UNIVERSIDAD NACIONAL “SAN LUIS GONZAGA”

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL Y
SANITARIA
LABORATORIO DE MONITOREO Y EVALUACION DE LA CONTAMINACION
AMBIENTAL
DOCENTE: Ing. MISAEL AQUILES BENDEZU BENDEZU
PRACTICA Nº03

ESPECTOFOTOMETRÍA
Fosfatos, nitratos y nitritos
I. OBJETIVOS
El alumno aprenderá a utilizar un colorímetro y determinar parámetros
fisicoquímicos por el método de espectrofotometría.
II. MARCO TEORICO
Para la cuantificación de sustancias que puedan absorber la luz que las atraviesa, las
técnicas espectrofotométricas son confiables y de fácil manejo además no solo sirven
para calcular la cantidad de soluto presente en una disolución, sino también se pueden
utilizar para identificar sustancias de manera cualitativa.
Cuando se realiza un proyecto de investigación, se pueden requerir el desarrollo de
un método espectrofotómetro para cuantificar algún soluto o quizás el producto de
alguna reacción, que tenga la cualidad de absorber la luz.
Para conseguir esto se necesita:
a) Conocer la longitud de máxima absorbancia del compuesto, que se obtiene
haciendo un barrido en la región del espectro de absorción de interés.
b) La preparación de una curva de calibración con disoluciones de concentración
conocida. Conocer la curva permite verificar si la ley de Lambert y Beer se
cumple en el intervalo de trabajo.
c) Conocer si hay interferencias entre los reactivos, si las reacciones involucradas
son estables en las condiciones de trabajo y si hay responsabilidad en los
resultados experimentales.
Tome en cuenta que la absorción de la energía radiante en las regiones espectrales
del visible y del ultravioleta, depende principalmente de número de arreglos de los
electrones de las moléculas o iones absorbentes. En sustancias inorgánicas se
presenta una absorción selectiva, cuando un nivel energético electrónico incompleto
se halla cubierto o superpuesto por un nivel de energía completo, normalmente
formado por valencias de coordinación con otros átomos. En las moléculas orgánicas
la absorción selectiva en la región del visible y en las accesibles del ultravioleta lejano.
Las dobles ligaduras conjugadas producen absorción con mayores longitudes de onda.
Si las moléculas son muy grandes, la absorción entrara en la región del visible y
presentara color, tal como sucede con las moléculas del β caroteno,
Espectrofotómetro
El espectrofotómetro es un instrumento con el que se apoya la espectrofotometría para medir la
cantidad de intensidad de luz absorbida después de pasar a través de una solución muestra.
Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para medir, en
función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica
relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que se miden en
una muestra. También se utiliza en laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y
microorganismos.

Hay varios tipos de espectrofotómetros, que son de absorción atómica, de absorción molecular
(que comúnmente se conoce como espectrofotómetro UV-VIS), y no debe ser confundido con un
espectrómetro de masa.

Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una
muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador
realizar dos funciones:

1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra,

2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la
muestra.

2.1. COMPUESTOS ANALIZADOS:

 Nitratos (NO3)- es un compuesto inorgánico compuesto por un átomo de nitrógeno
(N) y tres átomos de oxígeno (O); el símbolo químico del nitrato es NO3. El nitrato
no es normalmente peligroso para la salud a menos que sea reducido a nitrito (NO2).
Nitratos en el agua potable: efectos sobre la salud
El nitrato es uno de los más frecuentes contaminantes de aguas subterráneas en áreas
rurales. Debe ser controlado en el agua potable principalmente porque niveles
excesivos puede causar diversas enfermedades. El origen de los nitratos en aguas
subterráneas es principalmente de fertilizantes, sistemas sépticos y almacenamiento
de estiércol o operaciones de extensión. Los fertilizantes nitrogenados no absorbidos
por las plantas, volatilizados, o arrastrados por la escorrentía superficial acaban en
las aguas subterráneas en forma de nitratos. Esto hace que el nitrógeno no esté
disponible para las plantas, y puede también elevar la concentración en aguas
subterráneas por encima de los niveles admisibles de calidad del agua potable.
El LMP para el nitrato es 50 mg/L
 Nitritos (NO2)- El nitrito es el radical univalente NO2 o un compuesto que lo
contenga, tal como una sal o un éster de ácido nitroso.
Efectos sobre la salud
Cuando el nitrito entra en el flujo sanguíneo, reacciona con la hemoglobina y
forma un compuesto llamado metahemoglobina. Este compuesto reduce la
capacidad de la sangre para transportar oxígeno.
El LMP para el nitrito en mg/L es 3,00 en Exposición corta 0,20 en Exposición
larga.
  Fosfatos (PO4-P)- Los fosfatos son la forma más habitual de encontrar el
fósforo en agua. Los podemos encontrar en solución, en forma de partículas o
detritus, o incluso en los organismos acuáticos.
El origen de dicha presencia puede ser muy variado, se añaden en algunos
tratamientos de aguas, o como caso más habitual es en forma de aditivo a
detergentes para el lavado de la ropa o limpieza en general.
Los compuestos del fósforo son nutrientes de las plantas y conducen al
crecimiento de algas en las aguas superficiales. Dependiendo de la concentración
de fosfato existente en el agua, puede producirse la eutrofización. Tan sólo 1
gramo de fosfato-fósforo (PO4-P) provoca el crecimiento de hasta 100 g de algas.
Cuando estas algas mueren, los procesos de descomposición dan como resultado
una demanda de oxígeno de alrededor de 150 gramos. Las concentraciones
críticas para una eutrofización incipiente se encuentran entre 0,1-0,2 mg/l PO4-P
en el agua corriente y entre 0,005-0,01 mg/l PO4-P en aguas tranquilas.
Efectos sobre la salud
Demasiado fosfato puede causar problemas de salud, por ejemplo, afecciones en los
riñones y la osteoporosis.

III. MATERIALES Y METODOS

3.1. MATERIALES
 Vasos precipitados

 Colorimetros

3.2. EQUIPOS
 Espectrofotometro DR 900
IV. MUESTRAS
 Muestras de agua potable de diferentes lugares: Ica, Subtanjalla y el Carmen.

 Kits para la coloración de nitratos, nitritos y fosfatos.

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Prepara la solución de muestra de sulfatos o nitratos, colocar las muestras en los viales o
celdas, luego adicionarlos de acuerdo a la sustancia que deseamos identificar y analizar.
 Luego si es el espectrómetro DR 900 el equipo que vamos a utilizar, se selecciona la sustancia
que se quiere analizar en la pantalla del equipo, después se calibra con agua destilada
poniendo en la zona espectral, finalmente se coloca la muestra problema y se realiza las
mediciones de absorbancia, transmitancia y concentración (ppm).
VI. RESULTADOS

PARÁMETRO MUESTRA DE MUESTRA DE MUESTRA DE EL

LABORATORIO SUBTANJALLA CARMEN

FOSFATO (mg/l) 4.9 4.6 11

NITRATO (mg/l) 0.6 2.7 2.3
NITRITO (mg/l) 1 0 14

VII. CUESTIONARIO

Defina la espectroscopia, aplicación en la ingeniería ambiental y sanitaria.

Es una técnica instrumental ampliamente utilizada por los físicos y químicos para poder
determinar la composición cualitativa y cuantitativa de una muestra, mediante la utilización de
patrones o espectros conocidos de otras muestras. El análisis espectral permite detectar la
absorción o emisión de radiación electromagnética de ciertas energías, y relacionar estas energías
con los niveles de energía implicados en una transición cuántica.

La espectroscopia es el estudio del espectro luminoso de los cuerpos, son aplicaciones en

química, física y astronomía.
Detectan las transmisiones electrónicas de los sistemas conjugados y proporciona
información sobre el tamaño.
APLICACIÓN:
En la ingeniería ambiental y sanitaria la espectroscopia se utiliza para analizar muestras
ya sea liquida solida o gaseosa de un determinado medio contaminado el tipo de
espectrocopia es la infrarroja.

Defina la absorbancia y transmitancia, importancia.

LA ABSORBANCIA
En espectrofotometría, la absorbancia es definida como: la intensidad de la luz con una
longitud de onda específica y que es pasada por una muestra es la intensidad de la luz
antes de que entre a la muestra El término es frecuentemente intercambiable con densidad
óptica, si bien este último se refiere a la absorbancia por unidad de longitud. Las medidas
de absorbancia son frecuentemente usadas en química analítica, ya que la absorbancia es
proporcional al grosor de una muestra y la concentración de la sustancia en ésta, en
contraste a la transmitancia I / I0, la cual varía exponencialmente con el grosor y la
concentración.
TRANSMITANCIA
La transmitancia óptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo, en una
determinada longitud de onda. Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslúcido,
una parte de esa luz es absorbida por el mismo, y otra fracción de ese haz de luz atravesará
 el cuerpo, según su transmitancia. El valor de la transmitancia óptica de un objeto se
puede determinar según la siguiente expresión:

Influencia de la temperatura en la medición de la absorbancia y la transmitancia.

La temperatura puede influir modificando el equilibrio químico de algunos sistemas, la
temperatura n suele ser un factor a considerar en mayor parte de los sistemas absorbentes
sencillos.