Organización del genoma

Origen del núcleo.

Se formo por invaginación de la membrana plasmática y de los orgánulos membranosos del sistema de endomembranas. Las
mitocondrias y los cloroplastos se originaron por endosimbiosis seriada.
La endosimbiosis seriada plantea que el núcleo es la primera adquisición en una serie de eventos sucesivos. La fusión de dos
bacterias (posiblemente una arqueofermentadora y una espiroqueta) dio origen al primer eucarionte unicelular y ancestro único
de todos los pluricelulares. En esta primera célula nucleada el ADN quedo confinado en un espacio separado por una membrana
del resto de la célula.
 Célula en interfase: Periodo entre dos divisiones celulares caracterizado por una intensa actividad metabólica. Aquí la
célula transcribe la información genética (síntesis de ARN) duplicando su ADN. Núcleo visible por microscopio
electrónico y por medio de hematoxilina.
Estructura del núcleo
 Envoltura nuclear:
Doble membrana que encierra el genoma nuclear en las células eucariotas. Contiene un gran número de proteínas propias,
quienes participan en la organización de la cromatina (ADN+proteínas) y la regulación de la expresión genética. Hace posible la
expresión de los genes, al confinarlos y protegerlos de las enzimas.
La membrana nuclear se desensambla al principio de la división celular y se reorganiza al final del proceso, lo cual posibilita la
interacción entre el huso mitótico y la cromatina.
Esta envoltura está formada por dos membranas concéntricas interrumpidas por estructuras proteicas llamadas complejo de
poro nuclear (CPN) y por la lámina nuclear, estructura proteica unida a la membrana interna de la envoltura nuclear. La
membrana externa, en contacto con el citoplasma, tiene ribosomas adheridos, que sintetizan las proteínas que se vuelcan al
espacio perinuclear. El espacio perinuclear se continúa con el lumen del retículo endoplasmatico.
Tanto la membrana externa como la interna presentan proteínas específicas que no se encuentran en los demás componentes
del sistema de endomembranas. Pueden estar agrupadas según su localización en:
-proteínas del poro nuclear: forman el 70% de los poros nucleares.
-proteínas integrales de la membrana externa: por ejemplo la nesprina, que permite la interacción del núcleo con los filamentos
de actina, manteniendo la posición del núcleo dentro de la célula.
-proteínas integrales de la membrana interna: anclan la lámina nuclear a la membrana interna.
-proteínas de la lámina nuclear: constituyen la lámina nuclear.
La envoltura nuclear cumple un papel fundamental en la protección de los componentes del genoma frente a los componentes
del citoplasma, mediando el tráfico y la circulación de proteínas y ARN entre el núcleo y el citosol, y además es una membrana
especializada que proporciona sitios de anclaje para la cromatina y para el citoesqueleto

 Lamina nuclear:
Soporta las estructuras del núcleo. Es una estructura densa y delgada de fibras que recubre la superficie interna de la envoltura
nuclear, proporcionando resistencia mecánica al núcleo. Se construye a partir de filamentos llamados laminas de tipo A y de tipo
B, que están codificados por distintos genes; las laminas A y C (A) contactan con la cromatina; la lamina B interacciona con la
membrana interna nuclear. La fosforilacion de las laminas provoca el desensamble de la lamina nuclear y la desintegración de la
EN al inicio de la división celular, cambio que permite el encuentro de los cromosomas con los microtubulos.
 Complejo de poros nucleares (CPN)
Posee canales especializados llamados CPN , cada poro es un pequeño canal cilíndrico que conecta el citosol y el nucleoplasma.
El número de CPN depende del tipo de célula y de su actividad. A mayor actividad, mayor cantidad. En cada poro, las
membranas interior y exterior de la envoltura nuclear se fusionan, formando un canal recubierto con una estructura de
proteínas llamadas nucleoporinas.
El CPN tiene simetría octogenal; dos anillos paralelos formados por ocho subunidades describen el borde de la rueda. Ocho
radios se extienden desde los anillos al centro de la rueda, demarcando un canal central que se denomina transportador, que se
llama así por participar en el movimiento de macromoléculas a través del CPN. Esto termina formando una casta.

 Transporte a través del complejo del poro nuclear

Por los poros difunden iones y moléculas pequeñas. La tasa de entrada en el núcleo es inversamente proporcional a la medida
de la molécula a transportar. Las moléculas más grandes no ingresan pasivamente. Las moléculas más chicas se mueven
libremente por los canales acuosos que rodean al canal central. Los canales acuosos son permeables a los iones y moléculas
pequeñas como los ribo y desoxiribonucleotidos.
El transporte activo a través de los poros nucleares requiere gasto de energía y es selectivo, por lo que requiere de la
participación de tres tipos de proteínas.
 Las carioferinas, son los receptores para las moléculas a transportar. Pueden ser importinas o exportinas, que
dependen de la dirección de la carga. La diferencia en esa dirección depende de la interacción de estas con Ran. Las
importinas funcionan como transbordadores de proteínas citoplasmáticas hacia el núcleo, libera su carga y vuelve al
citoplasma.
 La GTPasa Ran, es una pequeña proteína G (actúan como interruptores biológicos en la transducción de señales), que
pueden unirse a GTP o GDP. Estas determinaran la dirección del transporte.
  Proteínas regulatorias
Las proteínas sintetizadas en el citoplasma que cumplen función en el núcleo, deben poseer su “pasaporte”, partícula de
localización nuclear (NCL).
El ARN para salir necesita una proteína especial, señal nuclear de exportación (NES), requiere también de riboneoproteinas
(RNP).
3-Organización interna del núcleo
La envoltura nuclear encierra la matriz nuclear, la cromatina y el nucléolo.
 Matriz nuclear
Red fibrosa insoluble que ayuda a mantener la forma del nucleo, proporcionando un esqueleto sobre el que se organizan las
fibras de cromatina. Si se elimina la cromatina, este permanece estable.
 Cromosomas y cromatina
En una célula en interfase, la cromatina es un conjunto de ADN y proteínas.
La mayor parte de las proteínas asociadas al ADN son las histonas. Tambien se encuentran las proteínas no histonicas cuya unión
al ADN suele ser pasajera y su funcion es regular la transcripción, la replicación y la reparación del ADN.
Las histonas participan de la condensación de la cromatina y por lo tanto también influyen en la expresión del ADN.
Un cromosoma esta compuesto por una molecula de ADN junto a sus proteínas asociadas. El conjunto de todos los cromosomas
interfasicos constituyen la cromatina. La interfase consta de tres periodos: G1, S y G2. La cantidad de ADN presente en el nucleo
se duplica en el periodo S de la interfase. En un nucleo interfasico de una célula humana podemos contar 46 cromosomas, cada
uno de ellos contiene en el periodo G1 (antes de la replicación), una única molecula de ADN, y después del periodo S (de síntesis
de ADN), dos moléculas de ADN idénticas (las cromatides hermanas).
Durante la interfase, las fibras de cromatina de una célula tienden a estar extendidas y dispersas por todo el nucleo. La
cromatina de cada cromosoma tiene una ubicación propia y discreta en territorios cromosómicos. Las regiones no ocupadas por
cromosomas se denominan canales o dominios cromosómicos. En los canales se ubican canales de transcripción, de maduración
del ARN, de replicación y reparación del ADN, e incluso la cola poli A.
La membrana interna de la EN ayuda a organizar la cromatina en los sitios que están estrechamente asociados con los poros
nucleares.
Existen dos tipos de cromatinas:
 Heterocromatina o cromatina condensada, ubicada en la periferia del nucleo. Hay dos tipos, heterocromatica
constitutiva, su ADN consta de secuencias de ADN repetivas que no presentan genes (es decir, son secuencias que se
repiten en tándem y no se transcriben). Y la heterocromatina facultativa, que depende de las actividades llevadas a
cabo por cada célula. Representa a las regiones cromosómicas que se han inactivado o silenciado en un tipo especifico
de célula.
 Eucromatina o cromatina laxa, de localización central. Esta, por estar menos condensada presenta los genes activos. La
expresión de los genes depende del estado de condensación de los genes, a menos condensación, mayor expresión.
Las regiones del ADN que se encuentran como heterocromatina tienden a estar metiladas en zonas del ADN ricas en CG (citosina
y guanina). En contra posición, la Eucromatina presenta un menos porcentaje de ADN metilado y tiene sus histonas acetiladas.
Esto se debe a que los acetilos bloquean las cargas positivas de las histonas debilitando las uniones ionicas entre el ADN y las
histonas. En consecuencia, el ADN se separa de estas proteínas lo cual permite un mejor acceso a los genes para su
transcripción. Por eso se suele decir que la Eucromatina acetilada es trascripcionalmente activa.

-Niveles de condensación de la cromatina

La condensación de la cromatina permite recluir al ADN dentro del nucleo. La cromatina humana esta subdividida en 46
segmentos lineales de ADN que correspondes a los distintos cromosomas. Las histonas participan en la participación de la
cromatina.
Las histonas son proteínas básicas, cargadas prositivamente, y por esta razón se unen estrechamente a través de uniones
ionicas a las cargas negativas de los fosfatos presentes en el ADN.
En el cromosoma se pueden distinguir los nucleosomas, que son las unidades de enrollamiento de la cromatina.
Los nucleosomas están formados por un centro de histonas. Dicho centro posee dos copias de cada una de las siguientes
histonas, H2A, H2B, H3 y H4.
La unión de las histonas al ADN no depende de una secuencia particular de nucleótidos, sino de la secuencia de aminoácidos de
la histona.
Alrededor de 60 pares de bases de ADN unen un nucleosoma con el próximo. Cada región de unión es el ADN espaciador o
linker. Esta estructura es el primer grado de compactación de la cromatina.
Una quinta histona, la H1, también llamada histona ligadora, promueve la condensación de la cromatina por lo que permite
compactar este sistema de nucelosomas y llegar al siguiente nivel de organización de la cromatina.
El nivel de organización en lazos o bucles se estabiliza debido a la unión con proteínas no histonicas que conforman la matriz
nuclear. Cada bucle de cromatina representa un dominio funcional o unión de replicación.
 Durante la división celular, los cromosomas se condensan y de ese modo son distribuidos en las células hijas. Los lazos de fibras
de cromatina comienzan a plegarse sobre si mismos y llegan a su mayor grado de condensación en la metafasse de la división
celular.
La matriz nuclear se encuentra mas plegada en las zonas heterocromaticas.
 El nucléolo
En el tienen lugar la síntesis y procesamiento de ARNr y el ensamblado de las subunidades ribosómicas. Tiene un importante
papel en la regulación del ciclo celular.
El nucleo humano típico tiene un solo gran nucléolo, formado por bucles de cromatina derivada de de 10 cromosomas
separados, los pares 13, 14, 15, 21 y 22. Todos estos cromosomas presentan constricciones secundarias denominadas
organizadores nucleolares (NOR), formados por secuencias que codifican ARNr.
El nucléolo es una estructura simple carente de componente membranoso, en la que se diferencia un centro fibrilar formado
por el ADN de los organizadores nucleolares rodeado por un componente fibrilar denso (ADN + ARNr naciente que se esta
transcribiendo en la ARNpol l); y un componente granular periférico. Los granulos son moléculas de ARNr que se unen con las
proteínas y forman subunidades ribosómicas.
El tamaño del nucléolo se correlaciona con su nivel de actividad.
A medida que la célula se aproxima a la división, se produce la condensación de la cromatina en cromosomas compactados,
junto con la desaparición de la EN y los nucléolos.
Cuando finaliza la división celular, la cromatina se desenrrolla, los bucles de NORs se observan nuevamente, y se reanuda la
síntesis de ARNr. Cuando esto ocurre 10 nucleolos pequeños se hacen visibles. A medida que estos nucléolos se agrandan, se
funden en un único nucléolo grande.
El ADN de los NOR lleva multiples copias de ARNr. Estos genes multiples de ARNr son un ejemplo de ADN repetitivo presente en
todos los genomas.
El numero de copias de los genes de los ARNr varia en gran medida de una especie a otra. Las copias multiples se agrupan en
una o mas NORs, que pueden residir en mas de un cromosoma. En cada NOR, las copias de genes multiples están dispuestas en
tándem. Un nucléolo único puede contener ARNr de genes derivados de mas de una NOR.
4- El cromosoma eucariota
Consisten en moléculas lineales de ADN.
Antes de comenzar la división celular, cada cromosoma eucariota esta constituido por una molecula de ADN. La célula duplica
su ADN durante la etapa S, al final de esta etapa, el cromosoma estará formado por dos moléculas de ADN o dos cromatides
hermanas. Estas permaneces unidas hasta la anafase, momento en el que migran a cada uno de los polos. Los cromosomas
metafasicos están siempre duplicadas.
Al inicio de la división celular, los cromosomas duplicados se condensan y están unidos por medio de sus centrómeros. Mientras
permanecen unidos, cada molecula de ADN que conforma este cromosoma duplicado se denomina cromatide hermana. Al
finalizar la división celular las cromatides hermanas se separaran y pasar a constituir un cromosoma independiente en las células
hijas. Por lo tanto, luego de la duplicación del ADN y antes de la separación de las cromatides hermanas, una célula humana
presentara transitoriamente 46 cromosomas duplicados, lo que equivale a 92 moleculas de ADN o 92 cromatides. Luego de
finalizar la división celular, cada célula hija, en etapa G1, presentara 46 cromosomas simples, lo que equivale a 46 moleculas de
ADN o 46 cromatides.
Los cromosomas presentan regiones codificantes, denominadas genes, cuyo ADN lleva una secuencia característica de
nucleótidos con información para la síntesis de proteínas y ARN. Sin embargo, la mayor parte del ADN del cromosoma
corresponde a zonas denominadas no codificantes. Una parte de este ADN no codificante corresponde a secuencias de
nucleótidos llamadas ADN repetitivo.
En un cromosoma eucariota típico se identifican:
 Dos telomeros: Secuencia repetitiva de ADN ubicadas en los dos extremos del cromosoma. Conforman la
heterocromatina constitutiva.
 Un centrómero: Presenta secuencias de ADN altamente repetotivas, sin genes ni información genética. Forma parte de
la heterocromatina costitutiva.
 Multiples orígenes de replicación (ORI): Seceuncias de ADN que correspondes a las regiones donde se iniciara la
replicación del mismo durante la etapa S de la interfase.
 Un conjunto lineal de genes, que codifican ARN y proteínas, interrumpidos por muchas secuencias intergenicas de ADN
no codificante.
La funcion de los telomeros esta relacionada con la integridad estructural del cromosoma, formando el tapon telomerico que
sella los extremos de los cromosomas protegiéndolos. Son necesarios para la duplicación completa del cromosoma y evitan que
los extremos de los cromosomas se fusionen entre si. Contienen la secuencia de nucleótidos 5-TTAGGG-3, la cual no presenta
información genética.
El mecanismo de duplicación de ADN lleva consigo un acortamiento de los telomeros. Para compensar el acortamiento, los
telomeros son sintetizados por una enzima, la telomerasa. Si la telomerasa esta inactiva, cada vez que la célula se divide, los
telomeros se acortan. Con el tiempo, los telomeros se vuelven tan cortos que la célula ya no puede dividirse. A este fenómeno
se lo denomina senescencia celular (envejecimiento). Es decir, las células solo pueden dividirse un numero determiunado de
veces antes de morir.
Las células madres y las células tumorales al mantener la enzima telomerasa activa pueden dividirse un numero ilimitado de
veces.
 El centrómero es la región de un cromosoma que lo separa en un brazo corto (p) y un brazo largo (q). el centrómero
corresponde a secuencias de ADN con funcion estructural.
Unido al centrómero se encuentra una placa proteica llamada cinetocoro que al unirse a las fibras de huso mitonico, permite la
separación y tracción de las cromatides hermanas hacia las células hijas.
La ubicación del centrómero en los distintos cromosomas determina el modo en el que se clasifican.
 Metacentrico: El centrómero se ubica en posición central y los brazos del cromosoma tendrán igual longitud.
 Submetacentricos: Un par de brazos es mas corto que el otro.
 Acrocentrico: El centrómero se encuentra desplazado hacia uno de los extremos, por lo tanto, uno de los brazos es
sumamente corto. Estos poseen una masa de cromátina llamada satélite, en el extremo del brazo corto. El satélite se
halla aislado del resto del cromosoma por la constriccion secundaria.

--Cariotipo humano
Es el conjunto de cromosomas de una célula. En la metafase mitonica alcanzan el mayor grado de condensación por lo cual los
cromosomas se ven duplicados, ya que cada uno aun conserva las dos clomatides hermanas.

--Conceptos de diploidia y haploidia

El cariotipo humano consta de 23 pares de cromosomas homologos. Cada par de homologos posee un representante
proveniente de la mujer o del varon. Los cromosomas homologos llevan genes que codifican los mismos caracteres, pero portan
versiones distintas de estos genes. Cada versión posible de un gen se denomina alelo.
La células que presentan cromosomas homologos se denominan homologos y se simbolizan “2n”. tal es el caso de las células
humanas a excepción de las gametas, que solo poseen un cromosoma de cada par y se denominan haploides, y se simbolizan
“n”.
Los 23 pares de cromosomas homologos presentes en cualquiera de las células somaticas humanas se clasifican en dos tipos:
 Cromosomas somáticos o autosomas: son los cromosomas de los pares 1 al 22. Codifican rasgos somáticos (corporales).
 Cromosomas sexuales, gonosomas o alosomas: son los cromosomas del par 23, que determinan las diferencias entre
los sexos. Puede estar constituido por dos cromosomas X (XX) o bien por un cromosoma X y otro Y (XY).
Las gametas llevan solamente 23 cromosomas. La meiosis posibilita la separación de los cromosomas homologos, de
manera que cada gameta resiciva un cromosoma de cada par. Esta separación afecta tanto a los cromosomas somáticos
como a los sexuales.
El cromosoma sexual presente en las gametas femeninas u ovulos es siempre un cromosoma X. En las gametas masculinas,
el cromosoma sexual puede ser el X o el Y. La mitad de los espermatozoides que produce un varon lleva el cromosoma X, y
la otra mitad el Y.
--Determinacion cromosómica del sexo
En los mamíferos, el sexo cromosómico queda determinado en el momento de la fecundación, de acuerdo a los
cromosomas que le da la cigota.
--Mecanismo de la inactivación del cromosoma X y corpúsculo de Barr
La compensación de dosis génica se lleva a cabo por diferentes mecanismos. El macho es heterogametico (XY) y las hembras
son homogameticas (XX). Por compensación de la dosis, uno de los dos cromosomas X es desactivado al azar y se trata de
un ejemplo de heterocromatina facultativa.
El cromosoma X heterocromatico se denomina Corpusculo de Barr (masa de cromatina muy teñida que aparece en la
periferia de los nucleos de las células somaticas femeninas durante la interfase. Representa al cromosoma X inactio y
condensado).
La inactivación del cromosoma X es un evento que sucede en el desarrollo embrionario. Luego de que sea inactivado, todas
las células hijas de esa célula en particular, continúan con el mismo cromosoma X incativado. Por lo tanto, la inactivación del
cromosoma X genera líneas celulares o clones que poseen diferentes genes activos. Los organismos con estas caracteristicas
se denominan mosaicos geneticos. Es decir, las mujeres son mosaicos genéticos.
Mecanismo: en la inactivación del cromosoma X actua un gen XIST que se encuentra en el mismo cromosoma X. El gen XIST
codifica una gran molecula de ARN. El ARN que se copia a partir del gen XIST se acumula a lo largo del cromosoma X que
contiene el gen XIST activo. Este ARN inactiva casi todos los restantes genes del cromosoma. Este ARN no se une al otro
cromosoma X. los corpusculos de Barr son cromosomas X recubiertos por el ARN de XIST.
La transcripción del gen XIST cesa en el otro cromosoma X, permitiendo la expresión de los genes que este posee. La
inactivación del gen XIST del cromosoma X activo se produce por la metilación de sus secuencias regulatorias. Por lo tanto,
el bloqueo de la expresión del gen XIST permite que este gen continue activo.
--Epigenetica e inactivcion del cromosoma X
La epigenetica se ocupa de la interaccion y regulación entre los genes y sus productos, lo que da lugar a su genotipo.
En el nucleo celular se compactan 2 metros de ADN y la información almacenada no esta libremente disponible, sino que
algunos genes están siempre activos como los genes constitutivos, y otros inactivos. Estos patrones de activación y
desactivación génicos se dan por las interacciones entre los genes y sus productos.
--Euploidias y aneoploidias
Los indivuos euploides son aquellos que poseen uno o mas juegos de cromosomas. Pueden ser monoploides, diploides o
poliploides. Los individuos aneoploides son los que presentan alterados el numero de cromosomas.
Las aneuploidias cromosómicas son uno de los mas frecuentes transtornos genéticos en humanos. La probabilidad de que
se presente se incrementa a medida que es mayor la edad de la madre al quedar embarazada. La edad del padre también
influye.
Las aneuploidias mas frecuentes corresponden a las trisomías de los cromosomas 21 (síndrome de dawn), cromosoma 18
(síndrome de Edward) y cromosoma 13 (síndrome de patau).
También se presentan anormalidades en el numero y tipo de cromosomas sexuales, el X o el Y.
El síndrome de Turner, o monosomia X se caracteriza por la falta de un cromosoma X. Genotípicamente son mujeres, pues
carecen del cromosoma Y. Es la única monosomia viable en seres humanos, pues la carencia de cualquier otro cromosoma
es letal.
El síndrome de Klinefelter afecta solamente a hombres y se caracteriza por poseer un cromosoma X de mas. Produce
infertilidad e hipogonadismo.
--Cromosoma procarionte
Esta compuesto por una molecula de ADN circular y desnuda (cromosoma no asociado a proteínas).
El super enrollamiento en bacterias esta regulado por la ADN girasa y la topoisomerasa l. En general, se denomina
nucleoide al cromosoma circular compactado.
El ADN bacteriano se encuentra asociado a las proteínas HU, que inducen la condensación del cromosoma y los procesos de
replicación, de esta forma, pueden regular la expresión celular en procariontes.

PARTE II
1-Genoma
Es la totalidad el ADN contenido en una célula. En las células procariotas, el ADN forma un solo cromosoma circular,
mientras que en los eucariotas se reparte en varias moléculas de ADN, cada una de las cuales corresponde a un cromosoma
distinto.
Las unidades informativas del genoma se denominan “genes”, los cuales están separados por secuencias sin aparente
información llamadas “regiones intergenicas”.
En el genoma procariota, los genes se disponen densamente a lo largo de la secuencia de ADN, separados por cortas
secuencias intercaladas que no codifican información. En el genoma eucariota, en cambio, las secuencias intergenicas son
mas extensas; de hecho, representan una parte mayor del genoma que la correspondiente a los genes.
Las distintas regiones del ADN, génicas e intergenicas, no están separadas por ningún limite físico, si no que por la secuencia
de bases nitrogenadas; la información genética esta codificada en esa secuencia de bases.
La síntesis de cada proteína celular requiere un “instructivo” que informa la secuencia de aminoácidos propia de dicha
proteína que se encuentra en la secuencia de bases del gen correspondiente.
Se denomina expresión genética a la forma como la información contenida en un gen es utilizada y decodificada hasta
obtener un producto. Los genes de proteínas se expresan en dos pasos: la transcripción y la traducción.
La transcripción consiste en la síntesis de un ARNm, que copia la secuencia de bases del gen. Posteriormente, en los
ribosomas, el mensaje que porta el ARNm es decodificado o traducido para enlazar los aminoácidos en la secuencia que da
como resultado la cadena proteica. Los ARENm son intermediarios entre el gen y la proteína, el producto final del gen.
El genoma también contiene genes de otros tipos de ARN, como el ribosómico, el de transferencia y los ARN pequeños
nucleares y citoplasmáticos, y los de interferencia. Estos genes se transcriben pero no se traducen, ya que los ARN
resultantes carecen de información codificada para sintetizar proteínas. Dichas especies de ARN son productos finales de los
genes y desempeñan otras funciones vinculadas a la síntesis de proteínas y la regulación genética.
Los genes tienen regiones señalizadoras llamadas “promotores o terminadores”. En general no son codificantes por lo cual
no se transcriben. Actúan como signo de puntuación marcando el principio y el final de un gen. Son indispensables.
Las células regulan la expresión de sus genes; no transcriben y traducen todos los genes al mismo tiempo. En las
regulaciones de la expresión genética intervienen las regiones del ADN llamadas secuencias reguladoras, son no
codificantes, pues no llevan información para la síntesis de otras moléculas. Las regiones reguladoras no se transcriben; su
funcion consiste en regular la transcripción de los genes, lo que requiere la interaccion de las regiones reguladoras con
proteínas activadoras o represoras.
El ADN, en las secuencias reguladoras, lleva los “interruptores” desde los cuales se enciende o apaga la expresión de los
genes.
El genoma de las células eucariotas contiene copias únicas de los genes que codifican proteínas, exceptuando a las histonas,
cuyos genes son de copia multiple, al igual que los genes que codifican ARNm y ARNt.
Gran parte del genoma consiste en secuencias intergenicas, es decir que son no codificantes, que no expresan en productos
celulares. A estas secuencias intergenicas se las ha calificado como “ADN basura”, que se desconoce su funcion. Entre las
secuencias intergenicas se encuentran los elementos transponibles, los seudogenes y el ADN satélite.
Los elementos transponibles o transposones, algunos codifican enzimas necesarias para su propia transposición. Forman
parte del ADN moderadamente repetitivo junto con secuencias codificantes.
Los seudogenes son secuencias originadas en duplicaciones fallidas en ciertos genes, qque resultan en copias no
funcionales.
El ADN altamente repetitivo o ADN satélite son secuencias cortas de ADN que aparecen repetidas millones de veces en un
genoma. Muchas forman los centrómeros y los telomeros, pero la mayoría tienen funcion desconocida.
2- El proceso de transcripción
La transcipcion es el proceso de síntesis de ARN dependiente de un molde de ADN.
Los genes presentan una región promotora o promotor, cuya secuencia de bases señala el nucleótido donde se iniciara la
transcripción. Otras secuencias llamas terminadores indican el punto final de la transcripción.
La transcripción de un gen requiere la participación de una enzima de las ARN polimerasa. Cada ARN pol reconoce
principalmente ciertas regiones del promotor, llamadas secuencias consenso. La ARNpol se une a dichas secuencias y da
inicio a la transcripción. En eucariotas, la unión de la ARN pol al promotor esta mediada por un grupo de proteínas llamadas
factores basales de transcripción.
Una vez unida al promotor, la ARNpol queda correctamente posicionada para copiar la cadena molde, la cual recorrerá en
sentido 3’-5’. A medida que avanza, la enzima separa transitoriamente a la cadena molde de su complementaria, la cadena
antimolde. Las cadenas de ADN desapareadas forma una “burbuja de transcripción”. De esta forma se exponen los
nucleótidos del molde, a cada uno de los cuales la ARNpol empareja un ribonucleotido complementario. Los ribonucleotidos
se aparean con los desoxirribonucleotidos según las mismas reglas de complementariedad que rigen para el ADN, con la
sola excepción de que la timina es reemplazada por uracilo. La ARNpol cataliza la formación de los puentes fosfodiester que
enlazan entre si a los ribonucleotidos consecutivos, construyendo el polímero de ARN.
El transcripto de ARN resulta complementario y antiparalelo con respecto al molde. El ARN crece en la dirección 5’-3’ sobre
un molde “leído” en la dirección 3’-5’.
El transcripto se mantiene un breve lapso apareado con el molde conformando ambos una doble hélice transitoria. Asi el
molde ya transcripto vuelve a aparearse con el antimolde, en tanto el extremo 5’ del transcripto se separa del molde.
El proceso concluye cuando la ARNpol sobrepasa la secuencia terminadora, que también es transcripta. Una vez concluido
el proceso de copia, el extremo 3’ del ARN sintetizado se desaparea de su molde y se libera, mientras se cierra la burbuja de
transcripción.
El ARN sintetiza por complementariedad con respecto al molde y antiparalelo al mismo, por lo cual su direccion y secuencia
de bases coinciden con las del antimolde. Por esta razón el antimolde es también llamado hebra positiva o codificante,
mientras que el molde es denominado hebra negativa o no codificante.
En los eucariotas, la transcripción se lleva a cabo en el nucleo celular.
Los procariotas constan de un solo ARN polimerasa, mientras que en los eucariotas existen 3 clases de ARN polimerasas.
--- transcripción en procariotas
Consta de 3 etapas:
 Iniciación: el reconocimiento del ppromotor por la ARN pol, la formación de la burbuja de transcripción y ek inicio
de la nueva cadena de ARN. Los promotores procariotas se caracterizan por la presencia de dos secuencias
consenso, necesarias para la fijación de la ARNpol. La interaccion entre dichas secuencias y la enzima posiciona a
esta ultima de manera tal que su sitio activo interacciona sobre el primer nucleótido a ser transcripto en la cadena
que actuara como molde. La ARNpol procariota es una holoenzima que consta de un nucleo catalítico y una
subunidad reguladora, llamada sigma, esta es fundamental para el reconocimiento del promotor y generalmente
se libera despuen de la iniciación, mientras el nucleo catalítico se desplaza sobre el molde continuando la
transcripción.
 Elongación: es el alargamiento de ARN en la burbuja de transcripción. Genera una supertorsion o
superenrrolamiento del ADN rio abajo, requiere la participación de la enzima topoisomerasa I.
 Teminacion: la transcripción culmina culmina cuando la ARNpol sobrepasa una secuencia terminadora. Los
terminadore son transcriptos, pero poseen secuencias que favorecen la separación del ARNpol. Hay dos clases de
terminador: independientes de la proteína rho que tienen secuencias repetidas inversas, formadas por bases
complementarias, lo que ocasiona que el transcripto forme una estructura secundaria en horquilla. La horquilla
detiene a la ARNpol y la trancripcion cesa; la terminación dependiente de rho, los ARN poseen extremos 3'
desestructurados, donde se fija la proteina rho. Esta posee una actividad helicasa, abriendo la doble hélice hibrida
formada por el molde y el transcripto, de manera que el ultimo se separa, poniendo fin a la transcripción.
---- transcripción en eucariotas:
También se divide en etapas de iniciación, elongación y terminación. No obstante tiene algunas caracteristicas que las
distinguen:
1) El proceso de transcripción esta confinado al nucleo, donde los transcriptos sufren posteriormente un proceso de
maduración.
2) El ADN esta asociado a las histonas, formando la cromatina. La accesibilidad del ADN a las enzimas de la transcripción
requiere modificaciones transitorias de las histonas y de la arquitectura de la cromatina.
3) Existen 3 tipos de ARNpol, se encargan de la transcripción de genes específicos.
4) La unión de cada ARNpol al promotor se realiza en presencia de factores basales de transcripción. La interaccion de
estos posibilita una tasa de transcripción minima.
5) Los promotores, según el tipo de gen, pueden ubicarse rio arriba o rio abajo del `punto de inicio. Por ejemplo, los
promotores de los genes que codifican proteínas se ubican rio arriba, por lo cual no son copiados en el transcripto. Los
promotores de los genes de ARNr se situan dentro de la región transcripta. Una secuencia común es la llamada caja
TATA, que presenta una secuencia del tipo 5',TATAAA-3'.
6) Las regiones reguladoras del ADN interaccionan con proteínas llamadas factores de transcripción específicos y ambas
regulan la maquinaria de transcripción basal que modula la velocidad y frecuencia de transcripción de un gen.
3- El código genético
El código de los genes esta constituido por tripletes de nucleótidos. Las cuatro bases pueden formar 64 tripletes
diferentes, según el orden en que se combinen. Los tripletes, una vez transcriptos al ARNm reciben el nombre de
“codones”.
De los 64 tripletes, 61 codifican aminoácidos, y 3 son codones stop o de terminación.
Cada uno de los 61 codones que codifican aminoácidos “nombre” a uno y solo un aminoácido particular. Pero el código
genético tiene, para codón, una interpretación única.
Los codones restantes funcionan como sinónimos. Es decir, que cada aminoácido esta codificado por mas de un codón,
con la excepción de metionina y triptófano, que están nombrados por un único codón cada uno. La existencia de
diferentes codones sinónimos que codifican a un mismo aminoácido se conoce como “degeneración” o “redundancia”.
Los codones stop o determinación son UGA, UAG y UAA, y no codifican aminoácidos. Los codones stop ofician como
punto final del mensaje.
La traducción de un ARNm es realizada en la dirección 5’-3’. El primer codón traducido es siempre un codón con la
secuencia AUG, llamado por ello codón de iniciación.
Durante la traducción, el mensaje que porta el ARNm se lee de corrido. Ninguna base forma parte mas de un codón; los
codones no se superponen o solapan entre si.
--ventajas de la degeneración y del bamboleo o “wobble”
La degeneración del código genético podría ser interpretada como una falla que puede ser ventajosa. La redundancia,
por lo tanto, posibilita la neutralización de ciertos errores en los procesos de autoduplicacion y transcripción del ADN,
ya que a pesar de ellos no se altera el significado del mensaje.
Los codones que funcionan como sinónimos solamente difieren en la tercera base.
Durante la traducción los codones se aparean con los anticodones, tripletes complementarios que forman parte de los
ARNt. El bamboleo, proporciona una dosis de plasticidad adaptabilidad al funcionamiento del código genético universal.
RESUMIENDO:
El código genético consta de 64 tripletes o codones, 61 de los cuales codifican aminoácidos, mientras que los 3
restantes funcionan como stop.
Es degenerado o reduntante, pues existen codones sinónimos.
No es ambiguo, ya que cada codón solamente codifica un aminoácido.
Sus codones se traducen de corrido.
Es universal.
-- Excepciones a la universalidad del código y mensajes solapados
Ciertos codones pueden tener significado diferente al comparar ADN de distintos orígenes. La mayor parte se verifican
en los codones stop y en el ADN mitocondrial.
El código genético no se solapa, ya que en la lectura y traducción del mensaje no se saltea ningún nucleotido y cada uno
de ellos forma parte de un único codón. Sin embargo, ciertos virus portan en su genoma mensajes solapados. En estos
genomas, determinadas secuencias de nucleótidos codifican mas de una secuencia de aminoácidos.

4-La maquinaria traduccional

--- ARN mensajero
Los ARNm son moléculas lineales de cadena simple en donde residen las instrucciones para la elaboración de un
producto proteico.
Esta secuencia se lee en la dirección 5’-3’. Presenta un codón iniciador iniciador y un codón stop. Presenta sectores
extra en los sectores 5’ y 3’ denominados secuencias no codificantes. Estas regiones no se traducen en proteínas aun
cuando forman parte del ARNm transcripto del gen
---ARNm eucariota
La mayoría de los ARNm eucariotas presentan la secuencia codificadora del mensaje interrumpida, es decir, coexisten a
lo largo de la molecula sectores que codifican la proteína, llamados exones, consecuencias intercaladas sin información,
denominadas intrones.
Maduración: los ARNm transcriptos primarios sufren una serie de modificaciones antes de salir citoplasma como ARNm
maduro.
Algunos cambios consisten en agregado de moléculas en los extremos 5’ y 3’ llamados capping y poliadenilacion.
1) Capping: proceso por el cual se adiciona en el extremo 5’ del ARNm una molecula de 7 metil-guanosina, a la que se la
conoce como cap. La cap impide la degradación del ARNm inmaduro por enzimas como nuclesas y fosfatasas nucleares.
También participan en la remoción de intrones y en el inicio de la traducción.
2) Poliadenilacion: proceso que consiste en el agregado de unas 250 adenosinas o cola poli A en el extremo 3’ del
ARNm. El ARNm presenta una secuencia de nucleótidos especifica conocida como señal de poliadenilacion. Una
nucleasa corta el pre-ARNm. Una vez liberado el pre-ARNm, la enzima poli A-polimerasa le agrega las adenosinas de a
una por vez. Por otra parte, la ARNm pol II, continua transcribiendo un tramo mas del molde, finalmente se disocia del
gen. Este ultimo tramo de ARN es rápidamente degradado por nucleasas y fosfatasas.
La funcion de la cola poli A son proteger al extremo 3’ de la degradación y ayudar a los ARNm a salir del nucleo.
Los ARNm de histonas carecen de cola poli A pues, presentan mas de una señal de poliadenilacion. Cuando asi ocurre,
el mismo gen puede ser transcripto por dos productos diferentes, dependiendo de cual sea la señal reconocida.
3) Corte y empalme (splicing): afecta a la secuencia codificadora, que sufre un acortamiento de la eliminación de los
intrones, quedando como producto final los exones empalmados en una secuencia continua.
Para que se lleve a cabo este tipo de maduración del pre-ARNm se necesita una bacteria de ribonuoproteinas pequeñas
nucleares (RNPpn). Estas se denominan U1,U2,U4,U5,U6, y se combinan de a una por vez en los extremos de cada
intron. El complejo resultante del ensamblado se denomina espliseosoma. La actividad enzimática residirá en los
ARNpn del espliseosoma. Estos serán los responsables de reconocer las secuencias señalizadoras de corte, escindir a los
intrones en forma d elazo, y empalmar a exones entre ellos, produciendo una molecula de ARNm maduro. Estos son
monocistronicos, es decir, el sector codificador dicta la secuencia para una sola cadena polipeptidica.
--- ARNm procariota
1) Los ARNm procariota presentan las secuencias codificadoras continuas, pues carecen de intrones.
2) No sufren modificación post-transcripcionales
3) Muchos ARNm procariotas son policistronicos, es decir, que una sola molecula de ARNm contiene información para
varias proteínas. Este ARNm contiene codones para la terminación y para la iniciación de la traducción entre las
secciones codificadoras de proteínas, de modo que se traduce como varias moléculas de proteínas distintas.
--ARNt (transferencia)
Los ARNt son moléculas 2adaptadoras” ya que interactúan por un lado con la cadena polinucleotidica (ARNm) y por el
otro con los aminoácidos que formaran parte de la cadena polipeptidica.
Cada ARNt es una molecula de 70-93 ribonucleotidos con disposición espacial en forma de hoja de trébol. Cada brazo
presenta una zona de doble cadena y un asa o bucle de cadena simple sin apareamiento de bases. Su estructura
definitiva será en forma de letra L.
Se distinguen dos extrtemos: en el extremo 3’ o aceptor d ela molecula se encuentra el trinucleotido CCA, que
representa el sitio d eunion donde se liga el aminoácido. Esta unión es catalizada por una enzima aminoacil ARNt
sintetasa especifica y apropiada para cada uno de los 20 aminoacidos.
En el extremo apuesto se localiza un anticodon, cuya secuencia varia en cada tipo de ARNt. Cada anticodon es
complementario de un codón del ARNm, aunque podría acoplarse a mas de un codón, como los sinónimos.
Existen 61 codones que codifican para aminoácidos y tan solo 31 anticodones en los respectivos ARNt, pues los codones
sinónimos pueden ser leidos por un mismo ARNt. Por lo tanto, el ARNt posee varias propiedades especificas:
 Debe ser reconocido por una aminoacil ARNt sintetasa que lo una al aminoácido correcto.
 Debe tener una región que actue como sitio de unión para el aminoácido.
 Debe tener una secuencia complementaria (anticodon) especifica para el codón del ARNm correcto.
Algunos genes para ARNt presentan un intron que interrumpe la secuencia codificadora, el cual es removido en el
nucleo post-transcripcion
-- ARNr (ribosómico)
Los ribosomas y los ARNt intervienen en la traducción de la información codificada en el ARNm, por lo cual los primeros
son considerados fabrica de proteínas.
Dentro de cada ribosoma hay tres huecos llamado sitio A (aminoacidico), P (peptidilico) y E (salida), para el ingreso de
los ARNt unidos a sus correspondientes aminoácidos y el egreso de los ARNt descargados.
Cada ribosoma consta de subunidades: la subunidad mayor y la subunidad menor. Estas trabajas conjuntamente en la
síntesis proteica. La subunidad menor aloja al ARNm sobre el cual se acomodan los ARNt junto con los aminoácidos que
transportan. La subunidad mayor cataliza la unión peptídica de los aminoácidos gracias a la acción de la peptil
transferasa, ribozima.
Todos los ARNr procariotas y eucariotas sufren modificación post-transcripcion.
En eucariotas, la síntesis del pre ARNr se realiza en la zona organizadora del nucléolo a partir de la ARN pol I. una vez
obtenido el largo transcripto primario o pre-ARNr 45S, se eliminan secuencias espaciadoras, las que serán degradadas
por enzimas. Las secuencias resultantes utilizables de ARNr junto con ARNr 5S extranucleolar, se ensamblan a proteínas
importadas del citoplasma y conforman las subunidades ribosómicas.
Finalmente, las subunidades ribosómicas por separado y antes de completar sus respectivos ensambles, son exportadas
al citoplasma a través del complejo del poro nuclear.
-- Los ARN pequeños.
Los ARN pequeños forman complejos con proteínas especificas, dando liugar a la formaicon de partículas
ribonucleoproteicas (RNP).
Las RNP localizadas en el nucleo se denominan RNPpn: particula ribonucleoproteica pequeña nuclear. Varios RNPpn
participan en el procesamiento de los ARNm. Estas partículas forman un complejo multienzimatico denominado
espliceosoma, encargado de realizar cortes y empalmes en los ARNm transcriptos primarios (splicing).
Las RNP localizadas en el citoplasma se denominan RNPpc: particula ribonucleoproteica citoplasmática. Componen la
particula de reconocimiento de la señal o SRP. Estas participan en el reconocimiento de secuencias especificas de las
proteínas de secreción, proteínas de membrana y de los lisosomas, deteniendo su traducción, a¡hasta que el ribosoma
en el que se esta sintetizando contacte con la membrana del REG, donde finaliza su traducción.
5- proceso de traducción o síntesis proteica.
Es el proceso por el cual se construye una cadena polipeptidica con una secuencia especifica, a partir de la información
codificada en la secuencia de nucleótidos del ARNm.
Construir una proteína requiere d ela participación del ARNm, los ARNt (unidos a sus correspondientes aminoácidos),
ribosomas, enzimas, ATP/GTP y un conjunto variado de proteínas denominadas factores traduccionales.

--- Activacion de los aminoácidos o aminoacilacion.

Consiste en la unión de cada ARNt con su aminoácido correspondiente.
Esta catalizado por 20 variantes de la enzima aminoacil ARNt sintetasa (una para cada uno de los 20 aminoacidos). En
esta etapa, la actividad correctora de las enzimas aminoacil ANRt sintesas minimizan los errores en la selección del
aminoácido correcto. La reacción de aminoacilacion ocurre en dos fases:
En la primera fase de la reacción se utiliza la energía de la hidrolisis del ATP para unir cada aminoácido a un AMP. Esto
da origen a un complejo intermediario denominado aminoacil-AMP.
Sin abandonar la enzima, se transfiere el aminoácido del complejo aminoacil-AMP al ARNt especifico, con lo cual se
origina la molecula final: aminoacil-ARNt .
El enlace entre el ARNt y el aminoácido libera, al hidrolizarse, la energía necesaria para propulsar la formación del
enlace peptídico durante la traducción.
---Traduccion del ARNm
Puede describirse en tres etapas:
 Iniciación de la traducción: disparador de la síntesis proteica. El complejo esta compuesto por una molecula de
ARNm, una subunidad mayor, una subunidad menor, el ARNt iniciador y factores proteicos de iniciación (IF). Dicho
complejo comienza a formarse cuando se acoplan el ARNm y la subunidad menor del ribosoma. El ARNt iniciador
ingresa al sitio P uniéndose por complementariedad de bases al codón AUG mas próximo al extremo 5’ del ARNm,
este garantiza que el mensaje genético se lea en sentido 5’-3’. La incorporación posterior de la subunidad mayor
cierra el complejo de iniciación, originando un ribosoma completo y funcional. Por cada molecula de ARNm se
sintetiza una sola cadena proteica.
En procariotas, dada que la secuencia de reconocimiento entre el ARNm y el ARNr de la subunidad menor puede
aparecer varias veces a lo largo del mensaje, pueden originarse varias cadenas polipeptidicas a partir de un ARNm.
La mayoría de los ARNm procariotas son policistronicos.
 Elongacion de la cadena polipeptidica: el proceso se inicia cuando una nueva molecula de aminoacil-ARNt ingresa
al sitio A vacante del ribosoma, acoplándose por complementariedad de bases al segundo codón del ARNm
expuesto en ese lugar. Esta reacción requiere la intervención de uhn factor de elongación y GTP.
El aminoácido iniciador se desacopla del ARNt del sitio P, liberando energía que se utiliza en la formación del enlace
peptídico entre los dos aminoácidos alineados. Como consecuencia de esta reacción, el ARNt iniciador del sitio P
queda sin aminoácido y el dipeptido resultante queda enganchado al ARNt del sitio A.
El nuevo peptidil ARNt del lugar A el translocado al lugar P cuando el ribosoma se desplaza 3 nucleotidos a lo largo
de la molecula de ARNm. Esta etapa requiere energía y la presencia de un factor de elongación.
La molecula libre de ARNt se libera del ribosoma, puesto que su lugar pasa a ser ocupado por el peptidil ARNt. El
sitio de salida del ARNt descargado se denomina E. asi, el sitio A, puede aceptar una nueva molecula de amoniacil
ARNt.
Durante la elongación, se ponen en marcha mecanismos correctores. En esta etapa se garantiza que el
apareamiento de bases codón-antidocon sea correcto. Recién después del correcto apareamiento de estos , el
factor se disocia posibilitando la unión del aminoácido a la cadena polipeptidica. Este retraso en la unión del
aminoácido posibilita que se elimine el ARNt incorrecto.
 Terminacion de la síntesis proteica: ocurre ante la llegada al sitio A del ribosoma, de uno de los tres codones stop.
Estos son reconocidos por un factor de terminación o liberación. El polipeptido se desacopla del ARNt, liberándose
en el citoplasma. El ARNm se separa del ribosoma y se disocian las dos subunidades, las cuales podrán volver a
ensamblar sobre otra molecula de ARNm reiniciándose el proceso de traducción.
--El costo energético de la síntesis proteica.
La síntesis proteica requiere mas energía que cualquier otro proceso anabólico. Para formar cada enlace peptídico se
consumen en total un ATP y dos GTP, los que aportan cuatro enlaces de alta energía: 2 en la activación del aminoácido;
el tercero en la unión del aminoacil-ARNt a la subunidad menor del ribosoma; y el cuarto en la translocación del
ribosoma.
---Polirribosomas.
Una molecula de ARNm dirige la síntesis simultanea de varias moléculas de una misma proteína. En cuanto un
ribosoma ha traducido una secuencia de amoniacidos suficientemente larga como para dejar libre al extremo 5’ del
ARNm, un nuevo ribosoma puede iniciar la traducción. Al grupo de ribosomas que traducen simultáneamente que
traducen simultáneamente se lo denomina polirribosoma o polisoma.
--- Diferencias en la traducción en procariotas y eucariotas.
En eucariotas la envoltura nuclear y la maduración que sufren los ARNm impiden su traducción inmediata. El ARNm es
“leído” después de que haya abandonado el nucleo a través de los poros nucleares. La traducción es por lo tanto post-
transcripcional.
En procariotas, la traducción es simultanea a la transcripción, lo que es traducción cotranscripcional.

6- Regulacion de la expresión genética.

--- Regulacion en procariotas.
-- El operon lac
La bacteria E. Coli vive en nuestro intestino grueso de donde toma nutrientes como glucosa y lactosa. Prefiere glucosa
como fuente de carbonos, pero en su ausencia, opta por la lactosa. Para metabolizar esta molecula es necesaria la
participación de enzimas. Solo cuando en el medio este presente la lactosa, los genes que codifican estas enzimas se
expreseran.
Un operon es un conjunto de genes agrupados en el cromosoma bacteriano que codifican la síntesis de proteínas que
participan en una determinad via metabolica. No se transcriben, funcionan como una unidad de transcripción bajo
control de las mismas secuencias reguladoras.
El operon lac consta de:
 Regulador: segmento de ADN que codifica una proteína represora que reconoce el segmento operador.
 Promotor: segmento de ADN en donde se une la ARNpol yidentificando el inicio de la transcripción.
 Operador: segmento de ADN reconocido por la proteína represora, controla la transcripción de los genes
estructurales.
 Genes estructurales: esta la z, que cataliza la hidrolisis de la lactosa en galactosa y glucosa; y, transporta a la lactosa
en la célula. a, no se conoce su funcion en el metabolismo de la lactosa.
Cuando se cultivan células de E.Coli en un medio carente de lactosa, el operon no se transcribe. El represor lac se une al
operador bloqueando el desplazamiento de la ARNpol y por ende la expresiones de los genes estructurales.
Cuando se cultivan células de E.Coli en presencia de lactosa el operon se transcribe. Un derivado de la lactosa
(alolactosa) se une a la proteína represora inactivandola, ya que afecta su conformación espacial. Pierde afinidad por el
operador dejándole a la ARNpol un libre deslizamiento. Al transcribirse los genes estructurales, se obtiene un único
ARNm policistronico.
Se concluye que el operon lac es un ejemplo de sistema inducible bajo control negativo: la inducción se produce cuando
el sustrato sobre el cual actuara la proteína provoca la síntesis d ela proteína. El control negativo lo ejerce el represor,
proteína que unida al ADN inhibe la transcripccion. En este sistema inducible, la transcripción normalmente esta
reprimida y debe inducirse su encendido.
El operon lac también se encuentra bajo control positivo, en este caso, otras moléculas se unen al ADN estimulando la
transcripción, este es dependiente de los niveles de glucosa en el medio. Para que el operon lac se exprese, no solo
debe estar presente la lactosa, sino que además debe estar ausente la glucosa. En el encendido del operon lac influye la
presencia del AMPc (nucleótido que es segundo mensajero, derivada del atp). Los niveles celulares del AMPc son
controlados por la concentración de glucosa del medio, cuanto menor es la concentración de glucosa, mayor es la
concentración de AMPc. El control positivo esta a cargo de un complejo activador formado por AMPc y una proteína de
regulación transcripcional denominada Cap. El compleco cap-AMPc activa la transcripción, pues la ARNpol se une al
promotor si el complejo regulador también esta presente.
Cuando la concentración de este complejo es alta, el cap-AMPc se fija a un sitio especifico del promotor lac,
aumentando la afinidad de la región promotora con la ARNpol, lo que estimula la transcripción del operon. Esto
posibilita que la bacteria utilice lactosa cuando la glucosa no esta presente en el medio.
-- El operon triptófano.
Es un operon reprimible en el que la transcripción normalmente esta encendida y debe apagarse o reprimirse. Consiste
en 5 genes estructurales (E,C,O,B,A) que codifican las enzimas involucradas en la biosíntesis del aminoácido tritofano.
Dichos genes se agrupan en una unidad de transcripción con un solo promotor y un operador. Un gen regulador se
localiza fuera del operon y codifica la síntesis de una proteína represora.
Cuando se cultivan células de E.Coli en ausencia de triptófano, el operon se transcribe ya que la ARNpol se une al
promotor y transcribe a los genes estructurales en un ARNm policistronico.
Cuando se cultivan células de E.Coli, el operon no se transcriben, ya que en el medio circundante el triptófano
(molecula denominada co-represor) se une a la proteína represora constituyendo el complejo represor/co-represor
impidiendo a la ARNpol transcribir los genes estructurales. Con este mecanismo de regulación, la bacteria ahorra
energía.
---Regulacion en eucariotas.
Pueden producirse regulación durante el procesamiento o maduración del ARNm. Mecanismos de regulación
eucariotas:
1) Mecanismos de control a nivel transcripcional:
Es el punto clave de la regulación de la expresión de los genes. No solo enciende o apaga los genes, sino también regula
la velocidad de transcripción de los genes encendidos.
En la regulación de la trancripcion participan:
- La estructura de la cromatina y la expreson genética: en cada tipo celular solo se expresan determinados conjuntos
de genes mientras el resto del genoma se mantiene silencioso.
La compactación de la cromatina afecta la capacidad de unión de las enzimas y factores transcripcionales a genes
específicos.
La transcripción solo ocurre cuando el ADN esta desplegado. Como la heterocromatina no puede ser transcripta, la
expresión genética en los eucariotas se puede reprimir por condensación de Eucromatina en heterocromatina. Por
lo tanto, las regiones de cromatina condensada y dispersa varian según el tipo celular reflejado.
El grado de enrollamiento de la cromatina es regulado por el agregado o remoción de grupos acetilo, metilo, o
fosfatos a las porciones de las histonas que se proyectan fuera del nucleosoma. A estos cambios se los denomina
epigeneticos, son cambios que afectan la expresión de los genes y una vez establecidos puede ser transmitido ala
descencia celular, sin modificar la secuencia de bases del gen.
La acetilación de las H3 y H4 disminuye el enrollamiento de la cromatina, lo que a su venz favorece el acceso de los
factores de transcripción y de la ARNpol. La desacetilacion provoca el efecto contrario, haciéndola menos accesible
y dando lugar al surgimiento de heterocromatina.
La metilación y fosforilacion de las histonas aumenta el enrollamiento de la cromatina. Contrariamente, la
remoción de metilos y fosfatos estimulan la descondensacion, propiciando la actividad de los genes.
- El grado de metilación del ADN y la expresión genética.
La metilación del ADN es un proceso epigenetico que participa en la regulación de la expresión genética de dos
maneras, directamente al impedir la unión de factores de transcripción, e indirectamente propiciando la estructura
“cerrada” de la cromatina. La metilación es un proceso unidireccional, cuando una secuencia CpG adquiere
metilación de novo, esta metilación se hace estable y es heredada como un patrón de metilación clonal. La perdida
de metilación genómica se asocia frecuentemente con el proce neoplásico y es proporcional a la severidad de la
enfermedad.
Los genes de expresión diferencial parecen estar también fuertemente metilados en las células que no expresan la
hemoglobina y no metilados en las células donde se expresa. Los genes implicados en el metabolismo general
raramente están metilados.
Los patrones de metilación se establecen en el proceso de diferenciación celular durante la embriogénesis. Dichos
patrones se conservan de generación en generación en las células descendientes.
- Los factores de transcripción y la expresión genética.
Existen dos regiones reguladoras: secuencias intensificadoras y secuencias silenciadoras, que interaccionan
respectivamente con dos tipos de factores de transcripción específicos (FTE): activadores y represores. La
interaccion física entre cada enhacer y su activador estimula la velocidad de la transcripción.
Cuando las proteínas represoras se unen a las secuencias silenciadoras se inhibe la transcripción.
Las interacciones que se establecen entre ADN y proteínas son débiles, reversibles, pero altamente especificas.
Para iniciar la transcripción de los genes que codifican proteínas, la ARNpol II requiere la presencia de factores
basales de transcripción unidos al promotor. Para que dicha unión ocurra, las secuencias reguladoras deben ser
activadas previamente por factores de transcripción específicos. Se considera que los factores basales son
constitutivos, ya que son los mismos para casi todos los genes. En cambio, los factores de transcripción especifico
son particulares para cada gen, y por ello se los califica como facultativos.
Los FTE interactúan con regiones especificas del surco mayor del ADN que corresponden a las zonas reguladoras
del gen que están mediadas por uniones débiles.
Cada gen tiene una combinación particular de intensificadores y silenciadores. Dos genes distintos pueden
compartir secuencias intensificadoras y silenciadoras, pero no existen dos genes la misma combinación de estas
secuencias reguladoras. Cada célula transcribe distintos genes y expresa distintas proteínas.
La unión de los FTE provoca un cambio conformacional del ADN que al curvarse formando un asa determina una
aproximación entre las secuencias reguladora y promotora. Este plegamiento permite contactar a los factores
específicos unidos a las regiones reguladoras, con mas o menos proteínas asociadas al complejo de transcripción
basal. Cuando esto ocurre, se estimula la transcripción por parte de la ARNpol, la que se desplaza copiando la
región codificadora del gen.
2) Mecanismos a nivel del procesamiento del ARNm.
En la maduración de los ARNm eucariotas, el corte de intrones y el empalme de exones posibilita la obtención de
una secuencia codificadora continua en el ARNm maduro. El empalme o splicing alternativo permite que a partir de
un mismo gen puedan obtenerse dos o mas proteínas diferentes.
 Existe mas de una via de procesamiento del transcripto primario que dan como resultado proteínas estructural y
funcionalmente diferentes. Esta variedad depende de la forma en que se combinen los exones a partir del
transcripto primario.
Durante el empalme, diferentes combinaciónes de exones se unen y generan una amplia gama de ARNm a partir
de un solo pre-ARNm.
3) Mecanismo a nivel del transporte del ARN al citoplasma.
Para salir del nucleo, los ARN deben pasar previamente por el proceso de maduración. Aquellos que carezcan de
capuchón, cola poli A op no hayan sufrido remoción de intrones, no superaran e,k control nuclear y será
rápidamente degradados.
4) Mecanismo a nivel de la permanencia del AARNm en el citoplasma.
La vida media de un ARNm esta determinada principalmente por la longitud de la cola poli A. en el citplasma la cola
pilo A comienza a acortarse y esto inestabiliza a los ARNm. Cuando la cola es muy corta, los ARNm son rápidamente
degradados.
5) Mecanismos de control a nivel de traducción.
Existen mecanismos generales e inespecíficos de control de la traducción. Por ejemplo, los factores de iniciación de
la traducción se controlan por fosforilacion. También es importante la disposición espacial del extremo 5’ del
ARNm, donde es fundamental la presencia de la cap para que el ARNm pùeda interactuar con la subunidad menor
del ribosoma e iniciar la traducción. Otro mecanismo inespecífico es el control de la estabilidad del ARNm. Entre los
mecanismos específicos están:
- Control de la traducción por proteínas reguladoras: deoenden de proteínas reguladoras que modifican la
configuración de la secuencia de nucleótidos no traducibles, localizados en el extremo 5’, entre la cap y el codón de
iniciación.
- Interferencia por ARN: los ARN interferentes pequeños (siARN) y los micro ARN (miARN) participan en un
fenómeno llamado interferencia por ARN.
Son cadenas cortas de ARN (siARN y miARN) de alrededor de 25 nucleotidos, que se aparean en forma perfecta o
imperfecta con regiones de los ARNm, induciendo la degradación de estos últimos por ARNasas, o bien impidiendo
su traducción.
Las siARN y las miARN se originan por acción de una enzima llamada “dicer” (cortadora) a partir de moléculas de
ARN de doble cadena.
La interferencia por ARN parece ser un mecanismo regulatorio de la expresión genética, que participa asimismo en
la defensa contra las infecciones virales.
La síntesis de ARN interferente de diseño (producido artificialmente) podría permitir el silenciamiento de genes
específicos.
6) Mecanismos de control post traduccionales: incluyen modificaciones que afectan la vida media de las proteínas
o su actividad biológica.
Dos factores son determinantes de la vida de una proteína citosolica. Su correcto plegamiento y la secuencia
aminocidica de su extremo aminoterminal.
Las chaperonas moleculares son proteínas citosolicas que se unen a la cadena en síntesis de una proteína que
emergió del ribosoma libre, ayudándola a adquirir la conformación nativa.
Respecto del extremo aminoterminal, existen secuencias aminoacidicas estabilizadoras, que asegurarían una vida
media prolongada y otras desestabilizadoras, las cuales favorecerían la marcación de las proteínas en dicho
extremo, conduciéndolas a una rápida degradación. Esto es conocido como la regla del aminoterminal.
Las proteínas que adquieren un plegamiento anómalo o se han desnaturalizado, o bien poseen su extremo
aminoterminal desestabilizante, sufren un proceso de ubiquitinizacion, que consiste en la adicion de varias
moléculas de ubiquitina que es un polipeptidico, con gasto de energía en forma de ATP. La proteína ubiquitinizada
es captada por un complejo enzimático denominado proteosoma, donde la proteína es degradada.
Los proteosomas están formados por mas de una docena de proteasas y tienen varios sitios de reconocimiento de
la ubiquitina.
Existe otra via que compite con la ubiquitinizacion. Las proteínas desnaturalizadas son conducidas por chaperonas
moleculares hasta una chaperona oligomerica. Estas puedes recuperar el plegamiento nativo de la proteína
evitando su destrucción. Esto solo es posible cuando el encuentro se da en una etapa previa o temprana de la
ubiquitinizacion.
Tanto las chaperonas como las proteosomas garantizan la calidad de las proteínas presentes en el citosol.
Las modificaciones que afectan la actividad biológica incluyen la fosforilacion, la metilación y la sumoilacion,
cambios reversibles que llevan a la proteína blanco del estado activo al inactivo o viceversa. La sumoilacion se
ejerce sobre factores de transcripción, por lo cual reprime la transcripción.
7-Estabilidad del genoma
El dogma de la biología molecular: la información genética almacenada en es ADN se transcribe en ARN y se
traduce en proteínas. La replicacion del ADN garantiza la transferencia vertical de dicha información.
A pesar de la alta estabilidad del genoma, existen mecanismos, como las mutaciones, que agregan variabilidad,
afectando a la vida en su conjunto.

--- Mecanismos que introducen variaciones en el genoma: mutaciones.

Se denomina mutacion a todo cambio espontaneo o inducido en la secuencia de nucleótidos del ADN. Si una
mutacion ocurre en una célula somatica no será transmitido a las generaciones siguientes. En cambio, si la
mutacion ocurre o involucra de algún modo a las células germinales existe una posibilidad elevada de que la misma
sea transmitida a las siguiente generaciones. Pueden ser génicas o puntuales, cuando afectan a uno o unos pocos
nucleótidos, o aberraciones cromosómicas cuando afectan a la estructura o al numero de cromosomas propios de
una especie (cariotipo).
Hay distintos tipos de mutaciones génicas, que las mas comunes se originan a partir de lo siguiente.
1) Sustitución: consiste en el reemplazo de un nucleótido por otro, pudiendo producir un cambio en el significado o
la codificacion del triplete.
La sustitución de un nucleótido que conlleva a la sustitución de un codon por otro que codifica un aminoácido
distinto, se denomina mutacion de cambio de sentido. Como consecuencia, la estructura primaria de la proteína
sintetizada difiere de la estructura primaria original.
Como consecuencia de la redundancia del código genético, no siempre las mutaciones alteran el producto del
mensaje. Cuando la sustitución pasa inadvertida se denomina silenciosa. El caso mas típico es cuando se produce
un cambio en la tercer base de un codón, convirtiéndolo en un codón sinónimo. Es decir, el codón se modifica pero
el aminoácido codificado sigue siendo el mismo.
Otra consecuencia es aquella en la cual un codón de detención reemplaza a otro codón previo que codificaba un
aminoácido. Estas mutaciones se denominan sin sentido. Según el numero de aminoácidos que hayan perdido, mas
o menos relevantes serán las consecuencias sobre el funcionamiento de la proteína mutada.
Las sustituciones no afectan la forma en que se agrupan y leen los tripleten de nucleótidos.
2) Consiste en el agregado de uno o mas nucleótidos en el gen. Induce a un corrimiento en el orden de lectura d
elos codones. Como resultado los codones situados a continuación del agregado del nucleótido informan una
seciencia de aminoácidos completamente distinta.
3) Delecion: consiste en la perdida de uno o mas nucleótidos en un gen. Igual que las inserciones, induce un
corrimiento en el marco de lectura de los codones y da como resultado una cadena de aminoácidos distinta de la
original.
Tanto las deleciones como las inserciones ocasionan profundos cambios en la estructura de las proteínas, de allí
que también afecten o modifiquen severamente su funcionamiento.

Conclusiones: como el ARN se sintetiza copiando un molde de ADN, también es posible el proceso inverso. La
información genética puede fluir desde el ARN al ADN.