UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS -ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA

AGRICULTURA

PRÁCTICA No. 6

NOMBRES: Cajas Cristina FECHA DE REALIZACIÓN:

Castillo Fabricio 12-diciembre-2017
Taday Sofía
FECHA DE ENTREGA:
NRC: 3302 19-diciembre-2017
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INFORME DE LABORATORIO DE FITOQUÍMICA

1. TÍTULO DE LA PRÁCTICA: “Extracción y cuantificación de fenoles por un método analítico”

2. OBJETIVOS
Objetivo General
Extraer y cuantificar fenoles por un método analítico.

Objetivos Específicos
 Extraer compuestos fenólicos de Vaccinium corymbosum (arándano azul), mediante agitación utilizando
una solución polar.
 Realizar una curva de calibración estándar confiable, con diferentes concentraciones de ácido gálico
en el software VISIONlite y Excel.
 Calcular la concentración de compuestos fenólicos presentes en la muestra vegetal mediante la curva
de calibración.

3. RESULTADOS
a) Curva de calibración obtenida con el software VISIONlite

1.4

1.2

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

0.0
0 100 200 300 400 500
mg/L

Parámetros de la curva: y = 2,975154E-03 x -0,039711

Resíduos: 0,0116 Coeficiente de Correlación: 0,99974
Fecha: 12/12/2017 13:11:18

Figura 1. Gráfica “Absorbancia vs concentración de fenoles “, obtenida por las diluciones de ácido gálico
(Software VISIONlite, 2017), ecuación: 𝑦 = 2,975154 ∗ 10−3 𝑥 − 0,039711 con un coeficiente de correlación
de 0,99974.
 Tabla 1: Concentración de fenoles totales en Vaccinium corymbosum (arándano azul) en base a curva de calibración
obtenida por VISIONlite
Concentración
Absorbancia
Muestra (mg/L) de ácido
(nm)
gálico
Arándano 1 0,109 50,05
Arándano 2 0,100 46,99
Arándano3 0,101 47,23
Concentración media = 48,09 mg/g de muestra
Concentración media = 4809 mg/ 100 g de muestra

b) Cuantificación de fenoles usando el software Excel

La ecuación que se obtiene es: 𝑦 = 3 ∗ 10−3 𝑥 − 0,0373 con un coeficiente de correlación de 0,9994.

Tabla 2: Concentración de fenoles totales en Vaccinium corymbosum (arándano azul) con la curva de
calibración obtenida por Excel
Concentración
Absorbancia
Muestra (mg/L) de ácido
(nm)
gálico
Arándano 1 0,109 48,76
Arándano 2 0,100 45,76
Arándano3 0,101 46,10
Concentración media = 46,88/g de muestra
Concentración media = 4688/100 g de muestra

c) Cálculo del error de los valores obtenidos por VISIONlite y Excel

Tabla 3: Porcentaje de error de la concentración de fenoles
Concentración
Concentración
media Error
media Excel
VISIONlite relativo
[mg/L] de
[mg/L] de (%)
ácido gálico
ácido gálico
48,09 46,88 2,52

Para la cuantificación de fenoles totales se utilizó un gramo de muestra de Vaccinium corymbosum

(arándano azul), que incluía la pulpa, cáscara y semillas de un arándano. Posterior a la extracción de
fenoles, el extracto obtenido se disolvió en 250 ml de agua destilada, para su cuantificación.

4. DISCUSIÓN

Los compuestos fenólicos de los alimentos se extraen con disolventes de diferentes polaridades de acuerdo al
carácter hidrofílico o lipofílico de los compuestos que se desean evaluar. Los disolventes más comúnmente
utilizados en la obtención de fenoles son el metanol, etanol y mezclas de acetona/agua en medio ácido (Cerón &
López, 2013), pues proporcionan mayor estabilidad a los compuestos del extracto (Lilio et al., 2016). Además
según (Beltrán et al., 2013) en su estudio, los extractos obtenidos con agua y etanol, con pretratamiento de la
muestra y agitación, presentan valores significativamente superiores en contenido de sólidos totales y
compuestos fenólicos respecto a los obtenidos con solventes de menor polaridad, y sin secado previo de la
muestra; esto refiere una extracción confiable en nuestro ensayo aunque no hubo secado previo de la muestra,
pues los compuestos fenólicos en materia fresca, no presentan dificultades de separación por su afinidad con el
agua y el solvente polar (Lilio et al., 2016).
Se realizaron curvas de calibración con VISIONlite y Excel obteniéndose resultados diferentes para la
concentración de fenoles (mg/L de ácido gálico), de esta manera se encontró un error de 2.52%. Lo cual puede
deberse al número de cifras significativas que utiliza el software VISIONlite que es mucho mayor que el de
Excel, lo que lleva a un redondeo de las cantidades, además de que se sabe que Excel y otras hojas de cálculo
muestran inexactitudes importantes para análisis básicos como la regresión lineal (Javi, 2014). Con esto se puede
afirmar, que el resultado generado para el coeficiente de correlación (r2) con VISIONlite es más preciso por estar
más próximo a 1, indicando que existe una dependencia casi total entre la concentración y la señal analítica,
absorbancia (Dosal & Villanueva, 2008)

La concentración de compuestos fenólicos varió de 274,48 a 694,60 mg GAE.100 g-1 para cultivares de arándanos
en Brasil (Rodriguez et al., 2011). Sellappan, Akoh y Krewer (2002) estudiaron diferentes cultivares de arándanos
en el estado de Georgia (EE. UU.) e informaron una concentración máxima de fenoles totales en su estudio de,
929.62 mg.100 g-1; estos valores son inferiores al obtenido en nuestro ensayo que fue de 4809 mg/100 g de
muestra fresca, la variación se presenta ya que las especies de arándanos varían su contenido nutricional y
fenólico, debido al medio y sustrato donde se lo cultiva (Beltrán et al., 2013). Y a pesar de utilizar un protocolo
meticuloso para la extracción de los compuestos fenólicos, con el mismo fundamento que utilizamos, los estudios
mencionados, mostraron una cantidad inferior de fenoles, sin citar que ambos utilizaron diluciones de 1,5 g de
muestra con 100 ml de agua y nosotros 1,0 g de muestra en 250 ml de agua.

5. CONCLUSIONES
 Se extrajeron fenoles presentes en la muestra de 1 gramo de Vaccinium corymbosum (arándano
azul) mediante un solvente polar como el metanol acidificado que permite estabilizar la muestra,
aforando hasta 250 ml.
 Los resultados de la curva de calibración utilizando el software VISIONlite fueron más exactos
que los que se obtienen usando Excel, esto se corroboró mediante el coeficiente de correlación
obtenido del primero: 0,99974, que es bastante cercano a 1.
 Tomando en cuenta los resultados de VISIONlite, la concentración media de fenoles procedente de
Vaccinium corymbosum (arándano azul) es de 48,09 mg/L de ácido gálico..

6. BIBLIOGRAFÍA

Beltrán Delgado, Yaixa, Morris Quevedo, Humberto J, de la Cruz, Enrique Reynaldo, Quevedo
Morales, Yanelis, & Bermúdez Savón, Rosa Catalina. (2013). Contenido de fenoles
totales en extractos de Pleurotus obtenidos con solventes de diferente polaridad.
Revista Cubana de Investigaciones Biomédicas, 32(2), 121-129. Recuperado en 17 de
diciembre de 2017, de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-
03002013000200001&lng=es&tlng=es.

Cerón L. & López I. (2013). Extracción y cuantificación de compuestos antioxidantes a partir de

cáscaras de tres variantes de papas (Solanum tuberosum) (Tesis de pregrado).
Universidad de Nariño, San Juan de Pasto- Colombia
Dosal , M. A., & Villanueva, M. (2008). CURVAS DE CALIBRACIÓN EN MÉTODOS
ANALÍTICOS. México.
Javi. (16 de octubre de 2014). wordpress.com. Obtenido de Por qué R es mejor que Excel:
https://psicologiadedatos.wordpress.com/2014/10/16/por-que-r-es-mejor-que-excel/
Lillo, A, Carvajal-Caiconte, F, Nuñez, D, Balboa, N, & Alvear Zamora, M. (2016). Cuantificación
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berries nativos del Cono Sur de América. RIA. Revista de investigaciones
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Rodrigues, Eliseu, Poerner, Naira, Rockenbach, Ismael Ivan, Gonzaga, Luciano Valdemir,
Mendes, Camila Ribas, & Fett, Roseane. (2011). Phenolic compounds and antioxidant
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911-917. https://dx.doi.org/10.1590/S0101-20612011000400013

SELLAPPAN, S.; AKOH, CC; KREWER, G. Compuestos fenólicos y capacidad antioxidante de

los arándanos y las moras cultivadas en Georgia. Journal of Agricultural of Food
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http://dx.doi.org/10.1021/jf011097r