¿Qué es un Hemograma?

Es un examen de sangre que permite medir: glóbulos rojos,

glóbulos blancos, plaquetas, hematocrito y hemoglobina.
Cuando se hace con valores diferenciales también permite
medir las concentraciones de cinco tipos de glóbulos blancos
que se encuentran en la sangre: neutrófilos, linfocitos,
monocitos, eosinófilos y basófilos.

Con un conteo de este tipo de células es posible confirmar el

diagnóstico de algunas enfermedades, según si estas células
están sobre o bajo el rango normal. También permite detectar
respuestas adversas a diferentes tratamientos.

Considerando que cada una de estas células tiene funciones

determinadas, el déficit o exceso de éstas puede ser indicador
de diferentes condiciones, infecciones o patologías.

 Glóbulos blancos o leucocitos: ayudan al organismo en el combate de infecciones. Cuando existe una anormalidad en el recuento
de estas células, es posible que la persona tenga alguna infección o sea portadora de un virus.

 Glóbulos rojos: para conocer la cantidad de glóbulos rojos se mide la hemoglobina. Estas células transportan el oxígeno a través
de la sangre a todo el organismo. Si la hemoglobina está bajo el rango normal, es posible que la persona padezca anemia.

 Plaquetas: son fundamentales para la coagulación y la prevención de hemorragias. Por lo tanto, si están bajo la curva
recomendada, es posible que sea la causa de distintos episodios de hemorragia o moretones frecuentes.

Toma de Muestra Procedimiento El tubo con la muestra se bate

En la mayoría de los análisis de sangre, se extrae
una muestra de sangre a partir de una vena y se
utiliza tubos con anticoagulante EDTA.
En lista de trabajo, click en “nuevo”; cada
paciente tiene asignado un número de
identificación para su muestra. También se
debe incluir otros datos como: cédula,
nombre y apellido, sexo, fecha de
nacimiento, edad y se Guarda los datos
bien, en caso tal haya una burbuja
se bate nuevamente, luego la
acercamos al “Mindray” (equipo
encargado de realizar el
hemograma), se introduce la
aguja, se presiona el botón y al
sentir que se va la aguja se saca el
tubo de la muestra y el equipo
procesa la muestra.

Resultados:
Los resultados pueden tardar de unas pocas horas a un día en estar listos, se va a gráficos donde aparece el hemograma completo.

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 EXTENDIDO SAGUÍNEO
Un excelente extendido sanguíneo es aquel en donde
se logra una buena distribución de los diferentes
elementos que componen la sangre (eritrocitos,
leucocitos y plaquetas).
Confección:
o Una vez tomada la muestra de sangre, proceda a
mezclar.
o Se deposita una gota de sangre en un extremo del
portaobjetos o lamina.
o Con el borde de otra lamina, se extiende la totalidad
de la gota por capilaridad.
o Manteniendo la lámina extensora con un ángulo de
45 grados y una velocidad constante.

TINCIÓN PANÓPTICO
La técnica de la tinción de panóptico rápido permite
una preparación rápida de frotis sanguíneos teñidos
mediante un uso sucesivo de tres soluciones o
colorantes.

Consigue menos resolución de las estructuras

celulares que la tinción de May-Grünwald-Giemsa y
la tinción de Wright. Pero su elaboración es más
rápida y más sencilla.
Reactivos: Hay que tener en cuenta que se trata de una tinción
1. Solución fijadora. diferencial que no reúne los requisitos para ser
2. Colorante ácido “Eosina” considerada tinción tipo Romanowsky.
3. Colorante básico “Azul de Metileno”

El colorante ácido se deja aplicar Finalmente con el colorante básico

Se utiliza para fijar previamente de 45 segundos a 1 minuto. se deja aplicar no más de 20
las células antes de teñir durante segundos.
1 minuto.

Resultados: se debe visualizar las preparaciones al microscopio óptico para comprobar la calidad de la tinción:

Monocito vacuolado Macroplaqueta Eosinófilo y Neutrófilo

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 MIELOCITOS NORMOBLASTO

MORFOLOGÍA SANGUÍNEA
FRACCIÓN INMADURA

PROMIELOCITO
Metamielocito, Mielocito y Promielocito
LINFOCITOSIS

CÉLULA PLASMÁTICA NEUTRÓFILO EN BANDA

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 ELECTROFORESIS
DE HEMOGLOBINA
Es el análisis que se encarga de medir los distintos tipos de hemoglobina que se encuentran en la sangre. Ahora
bien, la hemoglobina es la proteína encontrada en los glóbulos rojos la cual se encarga de transportar oxigeno
hacia la sangre, sin embargo existen algunos tipos anormales de esta proteína que no hacen esto correctamente.
Gracias a la electroforesis de hemoglobina se pueden diagnosticar hemoglobinopatías, es decir alteraciones en
la hemoglobina.

TIPOS DE HEMOGLOBINA
Normales, entre los tipos de hemoglobina
normales más comunes están:
• Hemoglobina A: entre los tipos de
hemoglobina este es el más común y usualmente se
encuentra en las personas adultas. Existen ciertas
enfermedades como por ejemplo los casos graves
de talasemia que provocan una disminución de
hemoglobina A y un incremento en los niveles de
hemoglobina F.
• Hemoglobina F: es la hemoglobina fetal, es
decir la que está presente en los niños recién nacidos
y en los fetos esta suele ser reemplazada por la
hemoglobina a poco tiempo después de que el bebé
nace y usualmente se produce poca de esta
hemoglobina F posterior al nacimiento. Existen
algunas enfermedades como la anemia aplásica, la
leucemia y la enfermedad drepanocítica que
provocan anormalidades en la hemoglobina y un
incremento o elevación en los niveles de la
hemoglobina F. cuando la hemoglobina F representa
más del 2% de la hemoglobina total se asocia con
algunas enfermedades.
• Hemoglobina A2: este tipo de hemoglobina es
normal y se da en cantidades pequeñas en las
personas adultas.
Anormales, existen más de 350 tipos de
hemoglobinas anormales, entre las más comunes
están:
• Hemoglobina S: este se encuentra en la
enfermedad drepanocítica, en esta enfermedad se
presentan serios problemas en la sangre. Las
personas que sufren de esta enfermedad presentan
en ciertas ocasiones una forma falciforme o de luna
creciente en los glóbulos rojos. Dichas células suelen
descomponerse de una manera fácil provocando
obstrucción en pequeños vasos sanguíneos.
• Hemoglobina C: este no cumple con la
transportación correcta de oxígeno. Se asocia con la
anemia hemolítica.
• Hemoglobina E: es encontrado en las personas
que tienen ascendencia del sudeste asiático.
• Hemoglobina D: es un tipo de hemoglobina que
se encuentra en ciertos trastornos drepanocíticos.

VALORES DE LA ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA

En los niños y en los adultos los resultados normales son diferentes

En los niños o bebés los

En los adultos los porcentajes porcentajes normales de las
normales de las moléculas son: moléculas de hemoglobina F son:
 Hemoglobina A: de 95% a  Hemoglobina F en niños
98% recién nacidos: de 50% a
 Hemoglobina A2: de 2% a 80%
3%  Hemoglobina F en niños
 Hemoglobina F: 0.8% a 2% de seis meses: 8%
 Hemoglobina S: 0%  Hemoglobina F en niños
 Hemoglobina C: 0% mayores a seis meses: de
1% a 2%

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 Los tipos de hemoglobina anormales cuentan con distintas alteraciones provocadas por la sustitución de
aminoácidos dentro de sus cadenas de globina, este cambio eléctrico da paso a la separación entre gran parte
de las variantes anormales de dicha proteína y de la hemoglobina A dentro de un pH alcalino.

CROMATOGRAFÍA
DE HEMOGLOBINA
Este acetato de celulosa se puede cambiar también por gel de
almidón así como se puede cambiar el pH de 6.2 a 8.6 para así
poder separar las hemoglobinas de manera clara y lograr
expandir el rango de la electroforesis de hemoglobina más
allá de las hemoglobinas A1, A2, S y C. La electroforesis de
hemoglobina que se usa con más frecuencia es con acetato de
celulosa a pH alcalino pero se reemplaza con la
CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN.

Se realiza un contaje con índices de hemoglobina, hematocrito,

frotis de sangre periférica, metabolismo del hierro,
reticulocitos, test de falciformación, test de solubilidad y contar
la cantidad de hemoglobina A2 y hemoglobina F así como
electroforesis de hemoglobina a pH alcalino, si esto refleja
instabilidad o alteración de la afinidad al oxigeno significa que
se debe hacer también un test de estabilidad térmica, es decir
al calor, y química con isopropanol.

Esto suele ser suficiente para obtener resultados confiables,

sin embargo en algunas ocasiones se utiliza la
ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA A PH ACIDO,
estudios de globinas, isoelectroenfoque y en algunos casos
incluso se hace un análisis molecular de ADN. Equipo D-10 Hemoglobin testing System.
Es un sistema totalmente automatizado que combina
En la Elución desde el acetato de celulosa se da una separación las pruebas de talasemias y monitoreo de diabetes en
entre la hemoglobina S y la hemoglobina A2 si esta está una sola plataforma.
presente, sin embargo no se recomienda cuando se
manifiestan hemoglobina C, hemoglobina E y hemoglobina O
puesto que la movilidad que estas poseen es como la
movilidad de Hemoglobina A2.
En el pH alcalino la hemoglobina está cargada de manera
negativa y en un campo eléctrico este viaja hacia el ánodo
positivo.
Cuando se realiza una electroforesis de hemoglobina en un
medio alcalino se suele evidenciar dos bandas, una es la
hemoglobina A es decir la Ao+A1 y la hemoglobina A2, esto no
sucede en los niños menores a los 2 años de edad, pues ellos
presentan hemoglobina F en cantidades específicas.

Muchas veces se prefiere utilizar la cromatografía,

antes que la electroforesis ya que esta nos permite
separar mejor los diferentes tipos de Hemoglobinas y
así determinar la hemoglobinopatía que presenta el
paciente.

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 RESULTADOS

Aquí se muestra cómo se van separando en el siguiente orden: F, A1C, A1, A2, S, C

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HEMOSTASIA PRIMARIA
¿QUÉ ES LA HEMOSTASIA?
Mecanismo de defensa del organismo que se activa tras haber sufrido un traumatismo o lesión
que previene la pérdida de sangre del interior de los vasos sanguíneos. Se divide en 2 fases:
Hemostasia Primaria: Hemostasia Secundaria:
Las plaquetas se adhieren a la superficie En esta fase, la activación de múltiples
lesionada y se agregan para constituir el proteínas de plasma produce la formación de
“tapón hemostático plaquetario”. un coágulo de fibrina que impide la salida de
sangre al exterior.
¿CUÁNDO ESTA INDICADA?
Alteraciones congénitas: Alteraciones adquiridas:
 Hemofilia  Trombocitopenia
 Enfermedad de Von Willebrand  Hepatitis, cirrosis
 Defectos congénitos de factores de  Coagulación intravascular diseminada
coagulación  Procesos inflamatorios crónicos

AGREGACIÓN PLAQUETARIA
FUNDAMENTO
La agregación plaquetaria “in vitro” se puede definir como
la interacción plaqueta-plaqueta medida sobre plasma rico
en plaquetas (PRP) por método óptico (método descripto
por Born) y sobre sangre entera por impedancia.

Preparación del paciente

Es importante que el paciente no ingiera medicación que
altere la función plaquetaria. En el caso de las drogas que
inhiben las plaquetas de manera irreversible como el ácido
acetil salicílico y las tienopiridinas, se sugiere suspender su
ingesta entre 7-10 días previos al estudio.

Toma de muestra
Se utiliza tubo de Citrato porque conserva los factores de
coagulación.
Se toman 6 tubos, 2 para prueba de tiempo de obturación y
4 para prueba de AGREGABILIDAD plaquetaria.

OBSERVACIONES
 Se encuentran valores disminuidos de adhesividad plaquetaria en enfermedad de
Bernard Soulier, ya que en esta patología está alterado cuantitativamente o
cualitativamente el complejo GP Ib-V-IX, a nivel de la membrana plaquetaria.
 En la enfermedad de von Willebrand se pueden presentar también valores disminuidos
 Una adhesividad plaquetaria normal en esta patología no descarta el diagnóstico.
Generalmente se correlaciona con el valor del TS.

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 TIEMPO DE OBTURACIÓN
Equipo: PFA 200
Muestra: Sangre completa

El equipo cuenta con dos cartuchos, (colágeno-

epínefrina y colágeno-ADP), estos cartuchos evitan
las fugas al vacío. En cada cartucho se colocan 800
Microlitros de sangre total.
La sangre atraviesa por un capilar, cada capilar
está recubierto por una de las mezclas anteriores,
cuando las plaquetas tocan la epinefrina se forma
el agregamiento hasta que se obstruye el capilar
deteniendo la succión de la sangre.

VALORES NORMALES
150 seg (colágeno-epinefrina) El tiempo requerido para que se de el agregamiento y
102 seg (colágeno-ADP) se detenga la succión es lo que conocemos como
TIEMPO DE OBTURACIÓN.
OBSERVACIONES
 Si el tiempo de colágeno epinefrina sale  Si ambos salen alterados se puede deber a
aumentado y el ADP normal se debe al patologías como: Von Willebrand, Bernat
consumo de algún medicamento con ácido Soulier u otra alteración plaquetaria
acetilsalicílico

AGREGABILIDAD PLAQUETARIA
Equipo AggRAM (turbidímetro de 4 canales)
Muestra (125 microL): plasma rico en
plaquetas
AGREGANTES (250 microL):
• ADP
• Epinefrina (fotosensible)
• Colágeno
• Ristocetina
Blanco (250 microL): plasma pobre en
plaquetas
Para obtener:
- PLASMA RICO EN PLAQUETAS centrifugamos la sangre total a 1500 revoluciones por 5 min.
- PLASMA POBRE EN PLAQUETAS es obtenido centrifugando el plasma rico a 4000 RPM por 10 min.
OBSERVACIÓN: El plasma rico en plaqueta debe tener unas 250000 plaquetas para la prueba, si se
encuentra muy concentrado es necesario diluir agregando plasma pobre. Para conocer la cantidad de
PP a agregar utilizamos las siguiente formula: Vi + Ci = Vf + Cf
VERDE: EPINEFRINA
Tiene una de onda de agregación primaria, después de
cierto tiempo las plaquetas se activa libera granulos que
promueven la agregación y se forma una onda secundaria.
Esta onda secundaria también es conocida como fase de
liberación.
ROJO: ADP
Primero se da un bajon de la curva, esto porque las
plaquetas primero se hinchan y se ponen mas turbias, ya
luego se empienzan a agregar y la curva sube. El ADP
cambia casi inmediatamente la forma de las plaquetas.
AZUL: COLÁGENO
X: tiempo Tarda unos 60 seg para actuar, es decir que tarda un poco
Y: % luz transmitida (directamente proporcional mas en cambiar la forma de las plaquetas y producir
con la agregación) agregabilidad
MARRÓN: RISTOCETINA