“Año del Buen Servicio al Ciudadano”

Facultad:
Ing. De Agroindustrial

Curso:
MICROBIOLOGIA

Tema:
Bacilos gram negativos. Rhizobium, Agrobacterium

Docente:
RAUL, ANHUAMAN AZABACHE

Integrantes:
 CASTAÑEDA DIAZ, STIVEN
 CRUZ MEGO, CRISTHIAN
 LLANOS SOBERON, ROY
 PEREZ SUAREZ, ALFREDO
 SANTA CRUZ VASQUEZ, JUAN
 VENTURA VENTURA, LUIS GRABIEL

2017
Introducción:

Rhizobium es un género de bacterias gram-negativas del suelo que fijan

nitrógeno atmosférico. Pertenece a un grupo de bacterias fijadoras de nitrógeno
que se denominan colectivamente rizobio. Viven en simbiosis con determinadas
plantas (como por ejemplo las leguminosas) en su raíz, después de un proceso
de infección inducido por la propia planta mediante la secreción de lectina, a las
que aportan el nitrógeno necesario para que la planta viva y está a cambio le da
cobijo. Más específicamente, la condición de simbiosis viene dada por la
formación de una molécula de transporte de oxígeno, equivalente a la
hemoglobina, llamada Leghemoglobina. Sólo se puede sintetizar cuando los dos
organismos se encuentran en simbiosis; por parte de la bacteria se sintetiza el
grupo Hemo de dicha molécula, y por parte de la planta se sintetiza la
apoproteína. Así, mediante la nueva molécula formada, se puede llevar a cabo
el transporte de oxígeno necesario para el metabolismo de la bacteria (y así
poder fijar el nitrógeno requerido por la planta
Jean-Baptiste Boussingault, un reconocido químico francés, dio los primeros
indicios acerca de la incorporación de nitrógeno por parte de los tréboles y las
judías. Pero fueron Hellriegel y Wilfarth (1886-1888) quienes establecieron la
relación entre los nódulos de las leguminosas y la fijación de nitrógeno. Por otro
lado, Beijerinck, uno de los más grandes microbiólogos, fue el primero en aislar
y cultivar un microorganismo de los nódulos de legumbres en 1888. Él lo llamó
el Bacillus radicicola (Bacilo radicícola), que ahora es colocado en el Manual de
Bergeyde Bacteriología Determinativa bajo el género Rhizobium.
Mientras que la Agrobacterium es un género de bacterias que causan tumores
en las plantas. Esta capacidad tumorigénica viene dada por su capacidad natural
para transferir ADN a las células vegetales, hecho que los científicos
rápidamente aprovecharon para convertirla en una herramienta para la creación
de plantas transgénicas mediante ingeniería genética.
Rhizobium radiobacter (= Agrobacterium tumefaciens) es la especie más
comúnmente estudiada de este grupo. En plantas causa la enfermedad de las
agallas del cuello, denominada así porque produce agallas o tumores, a menudo
en la zona donde se une la raíz al tallo (cuello, o también llamado corona). Los
tumores son producidos por la transferencia de un segmento de ADN (ADN-T)
del plásmido bacteriano Ti (abreviatura de tumor-inductor). La especie
próximamente relacionada, R. rhizogenes (= A. rhizogenes), induce tumores en
la raíz, y presenta un plásmido distinto Ri (abreviatura de raíz-inductor). La
especie R. vitis (= A. vitis), restringida generalmente a la vid, puede presentar un
plásmido Ti.
Cepas de otras especies bacterianas distintas de Agrobacterium, aisladas en
muestras ambientales, han presentado también plásmidos Ti. Además, muchas
cepas ambientales de Agrobacterium no poseen plásmidos Ti ni Ri, por lo que
no son virulentas.
El plásmido ADN-T se integra semi-aleatoriamente en el genoma de la célula
huésped, y los genes de virulencia del ADN-T se expresan causando la
formación de una agalla. El ADN-T lleva genes de enzimas biosintéticas para la
producción de aminoácidos inusuales, típicamente octopina o nopalina. También
lleva genes para la biosíntesis de hormonas de las plantas, auxinas y
citoquininas. Estos alteran el equilibrio hormonal en la célula, de forma que la
planta no puede controlar la división de esas células, formándose tumores. El
cociente de auxina a citoquinina determina la morfología del tumor.
Características:
Las bacterias Rhizobium son organismos de vida libre que habitan en la rizosfera
y se alimenta de los restos de organismos muertos. Estas contienen un plásmido
que codifica información que es vital para la infección y la modulación de la planta
hospedadora correspondiente. Son bacilos móviles, Gram-negativos, con dos
capas de pared celular (la primera capa está hecha por carbohidratos y
proteínas, y la segunda capa por lípidos y carbohidratos), procariotas, aerobios
(necesita oxígeno para crecer), móviles (al hacerse el test de motilidad, el agar
se vuelve amarillo y no de su color original –morado-), beta (digiere la
hemoglobina), crece casi en cualquier temperatura, pero su desarrollo es más
óptimo a una temperatura de 25 °C (77 °F), sus dimensiones son de 0.5-0.9 x
1.2-3.0 µm, y cuenta con flagelos.

La capacidad de Agrobacterium para transferir genes a las plantas se ha

explotado en ingeniería genética para la creación de plantas transgénicas.
Pueden utilizarse plásmidos Ti o Ri modificados. El plásmido se desarma
eliminando los genes que inducen el tumor. Las únicas partes esenciales del
ADN-T son dos pequeñas repeticiones (25 pares de bases) en los extremos, por
lo menos una de las cuales es necesaria para la transformación de la planta.
Marc Van Montagu y Jozef Schell en la universidad de Gante (Bélgica)
descubrieron el mecanismo de transferencia de genes entre Agrobacterium y las
plantas, que permiten el uso de esta bacteria en ingeniería genética. Un equipo
de investigadores dirigido por Maria-Dell Chilton demostró que podían eliminarse
los genes de virulencia sin afectar a la capacidad de la bacteria para insertar su
propio ADN en el genoma de la planta (1983)
Historia:
Rhizobium – LEGUMINOSA
En 1888 por Hellriegel y Wilfarth, El rhizobium ha sido conocido como la fuente
principal de la fijación del nitrógeno en los nódulos de raíz de las leguminosas.
La simbiosis Rhizobium – Leguminosa ha sido objeto de detallados estudios
estructurales, fisiológicos y genéticos desde su descubrimiento, debido a la
importancia agrícola de muchos de los cultivos de leguminosas, y al aporte
nitrogenado derivado de la fijación biológica de nitrógeno.
La familia de las leguminosas es una de las más extensas y diversificadas. Son
Angiospermas del orden Rosales y se dividen en tres subfamilias:
Mimosoideas, Caesalpinoideas y Papilonoideas. Una característica importante
es su capacidad de establecer simbiosis con bacterias del grupo Rhizobium.

Las bacterias del grupo Rhizobium son bacilos Gram negativos,

proteobacterias del grupo _, son aeróbicas y en muchos casos aeróbicas
estrictas. Son mótiles por medio de flagelos peritricos, y su hábitat natural es el
suelo. Se reconocen cinco géneros: Rhizobium y Sinorhizobium (ambas de
crecimiento rápido), Bradyrhizobium (de crecimiento lento), Mesorhizobium y
Azorhizobium.
Las bacterias del grupo Rhizobium, además de poder desarrollarse como
organismos de vida libre en el suelo, son capaces de formar asociaciones
fijadoras de nitrógeno con plantas de la familia de las leguminosas. Esta
asociación, que conecta la capacidad fotosintética de la planta con la
capacidad de las bacterias de reducir el nitrógeno atmosférico, es el resultado
de un complejo proceso de desarrollo que requiere la expresión coordinada en
el espacio y en el tiempo de un gran número de genes, tanto de la planta como
de la bacteria. La simbiosis es altamente específica, y su establecimiento
comienza por un intercambio de señales químicas entre ambas partes (Downie,
1994) que permite el reconocimiento e invasión de la leguminosa hospedadora
apropiada por el rizobio, seguido por la proliferación y diferenciación de una
estructura altamente especializada denominada “nódulo”.
Rhizobium en la Rizosfera
La rizosfera es la zona del suelo que está modificada por la presencia y
actividad de las raíces de las plantas. En ella se establece un microclima cuyas
condiciones están alteradas por la presencia de estas raíces. Así, por ejemplo,
se produce un cambio en la composición química del suelo debido a exudados
radiculares, tales como aminoácidos, ácidos orgánicos, azúcares, factores de
crecimiento, nucleótidos, flavonoides y enzimas, que pueden suponer hasta un
20 % del fotosintato de la planta, siendo la exudación mayor en los ápices
radiculares.
La rizosfera es fundamentalmente heterogénea, existiendo zonas más o menos
ricas en determinados compuestos y está condicionada por diversos factores
como son el tipo de planta, edad de la raíz y tipo de suelo. Es precisamente en
la rizosfera donde tiene lugar el inicio de la interacción Rhizobium –
Leguminosa que dará lugar a la formación de nódulos radiculares.
 AGROBACTERIUM
INTRODUCCION:
Es un género de bacterias que causan tumores en las plantas. Esta capacidad tumorigénica
viene dada por su capacidad natural para transferir ADN a las células vegetales, hecho que
los científicos rápidamente aprovecharon para convertirla en una herramienta para la
creación de plantas transgénicas mediante ingeniería genética.

HISTORIA:
La historia de cómo una bacteria del suelo ubicua, Agrobacterium, pasó de ser
simplemente otro patógeno de plantas a un nombre familiar en ingeniería
genética de plantas y genética molecular de plantas sirve como un estudio de
caso de cómo la investigación básica puede conducir a consecuencias
totalmente imprevistas. En esta narración, resumiré algunos de los documentos
y observaciones más importantes que proporcionaron nuevos conocimientos
sobre las interacciones huésped-parásito y contribuyeron a que este
microorganismo revolucionara la agricultura. Debido a limitaciones de espacio,
muchos documentos importantes y contribuciones significativas no serán
cubiertos, y me disculpo de antemano por estas omisiones. Baste decir que
muchos grupos pequeños de científicos ampliamente dispersos que trabajan en
una variedad de disciplinas fueron los responsables de este notable cuento que
continúa desarrollándose.
La historia comienza casi exactamente hace 100 años cuando dos patólogos
de plantas del USDA, Erwin Smith y Charles Townsend publicaron un artículo
en Science (1907) que informaba que una bacteria que llamaron Bacterium
tumefaciens causó tumores de plantas o agallas en una variedad de plantas.
Este informe fue solo unos 20 años después del primer descubrimiento de
bacterias patógenas de plantas. Los siguientes grandes descubrimientos sobre
Agrobacterium y la agalla de la corona, que comenzaron en la década de 1940,
fueron realizados en el Rockefeller Instituto por Armin Braun, cuyos intereses
en el sistema fueron provocados inicialmente por una observación
sorprendente de un estudiante que estudiaba la hiel de la corona en Alemania.
El estudiante encontró muy difícil aislar Agrobacterium del tejido tumoral. Sobre
esta base, Braun razonó que las bacterias viables podrían no ser necesarias
para el crecimiento tumoral, un pensamiento bastante herético en ese
momento. Sin embargo, como becario de postdoctorado en el laboratorio de LO
Kunkel en el Instituto Rockefeller, Braun demostró que este es el caso. Estudió
"tumores secundarios", que se desarrollan a cierta distancia del sitio de
inoculación de Agrobacterium. ¡Braun demostró que son libres de bacterias! A
partir de estos y estudios posteriores, Braun desarrolló el concepto que ha
guiado tantas investigaciones posteriores sobre Agrobacteriumes decir, un
"principio inductor de tumores" o TIP es responsable del desarrollo del tumor.
Usando experimentos de cambio de temperatura, demostró que el TIP debe ser
elaborado durante las primeras 10 horas después de la inoculación de la
planta. Calentar las plantas inoculadas a 32 ° C antes de este tiempo, una
temperatura que no mata ni a las bacterias ni a la planta, previene la formación
de tumores. Después de 10 horas, el calentamiento no afectó la formación de
tumores. Braun también descubrió que Agrobacterium transforma las células de
las plantas permanentemente en que las células tumorales pueden crecer in
vitroindefinidamente en un medio que no admite el crecimiento de tejido vegetal
normal. En una declaración notablemente profética hecha en 1947, Braun
sugirió que el ADN era un posible candidato para TIP, una sugerencia
razonable probablemente hecha en parte porque sus colegas en el Instituto
Rockefeller habían demostrado recientemente que el ADN podría transformar
genéticamente la bacteria del neumococo.

AGROBACTERIUM EN BIOTECNOLOGIA

La capacidad de Agrobacterium para transferir genes a las plantas se ha

explotado en ingeniería genética para la creación de plantas trangénicas.
Pueden utilizarse plásmidos Ti o Ri modificados. El plásmido se desarma
eliminando los genes que inducen el tumor. Las únicas partes esenciales del
ADN-T son dos pequeñas repeticiones (25 pares de bases) en los extremos, por
lo menos una de las cuales es necesaria para la transformación de la planta.
Marc Van Montagu y Jozef Schell en la universidad de Gante (Bélgica)
descubrieron el mecanismo de transferencia de genes entre Agrobacterium y las
plantas, que permiten el uso de esta bacteria en ingeniería genética. Un equipo
de investigadores dirigido por Maria-Dell Chilton demostró que podían eliminarse
los genes de virulencia sin afectar a la capacidad de la bacteria para insertar su
propio ADN en el genoma de la planta (1983
¿Cómo puede ayudar esa bacteria a la ciencia?
Como sabéis, gracias a la ingeniería genética se pueden introducir en las plantas
nuevas características beneficiosas, como resistencia a enfermedades,
crecimiento más rápido, frutos más grandes o más sanos y muchas cosas más.
Esto se consigue introduciendo en su genoma, algún fragmento genético de
interés, procedente de otras especies. Sin embargo, es complicado conseguir un
método eficiente para introducir este ADN. Por eso, el descubrimiento del
mecanismo de infección de Agrobacterium supuso un antes y un después en la
mejora vegetal, ya que se puede modificar su plásmido e introducir en él los
genes de interés, dejando a continuación que infecte las células como suele
hacerlo. Así, por ejemplo, se han conseguido plantas capaces de producir por sí
mismas la toxina Bt, un potente insecticida del que ya os hablamos en otro
artículo y que se suele administrar rociándolo sobre las plantas. Por lo tanto,
Agrobacterium tumefaciens es la jeringuilla que los científicos necesitaban para
inyectar ADN foráneo en las células de las plantas. Estas bacterias,
originalmente, no quieren ser simbióticas, pero finalmente han acabado siendo
muy beneficiosas para nosotros y para las propias plantas.
conclusión :
La simbiosis entre la bacteria Rhizobium y las leguminosas tiene una gran
importancia tanto en la agricultura, como en el medio ambiente. En cuanto a la
agricultura, se dice que se ve beneficiada ya que causa un aumento
significativo de nitrógeno combinado en suelos desnudo y que carecen de este.
Además las leguminosas, parte esencial de la agricultura, se ven favorecidas al
poder crecer en zonas donde otras plantas no podrían. Por otro lado, ya que el
nitrógeno es uno de los nutrientes esenciales limitados para el crecimiento de
las plantas, esta simbiosis aumenta el nivel de fijación del nitrógeno
atmosférico, aumentando así la producción agrícola. También beneficiaria a la
agricultura económicamente, pues debido a que muchas industrias agrícolas
dependen de la cosecha de leguminosas, el hecho de que estas puedan crecer
sin abonos nitrogenados (pues la bacteria los remplazaría) hace que sea
posible el ahorrarse millones en abonos. En cuanto a la parte ambiental, los
fertilizantes son uno de los principales causantes del deterioro ambiental, pues
causan la eutrofización de masas de aguas, la erosión de suelos y generación
de lluvias ácidas. Estas bacterias fijadoras de nitrógeno pueden ser utilizadas
en remplazo de los fertilizantes nitrogenados para incrementar el crecimiento
de las leguminosas, acabando con los problemas ambientales que se han
venido causando.
BIBLIOGRAFIA:
McCullen, CA y Binns, AN 2006. Agrobacterium tumefaciens y las interacciones
entre las células vegetales y las actividades requeridas para la transferencia
macromolecular interkingdom. Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 22: 101-27.
Nester, E., MP Gordon, A. Kerr. eds . 2005. Agrobacterium tumefaciens: de la
fitopatología a la biotecnología. Sociedad Americana de Fitopatología , St. Paul,
MN
Tzfira, T. y V. Citovsky. eds. 2008. Agrobacterium: de la biología a la
biotecnología. Springer Science, NY
Tzfira T. 2006. En pistas y locomotoras: la larga ruta del ADN al núcleo.
Tendencias Microbiol. 14: 61-63.