna fosforilación de

ADP. Dicho en forma sencilla, desacoplan la oxidación de la fosforilación,

como el DNP: 2,4-dinitrofenol y el FCCP: carbonilcianida-p-

trifluorometoxifenilhidrazona.

Los Ionóforos, tales como la valinomicina, permiten el paso de iones

inorgánicos a través de la membrana, desacoplando oxidación y

fosforilación al disipar la contribución eléctrica del gradiente electroquímico

a través de la membrana mitocondrial.

Termogenina: proteína muy importante en los animales que hibernan; está

en las mitocondrias de las células del tejido adiposo pardo. Se fija a la

membrana interna de la mitocondria y conforma un canal, permitiendo el

paso de protones a través de ella, disipando el gradiente. Así, toda la

energía que se disponía para la formación de ATP, al pasar por este

transportador, se libera en forma de calor.

IV.3. Inhibidores

Diversas sustancias inhiben las oxidaciones biológicas de diferentes

maneras. La determinación de sus puntos particulares de acción ha sido

importante para interpretar los procesos de transporte de electrones y

fosforilación oxidativa. Una ventaja secundaria de esta clase de

investigaciones es la comprensión del mecanismo de acción de ciertos

venenos y drogas. Dentro de los inhibidores tenemos:

23
 IV.3.1. La Rotenona: Toxina extraída de una planta cultivada en la

amazonia peruana del género Lochocarpus (barbasco) que se

utiliza como insecticida. Se fija en uno de los centros Fe-S del

Complejo I y bloquea la transferencia de electrones hacia la CoQ.

Igual función cumplen el Amital (amobarbital, fármaco barbitúrico) y

la Piericidina A (antibiótico).

IV.3.2. La Antimicina A: antibiótico de Streptomyces, se fija al Complejo III

(en el citocromo b) bloqueando el transporte de electrones al

citocromo 1 (C1), inhibiendo la citocromo C reductasa.

IV.3.3. La Oligomicina: antibiótico proveniente de los actinomicetos,

suprime el consumo de oxígeno, interfiriendo en la fosforilación del

ADP. Del mismo modo, el glucósido vegetal Atractilósido, inhibe la

respiración, interfiriendo con el mecanismo de translocación del ATP

requerido para transportar el ATP a través de las membranas

mitocondriales.

IV.3.4. El Cianuro: se fija al Complejo IV e inhibe la transferencia de

electrones del citocromo a3 al oxígeno.

Del mismo modo actúan la azida y el monóxido de carbono (CO).

En resumen, los inhibidores de la actividad mitocondrial pueden clasificarse de la

siguiente manera:

 Los que afectan el transporte de electrones: rotenona, amobarbital,

antimicina A y cianuro

 Los que afectan la fosforilación: oligomicina y atractilósido.

 Los que desacoplan la fosforilación del transporte de electrones: DNP y

FCCP, valinomicina, termogenina.

24
V. CONTROL RESPIRATORIO

En las mitocondrias el proceso de fosforilación oxidativa está

normalmente acoplado en forma estrecha al transporte de electrones. En

presencia de un exceso de sustrato y oxígeno, la respiración continúa

hasta que todo el ADP es convertido en ATP. Luego la velocidad de la

respiración, o sea, la utilización de oxígeno, alcanza un nivel bajo, de

reposo. La adición de ADP provoca una aceleración de la respiración por

el repentino consumo de oxígeno. Esto significa que en presencia de

oxígeno y sustrato adecuados, el ADP se vuelve limitante de la

velocidad, ejerce un estrecho control sobre todo el proceso de

fosforilación oxidativa. Dicho control, que depende del estrecho acople

del transporte de electrones con la fosforilación, se designa como control

respiratorio.

En otras palabras, el control general de la velocidad de la fosforilación

oxidativa está ligado a la demanda de energía celular, en partículas, la

que tiene lugar en el citosol. Las mitocondrias se pueden considerar

como “esclavas” de la demanda de energía del citosol, la cual es muy

sensible a la concentración de ADP. A medida que el ATP es consumido

en las reacciones citosólicas, se pone a la disposición el ADP para su

translocación por medio de la adenina nucleótido translocasa y se

25
 acelera el transporte de electrones, el cual está acoplado estrictamente

con la disponibilidad de ADP.

Por lo tanto la fosforilación oxidativa:

• Es regulada por las necesidades de energía celulares.

• Las rutas de producción de ATP se encuentran coordinadas.

• La mutación en genes mitocondriales causa enfermedades humanas

relacionadas con la respiración celular.

V.1. Regulación de la fosforilación oxidativa

La velocidad con que se desarrolla la fosforilación oxidativa está

marcada por las necesidades energéticas de la célula. Para que el

proceso se realice de forma correcta se requiere un aporte de sustratos

como NADH (o FADH2), O2, ADP y Pi siendo el más importante el ADP.

La concentración intracelular de este metabolito es una medida de las

necesidades de energía metabólica, y, por lo tanto, va a fijar la velocidad

a la que ha de desarrollarse la fosforilación oxidativa. Esta regulación

por ADP se denomina control respiratorio, ya que el consumo de O2 por

parte de la mitocondria, es dependiente de la cantidad de ADP presente.

Según la actividad celular desarrollada, se producirá un consumo mayor

o menor de ATP, generándose cantidades variables de ADP. Una

concentración elevada de ADP causará un incremento en la velocidad de

la respiración celular o fosforilación oxidativa, intentando de manera

continua reequilibrar la relación ATP/ADP, o expresado bajo otros

26
 términos, la síntesis de ATP se realiza según va siendo requerido por las

necesidades celulares.

Todas las rutas catabólicas estudiadas tienen una regulación acoplada a

la fosforilación oxidativa, que se realiza a través de la carga energética;

de tal manera, que hay un engranaje correcto y equilibrado entre todos

los procesos productores de energía con el consumo de la misma.

VI. CONCLUSIONES:

1. La fosforilación oxidativa es un proceso metabólico que utiliza

energía liberada por la oxidación de nutrientes para producir ATP,

que se realiza en dos etapas; por liberación de energía y por la

cadena respiratoria, donde utilizan variedad de donantes y aceptores

de electrones para canalizar las moléculas transportadoras,

coenzimas, citocromos haciendo el proceso más eficiente.

2. Pese a que la fosforilación oxidativa es una parte vital del

metabolismo, produce una pequeña proporción de especies

reactivas que provocando daño celular. Las enzimas que llevan a

cabo esta ruta metabólica son blanco de muchas drogas y productos

tóxicos que inhiben su actividad.

3. Los inhibidores son sustancias que detienen el transporte de

electrones; es decir se unen a otro componente de la cadena y

bloquean el cambio entre la forma oxidada y forma reducida.

4. Los desacopladores son sustancias que no detienen el transporte de

electrones.

27
 5. El control respiratorio es el flujo de electrones que como resultado da

la fosforilacion de ADP.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. La Fosforilación Oxidativa. [citado el 10 Dic 2017]; Referencia Electronica

disponible en:

https://bioquibi.webs.ull.es/biquimicaestructural/fosforoxidativa.pdf.

2. Leiva M. Cadena Respiratoria Mitocondrial - Fosforilación Oxidativa

[Internet]. Guatemala; [actualizado 04 Feb 2012; citado el 12 de Dic 2017];

Disponible en: http://drleivaenriquez.file.wordpress.com.

3. Inhibidores y desacoplantes.[citado 12 Dic 2017]; Referencia electronica

disponible en:

http://www.ffis.es/volviendoalobasico/5inhibidores_de_la_fosforilacin_oxidati

va.html.

4. Cadena Respiratoria y Fosforilación Oxidativa [12 Abr 2012; citado 11 Dic

2017] ; Referencia Electronica disponible en:

https://www.odon.uba.ar.bioquimica.docs.

5. Control respiratorio.[Internet]; [citado 11 Dic 2017].Disponible en:

http://ocw.unican.es/ciencias-de-la-salud/fisiologia-general/materiales-de-

clase-1/tema-1.-introduccion-al-estudio-de-la-fisiologia/Tema%204C-Bloque

%20I-Fosforilacion%20Oxidativa.pdf.

28
VIII. ANEXOS:

29