DEBER DE FOTOMETRÍA DE LLAMA, ABSORCIÓN ATÓMICA Y FLUOROMETRÍA

4to. NIVEL BIOQUÍMICA Y FARMACIA, SEM. SEPTIEMBRE - FEBRERO 2020

1. Los siguientes datos se obtuvieron en el análisis de muestras de agua, para el calcio. Calcule la
concentración de Ca presente en la muestra desconocida de agua. Los pares listados en seguida muestran en cada caso la
intensidad de emisión, correspondientes a las concentraciones indicadas en p.p.m.: 0,0 p.p.m. – 4,0; 2,0 p.p.m. – 9,6; 4,0
p.p.m. – 15,0; 6,0 p.p.m. – 20,7; 8,0 p.p.m. – 26,5; 10,0 p.p.m. – 31,9; incógnita – 11,5. R. 2,695 ppm.
2. La misma incógnita dada en el problema anterior se analizó también usando una técnica de adición de estándar en un
instrumento diferente. La incógnita sola dio una intensidad de 44,5 unidades, de las cuales 31,5 se debieron al fondo. Al
aumentar la concentración de calcio presente en la muestra en 2,0 y 4,0 p.p.m. se produjeron intensidades de emisión de
54,15 y 63,80 unidades respectivamente, incluyendo el mismo fondo. Calcule la concentración del Ca presente en la
incógnita. R. 2,694 ppm
3. El estroncio se determina rutinariamente por absorción atómica en un laboratorio industrial particular mediante los
siguientes datos de calibración obtenidos a 4607 Å. Los pares listados en seguida muestran en cada caso el valor de la
intensidad correspondiente a la concentración de Sr en p.p.m.: 50,0 p.p.m.- 85,0; 40,0 p.p.m.- 68,0; 30,0 p.p.m. – 51,0;
20,0 p.p.m.- 34,1; 10,0 p.p.m.-16,9; 0,0 p.p.m.- 0,0. En el análisis de una muestra de una nueva fuente, que contiene
probablemente una sustancia que interfiere, se hicieron dos mediciones. En la primera se midió una porción alícuota de
muestra, que dio una lectura de intensidad de 42,0. A otra alícuota se agregó suficiente Sr para aumentar la concentración
a 5,0 p.p.m. La solución resultante produjo una lectura de intensidad de 49,0. Calcule la concentración de Sr en la
incógnita. R. 30,01 ppm
4. El manganeso puede determinarse por absorción atómica a 4033 Å. En cierto análisis se obtuvieron los siguientes datos
de calibración. Los pares listados muestran en cada caso el valor de la intensidad correspondiente a la concentración de
Mn en p.p.m. 4,0 p.p.m.- 21,0; 8,0 p.p.m.- 38,5; 12,0 p.p.m. – 56,5; 16,0 p.p.m. - 73.0; 20,0 p.p.m.- 90,0. Calcule las
concentraciones de Mn en una muestra desconocida que exhibe una intensidad de emisión de 43,5. R. 9,128 ppm
5. El análisis del indio puede realizarse frecuentemente por absorción atómica usando la línea de 4511- Å del indio. Una
muestra desconocida de 500 g se disuelve en agua hasta formar 1,00 litro de solución y de éste se toma una alícuota de 3
mL y se mide la emisión de la flama encontrándose que es de 48,0 unidades. Se agregan 5,00 mg de indio como sal
soluble a la muestra remanente; se mide nuevamente la intensidad de emisión de la flama y se encuentra que es de 53,5
unidades. Calcule el porcentaje de indio en la incógnita suponiendo un fondo despreciable. R. 8,727x10-3 por ciento.
6. En la determinación de cadmio en un mineral, se obtuvieron los siguientes datos usando la absorción atómica. Los pares
de valores muestran en cada caso la absorbancia correspondiente a la concentración de Cd indicada: 2,00 p.p.m.- 0,053;
3,80 p.p.m.- 0,104; 5,80 p.p.m.- 0,160;. 8,00 p.p.m. – 0,220; 9,60 p.p.m.- 0,260; 11,20 p.p.m.- 0,310. Calcule la
concentración en p.p.m. de cadmio en una muestra desconocida que exhibe una absorbancia de 0,179. R. 6,538 ppm.
7. Una muestra de aleación de plata que pesa 5,00 g se disolvió y se trató para producir 500 mL de solución. En los datos
siguientes los pares de valores dados muestran en cada caso los valores de % T registrados correspondientes a la
concentración de Ag en p.p.m. en una serie de soluciones estándares: 0,00 p.p.m. – 100,00%; 5,00 p.p.m.- 86.8%; 10,0
p.p.m.- 75.5%; 15.0 p.p.m.- 65.3%; 20,0 p.p.m.- 56,5%; 25,0 p.p.m.- 49.0%; 30.0 p.p.m.- 42,6%. Si la transmitancia de la
solución desconocida fue de 68,5. ¿Cuál fue la concentración de plata en la aleación? a). en p.p.m. y b). en porcentaje? R.
0,133 por ciento.
8. Una serie de estándares de calcio dio los siguientes valores de absorbancia correspondientes en cada caso, a la
concentración de Calcio en p.p.m.: 0,00 p.p.m. – 0,000; 1,00 p.p.m.- 0,090; 2,20 p.p.m.- 0,194; 3,10 p.p.m.- 0,273; 3,90
p.p.m.- 0,340; 5,00 p.p.m.- 0,440; 6,00 p.p.m.- 0,525. Una muestra de 1,00 g de una tierra desconocida se disolvió
después de descomposición y dio 150 mL de solución. Esta solución se analizó de la misma manera que los estándares y
en el mismo instrumento, dando una absorbancia de 0,380. Calcule la concentración de Ca a). en la solución desconocida
en p.p.m. y b). en porcentaje en peso, en la tierra. R. 0,065 por 100.
9. Se trató una muestra de 5,00 mL de sangre con ácido tricloroacético para precipitar las proteínas. Después de centrifugar,
la disolución resultante se llevó a pH 3 y se procedió a una extracción con dos alícuotas de 5 mL de metil isobutil cetona
conteniendo el agente orgánico complejante de plomo APCD. El extracto se aspiró directamente a una llama de
aire/acetileno, dando una absorbancia de 0,444 a 283,3 nm. Se trataron de la misma forma alícuotas de cinco mililitros de
disoluciones patrón conteniendo 0,250 y 0,450 ppm de Pb, dando absorbancias de 0,396 y 0,599 respectivamente.
Calcular las ppm de Pb en la muestra suponiendo que se cumple la ley de Beer. R. 0,297 ppm.
10. Se determinó el cromo en una muestra acuosa pipeteando alícuotas de 10,0 mL de la muestra en cinco matraces aforados
de 50,0 mL. Antes de enrasar los matraces, se añadieron a cada uno de ellos volúmenes distintos de un patrón de 12,2
ppm de Cr. R. 27,98 ppm.
Muestra, mL 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0
Patrón, mL 0,00 10,0 20,0 30,0 40,0
Absorbancia 0,201 0,292 0,378 0,467 0,554
Representar los datos; b). Deducir una ecuación que relacione la absorbancia y el volumen de patrón y el coeficiente de
correlación; c). Calcular las ppm de Cr. En la muestra; d). Calcular la desviación estándar del resultado en c).
11. En una determinación de manganeso a 403,3 nm, la solución A conteniendo una parte alícuota de una solución
desconocida, dio una lectura de medición de 45. La solución B, conteniendo la misma cantidad de solución del problema,
mas 100 g/mL de manganeso agregado, dio una lectura de 83,5. Todas las lecturas se corrigieron para el fondo.
Calcúlese la cantidad de manganeso en la solución A. R. 116,88 ppm. R. 62,838 ppm.
12. Una muestra de ceniza de mineral dio una lectura de 37. Las soluciones B y C conteniendo la misma cantidad de solución

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 desconocida del problema, más 40 y 80 g/mL de potasio agregado, respectivamente, dieron lecturas netas de 65 y 93.
Calcúlese la cantidad de potasio en la solución original. R. 52,86 ppm.
13. La forma reducida del di nucleótido de adenina y nicotinamida (NADH) es un importante coenzima y altamente
fluorescente. Tiene un máximo de absorción a 340 nm y un máximo de emisión a 465 nm. Unas disoluciones patrón de
NADH dieron las siguientes intensidades de fluorescencia:
Concentración de NADH (mol/L) 0,20 0,40 0,60 0,80
Intensidad relativa, I 4,74 8,98 14,01 18,02
a). Construir la curva de calibrado para el NADH; b). Calcular, por mínimos cuadrados, la ecuación de la recta
correspondiente; c). Una disolución problema presenta una fluorescencia relativa de 12,16. Calcular a concentración de
NADH; d). Calcular la desviación estándar relativa del resultado del apartado c). si la lectura 12,16 fuera una sola medida
y cuando es la media de tres medidas. R. 0,541
14. Los siguientes volúmenes de una disolución que contenía 1,10 ppm de Zu 2+ se pipetearon en ampollas de decantación que
contenían, cada una, 5,00 mL de una disolución de Zn2+ desconocida: 0,00; 5,00; 10,00 y 15.00 mL. Cada uno de ellos fue
extraído con tres alícuotas de 5 mL de CCl 4 que contenía un exceso de 8-hidroxiquinolina. Los extractos se diluyeron a
25,0 mL y se midió su fluorescencia con un fluorímetro. Los resultados fueron:
Volumen de Zn2+ patrón /mL 0,00 5,00 10,00 15,00
Lectura del fluorímetro, F 6,08 11,24 15,47 20,84
a). Representar gráficamente las lecturas del fluorímetro frente al volumen de disolución patrón; b). Calcular, por
mínimos cuadrados, a ecuación de la recta y el coeficiente de correlación, correspondiente a la representación gráfica; c).
Calcular la concentración de cinc en la muestra; d). Calcular la desviación estándar para el resultado del apartado (c).
Cuando se considera una sola lectura y el promedio de cuatro lecturas semejantes. R. 1,39 ppm.
15. A cuatro alícuotas de 5,0 mL de una muestra de agua se adicionaron 0,00; 1,50; 3,00 y 4,50 mL de una disolución patrón
de NaF que contenía 5,0 ppb de F-. Se adicionaron a cada una 5,00 mL exactos de una disolución que contenía un exceso
del complejo de Al con el granate de alizarina R un complejo fuertemente Fluorescente, y las soluciones se diluyeron a
50,0 mL. La intensidad de fluorescencia de las cuatro disoluciones, una de ellas el blanco, fueron:
mL de muestra 5,00 5,00 5,00 5,00
mL de F- patrón 0,00 1,50 3,00 4,50
Lectura, F 66,3 53,7 39,0 26,4
a). Representar gráficamente los datos; b). Calcular, por mínimos cuadrados, la ecuación de la recta y el coeficiente de
correlación que relaciona la disminución de la fluorescencia con el volumen de reactivo patrón; c). Calcular al
concentración en ppb, de F- en la muestra; d). Calcular la desviación estándar del dato del apartado (c).para una sola
medición y para el promedio de tres mediciones. R. 14,84 ppb.
16. Los iones de Fe(II) catalizan la reacción del luminol con H 202. Se ha comprobado que la intensidad de
quimioluminiscencia resultante aumenta linealmente con la concentración de hierro (II) desde 10 -10 a 10-8 M. A una
alícuota de 2,00 mL de una disolución problema de Fe(II) se adicionaron 1,00 mL exactos de agua, seguidos de 2,00 mL
de una disolución diluida de H202 y 1,00 mL de una disolución alcalina de luminol. La señal quimioluminiscente de la
mezcla se integró durante un período de 10,0 s y se encontró que era de 16,1. A una segunda alícuota de 2,00 mL de la
muestra se adicionaron 1,00 mL de una disolución de Fe(II) 4,75 x 10 -5 M seguido del mismo volumen de H 202 y luminol.
La intensidad integrada fue 29,6. Calcular la concentración molar del Fe(II) en la muestra. R. 2,83x10-5 M.
17. La concentración del colesterol en el suero puede analizarse fluorométricamente. Utilizando el procedimiento aceptado,
una muestra estándar que contiene 20,0 mg/100 mL produjo intensidad de fluorescencia sin corregir, de 78,8 unidades.
(El patrón dio una lectura de 2,0 unidades). a). ¿Cuál será la concentración de una soluci6n desconocida que tiene una
intensidad de fluorescencia sin corregir de 63,5 unidades suponiendo que el patrón aún da 2,0 unidades? b). ¿Cuál será la
concentraci6n de colesterol en el suero usado para producir la muestra desconocida en la parte a)? si se derivara de una
muestra de 50,0 mL de suero? R. 32,03 mg/100 mL.
18. El análisis del selenio se realiza por formación de un complejo con 2,3-diaminoftaleno y por medición de la fluorescencia
del complejo. Una muestra de 5,00 g se trata con la técnica del frasco de oxígeno y varios pasos subsecuentes hasta que
ha reaccionado con el ligando para formar finalmente 10,0 mL de solución. Una solución estándar que contiene 10,0
g/mL de Se produce una intensidad de fluorescencia de 64,0 unidades. Si la solución desconocida da una intensidad de
fluoresescencia de 74,5 unidades, ¿cuál es la concentración de Se en la muestra inicial? R. 2,328x10-3 por 100.
19. La identificación y el análisis de drogas de fenotiazina se realizan comúnmente por métodos de fluorescencia. En el
análisis de la cloropromazina se obtuvieron los siguientes datos. Cada par muestra en cada caso la intensidad de
fluorescencia correspondiente a la concentraci6n del estándar: 0,0 p.p.m.- 0,00; 0,10 p.p.m. - 7,50; 0,20 p.p.m – 14,8;
0,30 p.p.m – 22,6; 0,40 p.p.m.-30,0; 0,50 p.p.m. – 37,7. Calcule la concentración de la cloropromazina en una solución
que exhibe una intensidad de fluorescencia de 18,7 con una lectura del patr6n de 2,4. R. 0,217 ppm.
20. La droga morfina puede convertirse en seudomorfina utilizando la oxidación alcalina. La seudomorfina puede analizarse
fluorométricamente usando una excitación a 250 m y midiendo la emisión a 440 m . Se encuentra que el límite de
detección es de 0,02 g/mL de plasma o extracción de tejido. Se extrae 1,00 g de tejido y se trata de acuerdo con el
procedimiento prescrito para producir 10,0 mL de solución. Ésta se analiza fluorométricamente, produciendo una lectura
de 67,5 unidades, con una lectura del patrón de 3,40 unidades. Bajo las mismas condiciones una muestra estándar de 1,40
g/mL dio una intensidad de fluorescencia de 55,5 unidades cuando la lectura del patrón 3,20 unidades. Calcule el
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porcentaje de morfina en el tejido. R. 1,716x10-3 %.

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