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AVANCES RECIENTES EN LA INVESTIGACIÓN QUÍMICA DEL CANNABIS.

El Dr. Ljubi? Un Grlić Zagreb Yugoslavia

Introducción
A pesar de la gran cantidad de contribuciones importantes hechas en el transcurso
de los últimos veinticinco años al estudio de la química de la resina de cannabis,
los componentes químicos del cannabis siguen siendo objeto de una intensa
investigación. Los autores estadounidenses y británicos lograron el mayor
progreso en 1940-1942 para determinar la estructura química de los componentes
estrechamente relacionados del "aceite rojo" (cannabinol, cannabidiol y
tetrahidrocannabinol), así como para identificar los tetrahidrocannabinoles (THC)
como activos principios de la droga. Aunque los THC se obtuvieron no solo de la
resina de cáñamo, sino que también se prepararon sintéticamente y
semisintéticamente, nunca se los aisló del cannabis en una forma cristalina
homogénea. Esto se debe principalmente al hecho de que la estructura del THC
involucra una gran cantidad de estereoisómeros y que la actividad del hachís se
atribuye a una mezcla de THC isoméricos en la resina de cannabis. Algunos de los
isómeros examinados muestran variaciones considerables en su potencia
fisiológica. En una serie de estudios posteriores, se preparó una serie de
homólogos de THC activos por síntesis, y se estableció la relación entre la
estructura y la potencia biológica de estos compuestos.
Las investigaciones realizadas de forma independiente en Checoslovaquia y
Alemania durante los años 1955-1960 han demostrado que, además de los THC
que exhiben actividad de hachís, también hay algunos otros componentes que
poseen actividad biológica diferente. Se descubrió que el ácido cannabidiólico
recientemente aislado es un agente sedante y antibacteriano de la droga.
Varios autores han estudiado variaciones químicas en el cannabis de diversos
orígenes y variedades. Se ha establecido que, además de las diferencias en la
potencia de las diversas resinas, la presencia y la cantidad de cannabinoles
inactivos también pueden ser características para un tipo dado. Las variaciones
observadas ahora se explican principalmente por las diferencias en el progreso de
la conversión gradual fitoquímica de los cannabinoles. El estudio de los factores
genéticos y ecológicos que afectan este proceso es de particular interés para
explicar la formación de los diversos tipos de drogas. Se han hecho intentos para
clasificar el cannabis en varios tipos según el contenido relativo o el predominio de
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varios cannabinoles en la resina. Estos estudios han contribuido a las opiniones

actuales sobre la biogénesis,
Numerosos estudios llevados a cabo recientemente en Canadá, Alemania,
Checoslovaquia, Estados Unidos y Yugoslavia se refieren a nuevos métodos
analíticos para la detección, separación o ensayo cuantitativo de cannabinoles y
otros componentes del cannabis. Sin embargo, es obvio que los
tetrahidrocannabinoles, los principales agentes biológicos, siguen siendo el centro
de interés. Los métodos cromatográficos reproducibles para la separación y la
determinación cuantitativa de THC activos están ahora disponibles. Sin embargo,
aún no se han aplicado completamente e, incluso en los estudios más recientes,
muchas preguntas importantes que tratan sobre las propiedades de los isómeros
de THC separados y su aparición en varios tipos de cannabis permanecen sin
respuesta. El problema más importante a resolver es la posibilidad de la
estimación química directa de la potencia biológica del cannabis. Obviamente,
este trabajo encontrará grandes dificultades, ya que la interrelación exacta entre
las diversas acciones biológicas de los THC sigue siendo desconocida. Se
requiere una estrecha cooperación de químicos y farmacólogos en este campo de
investigación. En cualquier caso, los métodos analíticos modernos han indicado
las posibilidades de aclarar incluso estas preguntas.
El trabajo para mejorar las reacciones químicas para la identificación del cannabis
todavía está en progreso. Este es el objetivo principal del programa de
investigación sobre el cannabis establecido por la Comisión de Estupefacientes de
las Naciones Unidas en 1959. Se ha tratado en varios documentos de las
Naciones Unidas. El problema de la identificación geográfica también parece
haber atraído considerable atención. También sería interesante examinar las
posibilidades de desarrollar pruebas químicas para detectar la adicción al
cannabis. Además, parece que la presencia de componentes activos en varias
partes de la planta de cáñamo también requiere más estudio, ya que su ocurrencia
probablemente no se limita a las cimas en flor de la planta femenina.
A partir de la situación actual con respecto a la investigación química del cannabis,
cabe esperar que el trabajo que queda por hacer en los próximos años completará
nuestro conocimiento actual sobre este tema. Se hicieron contribuciones
importantes en los últimos años, y los métodos desarrollados ofrecen amplias
oportunidades para futuros estudios. En el presente informe, se revisan el
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desarrollo y los resultados de la investigación química sobre el cannabis,

disponible desde 1960.
Estructura De Cannabinoles
Recientemente se hicieron intentos para resolver algunos de los problemas
restantes relacionados con la estructura de los cannabinoles, como la
configuración de los dos átomos de C asimétricos en THC y la posición del doble
enlace alicíclico. Taylor y Strojny[ 51 ] han examinado las posibles rutas sintéticas
estereoespecíficas mediante la síntesis de algunos compuestos modelo
relacionados con el THC. La estructura propuesta por Adams et al .[ 3 ][ 4 ] en
1940 ha sido modificado por Mechoulam[ 35 ][ 36 ], quienes propusieron una
estructura estereoquímica para el cannabidiol sobre la base del espectro de RMN
obtenido en deuteriocloroformo. Se demostró que la posición del doble enlace en
el anillo hidro-aromático estaba conjugada con el grupo fenilo o con el doble
enlace en la cadena lateral (figura 1). ? antavy[ 50 ] ha llegado
independientemente a la misma conclusión sobre la base de los datos de rotación
óptica.
FIGURA 1 Estructura del cannabidiol según Adams (I) y Mechoulam (II)
Biogénesis de cannabinoles

Biogénesis De Los Cannabinoles.

De acuerdo con la hipótesis de Todd [ 52 ], los cannabinoles se forman en la
planta mediante la condensación de un derivado de terpeno, menthatriene, con
olivetol. El primer producto de tal síntesis sería el cannabidiol (CBD), seguido de la
ciclación a tetrahidrocannabinol (THC) y, finalmente, la pérdida de hidrógeno, al
cannabinol (CBN). Después del aislamiento de ácido cannabidiólico (CBDA) por
Krejci y? Antavy[ 31 ] y por Schultz y Haffner[ 46 ], esta hipótesis fue
modificada. En un estudio muy interesante que incluye métodos para la
separación y el análisis cuantitativo de varios cannabinoles, Schultz & Haffner[ 47 ]
sugirió que el CBD se forma en resina de cannabis por descarboxilación de
CBDA. Además, algunos hallazgos sobre la composición de varios tipos de
cannabis por Grlic[ 14 ][ 16 ][ 19 ] confirmó la opinión de que CBDA puede
considerarse como el compuesto inicial en la conversión fitoquímica de los
cannabinoles. Farmilo et al. Dieron un esquema detallado de la biogénesis de los
cannabinoles .[ 12 ] De acuerdo con el abedul[ 6 ] hipótesis del ácido acético para
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la síntesis de fenol, se supone que puede producirse una forma ácida de olivetol
en la planta. El primer paso en la biosíntesis sería la condensación de un ácido
hexanoico con tres moléculas de ácido acético, produciendo un ácido
ciclohexenodiona como un intermedio, que podría enolizar al ácido
dihidroxifenólico (ácido olivólico). El segundo componente sería menthadiene
(limonene), en lugar de menthatriene, como lo menciona Todd. El ácido olivolólico
con menthadiene produce CBDA, que puede convertirse en CBD por
descarboxilación, o por ciclación para formar ácido THC que puede
descarboxilarse a THC y finalmente por deshidrogenación para formar CBN (figura
2). En nuestra opinión, es más probable que ocurra la primera forma de
conversión de CBDA, o al menos parece que predomina en la resina de cannabis.
FIGURA 2 Biogénesis de cannabinoles según Farmilo et al. (12), por
condensación de ácido acetólico y menthadiene Separación y aislamiento de
componentes de cannabis por diversos métodos Distribución
contracorriente

Separación Y Aislamiento De Los Componentes Del Cannabis Por Diversos Métodos.

Korte y Sieper [ 27 ] han descrito en detalle una técnica de cromatografía en
columna seguida de separación a contracorriente mediante la cual se ha aislado el
cannabidiol cristalino (y posiblemente también el THC) del cannabis cultivado en
Alemania. Al aplicar la distribución a contracorriente y utilizar el sistema n-hexano-
metanol-agua (10: 9: 1) también han aislado dos isómeros de la resina de THC,
preparados sintéticamente de acuerdo con Adams et al .[ 1 ] El primero tenía
forma de agujas largas e incoloras, que se fundían a 128 ° C, y el segundo en
prismas incoloros que se fundían a 62-63 ° C. En otra publicación (28), los mismos
autores informaron sobre un tercer isómero, aislado en pequeñas cantidades
como agujas incoloras que se derriten a 86-87 ° C. Los tres isómeros se pueden
distinguir entre sí por absorción ultravioleta. El primero exhibe un máximo a 266
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m? (log? 4.29), el segundo a 273 m? (log? 4.12) y el tercero a 258 m? (registro?

4.25).
Cromatografía en papel
Después del estudio de Asahina, publicado en el Boletín sobre estupefacientes de
1957.[ 5 ], el uso de la cromatografía en papel para detectar y separar los diversos
componentes del cannabis ha sido descrito por varios autores.
Obata e Ishikawa [ 40 ] informaron sobre la detección de eugenol y guaiacol, así
como dos compuestos de carbonilo desconocidos en extractos de cáñamo por
cromatografía en papel. Los mismos autores aislaron la piperidina como uno de
los componentes del olor desagradable de la planta de cáñamo.[ 41 ] Se demostró
que está parcialmente asociado con los aminoácidos.
De Ropp [ 43 ] informaron sobre la separación de ocho componentes de la
fracción fenólica del aceite rojo, utilizando el sistema dimetilformamida-ciclohexano
(1:10). Todos los componentes dieron un color amarillo o naranja con ácido
sulfanílico diazotizado. Tanto el color como la velocidad a la que se desarrolló
variaron con diferentes compuestos. Mediante una cromatografía de partición
adicional en tierra de diatomeas (Celite 545), el mismo autor separó la fracción
activa (THC) de otros componentes. Después de purificar esta fracción por
destilación de alto vacío, un THC resinoso incoloro (C 21 H 30 O 2 ) se obtuvo,
sólido a temperatura ambiente y que muestra una rotación específica [?] 25 / D-
161 ?. ¿Los máximos de absorción UV de la sustancia aislada fueron a 275 y 282
m? (log? 3.26 y 3.28), cambiando en hidróxido de sodio 0.1 N a 292 m? (log?
3.53), con un segundo pico a 325 m ?. El producto no pudo ser cristalizado.
El mismo método, con modificaciones menores, fue utilizado por Farmilo &
Davis [ 11 ] Estos autores han separado al menos diez compuestos fenólicos del
extracto de éter de gasolina del cannabis, y han informado sobre los valores
de R F obtenidos para CBN, CBD, THC y CBDA. El contenido relativo de varios
cannabinoles, como se encuentra en las muestras examinadas de cannabis, se
discute en el mismo documento. Una modificación adicional fue descrita por
Davis et al.[ 9 ]
Korte y Sieper [ 25 ][ 26 ] han informado sobre la separación de CBD, CBN y THC
en los extractos de cáñamo mediante cromatografía de papel descendente,
utilizando un papel impregnado con resina de silicona y el sistema de solventes
ligroinebenceno-cloroformo-metanol-agua (2: 2: 1: 4: 1) . Las manchas se pueden
desarrollar mediante cinco combinaciones diferentes de reactivos de pulverización,
cada una de las cuales produce colores característicos con los tres
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componentes. Los cannabinoles separados también se pueden identificar

midiendo directamente en el cromatograma sus espectros de absorción
UV. Aparentemente, es posible una determinación cuantitativa exacta por este
método solo si se realiza junto con cromatogramas simultáneos de sustancias de
referencia puras.
Schultz & Mohrmann desarrolló un método similar y fácilmente
reproducible. [ 49 ] Aplicaron cromatografía ascendente y un sistema de tolueno-
metanol-agua (5: 5: 1.5) también en papel hidrófobo (silicona Dowex). Además de
los tres cannabinoles anteriores, estos autores informaron sobre el valor
de R F para CBDA (como diacetato).
Kol? Ek et al . Describieron otro método para la separación de los diversos
componentes de la resina de cannabis mediante cromatografía en
papel .[ 24 ] Han utilizado un papel saturado con formamida y un procedimiento
ascendente con benceno como fase móvil. Al tratar por separado las fracciones
ácida y fenólica del aceite rojo obtenido del cannabis de origen yugoslavo, fue
posible obtener una serie de manchas que producían varios colores con cloruro de
di-o-anisidina-tetrazolio. Los cromatogramas se eluyeron con etanol, se trataron
con p -nitro-diazo-benceno-tetrafluoroborato y se midió la absorbancia del
azoproducto amarillo después de una hora a 425 m ^ {2}. Se utilizó cannabidiol
como sustancia de referencia. Los datos cuantitativos sobre la potencia antibiótica
de los componentes separados se han tabulado y discutido.
Además de los componentes de la resina, los componentes hidrosolubles del
cannabis también se han sometido a separación por cromatografía en papel. B?
Zner[ 7 ] informaron sobre el examen de hidrolizados ácidos y alcalinos de
extractos de alcohol de plantas de cáñamo recién cortadas y trituradas mediante
cromatografía de papel ascendente. Este trabajo demostró que era posible
distinguir diferentes variedades de la planta de cannabis en función de las
diferencias en su contenido de azúcar.
Cromatografía de capa fina
Krejci [ 32 ] informaron el uso de esta técnica analítica moderna para la separación
de componentes de cannabis. La aplicación de la cromatografía en capa fina
indicó que el CBD y el CBDA son responsables del efecto antibiótico del cannabis
cultivado en Checoslovaquia que, sin embargo, no exhibió ningún efecto de hachís
en experimentos con humanos y animales.
Korte & Sieper 28 describen grandes posibilidades para la separación de los
cannabinoles ofrecidos por cromatografía de capa fina sobre gel de sílice. El gel
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de sílice se impregnó con dimetilformamida y se usó ciclohexano como fase

líquida. Para la detección de manchas, se describen los colores obtenidos
mediante el uso de diversos reactivos para fenoles. Se descubrió que el detector
más útil era el cloruro de di-o-anisidina-tetrazolio (Echtblausalz B). Da con CBD,
THC y CBN los colores naranja, rojo y violeta respectivamente, de modo que los
tres componentes pueden identificarse en cromatogramas sin utilizar sustancias
de referencia.
A partir de la resina de THC preparada sintéticamente según Adams et al .[ 1 ] de
1-metil-ciclohexanona-3-carboxilato y olivetol, los autores[ 28 ] han aislado
mediante cromatografía en capa fina los mismos tres isómeros, que se han
mencionado anteriormente como aislados en forma cristalina mediante distribución
en contracorriente. Además, el THC sintetizado de acuerdo con Todd et al .[ 13 ]
se encontró que contenía otros dos isómeros, diferentes de los productos
contenidos en THC obtenidos por Adams et al.[ 1 ] THC obtenido de CBD por el
procedimiento con HCl etanólico y por medio de clorhidrato de piridina[ 2 ] se ha
separado por cromatografía en capa fina en tres y dos isómeros respectivamente,
mientras que el producto obtenido por medio del ácido p -toluenosulfónico[ 3 ] no
se pudo separar usando la técnica descrita. El THC aislado del cannabis cultivado
en Alemania (fusión a 146 ° C), de acuerdo con los cromatogramas obtenidos, no
era idéntico a ningún THC sintético o semisintético.
FIGURA 3 Cromatogramas de capa fina de extractos de cannabis de Korte &
Sieper [ 28 ] (Los comentarios sobre varios puntos están incluidos en el
texto).

Los cromatogramas informados por Korte & Sieper obtenidos de extractos de

cannabis de diversos orígenes son de particular interés (figura 3). Se ha
demostrado que las manchas que tienen los mismos valores de R F producen con
cloruro de di-o-anisidina-tetrazolio los mismos productos coloreados y, por lo tanto,
pueden indicar las mismas sustancias. Los puntos V, VI y VII son tres isómeros de
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THC. Entre ellos, el punto V (THC I) predomina en todos los extractos

examinados. THC III, de acuerdo con su R Fvalor y el color del producto, es
idéntico al isómero previamente aislado del cáñamo alemán (fusión a 146 ° C). Las
manchas IV y III corresponden a CBN y CBD, mientras que la mancha II (que
proporciona el mismo azoproducto y la misma prueba de haz que CBD) es
probablemente, según la opinión de los autores, un producto de izomerización de
CBD. CBDA (punto I) permanece en el punto de partida.
En los extractos de hachís de origen oriental (cromatogramas 1 a 4) CBDA no está
presente, mientras que todos los cannabinoles restantes se han detectado en
varias cantidades. El cáñamo alemán (cromatogramas 5 y 6) contiene una gran
cantidad de CBD, algunos CBDA y THC, mientras que CBN no se detectó en
absoluto. El cannabis indio cultivado en Alemania (cromatograma 7) contenía más
THC y menos CBD que el cáñamo alemán. Sin embargo, en un cannabis alemán
fresco solo se han detectado CBDA y CBD (cromatograma 8). Estos hallazgos
confirman la explicación de Grli?[ 17 ][ 19 ] sobre las diferencias en la composición
de varios tipos de cannabis. El examen del producto de la pirólisis del CBD
(cromatograma 9), que exhibe 13 puntos idénticos a los componentes de los
extractos de cannabis, también confirma suposiciones previas.
Una técnica similar para la cromatografía en capa fina se describió recientemente
en el Boletín sobre narcóticos de Miras et al .[ 37 ] El método se utilizó para
comparar la composición del extracto de cannabis ordinario con la sublimación del
cannabis fumado. Cuatro componentes principales de la resina (CBDA, CBD, CBN
y THC) se separaron del extracto de cannabis. Sin embargo, el punto
correspondiente a CBDA (con el valor R F de 0.06) no se detectó en el
cromatograma del sublimado.
En otro estudio reciente. [ 29 ], Korte y Sieper describieron las posibilidades para
la determinación espectrofotométrica cuantitativa de varios cannabinoles después
de la separación por cromatografía en capa fina. Debido a la baja capacidad de
absorción de los cannabinoles en la región ultravioleta, no fue posible preparar
eluatos suficientemente concentrados sobre los cuales llevar a cabo mediciones
directas de la absorción ultravioleta de los compuestos aislados. Por lo tanto, los
autores han convertido los componentes separados en azoproductos coloreados
de alta capacidad de absorción sobre la región visible del espectro. Como en la
técnica descrita anteriormente[ 28 ], los cromatogramas se han desarrollado por
medio de ciclohexano en gel de sílice impregnado con dimetilformamida. Se usó
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como reactivo una solución recién preparada de cloruro de di-o-anisidina-tetrazolio

en NaOH N / 10. CBDA permanece en el punto de partida como un punto naranja,
seguido (con el aumento de R F) por CBD (naranja), CBN (violeta oscuro), THC I
(escarlata), THC II (violeta claro) y THC III (rosa). Las manchas se extrajeron
mediante una mezcla de ácido acético glacial y metanol (1: 1). El rango de
aplicabilidad de la ley Lambert-Beer se ha establecido experimentalmente, y se
han calculado coeficientes de extinción empírica para cuatro productos coloreados
(correspondientes a CBD, CBN, THC I y THC II). Las cantidades de THC III han
sido demasiado pequeñas para el ensayo cuantitativo, mientras que CBDA, que
permaneció en el punto de partida junto con otras impurezas, no pudo
determinarse por separado. La determinación de cuatro cannabinoles en extractos
de cannabis mediante la técnica propuesta lleva de 4 a 5 horas. Los resultados del
análisis de seis muestras de cannabis, examinados por el método propuesto, se
reproducen en la tabla 1.[ 17 ] Por lo tanto, un alto contenido de CBN en las dos
primeras muestras corresponde a su clasificación como cannabis "demasiado
maduro"[ 17 ] Otros datos reportados en los dos documentos también están
bastante de acuerdo.
TABLA 1 Contenido de varios cannabinoles en 6 muestras de cannabis,
obtenidas mediante cromatografía de capa fina, según Korte & Sieper [ 29 ]
% en cannabis seco
Muestra CBD THC I THC II CBN
Nigeria UNC 59 - 0,079 0,019 0,481
Brasil UNC 61 - 0.190 rastro 0.410
Chipre UNC 33 - 0.230 0.150 0,060
Marruecos UNC 21 0,129 0,096 rastro 0.123
Ginebra UNC 51 0,129 0,059 0,028 0,017
Canadá UNC 37 0,103 rastro rastro -
La importancia del trabajo de Korte & Sieper está en poner a disposición un
método analítico simple y reproducible para la determinación cuantitativa de varios
cannabinoles y particularmente para la separación de isómeros de THC. Esto
parece ofrecer amplias posibilidades para más estudios detallados de los
componentes más importantes del cannabis.
Cromatografía de gases
Kingston y Kirk [ 23 ] separaron seis fracciones de un extracto de éter de petróleo
de cannabis, pasándolo a través de1 un caucho de silicona en Chromosorb W. La
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temperatura aplicada fue de 250 ° C, con una velocidad de flujo de helio de 40 ml /

min. Se han detectado doce fracciones recogiendo cada fracción de varias
corridas y volviéndolas a cromatografiar a 225 ° C. Se informaron características
de absorción UV para siete de las fracciones. Entre ellos, se han detectado CBN y
dos isómeros de THC, mientras que CBD no estaba presente en el extracto
examinado. La reacción de varias fracciones obtenidas con la prueba Duqu? Nois-
Negm ha sido estudiada y reportada. Sobre la base de los resultados obtenidos,
los autores supusieron que la cromatografía de gases permitiría la determinación
del origen del medicamento.
En un estudio preliminar, Scaringelli [ 45 ] ha obtenido, mediante una técnica
similar de cromatografía de gases, cinco picos distintos de extractos de
cannabis. Aunque estas fracciones no se han identificado positivamente, sobre la
base de los resultados obtenidos, el autor supuso que los estudios adicionales
sobre la aplicación de esta técnica permitirían la determinación de la actividad
biológica del cannabis.
Martin y col .[ 34 ] han examinado por cromatografía de gases más de 30
muestras de aceites esenciales obtenidos por destilación al vapor de cannabis de
diferentes orígenes. Se usó un flujo de gas portador de helio con una velocidad de
75 ml / min. a través de una columna llena de grasa "Apiezon M" soportada en
Chromosorb W calentado a aproximadamente 220 ° C. Las fracciones separadas
se disolvieron en CCI 4para espectrofotometría IR, y después de evaporar el
disolvente, el residuo se disolvió en etanol para pruebas de color y
espectrofotometría UV. Dieciocho componentes se encontraron en las muestras
de aceite obtenidas de plantas verdes frescas. Se realizaron pruebas de color para
cannabis (Beam, Duqu? Nois y Ghamravy) en unas gotas de la solución etanólica
de cada fracción. No se obtuvo una prueba de haz positiva con ninguna de las
fracciones separadas, mientras que se obtuvo una reacción positiva de Duqu?
Nois con ambas? y \ beta - cariofileno. Los valores de RRT y los porcentajes de
cada fracción, como se encuentran en cuatro de las muestras examinadas, se
tabularon por separado. Se consideró que algunos de los picos en los
cromatogramas eran particularmente característicos del aceite esencial de
cannabis. Cromatogramas de aceites de cannabis seco, El hachís y las charas
mostraron diferencias distintas de las de los aceites frescos, y pueden identificarse
sobre esta base. Como se ve en la figura 4, mirceno, limoneno,? y \ beta -
cariofileno se han detectado en las fracciones examinadas.
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Farmilo y col .[ 11 ][ 12 ] han utilizado una goma de goma de metil-silicona en la

columna Chromosorb W para la separación de los componentes del cannabis. El
material de empaque se activó a 225 ° C durante 12 horas en una corriente de gas
argón y luego a 325 ° C durante 24 horas sin flujo de gas. Las condiciones para la
cromatografía han variado considerablemente (temperatura de 160 a 194 ° C,
velocidad de flujo de gas de 66 a 104 ml / min., Detector beta o ionización por
llama). Se describe en detalle la forma de preparar muestras de aceites
esenciales, extractos de cannabis y cannabinoles puros para el análisis.[ 12 ] Los
cannabinoles puros dieron buenos cromatogramas usando las cantidades de 0,5 a
1,0 µg. Se informan los valores de RT y RRT obtenidos para CBD, THC, CBN y
piraraxil, mientras que el diacetato de CBDA no se cromatografió en las
condiciones probadas, incluso después de 40 minutos. La presencia de CBD se
indicó en un destilado al vapor de cannabis fresco.[ 12 ], aunque en un trabajo
anterior[ 34 ] no se obtuvo una prueba de haz positiva con ninguna de las
fracciones separadas por cromatografía de gases del aceite esencial de
cannabis. El número de componentes separados en varias muestras de la resina
de cannabis incautado varió de siete a uno. Como el análisis de las muestras de
cannabis no se realizó en condiciones idénticas al examen de los estándares de
cannabinol puro, los resultados no se pudieron comparar directamente. En otro
artículo de Davis et al .[ 9 ], se informaron y debatieron resultados adicionales
obtenidos por esta técnica, incluidos datos cuantitativos sobre el contenido de
CBD, THC y CBN en muestras de cannabis de diferentes orígenes.
FIGURA 4 Un cromatograma de gases típico del aceite volátil de cannabis,
por Martin et al. [ 34 ]

Lerner desarrolló recientemente un método rápido y simple para determinar

simultáneamente CBDA, CBD, THC y CBN [ 33] Al tratar el extracto de éter de
petróleo del cannabis con diazometano, el CBDA se convirtió en su éster metílico
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y, por lo tanto, se hizo susceptible a la cromatografía de gases. Otros

cannabinoles no se ven afectados por la metilación; pueden recuperarse sin
cambios después de la cromatografía de gases, como ha sido confirmado por los
espectros IR del material eluido. El producto del tratamiento con diazometano se
disolvió en éter y se sometió a cromatografía de gases en un cromatógrafo de
gases de ionización con argón operado a 180 ° C, en el que el flujo de argón fue
de 80 ml / min. Se usó una goma de cianoetil silicona en una concentración de
0,5% sobre un soporte Chromosorb W silanizado de malla 120 como columna. Los
tiempos de retención se establecieron para CBD, THC, CBDA-éster metílico y
CBN mediante el uso de sustancias estándar de alta pureza. Además, también se
dieron valores de RT para cuatro picos desconocidos, y se tabularon contenidos
relativos de un total de ocho componentes en varias muestras de cannabis. Las
variaciones cuantitativas de los principales componentes de la resina en varias
muestras fueron bastante considerables.
Pruebas Químicas Y Físicas Para Cannabis Y Cannabinoles.
En un documento de la Secretaría de las Naciones Unidas [ 53], se ha estudiado
la especificidad de las tres reacciones más utilizadas para la identificación del
cannabis. Se investigaron once muestras de cannabis y otras 120 especies de
plantas (pertenecientes a 28 familias botánicas). La Tabla 2 reproduce los
resultados obtenidos con muestras de cannabis y con especies de plantas que
muestran una tendencia a reaccionar positivamente con al menos una de las tres
pruebas. Como se puede ver, todas las muestras de cannabis dieron una prueba
Duqu? Nois-Negm muy positiva, mientras que su comportamiento con las pruebas
Beam y Ghamravy varió de una muestra a otra. Por otro lado, varias otras
especies de plantas mostraron tendencias a reaccionar con las pruebas de
cannabis, particularmente con la reacción de Ghamravy. Estas eran
principalmente plantas que contenían aceites volátiles. Por esta
razón,[ 53 ][ 55] En total, se probaron 48 sustancias puras de origen vegetal
(principalmente componentes de aceites volátiles) con las tres reacciones para el
cannabis. Los resultados para las sustancias que reaccionan positivamente se
registran en la tabla 3. Los resultados obtenidos indicaron que algunas de las
sustancias probadas exhibieron reacciones idénticas o muy similares a la resina
de cannabis, particularmente con las pruebas de Duqu? Nois-Negm y
Ghamravy. Estas investigaciones, que se han llevado a cabo en el laboratorio de
narcóticos de las Naciones Unidas, han permitido sacar conclusiones sobre la
especificidad, sensibilidad y utilidad de las tres pruebas más importantes para la
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identificación del cannabis. La prueba Beam demostró ser más específica,

mientras que la prueba Duqu? Nois-Negm fue la más sensible. La prueba de
Ghamravy fue de valor limitado y se recomendó solo si se usaba en combinación
con otras dos pruebas.Salvia officinalis ) mostró una tendencia a reaccionar en las
tres pruebas. En consecuencia, se considera que una aplicación paralela de las
tres pruebas ofrece una probabilidad relativamente alta (pero no una garantía
completa) de la identificación exitosa del medicamento.
TABLA 2
Resultados de las tres reacciones para la identificación del cannabis
obtenidas por el laboratorio de narcóticos de las Naciones Unidas [ 53 ] con
varias muestras de cannabis y con las especies de plantas que muestran
una tendencia a reaccionar positivamente con al menos una de las tres
pruebas
Abreviaciones utilizadas

00 Negativo
+ Rastro
++ Débilmente positivo
+++ Positivo
++++ Muy positivo
I.- CANNABIS SATIVA L.
especies Haz Ghamravy Duquenois-Negm
UNC 1A ++ ++++ ++++
UNC 1B ++++ ++++ ++++
UNC 1C +++ ++++ ++++
UNC 1D ++++ ++++ ++++
UNC 1E ++++ ++ ++++
UNC 1F ++ +++ ++++
UNC 2 ++ + ++++
UNC 3 ++ + ++++
UNC 4 ++++ ++++ ++++
UNC 5 00 ++++ ++++
UNC 6 ++ +++ ++++
II - OTRAS ESPECIES DE PLANTAS
especies Haz Ghamravy Duquenois-Negm
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Salvia officinalis L. + +++ ++

Thymus vulgaris L. 0 0 +++ ++
Rosmarinus officinalis L. ++ +++ 00
Satureja hortensis L. 0 0 ++ +++
Lavandula officinalis Chaix 0 0 +++ 00
Eucalipto Globulus Labill. 0 0 +++ ++
Arthemisia Absynthium L. 0 0 +++ 00
Arthemisia Dracunculus L. 0 0 ++ ++
Cinnamomum Camphora Nees 0 0 ++ 00
Laurus nobilis L. 0 0 ++ 00
Angelica Archangelica L. 0 0 ++ 00
Lepidium sativum L. 0 0 +++ 00
Armoracia lapathifolia Gilib 00 + 00
Ficus carica L. 00 00 +
Ficus elastica Roxb. 0 0 ++ 00
Pelargonium capitatum (L.) Ait 0 0 ++ +
Filipendula ulmaria (L.) Maxim 0 0 +++ 00
Papaver somniferum L. 00 + 00
Rhamnus Frangula L. 00 + +
Nicotiana Tabacum L. 00 + 00
Atropa Belladona L. 00 + 00
Datura Stramonium L. 00 + 00
Hyoscyamus niger L. 00 + 00
Juniperus oxycedrus L. 00 + 00
Juniperus Sabina L. 00 + 00
Juniperus communis L. 00 + 00
Larix decidua Mill. 00 + 00
Novak y col .[ 38 ][ 39 ] han descrito los resultados obtenidos para varias muestras
de cannabis utilizando la prueba de haz alcalino y ácido, las pruebas de Ghamravy
y Duqu? Nois-Negm, una prueba modificada del Codex de
la farmacopea británica , la reacción de Rathenasinkam, la reacción de Viehoever
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y la determinación del valor de Beam-C1. Los extractos de cannabis húngaro e

indio han mostrado diferencias claras en respuesta a todas estas pruebas
(excepto la reacción de Viehoever). Se suponía que una respuesta positiva a la
mayoría de las reacciones probadas debía atribuirse a los componentes
fisiológicamente inactivos del cannabis. Sobre la base de los resultados obtenidos,
se concluyó que no había más que trazas de componentes activos en los
extractos de cáñamo de origen húngaro.
Grlic et al . Han desarrollado varios métodos analíticos que indican la composición
y el tipo de resina de cannabis , como la determinación del contenido de fracción
ácida[ 19 ], indofenol método espectrofotométrico[ 14 ], prueba de ácido peróxido-
sulfúrico[ 15 ] y la determinación del " valor de FeCl 3 "[ 20 ] Los resultados
obtenidos con algunos de los métodos propuestos se expresan aritméticamente en
términos de varias constantes, que resultaron ser particularmente útiles para
caracterizar varios tipos de cannabis. Estos métodos y los resultados obtenidos
con una serie de muestras de cannabis se han revisado en detalle, y se remite al
lector a un artículo anterior en el Boletín sobre Estupefacientes.[ 14 ] Mediante el
uso de los mismos métodos, se han estudiado e informado cambios en las
propiedades químicas, que resultan cuando se cultivan muestras de diversos
orígenes en un lugar con clima de Europa central (Zagreb).[ 18 ] Se ha
demostrado en el curso de estos estudios que las diferencias en la composición
química exhibidas por varios tipos de cannabis pueden explicarse por la etapa de
desarrollo del proceso fitoquímico (llamado "maduración de la resina") por el cual
el CBDA se convierte gradualmente a CBD, THC y finalmente a CBN.1 Por lo
tanto, el cannabis en el que el CBDA (la sustancia inicial en la conversión de
cannabinoles) era predominante se clasificó como "inmaduro". La resina que
contenía principalmente THC fisiológicamente activos se denominó "madura". El
tipo "intermedio" contenía predominantemente CBD, mientras que la resina que
contenía CBN principalmente inactivo, el producto de conversión final,
correspondía al cannabis "demasiado maduro". Aunque el proceso de
"maduración" parecía estar afectado por varios factores, en general fue más
avanzado en el cannabis de áreas tropicales ("maduro") que en el cannabis
desarrollado en un clima templado ("inmaduro" o "intermedio"). En consecuencia,
el cannabis tropical se distingue no solo por su alto contenido de resina,
Cabe señalar que el término propuesto "maduración" de la resina y la clasificación
correspondiente en tipos no están necesariamente relacionadas con la madurez
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fisiológica de la planta de cáñamo, ya que algunos autores parecen

malinterpretarlo al citar el trabajo anterior. Estas expresiones se han utilizado para
abreviar la terminología y facilitar la noción de un proceso de transformación
natural y de las variaciones que dependen de su progreso gradual.
Miras y col. [ 37 ] informaron la desaparición de CBDA y un aumento relativo del
contenido de THC en la sublimación del cannabis fumado en comparación con el
extracto de cáñamo común. Uno podría explicar los hallazgos de estos autores
también mediante una "maduración" de los cannabinoles que se produce al fumar
el medicamento. Tal explicación puede ser de gran importancia, ya que lleva a la
conclusión de que el humo del cannabis "inmaduro" (cultivado en un clima
moderado) probablemente contiene una mayor cantidad de agentes tóxicos que
los extractos del mismo tipo de droga.
Las posibilidades para el examen del cannabis mediante espectrofotometría
ultravioleta directa también se han reexaminado en los últimos años y se han
descrito en detalle. [ 16 ][ 54] En comparación con los extractos de algunas plantas
aromáticas, la absorción ultravioleta medida directamente de los extractos de
cannabis no fue lo suficientemente específica como para ser utilizada como base
para la identificación de la droga. Sin embargo, este método proporciona
información útil sobre la composición química de la resina de cannabis. Se
descubrió que las curvas de absorción de las soluciones etanólicas diluidas de la
resina son características de varios tipos de cannabis. Todas las muestras
exhibieron un pico de absorción marcado entre 266 y 280 m? (atribuido
principalmente a la absorción aditiva de varios cannabinoles) y un mínimo entre
246 y 250 m ?. Las muestras "maduras" no exhibieron otros máximos de
absorción. Las muestras "inmaduras" mostraron un pico secundario a 303-304
m? (explicado por el predominio de CBDA), mientras que el "intermedio" el tipo
mostró solo una ligera convexidad sobre la misma región. Para la caracterización
de la resina de cannabis, se han utilizado dos proporciones de extinción (E 260 /
E 280 y E 300 / E 3l0 ). La reproducibilidad de estas constantes fue muy buena, y se
descubrió que eran características de los grupos de muestras
examinadas. Resultados reportados por Novak[ 39 ], obtenido por la misma
técnica, ha confirmado los hallazgos anteriores. Miras y col.[ 37 ] han informado
sobre las diferencias entre los espectros de absorción UV del extracto de cannabis
y el extracto de sublimación del cannabis fumado. El pico sobre la región de 300
m? (atribuido a CBDA) faltaba en el extracto de sublimado. Scaringelli[ 44 ]
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desarrolló un método espectrofotométrico ultravioleta basado en el cambio

batocromático que muestran los cannabinoles cuando se examinan en medios
ácidos y alcalinos. Según los datos experimentales informados, el uso de valores
diferenciales para la absorción en soluciones ácidas y básicas parece aumentar la
especificidad de la identificación espectrofotométrica del cannabis. Se informó que
esta técnica es útil para detectar la presencia de cannabinoles en material
adulterado.[ 8 ]
TABLA 3
Colores con reacciones al cannabis administradas por ciertas sustancias
orgánicas, según los resultados del laboratorio de narcóticos de las
Naciones Unidas [ 53 ][ 55 ]
Reacción
Duquenois-
Sustancia Haz Ghamravy
Negm
Anethole 00 00 violeta débil
Anisol 00 00 rosado
l -Borneol 00 00 violeta fuerte
d -Camphene 00 00 violeta fuerte
Cannabidiol violeta fuerte violeta fuerte azul violeta a azul
Carvacrol 00 violeta azulado rojo violeta débil
l -Carvone marrón 00 violeta rosado
Cariofileno 00 violeta débil azul violeta a azul
Cineole 00 rosa violeta débil marrón
Aldehído cinámico Amarillo 00 violeta fuerte
Citral Amarillo violeta rojizo marrón violeta
parduzco
Citronela 00 violeta débil violeta azulado fuerte
Citronelol 00 violeta azulado violeta azulado
p- quimene 00 rosa parduzco azul violeta a azul
débil
Eugenole 00 00 marrón
Farnesol 00 violeta azulado violeta fuerte
Geraniol 00 violeta azulado violeta fuerte
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Guayazuleno 00 rojo rosado verde

Furfurol 00 gris violeta débil verde
Isoeugenol metil 0 0 00 Marrón rojizo
éter
Isosafrol 00 00 rojo naranja
Juglone marrón violeta 0 0 verde
d- limoneno 00 00 violeta azulado fuerte
l- limoneno 00 00 violeta azulado fuerte
Linalol 00 violeta azulado violeta fuerte
Mentol 00 00 violeta parduzco a violeta
azulado
Nerol 00 Violeta Violeta
? -Fellandreno 00 Violeta violeta azulado fuerte
? -Pinene 00 00 violeta azulado
? -Pinene 00 00 azul índigo
Pulegone 00 00 azul cielo fuerte
Pirrol 00 00 violeta fuerte
Resorcinol verde parduzco violeta rosado rojo rosado fuerte
Safrol 00 00 Marrón rojizo
Escualeno 00 00 Violeta
Thujone 00 00 Violeta
Terpineol 00 00 violeta azulado fuerte
Timol 00 Violeta violeta fuerte
Farmilo et al. Realizaron un gran estudio sobre la química del cannabis y que
contiene los datos obtenidos mediante varios métodos disponibles .[ 12 ] Los
autores examinaron las variaciones en la composición química del cannabis de
diversos orígenes geográficos, y discutieron las posibilidades para determinar la
procedencia de la droga por medios químicos.
Además de los estudios de varios métodos y pruebas para el cannabis y los
cannabinoles, el comportamiento de ciertos reactivos químicos con los
componentes del cannabis se ha descrito y discutido en varios documentos. La
mayoría de estas reacciones se han aplicado a la detección de manchas en
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métodos cromatográficos. Por lo tanto, se ha informado de la aplicación del

reactivo de Duqu? Nois-Negm[ 9 ][ 23 ][ 28 ][ 34 ],
haz[ 9 ][ 12 ][ 26 ][ 27 ][ 28 ][ 34 ], Ghamravy.[ 28 ][ 34 ],
Gibbs[ 11 ][ 12 ][ 14 ][ 26 ][ 28 ], Blackie[ 28 ], Pauly[ 25 ][ 26 ][ 27 ][ 28 ][ 43 ], etc.
Se informó que uno de los reactivos más sensibles y útiles para los cannabinoles
era el cloruro de di-o-anisidina-tetrazolio (Echtblausaltz B)[ 24 ][ 28 ], exhibiendo
diferentes colores con varios cannabinoles.
Constituyentes Antibacterianos
Se ha trabajado mucho en los últimos diez años en la investigación de los
componentes antibacterianos del cannabis. Como se sabe, el ácido cannabidiólico
fue identificado como el principal agente antibiótico por Krejci et al.[ 30 ] y por
Schultz y Haffner[ 48 ] En algunos estudios recientes, las sustancias
antibacterianas y su efecto han sido examinados por Kol? Ek et al .[ 24 ]
Krejci.[ 32 ] y Doktorov[ 10 ] La química y el efecto de las sustancias
antibacterianas del cannabis se describieron en detalle en el Boletín sobre
Narcóticos de Kabelik et al.[ 22 ] Sin embargo, según la opinión de la OMS[ 56 ],
no hay pruebas suficientes a favor de hacer que el cannabis esté disponible para
la extracción de sustancias antibióticas. Entre una gran cantidad de agentes
antibióticos conocidos, los componentes antibacterianos del cannabis no parecen
ofrecer ventajas particulares en medicina. En consecuencia, según la opinión
citada[ 56 ], las preparaciones de cannabis siguen siendo obsoletas, y no hay
justificación para su uso médico. Sin embargo, como lo demuestran Rado? Evic et
al.[ 42 ], la determinación de la potencia antibiótica puede ser útil para
proporcionar información interesante sobre la composición química de la resina de
cannabis.
Referencias
001

Adams, R. y Baker, BR: J. Am. Chem Soc ., 62, 2405 (1940).

002

Adams, R., Pease, DC, Caín, CK y Clark, JH: J. Am. Chem Soc ., 62, 2402 (1940).
003

Adams, R., Caín, CK, McPhee, WD y Wearn, RB: J. Am. Chem Soc ., 63, 2209
(1941).
004

Adams, R., Loewe, S., Pease, DC, Caín, CK, Wearn, RB, Baker, BR & Wolf, H .: J.
Am. Chem Soc. 62, 2566 (1940).
005
https://www.unodc.org/unodc/en/data-and-analysis/bulletin/bulletin_1964-01-
01_4_page005.html#bf001

Asahina, H .: Toro. Narcóticos , 9, N ° 4, 18 (1957).

006

Abedul, AJ: Fortsch. der Chem. Org., Natur ., 14, 186 (1957).
007

B? Zner, M .: Sbornik Ceskoslov. akad Zemedel. ved Rostlinna vyroba, 6 , 121

(1960).
008

Cann, FL: J. Forensic Sci. Soc ., 3, 33 (1962).

009

Davis, TWM, Farmilo, CG y Osadchuk, M .: Anal. Chem., 35 , 751 (1963).

010

Doktorov, V .: Biologia (Bratislava), 16, 351 (1961).

011

Farmilo, CG & Davis, TWM: J . Pharm Pharmacol, 13 , 767 (1961).

012

Farmilo, CG, Davis, TWM, Vandenheuvel, FA y. Lane, R .: documento de las

Naciones Unidas ST / SOA / SER.S / 7 (1962).
013

Gosh, R., Todd, AR y Wright, DC: J. Chem. Soc . (1941), 137.

014

Grlic, Lj .; Acta pharm. Jarra. 11 , 129 (1961).

015

-: J. Pharm. Pharmacol, 13 , 637 (1961).

016

-: Granja. Glas ., 17, 424 (1961).

017

-: Toro. Narcóticos, 14 , N ° 3, 37 (1962).

018

-: documento de las Naciones Unidas ST / SOA / SER.S / 10 (1964).

019

- & Andrec, A .: Experientia , 17, 325 (1961).

020

- & Tomic, N .: Experientia, 19 , 267 (1963).

021

J. Assoc. Ofic. Agr. Químicos, 45, 213 (1962).

022

Kabelik, J., Krejci, Z. y? Antavy, F .: Bull. Narcóticos, 12 , n. ° 3, 5 (1960).

023

Kingston, CR y Kirk, PL: Anal. Chem., 33, 1794 (1961).

024
https://www.unodc.org/unodc/en/data-and-analysis/bulletin/bulletin_1964-01-
01_4_page005.html#bf001

Kol? Ek, J., Maticic, M. y Repic, R .: Arch. Pharm., 295 , 151 (1962),
025

Korte, F. y Sieper, H .: Angew. Chem 72, 210 (1960).

026

- -: Tetrahedron, 10 , 153 (1960).

027

- -: Ann., 630, 71 (1960).

028

- -: J. Chromatog., 13 , 90 (1964).
029

- -: J. Chromatog., 13 (1964), en impresión.

030

Krejci, Z., Horak, M. y? Antavy, F .: Pharmazie, 14 , 349 (1959).

031

Krejci, Z. y? Antavy, F .: Acta Univ. Olomuc., 6, 59 (1955).

032

Krejci, Z .: Casopis Lekaru Ceskych, 100 , 1351 (1961); CA 57, 953h (1962).
033

Lerner, M .: Science, 140, 175 (1963); Documento de las Naciones Unidas ST /

SOA / SER.S / 9 (1963).
034

Martin, L., Smith, DM y Farmilo, CG: Nature, 191 , 774 (1961).

035

Mechoulam, R .: Israel J. of Chemistry, 1 , 37 (1963).

036

-: Tetrahedron, 19 , 2073 (1963).

037

Miras, S., Simos, S. y Kiburis, J .: Bull. Narcóticos, 16 , No. 1, 13 (1964).

038

Nov? K, I, Buz? S, G. & T? Th, L .: Pharmazie, 17 , 166 (1962).

039

Nov? K, I., Haznagy, A. y Szendrei, K .: Pharmazie, 17 , 294 (1962).

040

Obata, Y. e Ishikawa, Y .: Bull. Agr. Chem Soc. Japón, 24 , 667 (1960).

041

Obata, Y., Ishikawa, Y. y Kitazawa, R .: Bull. Agr. Chem Soc. Japón, 24 , 670
(1960).
042

Rado? Evic, A., Kupinic, M. y Grlic, Lj .: Nature , 195, 1007 (1962); Documento de
las Naciones Unidas ST / SOA / SER.S / 6 (1962).
https://www.unodc.org/unodc/en/data-and-analysis/bulletin/bulletin_1964-01-
01_4_page005.html#bf001

043

De Ropp, RS: J. Am. Pharm Assoc., Sci. Ed., 49, 756 (1960). 44. Scaringelli, F .: J.
Ass. Apagado. Agricola Chemists, 44, 296 (1961).
044

Scaringelli, F .: J. Ass. Apagado. Agricola Farmacia. 44 296 (1961).

045

-: Boletín del Tesoro de los Estados Unidos, División de Impuestos sobre el

Alcohol y el Tabaco, 1961 (disponible en manuscrito).
046

Schultz, OE, y Haffner, G .: Arch. Pharm., 291 , 391 (1958).

047

- -: Arco. Pharm., 293 , 1 (1960).

048

- -: Z. Naturforschung, 14b , 98 (1959).

049

- & Mohrmann, HL: Arch. Pharm., 295 , 66 (1962).

050

? antavy, F .: Manuscrito impreso (comunicación privada).

051

Taylor, EC y Strojny, EJ: J. Am. Chem Soc., 82 , 5198 (1960).

052

Todd, A .: Endeavour , 2, 69 (1943).

053

Secretaría de las Naciones Unidas, documento ST / SOA / SER.S / 1 (1960).

054

-, Documento ST / SOA / SER.S / 2 (1960).

055

-, Documento ST / SOA / SER.S / 5 (1961).

056

- Documento E / CN.7 / 409 (1961).