Métodos de siembra en medios de cultivo

Los métodos de siembra se utilizan para inocular ( colocar algo que podrá
desarrollarse y reproducirse) por distintos métodos, sobre un medio de cultivo
apropiado una muestra que contengan bacterias con el fin de reproducirlas para
aumentar el número de individuos de la población y formar colonias en el caso de
medios sólidos. (etal 2008)

En el caso de esta práctica nos enfocaremos en algunas técnicas en donde no solo

se logra mantener vivos a los microorganismos sino también llegar a tener colonias
aisladas para posteriormente lograr un cultivo puro. Estas técnicas serán la de
“Agotamiento por Estrías” para bacterias junto con la de “Punción Central” para
hongos.
Gracias a estas técnicas los microorganismos generan colonias separadas,
partiendo de un cultivo ya crecido, en donde varios microorganismos van siendo
separados hasta quedar muy pocos o uno solo, el cual en condiciones óptimas de
crecimiento podrá llevar a cabo su reproducción, originando con ello la forma
macroscópicamente denomina colonia aislada.
Al ser una célula la que origina la colonia, se denomina Unidad Formadora de
Colonia (UFC). Dicha colonia contiene gran número de individuos, los cuales al
tener la particularidad de provenir de un solo microorganismo, son genéticamente
similares entre sí.
Para el estudio de las bacterias y otros microorganismos cultivables, es necesario,
además, conocer y reconocer la morfología microscópica y macroscópica a partir
de su crecimiento en medios de cultivo; adicionalmente, es posible evaluar el
comportamiento de ellas frente a los diferentes compuestos nutritivos ó
proporcionarles aquellos nutrientes adecuados para favorecer su desarrollo.

Estas técnicas a continuación descritas empleadas para realizar estos cultivos, se

llevan a cabo mediante el uso de algunos elementos importantes para realizarlas,
como: El mechero (de alcohol o de Bunsen), el asa bacteriológica (asa de argolla),
o micológica (asa recta), cámaras de flujo laminar o el espacio adecuado en
condiciones asépticas y los medios de cultivo ya preparados y atemperados a
37°C; esta última observación es importante tenerla en cuenta, ya que los
microorganismos objeto de estudio y presentes en las muestras o cultivos,
deben evitar ser estresados con cambios bruscos de temperatura o por otros
factores (incluida la composición del medio de cultivo). Contando con estos
implementos, es posible iniciar adecuadamente el proceso de cultivar o subcultivar
muestras o aislamientos previamente obtenidos, con las técnicas anteriormente
mencionadas caracterizadas asi:
 Método de siembra por estría: La técnica de siembra en estría es usada para
aislar cepas puras en una caja Petri a partir de un inóculo o muestra con
diferentes especies. La técnica consiste en, mediante un asa de siembra
previamente esterilizada, rayar la superficie de cultivo de una caja Petri de
forma que en cada pasada sea menor el número de células depositado, las
últimas pasadas deberán
depositar un número tan bajo de células que, una vez incubadas, se formen
colonias puras

Ilustración 1. Siembra por estría en cajas de Petri

 Método de siembra por estría directa: se inocula la muestra sobre un extremo

de la caja de Petri con un asa y se extiende formando estrías en una sola
dirección sobre la superficie, con ello lograremos que cada célula aislada se
multiplique formando una colonia independiente, cada colonia representa un
cultivo puro.

Ilustración 2. método de siembra por estría directa

 Siembra por punción central: Método de siembra utilizado para observar el

crecimiento de hongos y así más adelante establecer su morfología; así
como, para la transferencia o subcultivo de cepas previamente almacenadas
y /o conservadas. Consiste en tomar parte de micelio con un asa micológica
(o asa recta), y por una punción suave en el centro de la caja inocular el
microorganismo a estudiar. Dependiendo del objetivo, pueden hacerse
múltiples picaduras en el agar (varios puntos de siembra) (Gerard J. Tortora,
Berdell R. Funke, Christine L. Case, 2007)
 Ilustración 3. siembra de hongos por punción directa

 Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L. Case, 2007,Introducción a

la microbióloga, Editorial medica Panamericana 9a edición,EE.UU.