IDENTIFICACIÓN MEDIANTE MEDIOS DE CULTIVO

SELECTIVOS, MICROORGANISMOS PATÓGENOS

CAUSANTES DE GASTROENTERITIS, salmonella y vibrio, ,
IDENTIFICATION OF PATHOGEN ORGANISMS CAUSING
GASTROENTERITIS, SALMONELIA AND VIBRIO,
THROUGH SELECTIVE CULTURE MEANS
JUAN RICARDO CANO, DAMIHAN CAMILO NARVAEZ, JHON ALEJANDRO
ABONIA, RONALDO
Resumen
En la realización de la práctica medio de cultivo, se llevó a cabo la identificación de diferentes microorganismos
mediante el uso del medio selectivo. Para esto, se trabajará con microorganismos patógenos causantes de
gastroenteritis como Salmonella, Vibrio y enterobacterias como Salmonella shigella, Agar XLD, TCBS y VRBG,
para estos microorganismos solo se trabajará 100ml de cada uno de ellos. Inicialmente se esterilizará el ambiente de
trabajo mediante el centrifugo en la cabina de flujo laminar. Para cada microorganismo se debe llevar a cabo una
preparación diferente de acuerdo a la etiqueta, ya que algunos dependen de altas temperaturas o a la presencia de
medios sódicos concentrados para un crecimiento más acelerados y otros factores que también influyen. Después de
tener los microrganismos en las cajas de Petri y haber sembrado, se encuba las placas durante 24 horas a 37°C.
después de haber pasado el tiempo se observa los resultados y se logra dar a conocer el medio de cultivo de cada uno
de estos microorganismos, el tiempo de crecimiento y el tipo de coloración que presentan, también se identificaron
microorganismos patógenos en medios selectivos.
Palabras clave: medios de cultivo, microrganismos, medio selectivo

Abstract
In the realization of the culture medium, the identification of different microorganisms will be carried out through
the use of the selective medium. For this, we work with pathogenic microorganisms that cause gastroenteritis such
as Salmonella, Vibrio and enterobacteria such as Salmonella shigella, Agar XLD, TCBS and VRBG, for these
microorganisms only 100ml of each of them will be worked. Initially the work environment will be sterilized by
centrifugation in the laminate flow cabinet. For each microorganism a different preparation should be carried out
according to the label, since some depend on high temperatures or the presence of concentrated sodium media for
faster growth and other factors that also influence. After having the microorganisms in the Petri dishes and having
sown, pack the plates for 24 hours at 37 ° C. After the time has elapsed, the results are observed and the culture
medium of each of these is known. microorganisms, the growth time and the type of coloration they present.

¹ estudiante universitario, Tercer semestre. Programa de ingeniería agrícola. Universidad Surcolombiana,

u20181168387 @usco.edu.co
² estudiante universitario, segundo semestre. Programa de ingeniería agroindustrial. Universidad Surcolombiana.
U20182174373 @usco.edu.co
³ Estudiante universitario, tercer semestre. Programa de ingeniería de petróleos. Universidad Surcolombiana.
U20181169466@usco,edu.co
Keywords: culture media, microorganism, selective media

1. Introducción
Los medios de cultivo son una técnica que se emplea en los laboratorios, que este consta de una gel o una solución
que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas. Según Burguet Lago 2013 “los
medios de cultivo constituyen la herramienta fundamental en los laboratorios de Microbiología, por lo que realizar
pruebas de control de calidad a los medios preparados es vital, con el fin de comprobar si estos cumplen con sus
especificaciones y si la metodología empleada en su preparación es satisfactoria”.
En la cultivación de los microorganismos (salmonella, Vibrio y Agar XLD), para el crecimiento de estos
microorganismos es necesario proporcionarles las condiciones ambientales adecuadas, ya que estos en fase de
crecimiento realizan réplicas de sí mismos y requieren de los elementos que se encuentran en su composición química.
Según Carlos M. Rodríguez “El peso seco de los microorganismos consiste en materia orgánica que contiene carbono,
hidrógeno, nitrógeno, oxígeno, fósforo y azufre. Se requieren, además, iones inorgánicos como potasio, sodio, hierro,
magnesio, calcio y cloruro para facilitar la catálisis enzimática y conservar los gradientes químicos a través de la
membrana celular”.

2. Metodología
Para la identificación de los microorganismos aislados de la muestra de pescado procedente del rio Magdalena se
realiza el siguiente proceso:
Inicialmente se esterilizo el ambiente de trabajo mediante la cámara de flujo circular laminar. Se realizaron los medios
de cultivo de Agar Salmonella, Agar XLD, VRBG, como se indica a continuación.
Para la preparación del Agar Salmonella se prepara 6g en 100ml, se deja reposar entre 10 a 15 minutos y luego se
procede a calentar en el microondas hasta el punto de ebullición, después de haber calentado el Agar Salmonella se
enfría y se vacía en las cajas de Petri. En la preparación del Agar XLD se utiliza 5.5g en 100ml, y para el VRBG se
utiliza 4.15g en 100ml y en ambos se repite el procedimiento del Agar Salmonella. Después de tener el medio en las
cajas de Petri y una vez los medios se solidifiquen, se sembró Salmonella en XLD y VRBG, Shigella en SS, y Vibrio
en agar TCBS. Se encuba las placas a 37°C durante 24 horas y se observara los resultados

3. Resultados y discusiones

finalizada la práctica, se observaron variaciones en los medios de cultivo, como se describe a continuación:
MEDIO AGAR SS
en este medio se observaron colonias rosadas hasta color cremoso y transparentes con centros negros, esta última
fue un indicador de colonias generadoras de H2S, el cual al entrar en contacto con el Tiosulfato y citrato férrico
reaccionan, generando un precipitado de color negro. Lo anterior, y tomando en cuenta que no hubo fermentación
de lactosa, y por ende ningún cambio en el pH o color, nos indica según la ficha técnica del medio de cultivo Agar
SS (MERCK, 2009), que dichos organismos son probablemente proteus y algunas Salmo nellas como salmonella
Typhimurium ATCC14028 y enterobacter aerogenes
MEDIO AGAR XLD
La caracterización de este medio, se dio por colonias de color rojo con centro negro, indicando que son productoras
de H2S, teniendo en cuenta este factor y basándonos en la ficha técnica del medio de cultivo Agar XLD (MERCK,
2019), podemos concluir que el microorganismo más probable es salmonella Typhimurium ATCC14028
MEDIO AGAR VRBG
se evidencia un crecimiento bueno de colonias, caracterizadas por no fermentar la lactosa, por ende, no sufren
ninguna alteración del pH y se mantiene con una tonalidad transparente. Teniendo como base la ficha técnica del
medio de cultivo Agar VRBG (MCD LAB, F.F) se deduce que probablemente el microorganismo contenido en el
medio de cultivo es salmonella Typhimurium ATCC14028
MEDIO AGAR TCBS
Las características de este medio en la primera muestra, tales como un crecimiento excelente y zonas amarillas
alrededor de las colonias, y una inhibición parcial de crecimiento con pequeñas colonias color amarillo en la
segunda, nos lleva a la conclusión, basándonos en la interpretación brindada por la guía (BD, 2003), que
probablemente el microorganismo observado en la primera muestra es un Vibrio Cholerae NCTC8021,
acompañado de E. faecalis ATCC29212 (segunda muestra)

Para finalizar la práctica, se realizó la prueba oxidasa-catalasa en los dos microrganismos detectados, esta para
aumentar el porcentaje de certeza, en cuanto a que las sepas sean de Vibrio y Salmonella.
En el caso de la sepa se caracterizó como Vibrio, y acorde a (BVSDE, F.F), los microorganismos proporcionaron
un resultado positivo tanto para la catalasa como para la oxidasa, aumentando en gran parte las posibilidades de ser
una sepa de Vibrio .
En la segunda prueba, realizada a las posibles sepas de Salmonella, se observó un resultado positivo para la
catalasa y negativo para la oxidasa, concordando con (DEPARTAMENTO DE FISICOQUÍMICA, F.F) y
maximizando las posibilidades de que la sepa sea correspondiente al Salmonella.

4. CONCLUSIONES
mediante el desarrollo de la practica se definió, se estudio y aplico los procedimientos que se deben realizar
para la elaboración de un medio de cultivo, logrando identificar los microorganismos patógenos en medios de
cultivos selectivos.
5. Referencias bibliográficas

- Burguet Lago, Nancy, & Castillo Abraham, Lourdes. (2013). Control de calidad de los medios de cultivo
utilizados en el monitoreo ambiental de las áreas clasificadas de producción. Revista Cubana de Higiene y
Epidemiología, 51(2), 155-160. Recuperado en 04 de agosto de 2019, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561-30032013000200004&lng=es&tlng=es
- Raquel de los Ángeles Junco Díaz, Carlos M. Rodríguez Pérez. (2001). Cultivo y crecimiento de los
microorganismos. Revista researchgate
https://www.researchgate.net/publication/288670374_Cultivo_y_crecimiento_de_los_microorganismos

- BD. (junio de 2003). INSTRUCCIONES DE USO MEDIOS EN PLACA LSITOS PARA USAR .
Obtenido de https://www.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/HB/CE/PA/ES-PA-254432.pdf
- BVSDE. (F.F). Vibrio cholerae . Obtenido de CONFIRMACIÓN DE LA IDENTIFICACIÓN Y
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http://www.bvsde.paho.org/texcom/colera/manuallabcap9.pdf
- DEPARTAMENTO DE FISICOQUÍMICA. (F.F). Método para la determinación de Salmonella spp. en
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- MCD LAB. (F.F). MCD LAB. Obtenido de
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- MERCK. (20 de enero de 2009). Merck. Obtenido de Merck group: http://www.merckmillipore.com/Web-
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105287&DocumentId=201512.284.ProNet&DocumentUID=28211945&DocumentType=DS&Language=
EN&Country=NF&Origin=PDP