PRÁCTICA N° 05: CRECIMIENTO POBLACIONAL EN LEVADURAS

Saccharomyces cerevisiae
I. INTRODUCCIÓN

Una población es un conjunto de individuos de una misma especie que ocupa un hábitat
determinado en un momento específico, entre los cuales existe un intercambio de información
genética entre los individuos e interacciones entre ellos. Toda población biótica, microscópica
o macroscópica, de bacterias, protozoarios, hongos, plantas o animales, posee un conjunto de
propiedades como la reproducción. Por lo que existen formas o patrones de Crecimiento como
el crecimiento exponencial o en forma de J o crecimiento sigmoideo o en forma de S.

La levadura Saccharomyces cerevisiae es un microorganismo eucariontes ubicuo, con una alta

adaptabilidad fisiológica, que emplea la respiración aerobia al igual que la fermentación
alcohólica para metabolizar la glucosa como fuente de energía. Que en condiciones de
laboratorio se desarrolla, primero con una fase de adaptación inicial donde la población
aumentará lentamente, etapa conocida como fase lag o fase lenta, y continuará el crecimiento
con el desarrollo de la fase logarítmica o exponencial (Fase log) para concluir con la fase estable
o de equilibrio, donde se da la propiedad de la población conocida como CAPACIDAD DE
CARGA, PORTE, SOPORTE O SUSTENTO (k).

II. MATERIALES Y METODOLOGÍA

A. Materiales:
Por la cátedra Por el Estudiante
 Microscopio óptico  Levadura (100 g)
 Baño María a 37°C  Azúcar rubia (50 g)
 Cocina eléctrica  Laminas porta objeto
 Hematocitómetro  Laminillas cubreobjeto
 Pipeta Pasteur
 Tubos de vidrio
 Pipeta de ensayo
 Matraz
 Bagueta
B. Metodología:

1. Cultivo:
 Pesar 0.5 g de levadura seca y adicionar 10 mL de agua destilada en un tubo de ensayo,
mezclar hasta obtener una suspensión uniforme.

 Sacar 1ml del cultivo preparado y adicionar 10 mL de agua destilada en un tubo de

ensayo, mezclar hasta obtener una suspensión uniforme.

 Realizar conteo en cámara de Neubauer, de cada una de las suspensiones.

  Anotar la cuenta de levaduras y calcular el número de células por mL.

2. Incubación:
 Transfiera 10 mL de suspensión de levaduras cada una en un matraz y colocarlos a
una incubadora a 37°C agitar cada 10 minutos.

 Realice observaciones a los 30 minutos, 60 minutos, 90 minutos, tomando 1 mL de

muestra
3. Conteo de Levaduras:
 A la muestra de 1 mL con levaduras adicionar 0.1 ml de azul de metileno (2 gotas) y
homogenizar

 De la solución homogénea. Colocar una alícuota en el hematocitómetro realice el

conteo al microscopio. (Anexo 01).
III. RESULTADOS. Elaboración de los cuadros y figuras que ilustren el experimento desarrollado.

Figura N° 01: Ilustrar el experimento de crecimiento de Levaduras.

Nº de levaduras por ml. 37 000 15 300 000 15 050 000 12 750 000
Tiempo 0 min 30 min 60 min 90 min

Figura N° 02: Ilustrar en método de conteo de levaduras

 Cuadro N° 01: Curva de Crecimiento de Levaduras en el tiempo

NUMERO DE CÉLULAS POR ml

18000000
15300000 15050000
16000000
12750000
NUMERO DE CE´LULAS

14000000
12000000
10000000
8000000
6000000
4000000
200000037000
0
0 30 60 90 120

TIEMPO

ANEXO

CONTEO EN CÁMARA DE NEUBAUER PARA LEVADURAS

Para utilizar la cámara de Neubauer realice el siguiente procedimiento:

 Limpie la cámara y la laminilla de cuarzo suavemente con alcohol

 Coloque la laminilla sobre la cámara en forma vertical
 Proceda a llenar la cámara, es recomendable llenarla con una micropipeta o con una jeringa ya
que la cámara se llena con una gota.
 Para el conteo, llevar la cámara al microscopio y enfoque en panorámico y pasar a mediano y
luego a mayor aumento donde se realizará el conteo, donde se visualiza cada uno de los campos
y con la ayuda del carro del microscopio se recomienda contar cuatro esquinas y el cuadro del
centro. En conclusión:
 Células/mL = Total de células contadas * 50 000

 Para determinar el número de células en la muestra original hay que multiplicar por la dilución