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UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA


AGROINDUSTRIAL

Mario R. Cotacallapa Sucapuca

SEMESTRE ACADÉMICO 2016-I


CONTENIDO

1. Introducción
2. Nucleótidos
3. ARN Ácido Ribonucleíco
4. ARN Mensajero (ARNm)
5. ARN Ribosomal (ARNr)
6. ARN de Transferencia (ARNt)
7. Diferencia entre ADN y ARN

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INTRODUCCIÓN

NUCLEÓTIDOS

Son los monómeros de los Ácidos


Nucleicos que se forman por
esterificación de los nucleósidos
(base nitrogenada + azúcar) con
ácido fosfórico.

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INTRODUCCIÓN

La información genética o genoma, está


contenida en unas moléculas llamadas ácidos
nucleicos.
Existen dos tipos de ácidos nucleicos:
ADN y ARN.
El ADN guarda la información genética en
todos los organismos celulares, el ARN es
necesario para que se exprese la información
contenida en el ADN

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INTRODUCCIÓN
ÁCIDOS NUCLÉICOS

Son macromoléculas que forman polímeros


lineales constituidos a partir de monómeros.

ADN
NUCLEÓTIDOS
(Ácido desoxirribonucleico)
ARN
(Ácido ribonucleíco)
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INTRODUCCIÓN

LA INFORMACIÓN GENÉTICA

Se transmite por generaciones a través de


las duplicación del ADN.
Se expresa a través de la transcripción o
síntesis de ARN y traducción o síntesis de
proteínas.
Tiene la capacidad de mejorar mediante la
reparación del ADN y la recombinación
genética.
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INTRODUCCIÓN

CONDENSACIÓN DEL ADN Y


ESTRUCTURA DE UN
NUCLEOSOMA

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NUCLEÓTIDO

COMPOSICIÓN QUÍMICA Y ESTRUCTURA DE LOS ÁCIDOS NUCLÉICOS

• Los ácidos nucléicos resultan de la


polimerización de monómeros complejos
denominados nucleótidos.
• Un nucleótido está formado por la unión
de un grupo fosfato al carbono 5’ de una
pentosa. A su vez la pentosa lleva unida
al carbono 1’ una base nitrogenada.

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NUCLEÓTIDO

Base
Nitrogenada

Grupo Grupo Grupo


fosfato fosfato fosfato

Azúcar

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NUCLEÓTIDO

BASE NITROGENADA

Bases Pirimídicas Pirimidina y


y Púricas
Derivan de
Purina

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NUCLEÓTIDO

BASE NITROGENADA
• Aquellas bases formadas por dos anillos
se denominan bases púricas (derivadas
de la purina). Dentro de este grupo
encontramos: Adenina (A), y Guanina (G).

• Si poseen un solo ciclo, se denominan


bases pirimidínicas (derivadas de la
pirimidina), como por ejemplo la Timina
(T), Citosina (C), Uracilo (U).
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NUCLEÓTIDO

BASE NITROGENADA

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NUCLEÓTIDOS DE IMPORTANCIA BIOLÓGICA

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POLINUCLEÓTIDOS
ADN – ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO

• En 1953 Watson y Crick propusieron el modelo


de doble hélice, para esto se valieron de los
patrones obtenidos por difracción de rayos X de
fibras de ADN.

• Este modelo describe a la molécula del ADN


como una doble hélice, enrollada sobre un eje,
como si fuera una escalera de caracol y cada
diez pares de nucleótidos alcanza para dar un
giro completo.

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POLINUCLEÓTIDOS
Modelo de la doble hélice de ADN Representación abreviada de un
segmento de ADN

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POLINUCLEÓTIDOS

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POLINUCLEÓTIDOS
• El modelo de la doble hélice establece que las
bases nitrogenadas de las cadenas se enfrentan y
establecen entre ellas uniones del tipo puente de
hidrógeno. Este enfrentamiento se realiza siempre
entre una base púrica con una pirimídica, lo que
permite el mantenimiento de la distancia entre las
dos hebras.
• La Adenina se une con la timina formando dos
puentes de hidrógeno y la citosina con la guanina
a través de tres puentes de hidrógeno. Las hebras
son antiparalelas, pues una de ellas tiene sentido
5’ ® 3’, y la otra sentido 3’ ® 5’.

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POLINUCLEÓTIDOS

Pares de bases
del ADN:
La formación
específica de
enlaces de
hidrógeno entre G
y C y entre A y T
genera los pares
de bases
complementarias

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POLINUCLEÓTIDOS
Una corta sección de la doble hélice de ADN

Las hebras
son
antiparalelas,
pues una de
ellas tiene
sentido 5’ ® 3’,
y la otra
sentido 3’ ® 5’.

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ARN - ÁCIDO RIBONUCLEÍCO

El ácido ribonucleíco se forma por la


polimerización de ribonucleótidos. Estos
a su vez se forman por la unión de:
• a) un grupo fosfato.
• b) ribosa, una aldopentosa cíclica y
• c) una base nitrogenada unida al
carbono 1’ de la ribosa, que puede ser
citocina, guanina, adenina y uracilo.
Esta última es una base similar a la
timina.

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ARN - ÁCIDO RIBONUCLEÍCO
• En general los ribonucleótidos se unen
entre sí, formando una cadena simple,
excepto en algunos virus, donde se
encuentran formando cadenas dobles.
• La cadena simple de ARN puede plegarse
y presentar regiones con bases
apareadas, de este modo se forman
estructuras secundarias del ARN, que
tienen muchas veces importancia
funcional, como por ejemplo en los ARNt
(ARN de transferencia).

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ARN - ÁCIDO RIBONUCLEÍCO

Se conocen tres tipos principales de


ARN y todos ellos participan de una u
otra manera en la síntesis de las
proteínas. Ellos son:
• ARN mensajero (ARNm)
• ARN ribosomal (ARNr)
• ARN de transferencia (ARNt).

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ARN MENSAJERO (ARNm)

• Consiste en una molécula lineal de nucleótidos


(monocatenaria), cuya secuencia de bases es
complementaria a una porción de la secuencia
de bases del ADN.
• El ARNm dicta con exactitud la secuencia de
aminoácidos en una cadena polipeptídica en
particular. Las instrucciones residen en tripletes
de bases a las que llamamos codones. Son los
ARN más largos y pueden tener entre 1000 y
10000 nucleótidos

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ARN RIBOSOMAL (ARNr)

• Este tipo de ARN una vez transcripto,


pasa al nucleolo donde se une a
proteínas. De esta manera se forman
las subunidades de los ribosomas.
Aproximadamente dos terceras partes
de los ribosomas corresponde a sus
ARNr.

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ARN DE TRANSFERENCIA (ARNt)

• Este es el más pequeño de todos, tiene


aproximadamente 75 nucleótidos en su cadena,
además se pliega adquiriendo lo que se conoce
con forma de hoja de trébol plegada. El ARNt se
encarga de transportar los aminoácidos libres del
citoplasma al lugar de síntesis proteica. En su
estructura presenta un triplete de bases
complementario de un codón determinado, lo
que permitirá al ARNt reconocerlo con exactitud y
dejar el aminoácido en el sitio correcto. A este
triplete lo llamamos anticodón.

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ARN DE TRANSFERENCIA (ARNt)

Molécula de ARNt

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ARN DE TRANSFERENCIA (ARNt)

Molécula de ARNt

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DIFERENCIA ENTRE EL ADN y ARN

• el peso molecular del ADN es generalmente


mayor que el del ARN
• el azúcar del ARN es ribosa, y el del ADN es
desoxirribosa
• el ARN contiene la base nitrogenada uracilo,
mientras que el ADN presenta timina
• la configuración espacial del ADN es la de un
doble helicoide, mientras que el ARN es un
polinucleótido lineal monocatenario, que
ocasionalmente puede presentar apareamientos
intracatenarios

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DIFERENCIA ENTRE EL ADN y ARN

Diferencias estructurales entre el DNA y el RNA

pentosa bases nitrogenadas estructura

DNA

RNA

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

La ingeniería genética, conocida también como manipulación genética, surge en


los años 70 (siglo XX) cuando se consigue introducir material genético de una
especie en células de otra especie muy distinta.

Se manipula y modifica microorganismos o células obtenidas de animales y plantas en


el ámbito industrial (medicina, farmacia).
No se incluyen actividades que manipulen animales o plantas enteras, aunque éstas son
necesarias posteriormente.

En la naturaleza se produce una transferencia de material genético entre bacterias,


fenómeno llamado transformación.

La transferencia de forma artificial se realiza mediante la técnica del ADN


recombinante. A ésta se han ido sumando otras técnicas de ingeniería genética que se
analizan seguidamente.

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

Se basa en la capacidad de ciertas bacterias que contienen enzimas llamadas


restrictasas o endonucleasas de restricción (actualmente se comercializan más de cien
enzimas diferentes) que cortan el ADN por sitios específicos que reconocen,
obteniéndose fragmentos de restricción. Para que se puedan unir después los
fragmentos de ADN extraño y el ADN que se utilizará como vector, se han de cortar
ambos con la misma restrictasa. Comparando dichos fragmentos, se construyen los
mapas de restricción, los cuales se usan para comparar genomas de especies diferentes
y establecer cambios evolutivos así como para detectar mutaciones cromosómicas como
delecciones e inserciones.

Restrictasa Secuencia Fragmentos


(Bacteria origen) reconocida de restricción
A-A-T-T- C...
EcoR1 G...
(Escherichia coli) ...G-A-A-T-T-C...
...G-T-T-A-A-G... G...
...C-T-T-A-A
Cuadro: Fragmentos de restricción originados por la enzima EcoRl

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

Existen en la naturaleza unos


centenares de especies de
microorganismos (bacterias, levaduras,
mohos, algas unicelulares) que producen
sustancias que presentan algún interés
para la especie humana.

Cuadro II: Algunos de los principales productos


industriales obtenidos con la ayuda de los
microorganismos

Los productos que tienen un interés comercial se pueden agrupar en cuatro clases:

a) productos del metabolismo primario( dióxido de carbono, etanol, ácido acético, aminoácidos, etc.).

a) productos del metabolismo secundario (antibióticos, toxinas).

a) macromoléculas (polisacáridos, enzimas); y

a) células microbianas (pienso animal llamado proteínas microbianas).

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
El proceso de fermentación ha
sido manipulado por el hombre
de diversas formas para
obtener toda una serie de
alimentos y bebidas.

Así, por fermentación láctica


se produce queso y yogur;
la fermentación alcohólica se
emplea para la elaboración de
pan fermentado (en este caso
se aprovechan las burbujas de
dióxido de carbono para
esponjar el pan) y bebidas
alcohólicas como el vino, la
cerveza (ver figura 3), sidra,
etc.
En la fermentación alcohólica
se emplean diferentes
especies de levaduras (hongos
unicelulares) del género
Figura: Producción de la cerveza
Saccharomyces

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
La clonación en plantas se consigue sobre todo mediante la manipulación de cultivos celulares.
La principal técnica empleada es la micropropagaciónn o propagación vegetativa in vitro, la cual
permite clonar en corto tiempo un gran número de especies. Este procedimiento se utiliza para la
selección y producción de plantas en grandes cantidades, así como para la investigación en biología
vegetal.

Se consigue mediante la obtención de unos


fragmentos o explantes de la planta madre.
Los explantes se colocan en un medio de
cultivo adecuado y produce un callo (masa
de células sin diferenciar); los callos pueden
dividirse en multitud de fragmentos o
incluso hacerse una suspensión de células.
En el momento que se desee, se cambian las
concentraciones de hormonas auxina y
citoquinina, esto hace que se diferencien las
células de los callos con lo que originarán
plantas enteras. Esta técnica puede ser muy
útil para la conservación de especies y
variedades en peligro de extinción, así como
para hacer más rentables la producción de
flores o de metabolitos secundarios
(perfumes, pigmentos, etc.)
Figura: Método de obtención de callos caulinare

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

Para obtener plantas trásgénicas con genes de otras especies ( sean plantas, microbios o
animales) se pueden utilizar dos grupos de técnicas: las indirectas y las directas.

La más usada es la transformación de células mediante la bacteria Agrobacterium


tumefaciens.

Esta bacteria vive en el suelo y produce en las plantas dicotiledóneas una enfermedad
tumoral llamada "agalla de cuello".

Cuando contacta con las células de la planta les transfiere un segmento de ADN del
plásmido Ti (inductor de tumores) que contiene la bacteria. Este plásmido puede
integrarse en uno o más cromosomas de las células vegetales, por lo que puede utilizarse
como vector de genes que se deseen introducir en plantas de especies dicotiledóneas.

La célula que recibe genes extraños puede regenerar una planta entera mediante la
técnica de la micropropagación y obtener así una planta transgénica.

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

Figura: Transferencia de ADN extraño a una célula vegetal mediante el


vector bacteriano Agrobacterium tumefaciens

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
Entre las diversas técnicas de
transferencia directa de material
genético una de las más empleadas
es la "de la perdigonada" o
transformación biolística. Se trata
de disparar bolitas de oro que llevan
fragmentos de ADN adheridos, con
una especie de pistola, sobre una
población de células. Las bolitas que
queden en el citoplasma pueden
transferir el ADN que transportan a
algún cromosoma de la célula
bombardeada.

Las aplicaciones agrícolas van desde


el mejoramiento de procesos básicos
como la fotosíntesis y la fijación de
nitrógeno atmosférico por parte de
las plantas, hasta la resistencia a
herbicidas, agentes patógenos y
factores de estrés (salinidad del
suelo, sequía, etc.), así como la
obtención de productos agrícolas de
mejor calidad y características Figura: Obtención de una planta transgénica por transformación biolística
nuevas.

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

La obtención de un gran numero de animales con alguna característica común


(producir mucha leche, engordar rápidamente, producir lana azul, etc.) es una
aspiración de muchos ganaderos. La forma de conseguirlo es mediante la clonación
con la que se consiguen animales genéticamente idénticos. Se usan para ello dos
técnicas:
a) la disgregación de células embrionarias a partir de un embrión, de modo
que cada célula separada funciona como un zigoto y originará un animal.

b) la transferencia nuclear; ésta consiste en obtener óvulos enucleados (se


les ha extraído el núcleo por microsucción) y conseguir introducir un núcleo
de una célula embrionaria o de una diferenciada (especializada), con esta
última modalidad se obtuvo la famosa oveja Dolly. Cuanto más diferenciada
esté una célula más difícil es conseguir su reprogramación para que funcione
como un zigoto y origine un nuevo animal.

Obtención de reses clónicas mediante la transferencia


de núcleos de células embrionarias de mórula

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

En la tecnología del ADN recombinante se puede


distinguir cuatro etapas:

1. Corte específico del ADN


2. Inserción de fragmentos de ADN en vectores
de clonación
3. Reacción en cadena de polimerasa
4. Introducción del gen en el organismo

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
CORTE ESPECÍFICO DEL ADN

se observa que el ADN es


cortado por las enzimas de
restricción, dejando dos
fragmentos de ADN con dos
bordes pegajosos

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
VERTORES BACTERIÓFAGOS

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
Inserción de fragmentos de ADN en vectores
de clonación

La inserción se realiza en vectores de


clonación, tiene la capacidad de auto replicarse
dentro de las células hospedadoras. Existen
dos tipos de vectores de clonación:

Plásmidos y bacteriófagos

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
VERTORES PLASMIDOS

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RECOMBINACIÓN DEL ADN
VERTORES BACTERIÓFAGOS

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

Reacción en cadena de polimerasa

• Esta técnica permite duplicar un número


ilimitado de veces un fragmento de ADN,
mediante esta técnica puede crearse millones
de moléculas idénticas.
• La potencialidad de esta técnica es
impresionante, a partir de una sola molécula
de ADN, la PCR puede generar 100000
millones de moléculas idénticas en una tarde.

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

Introducción del gen en el organismo

Podemos tomar como ejemplo la obtención de una


Cerda Transgénica.
Se toma un gen humano que codifica la síntesis de una
proteína de interés biológico con el promotor del gen
que codifica una proteína de la leche de una rata, se
introducen por micro inyección en un óvulo de cerda
fecundado y al desarrollarse ese óvulo tendremos un
animal transgénico.

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RECOMBINACIÓN DEL ADN

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