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DEFINICION DE BIOTECNOLOGIA
2,5 mL TBE 5x
12,5 μL TEMED
El mix utilizado viene dado por las condiciones del laboratorio, en este caso para dos
muestras M1 y M2, un positivo para verificar que el mix funciona con un ADN conocido
y dos negativos para ver si el mix está contaminado, obteniendo un total de 5
muestras. Este mix se realiza en tubos Eppendorf de 200 μL. (Cadavid & Ramirez,
2013)
MIX para 5 muestras
Agua estéril 92,5 μl
Nucleótidos (5 mM) 6 μL
Buffer 5x 30 μL
Una vez que se tienen los tubos preparados se llevan al termociclador Swift
(ESCO), se selecciona y se desarrolla el programa de amplificación. El
esquema consta de los 3 pasos siguientes:
Desnaturalización: 94ºC por 5minutos
Hibridación: 55ºC por 30 segundos.
Extensión o elongación: 72ºC por 86 minutos
10. Tirar el filtro y dejar los tubos con el DNA extraído. Guardarlos
en el congelador a -20ºC.
4.4. Polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP): se refiere a
secuencias específicas de nucleótidos en el ADN que son reconocidas y cortadas
por las enzimas de restricción (también llamadas endonucleasas de restricción) y
que varían entre individuos. (VERGEL & GUAPULEMA, 2019)
- Buffer de la enzima: 10 μL
- Enzima de restricción: 1 μL
6. Bibliografía
Burmeister, S. (2007). ELECTROFORESIS PARTE I. FUNDAMENTOS: GELES DE AGAROSA.
Argentina: UNIVERSIDAD NACIONAL DE MISIONES.
Carrascosa, A., & Gonzales, R. (2005). Microbiologia del Vino. España: 1° edicion.
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Jara, C., Rojas, A., & Romero, J. (2009). A simple molecular method for monitoring co-
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Martinelli, R., & Mieles, R. (2015). MÉTODOS EN BIOLOGIA MOLECULAR. ARGENTINA: XXXIII
CONGRESO ARGENTINO DE HISTOTECNOLOGIA.